Importancia de Bacillus thuringiensis en el control

biológico de Aedes aegypti

Importance of Bacillus thuringiensis in the biological control of Aedes aegypti

Carlos D Simanca1, Marian D Melgarejo2, Jose A Rojas3

Estudiantes de séptimo semestre de Bacteriología y Laboratorio clínico
Universidad de Santander campus Valledupar

Resumen
Los estudios de Bacillus thuringiensis se han enfocado al control de plagas en los sistemas
agrícolas pero debido al llamado de la organización mundial de la salud, quien implemento
una estrategia para en control vectorial del dengue. Bacillus thuringiensis es un bacilo
Gram positivo esporulado que históricamente se ha utilizado como una alternativa
biológica al plaguicida, conocida también como bacteria “común del suelo” o Bt, pero otros
estudios han demostrado su mayor porcentaje de aislamientos en muestras de agua. Para el
aislamiento del microorganismo comúnmente se utiliza agar nutritivo a 30°C durante 24hrs.
El bacilo contiene unas inclusiones parasporales que son altamente toxicas para algunos
insectos, siendo inocuo para el ser humano y medio ambiente.

Palabras claves: Bacillus thuringiensis, Aedes aegypti, biotecnología, Control biológico.

Abstrac

Bacillus thuringiensis studies have focused on pest control in agricultural systems but due
to the call of the world health organization, who implemented a strategy for dengue vector
control. Bacillus thuringiensis is a spore-positive Gram-positive bacillus that has
historically been used as a biological alternative to the pesticide, also known as "common
soil" bacteria o Bt, but other studies have shown a higher percentage of insulation in water
samples. For the isolation of the microorganism is commonly used nutritious agar at 30 C
for 24hrs. Bacillus contain parasporal inclusions that are highly toxic to some insects, being
harmless to humans and the environment.
Keywords: Bacillus thuringiensis, Aedes aegypti, biotechnology, Biological control.

Introducción

Bacillus thuringiensis es un bacilo Gram positivo esporulado que históricamente se ha

utilizado como una alternativa biológica al plaguicida, conocida también como bacteria
“común del suelo” o Bt, denominada así por algunos autores por su fácil aislamiento en
todo tipo de suelos. Sin embargo, otros estudios han demostrado que esta bacteria puede ser
aislada de aguas y animales en descomposición incluso en plantas. Los estudios brindaron
datos importantes sobre las relaciones entre la estructura, el mecanismo de acción y la
genética de sus proteínas cristalinas pesticidas, y una visión más clara y coherente sobre
estas relaciones. Otros estudios se centraron en el rol ecológico de las proteínas cristalinas
de Bacillus thuringiensis, su funcionamiento en sistemas agrícolas y en otros sistemas
naturales. Bacillus thuringiensis tiene la capacidad de ser toxica contra insectos del orden
díptera, coleóptera y lepidóptera, gracias a la secuenciación y amplificación de su genoma
se dieron cuenta que posee genes Cry y Cyt, también conocidas como “proteínas
cristalinas” algunas subespecies como es el caso de Bacillus thuringiensis var. israelensis
(Bti), poseen Cry11Aa, Cry4Ba y Cry4Aa (3 dominios) y la toxina citolítica Cyt1Aa,
altamente tóxicas para las larvas de los mosquitos y altamente eficaz en el control
biológico, hasta ahora ha sido una de las especies mas estudiada.

Desarrollo y Metodología

Los estudios de Bacillus thuringiensis se han enfocado al control de plagas en los sistemas
agrícolas pero debido al llamado de la organización mundial de la salud, quien implemento
una estrategia para en control vectorial del dengue. El dengue ha sido considerado como
una enfermedad de importancia en salud publica dada su epidemiologia alrededor de todo
el mundo, los estudios más recientes con la bacteria se han concentrado en su capacidad
insecticida contra el insecto blanco, Aedes aegypti.

Para el año 2017 Lobo K dos S et al. (1)investigaron el potencial de los aislados de Bacillus
thuringiensis obtenidos en la región del Cerrado del estado brasileño de Maranhão para el
control biológico de las larvas de Aedes aegypti. Las cepas fueron obtenidas a partir de
muestras de suelo y la identificación de las colonias de B. thuringiensis se basó en las
características morfológicas. Los bioensayos se realizaron para evaluar la patogenicidad y
toxicidad de las diferentes cepas de B. thuringiensis frente a larvas de tercer estadio de A.
aegypti. Los investigadores aplicaron la electroforesis en gel de poliacrilamida y sulfato de
sodio para obtener los perfiles de las proteínas, además realizaron PCR para detectar los
genes de toxina encontrados en los aislados bacterianos. En total, en el estudio encontraron
que 12 (4.0%) de los 300 aislados obtenidos de las 45 muestras de suelo presentaban
actividad larvicida, mientras que los aislados de BtMA-104, BtMA-401 y BtMA-560
causaron el 100% de la mortalidad. El aislado de BtMA-401 fue el más virulento, con la
concentración media letal más baja (LC50) (0,004 × 107spores/mL), seguido por el
Bacillus thuringiensis var. Israelensis estándar (0,32 × 107spores/mL). Los perfiles
proteicos de los aislados de BtMA-25 y BtMA-401 indicaron la presencia de masa
molecular consistente con la presencia de las proteínas Cry4Aa, Cry11Aa y Cyt1, similar al
perfil de Bacillus thuringiensis var. israelensis.

Biotecnológicamente Bacillus thuringiensis es ampliamente utilizado y muy diverso, y

constituye un principal medio para el desarrollo de investigaciones sólidas y de mucha
importancia, la ventaja de trabajar con este microorganismo es que emplea las denominadas
“tecnologías limpias” y se ha demostrado que no causa efectos adversos al ser humano y es
amigable con el medio ambiente. Diego H. Sauka (2), realizó una publicación de sus
investigaciones en la revista Argentina de Microbiología, donde menciona la potencial
gama de aplicaciones de Bacillus thuringiensis y que no se restringen solo a la agricultura,
sino que se podrían extender a la biorremediación de ambientes contaminados, ya que B.
thuringiensis es capaz de degradar totalmente compuestos xenobióticos. Por otro lado, más
allá de las aplicaciones mencionadas de B. thuringiensis, podrían ser útiles los metabolitos
secundarios que produce. Sus bacteriocinas también afectan a bacterias patógenas Gram
positivas y Gram negativas que son transmitidas al humano por alimentos contaminados,
por lo que su empleo potencial como sustituto de preservantes tradicionales en la industria
alimenticia suena atractivo. Otras cepas producen celulasas que podrían aplicarse en la
bioconversión de biomasa lignocelulósica en azúcares fermentables, actividad de gran
importancia en la producción de biocombustibles. Si bien todas estas aplicaciones resultan
muy interesantes, la posible aplicación en oncología clínica de un grupo nuevo de proteínas
de los cristales de B. thuringiensis, denominadas parasporinas, se destaca por su impacto
para la salud pública.

Francia J et al. (3)evaluaron la susceptibilidad de la larva de Ae. aegypti a Bacillus

thuringiensis Israelensis en Tegucigalpa, Honduras para el año 2018, utilizando una
muestra de 960 larvas de Ae. Aegypti y los bioensayos los hicieron de acuerdo con las
directrices emitidas por la Organización Mundial de la Salud y la Red Latinoamericana de
Control de Vectores. En el estudio se llevaron a cabo 12 bioensayos por cada concentración
estudiada. En el estudio se utilizaron cuatro concentraciones de Bti: 0,5 mg/L, 1 mg/L, 2,5
mg/L y 5mg/L. La mortalidad se registró a las 24 h. Se encontraron valores de mortalidad
larvaria de 98.734% para la dosis de 0.5 mg/L; 99.375 % para 1 mg/L; 100 % para 2,5
mg/L y 100 % para 5 mg/l probando que Bti es efectivo contra las larvas de Ae. aegytpi, se
recomienda su evaluación sistemática y de manera periódica para mejorar su aplicación y
posible desarrollo de resistencia.

En el 2019 en la Habana- Cuba, Rizo AG et. al. (4) evaluaron y compararon la eficacia
larvicida contra Aedes aegypti de la formulación en polvo Rapidall NP3(Earth Alive Clean
Technologies, principio activo B. thuringiensis var israelensis) con la formulación liquida
del producto Bactivec® (LABIOFAM, B. thuringiensis var israelensis H14 ingrediente
activo). Los bioensayos de laboratorio se realizaron con la cepa de mosquito Rockefeller de
Ae. aegypti (referencia internacional de susceptibilidad a insecticidas), estadio larvario III-
IV, y 50 larvas por recipiente. Aplicaron directamente en el agua, el biolarvicida Rapidall
NP3 en dosis 98 mg en 8 L de agua y biolarvicida de referencia Bactivec® en dosis 160 μL
en 8 L de agua, luego realizaron cuatro réplicas de los bioensayos de laboratorio durante 72
h. Las larvas se adicionaron 24 h después del recambio de agua y se contó la supervivencia
a las 24 h siguiendo los procedimientos descritos por la OMS. El producto evaluado
Rapidall NP3, provocó 100 % de mortalidad larvaria durante 11 semanas, mientras que el
Bactivec® solo provocó 100 % de mortalidad hasta las 6 semanas de iniciado el
experimento. El biolarvicida Rapidall NP3 mostró buena eficacia y actividad residual
prolongada al compararlo con Bactivec®, por lo que recomendamos su evaluación en el
terreno en el control larvario de depósitos que constituyen sitios de cría habituales y que no
pueden ser eliminados físicamente.
Discusión de resultados

Los estudios antes mencionados describen la viabilidad y replicación de las investigaciones

del Bacillus thuringiensis con potencial insecticida, asilados, caracterizados y evaluados de
suelos de diferentes países y regiones diversas; todas han mencionado la amplia gama de
usos y ventajas de la bacteria, demostrando la validez de las hipotesis conforme a su
importancia en el control biológico, pero un proyecto de grado realizado en una
universidad de Perú, se basó en el “aislamiento de Bacillus thuringiensis no solo en
muestras de suelo sino también, en muestras de agua y larvas muertas en el cual se
concluyó que el mayor porcentaje de asilamientos de Bacillus thuringiensis se obtiene en
muestras de agua y no de suelo. En el estudio se procesaron un total de 32 muestras, 24 de
esas muestras analizadas fueron de agua, 6 de suelo y 2 de larvas muertas, en el cual se
obtuvo un resultado positivo solo en 7 muestras, representando un 22% y procedían de
cuerpos de agua obtenidos en diferentes distritos, el otro 78% correspondían a resultados
negativos”. (5)

Conclusión

Queda desmostrado que Bacillus thuringiensis representa una alternativa eficiente en

control de Ae. Aegypti y que puede ser implementada en diversos procesos biotecnológicos
A pesar de algunas restricciones, en cuanto a su aislamiento, ciertas ventajas son
significativas, como la seguridad humana, bajo desarrollo de resistencia, la utilización de
las denominadas tecnologías limpias y la posibilidad de uso con productos químicos lo
ponen en un nivel bastante alto y hacen que este entomopatógeno muy prometedor en el
control biológico del dengue y muchos otros insectos de importancia agrícola y
biotecnológica. Además, es necesario aclarar a la población el uso de la bacteria teniendo
en cuenta las licencias ambientales y permisos específicos, y promover las investigaciones
para aumentar el potencial de las técnicas de control y mayor aprovechamiento de la
bacteria.
Referencias

Lobo K dos S, Soares-da-Silva J, Silva MC da, Tadei WP, Polanczyk RA,Pinheiro VCS.
Isolation and molecular characterization of Bacillus thuringiensis found in soils of the
Cerrado region of Brazil, and their toxicityto Aedes aegypti larvae. Rev Bras Entomol
[Internet]. 2018;62(1):5–12.Available from: http://dx.doi.org/10.1016/j.rbe.2017.11.004
Sauka DH. Bacillus thuringiensis: New applications for an old acquaintance?Rev Argent
Microbiol [Internet]. 2017;49(2):123–4. Available from:
http://dx.doi.org/10.1016/j.ram.2017.05.001
Francia J, Guevara P, Erazo BM, Yanes NJ, Maradiaga AY, Ponce AB, et al. a Bacillus
Thuringiensis Var Israelensis En Tegucigalpa , Honduras.2018;86:12–5.
Rizo AG, Ibañez AC, Díaz ZM, Martínez JA, García IG, Borjas CML, et al. Evaluation of
the larvicidal efficacy of rapidall NP3 (Bacillus thuringiensis) against aedes aegypti
(linnaeus) (diptera: Culicidae) in laboratory conditions. Rev Cubana Med Trop.
2019;71(1):1–8.
Ramirez IN. Aislamiento y Caracterización fenotípica y molecular de cepas nativas de
Bacillus thuringiensis aisladas de ecoregiones de la costa del Perú con actividad larvicida
para Aedes (Stegomyia) aegypti (L). 2019;1–98. Available from:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/handle/cybertesis/10378/Ramirez_oi.pdf?sequenc
e=1&isAllowed=y