APTT

Fundamento:

Esta técnica se usa para determinar el tiempo de coagulación de un plasma citratado con diversos
reactivos (activador de contacto y fosfolípidos prooagulantes, además de calcio).

Material:

• Coagulómetro
• Tubos de coagulómetro
• Micropipetas de 100 – 100 µl + puntas
• Cementerio con agua y otro biológico
• Imanes de coagulación
• Muestra de plasma

Reactivos:
• R1: Activador, Ácido elágico. Tampón y conservantes
• R2: Iniciador, Cloruro cálcico 0,02M
• Opcional: control normal y patológico

Procedimiento:

Hacer técnica de control, antes de hacer esta técnica (de la misma forma).

1) Calentar los reactivos y la muestra en el coagulómetro (37ºC).

2) Identificar todos los tubos con los respectivos reactivos. (R1, R2…)
3) Mezclar los reactivos sin agitar (con suavidad).
4) Pipeteamos en R1: 100 µl de plasma citratado y 100 µl de R1.
5) Mezclar bien e incubar durante 5 min (300 segundos) a 37ºC
6) Pipetear 100 µl del tubo R1 y ponerlo en el tubo R2 y lo ponemos en el controlador de
coágulo, ponemos tapita y pipeteamos 100 µl de R2 en el tubo R2 con los otros reactivos y
empieza el tiempo (automáticamente) y esperamos a que pare el tiempo, ese será su tiempo
de coagular.
Resultados obtenidos / esperados:

40-47 control y 96,4 resultado paciente

Se puede expresar en segundos o en tasa de APTT:

Técnica de mezcla:

Se realiza debido a que el paciente dió un tiempo polongado.

Identificar tubo como plasma mezcla

100 µl de plasma control + R1 + 100µl de plasma paciente.

Nos expresará si tiene algún factor en déficit o si algún elemento inhibide algún factor.

Notas personales:

• Mirar las fechas de caducidad de los reactivos y demás.

• Asegurar que cogimos bien la cantidad con la micropipeta cogiendo dos veces para verificar.
• En caso de que venga liofilizado hay que hidratarlo.
• Como no tenemos muchos hierros suficientes, los reutilizamos. Pero en ámbito laboral se
desechan.
• Coger puntas esterilizadas.
• Las puntas no se reciclan para hematología
• Coger mas cantidad de reactivos y plasma y demás para no coger burbujas.
• Nuestro plasma control (PC) está en mal estado.

Normas de seguridad e higiene:

1. Estudiar y mirar cada práctica antes de realizarla.

2. Trabajar con orden y pulcritud
3. Tratar la muestra como altamente infeccioso y tener más cuidado de lo habitual.
4. Identificar de forma correcta los tubos.
5. No comer, beber o fumar, no morder los bolígrafos ni uñas en el laboratorio.
6. Hacer uso de guantes y batas correctamente.
7. Apagar el equipo cuando terminemos de usarlo.
Gestión de residuos generados:

Ya que este es un laboratorio didáctico, en este se reutiliza todo lo posible ya que disponemos de
poco material por el que hay que cuidarlo lo máximo posible para darle una vida útil mucho más
larga que en un laboratorio no didáctico.

Material en contacto con sangre

1. Todo material de laboratorio que haya estado en contacto con sangre se considera
potencialmente contaminado o infeccioso, por lo que, inmediatamente después de su uso
procederemos a su esterilización (autoclave, por ejemplo) o a su desinfección por inmersión
en lejía diluida al 5-10% durante 20-30’.

2. Limpieza con agua y solución detergente.

3. Aclarado.

4. Secado.

Material eléctrico
1. Comprobar que están desenchufados.

2. Limpiarlos con un paño húmedo. En caso de manchas resistentes utilizar un paño empapado
en una solución con agua jabonosa o ligeramente humedecido en alcohol.

3. Secado escrupuloso.