Articulo n°1

CONTROL BIOLÓGICO IN VITRO DE BOTRYTIS CINEREA (PERS) MEDIANTE EL USO DE HONGOS

ANTAGONISTAS, EN VID (VITIS VINIFERA)

Aislamiento de especies nativas de hongos antagonistas en hojas infectadas de vid.

A las cepas aisladas se les asignó el código CH - N - a, b, c ó d donde:

- C: corresponde al lugar de aislamiento (Cajamarca)

- H: a la muestra de donde fue aislada (Hoja)

- N: al número de muestra de donde se aisló y

- a, b, c ó d: representan los diferentes géneros de hongos provenientes de una misma

muestra.

Resultados:

De las 56 muestras procesadas se obtuvieron 66 aislamientos (Tabla Nº 1), identificándose los

géneros Aspergillus (con 8 cepas), Fusarium (con 14 cepas), Penicillium (con 1 cepa),
Chrysosporium (con 1 cepa), Alternaria (con 20 cepas), Acremonium (con 5 cepas), Mucor (con
1 cepa), Botrytis (con 4 cepas) y Trichoderma (con 12 cepas).

Cantidad de cepas aisladas de hongos obtenidos a partir de las hojas infectadas de vid

RESULTADOS:
obtuvimos esta Cantidad de cepas aisladas de la especie T. viride utilizadas para la
evaluación de la actividad antagónica frente a B. cinérea

también una tabla de Porcentaje del área ocupada por las cepas de T. viride sobre B. cinerea
donde vemos su desarrollo en porcentaje que ha cubierto u ocupado sobre la botrytis con las
temperaturas de 24° C y 28° C
luego aquí podemos ver el Crecimiento micelial en mm diario de las cepas de T. viride sobre
B. cinerea a las temperatura de 24° C y 28° C

también se realizó un Análisis de varianza (ANOVA) y Prueba de Comparaciones Múltiples de

Tukey

en el análisis de variancia Se comprobó que si existe un efecto de cada cepa de Trichoderma

viride en las cepas (CH-13, CH-25, CH-30, CH-38 y CH-52) en el porcentaje de área ocupada
sobre B. cinérea.

Mientras que el análisis de Comparaciones Múltiples de Tukey determinó que a 24º C, las
cepas CH-30 y CH-38 de T. viride presentaron diferencias significativas con el porcentaje del
área ocupada de las demás cepas CH-13, CH-25 y CH-52 sobre B. cinerea desde las 72 hasta las
120 horas de evaluación, donde la cepa CH-30 tuvo la mayor actividad antagonista con un
54.67%; mientras que a 28° C, los porcentajes del área ocupada de las cepas CH-25 y CH-30
fueron estadísticamente diferentes con las demás cepas evaluadas a las 120 horas, donde la
cepa CH-30 presento la mayor actividad antagonista con un 98% (Tabla Nº 7)

Estas diferencias en los porcentajes del área ocupada de las cepas de T. viride las podemos
observar en el siguiente gráfico:

aquí vemos el Porcentaje del Área Ocupada de las de cepas de T. viride sobre B. cinerea a 24°
C donde según los colores podemos ver el área que ocupo frente a botrytis en las diferentes
horas a 24º
en este están los Porcentaje del Área Ocupada de las de cepas de T. viride sobre B. cinerea a
28° C

CONCLUSIONES

De las doce cepas de T. viride, que se evaluaron, sólo cinco cepas (CH-13, CH-25, CH-30, CH-38
y CH-52) presentaron los mayores porcentajes de área ocupada sobre B. cinerea Pers, con
valores máximos del 54.67% y 98% a 24° C y 28° en comparación con los siete restantes.

estas cinco cepas presentaron antagonismo del tipo micoparasitismo sobre B. cinerea Pers.

Nos dimos cuenta que a 28° C hubo crecimiento óptimo de las cinco cepas evaluadas con una
interacción antagónica eficiente frente al patógeno en comparación de 24º

A 24° C, las cepas CH-30 y CH-38 presentaron un 54.67% y 53% de área ocupada frente a
botrytis.

Mientras que a 28° C, las cepas CH-25 y CH-30 presentaron un 97.67% y 98%.

Con todo esto pudimos concluir que la cepa CH-30 presento el mayor porcentaje de área

ocupada sobre B. cinerea Pers tanto a 24° C y a 28° C con el 54.67% y 98% de área ocupada
frente a botrytis.

Articulo n°2

Hipótesis

La efectividad de los tratamientos fungicidas en el control de la pudrición gris en

uva de mesa, depende del tiempo que transcurre entre la aplicación y el inicio de

una infección.

Objetivo General
Determinar la efectividad de tratamientos fungicidas en el control de Botrytis

cinerea, aplicados antes y con posterioridad a un periodo de infección.

Materiales

Para el ensayo de floración se utilizó el aislado B-CL1 de Botrytis cinerea, previamente

colectado del parronal de Agrícola Brown. Para los ensayo de pinta – cosecha se ocupó

aislados de Botrytis cinerea colectados al momento de la inoculación, a partir de bayas

infectadas del cv. Thompson Seedless, en cada uno de los parronales ubicados en las

localidades de Calle Larga y Buin.

Los racimos inoculados fueron tratados con fungicidas 24 horas antes de la inoculación y 1, 24,
36 y 48 horas después de dicha inoculación, en el caso de floración, y 24 horas antes y 1, 12, 24
y 36 horas después de la inoculación en precosecha (Cuadro 2). Los fungicidas en polvo se
utilizaron solo durante la precosecha y se aplicaron solamente después de la inoculación.

Tratamientos

Preparación del inoculo Las conidias del hongo necesarias para la inoculación artificial se
obtuvieron, para el ensayo de floración, a partir de cultivos puros en agar papa dextrosa de 7 a
10 días de edad. En el caso de los ensayos de precosecha, se utilizaron las conidias de bayas
infectadas con 9 Botritys, colectadas de los mismos huertos. La viabilidad de dichas conidias
fue de 94% y 93% para los campos de Buin y Calle Larga, respectivamente. En este ensayo se
utilizó una suspensión conidial cuya concentración fue de 1 x 104 conidias/mL, para el ensayo
de floración, y de 3 x 105 conidias/mL, para los ensayos de pre cosecha. La concentración de
dicha suspensión fue determinada con la ayuda de un hemacitómetro.
Montaje del ensayo

La inoculación se realizó sobre cada racimo con un pulverizador manual (Figura 1A).

Luego los racimos fueron envueltos con una bolsa de polietileno y se mantuvieron así por 8

horas para mantener las condiciones predisponentes para el desarrollo de la enfermedad

(Figura 1B). A su vez, las bolsas de polietileno fueron cubiertas con papel aluminio, con el

fin de evitar el aumento de la temperatura al interior de la bolsa (Figura 1C y D).

RESULTADOS

AGRICOLA BROWN – CALLE LARGA

Los fungicidas Switch (37,8%), Stroby (33%), Rovral (31,3%), Scala (30,8%) y Horizon (28,4%)
fueron los que mejor controlaron la pudrición gris respecto al testigo inoculado, no existiendo
diferencias significativas entre ellos. Sin embargo, los últimos cuatro fungicidas fueron
similares, en efectividad, con Teldor, dejando a Bellis como el fungicida con menor porcentaje
de inhibición (Cuadro 3).

PRECOSECHA

Los fungicidas que mejor controlaron la pudrición producida por B. cinerea, evaluada
luego de 88 días de almacenamiento en frío, fueron Switch, Teldor, Rovral y Teldor Dust, cuyos
porcentajes de inhibición fueron de 53,7%, 51,5%, 49,3% y 47,9% respectivamente, no
existiendo diferencias significativas entre ellos (Cuadro 4).

Bellis, Rovral Dust y Lonlife Gold fueron los fungicidas que menos inhibición ejercieron
sobre la enfermedad, respecto al testigo inoculado. Esto indica que de los fungicidas con
formulación en polvo, Teldor Dust produjo una mayor inhibición de la enfermedad.
 El análisis realizado solo a los fungicidas aplicados vía líquida (Apéndice II, Cuadro 11),
considerando todos los momentos de aplicación, indicó que los fungicidas Switch y Teldor
fueron los que produjeron una mayor inhibición de la pudrición. Rovral fue similar a los dos
anteriores pero considerando todos los momentos de aplicación no se diferenció de Bellis
(Cuadro 5).

Los análisis de comparación múltiple realizados a todos los tratamientos fungicidas,

considerando solo los momentos de aplicación después de la inoculación, indicaron que los
racimos tratados con el fungicida Teldor presentaron el menor porcentaje de pudrición
producida por B. cinérea a los 78 días de almacenamiento en frío, con respecto del testigo
inoculado. Así mismo, los fungicidas Teldor Dust, Switch y Rovral siguieron en efectividad de
control, siendo significativamente distintos entre ellos (Cuadro 6).

El análisis realizado a los tratamientos fungicidas aplicados vía liquida, considerando todos los
momentos de aplicación, indicó que Teldor fue el mejor (Apendice III, Cuadro 14), alcanzando
un promedio de 60,5% de inhibición en el desarrollo de la enfermedad. Switch siguió en
efectividad (Cuadro 7). A diferencia del cuadro anterior Bellis y Rovral no presentaron
diferencias significativas.
 Articulo n°3

EFICACIA DE LOS TRATAMIENTOS FUNGICIDAS PARA EL CONTROL

DE Botrytis cinerea DE LA VID EN FUNCION DE LA EPOCA DE
APLICACION
La pudrición gris de la uva de mesa, causada por Botrytis cinérea, es el principal problema
sanitario que afecta la vid en pre y postcosecha en Chile.

Este articulo tuvo por objetivo determinar el efecto de la época de aplicación de los
tratamientos fungicidas en el control de la pudrición gris a la cosecha.
MATERIALES Y METODOS

Detección de B. cinerea latente. Con este propósito se recolectaron muestras consistentes en

al menos 100 flores o 100 bayas (< 5 mm de diámetro) aparentemente sanas en dos y cuatro
parrones (sistema de conducción con un plano horizontal de vegetación a 2 m de altura,
aproximadamente) comerciales de vides cvs. Red Globe, y Thompson Seedless,
respectivamente, ubicados en la zona central de Chile. Todos los cultivos se incubaron a 23 °C
por 7 a 10 días antes de contabilizar, bajo microscopio estereoscópico, el número de flores o
bayas con presencia de conidióforos y conidias de B. cinerea.

Figura 1. Determinación de Botrytis cinerea latente asociado a flores o bayas (3-7 m de

diámetro), aparentemente sanas de la vid. Promedios de dos y cuatro localidades en vid cvs.
Red Globe y Thompson Seedless, respectivamente.
 1998 - 1999

Thompson
Sedless

1999 - 2000

1999 - 2000 Red Globe

Figura 2. Eficacia del control obtenido con ciprodonil en el control de la pudrición gris (Botrytis
cinerea), aplicados en diferentes estadios fenológicos de la vid y según el pronóstico de esta
enfermedad.

 A.Vid cv. Thompson Seedles 1998-1999.

 B. Vid cv. Thompson Sedless 1999-2000.
 C. Vid cv. Red Globe 1999-2000.
  Floración (F) = 2 aplicaciones en 50 y 100% de floración.
 Pre-cosecha (PC) = 2 aplicaciones en la pinta (8-10 % sólidos solubles) y 7 días antes de
la cosecha.
 Calendarizado (Cal) = 4 aplicaciones, dos en floración y dos entre pinta y cosecha.
 Pronóstico (Pro) = 3-5 aplicaciones según el riesgo de infección, esto es una aplicaicon
presentiva.
 Cada barra representa el promedio de 4 repeticiones.

Interpretación del primer cuadro

En la ciudad colina, se alcanzo una eficiencia de 80% aproximadamente en el estado fenológico

de pinta a cosecha en la variedad Thompson Sedless.

En la ciudad buin, se alcanzó una eficiencia de 60% aproximadamente en el estado fenológico

de pinta a cosecha variedad Thompson Sedless.

Interpretación del segundo cuadro

En la ciudad colina, se alcanzó una eficiencia de 100% en el estado fenológico de pinta a

cosecha en la variedad Thompson Sedless.

En la ciudad buin, se alcanzó una eficiencia de 90% aproximadamente en el estado fenológico

de pinta a cosecha en la variedad Thompson Sedless.

Interpretación del tercer cuadro

En la ciudad colina, se alcanzó una eficiencia de 90% en el estado fenológico de pre cosecha en
la variedad Red Globe.

En la ciudad buin, se alcanzó una eficiencia de 98% aproximadamente en el estado fenológico

de pronóstico, (como preventivo), en la variedad Red Globe.

Tabla 1. Efecto de la época de aplicación del tratamiento fungicida en la incidencia y severidad

de la pudrición gris (Botrytis cinerea) a la cosecha en uva de mesa cv. Thompson Seedless.

En la floración, pre cosecha, calendarizado, condiciones, las respuestas obtenidas a las

aplicaciones del fungicida del ciprodimil son muy similares.
Pero en el testigo se observó una alta incidencia de 18,3%.

Como conclusión, decimos que La mejor respuesta a la aplicación del fungicida se obtiene en el
estado de pre cosecha, calendarizado y condiciones.

Tabla 2. Efecto de la época de aplicación del tratamiento fungicida en la incidencia y severidad

de la pudrición gris (Botrytis cinerea) a la cosecha en uva de mesa cv. Red Globe

Como conclusión, decimos que La mejor respuesta a la aplicación del fungicida se obtiene en el
calendarizado y condiciones reduciendo la incidencia de botrytis cinérea.

Conclusión de ambas tablas

Las diferencias en la incidencia de B. cinerea latente obtenida entre cultivares, Thompson

Seedless y Red Globe, no fueron importantes. Aparentemente, el factor genético, propio de
cada cultivar, no interfirió en la colonización de los restos senescentes.