Medios de cultivo

Luz Montes.
Estudiante de medicina UBA.
Ayudante de 2da microbiología UA2.

Los medios de cultivo son una técnica de laboratorio que consta de un gel o
una solución que contiene los nutrientes necesarios, para que en condiciones
favorables de pH y temperatura, crezcan microorganismos.
Se los puede dividir en medios líquidos donde el crecimiento bacteriano se
manifiesta a través de un aumento de la densidad del líquido; y en medios
sólidos donde se visualizan y contabilizan UFC (unidades formadoras de
colonias).

A su vez, los medios sólidos pueden ser simples o enriquecidos;

diferenciales y/o selectivos; aeróbicos o anaeróbicos.

-Los medios simples se utilizan para aislar bacterias que no tengan

requerimientos nutricionales especiales y se usa como base para la
preparación de medios enriquecidos.
-Los medios enriquecidos se utilizan para aislar bacterias llamadas
“fastidiosas” que requieren algún tipo de nutriente en especial. Son los agar
sangre y agar chocolate.
El agar sangre tiene como agregado glóbulos rojos de algún animal (por eso
seria enriquecido) y se usa a su vez para poner en manifiesto la capacidad
hemolítica de la bacteria (medio diferencial). Por esta razón el agar sangre es
un medio de cultivo enriquecido y diferencial.
Según el tipo de halo alrededor de la UFC se puede determinar el tipo de
hemolisis que haga el microorganismo:
Alfa: hemolisis parcial  halos verdosos.
Beta: hemolisis completa halos incoloros.
Gamma: sin hemolisis  sin halo.

El agar chocolate es una variante del agar sangre. La diferencia radica en que
contiene glóbulos rojos lisados por calor. Se utiliza para cultivar bacterias que
no realizan hemolisis y necesitan para su crecimiento factores que se
encuentran dentro de los glóbulos rojos. Ej: haemophilus influenzae.

-Los medios diferenciales son aquellos que ponen en manifiesto una

propiedad bioquímica de las bacterias. Son muy usados en la práctica.
-Los medios selectivos son aquellos que permiten el crecimiento de un solo
microorganismo.
El agar Mc CONKEY está compuesto por lactosa, sales biliares y cristal violeta.
Se lo considera un medio de cultivo diferencial ya que diferencia entre bacterias
fermentadoras de lactosas (E.coli, Klebsiella, Enterobacter) y bacterias no
fermentadoras de lactosa (Shigella, Salmonella, Yersina, Proteus). La
fermentación de la lactosa disminuye el pH dando como resultado el desarrollo
de colonias rojas mientras que las bacterias incapaces de fermentar la lactosa
dan colonias incoloras.
 A su vez, es un medio selectivo ya que las sales biliares y el cristal violeta
inhiben el desarrollo de bacterias gram +.

El medio de Chapman o manitol salado, es un medio de cultivo que entre sus

componentes tiene altas concentraciones de NaCl y manitol. Se lo considera un
medio selectivo ya que permite el desarrollo de bacterias capaces de crecer en
un medio con altas concentraciones de sal (Staphilococcus). Por su parte el
manitol lo convierte en un medio diferencial ya que la fermentación del mismo
provoca un cambio de pH en el medio y el desarrollo de colonias amarillas
(Staphylococcus coagulasa +) mientras que las bacterias que no fermentan el
manitol desarrollan colonias rojas (Staphiloccocus coagulasa -).
El medio de Simmons es un medio de cultivo utilizado para diferenciar
enterobacterias en función de su capacidad de utilizar el citrato como única
fuente de carbono y energía. Los microorganismos capaces de utilizar el
fosfato amónico y el citrato sódico como únicas fuentes de nitrógeno y carbono,
respectivamente, crecerán en este medio y producirán una reacción alcalina
que se manifiesta gracias al azul de bromotimol que virará de verde (pH neutro)
a azul oscuro (pH alcalino), indicativo de la producción de la citrato permeasa.
Cabe destacar que este medio no hace en placa sino en tubos inclinados,
conocidos como “agar en pico de flauta”.

El medio TSI (agar hierro triple azúcar) es un medio de cultivo utilizado para la
diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa,
lactosa y sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.
Por la fermentación de azúcares, se producan ácidos, que se detectan por
medio del indicador rojo fenol, el cual vira al color amarillo en un medio ácido.
El tiosulfato de sodio, se reduce a sulfuro de hidrógeno que reacciona luego
con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro color negro.
Interpretación de los resultados:
Observar el color del cultivo y la producción de gas.

1. Si la bacteria fermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo virar a

amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es
fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de color rojo.
2. Si la bacteria fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su
superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que si no lo es, la
superficie del medio continuará de color rojo.
3. Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de
las sales de hierro), se presentará un ennegrecimiento del tubo. La
producción de sulfhídrico y el consiguiente ennegrecimiento pueden
 impedir ver la fermentación de la glucosa (fondo amarillo), pero este
hecho implica directamente que la bacteria es fermentadora de glucosa.
4. Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria
es productora de gas.