EXTRACCIÓN Y AISLAMIENTO DE CLOROFILA Y CAROTENOIDES DE FUENTES VEGETALES.

USO DE
LA CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA Y EL ESPECTROFOTÓMETRO UV

PROCEDIMIENTO

Se pesa 50 g de droga vegetal, luego se añade 200 mL de etanol de 96°GL y se lleva a reflujo por
espacio de 30 minutos. Se filtra y se concentra con vacío hasta la quinta parte del volumen
original. En este paso se añade éter de petróleo, diluyendo con agua hasta la aparición de dos
capas. Se agita en embudo separador, repitiéndose el proceso varias veces de ser necesario. Los
extractos etéreos se lavan con agua y se secan con sulfato de sodio anhidro si es necesario. La
fracción de éter se somete al siguiente fraccionamiento.

PREPARACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA DE COLUMNA EN POLIETILENO TRANSPARENTE

Extracto etéreo

Silicagel G

algodón

1.- Se corta aproximadamente 30 cm de largo de bolsas de polietileno transparente de diámetro

de 3 cm.

2.- Se realiza dos orificios en la parte inferior de las bolsas de polietileno transparente y se coloca
algodón.

3.- Se coloca silicagel G en las bolsas de polietileno transparente, hasta las tres cuartas partes.

4.- Luego se coloca la fracción de éter de petróleo en la parte superior del silicagel G.

5.- Se eluye con cloroformo o diclorometano y se observa la separación de las bandas.

6. Se cortan las bandas coloreadas, se recogen en un vaso de precipitado y se lavan con

diclorometano y este se lleva a leer al ultravioleta para su análisis respectivo.