TEMA 5.

TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN
1. Realiza un esquema de las diferentes técnicas de hibridación según el medio

2. En qué consiste el DOT BLOT

El Dot blot es una técnica de hibridación simple que utiliza membranas de nitrocelulosa o nailon como soporte sólido y que
permite detectar secuencias de ácidos nucleicos en una mezcla compleja, sin aportar ninguna información adicional
o Es la forma más simple de hibridación.
 Sobre la membrana se coloca una gota de lo que queremos estudiar.
 Las muestras pueden ser: ADN purificado, un lisado celular y un producto de amplificación por PCR
o Permite el estudio simultaneo de varias muestras, aplicando cada muestra en una zona distinta de la membrana
bien identificado la muestra que ponemos y donde se puede realizar con sondas radioactivas o con sondas
marcadas con haptenos
Si las aplicaciones se hacen en forma de banda en vez de circular se llama Slot blot
o Se lleva a cabo incubando secuencialmente las membranas con los reactivos por inversión en cubetas o lo más
habitual bolsas de plástico termosellables o cierre hermético se gasta menos reactivo o frascos con tapón de rosca