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Alvarado Gallardo Ana Isabel MEDIOS DE CULTIVO Grupo 1651

Nombre del medio de Clasificación de acuerdo a su Fundamento del medio Utilidad Interpretación Utilidad de los componentes
cultivo composición química
Selectivo moderado pues La diferenciación entre Es utilizado para el Escherichia coli: Verdosas Peptona 10.0 g/L
aísla bacilos Gram negativos organismos capaces de utilizar aislamiento selectivo de con brillo metálico y centro Lactosa 5.0 g/L
de rápido desarrollo y escasas la lactosa y/o sacarosa, y bacilos Gram negativos de negro azulado. Klebsiella Sacarosa 5.0 g/L
exigencias nutricionales y aquellos que son incapaces de rápido desarrollo y escasas pneumoniae: Mucosas, rosa Fosfato dipotásico 2.0 g/L
diferencial : porque diferencia hacerlo, está dada por los exigencias nutricionales. púrpura, confluentes Proteus Agar 13.5 g/L
organismos capaces de utilizar indicadores eosina y azul de Permite el desarrollo de todas mirabilis: Incoloras. Eosina 0.4 g/L
la lactosa y/o sacarosa, y metileno; éstos ejercen un las especies de la familia Enterococcus faecalis: Azul de metileno 0.065 g/L
aquellos que son incapaces de efecto inhibitorio sobre Enterobacteriaceae. Incoloras, pequeñas, pH final: 7.2 ±2
hacerlo muchas bacterias Gram puntiformes. Shigella Las peptonas proveen la fuente de
positivas. flexneri: Incoloras. nitrógeno, la eosina y el azul de
Salmonella typhimurium: metileno son colorantes que se
Agar Eosina y Azul de Incoloras. Las colonias de combinan para formar un
metileno Salmonella y Shigella son precipitado a pH ácido. Los
translúcidas, de color ámbar colorantes actúan como inhibidores
o incoloras. Los coliformes e indicadores. Las carbohidratos
que utilizan la lactosa y/o proporcionan la fuente de energía,
sacarosa producen colonias las fosfatos actúan como buffer y el
de color azul a negro con agar como agente solidificante.
centros obscuros y brillo
metálico.

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selectivo La fórmula del Medio líquido Es recomendado para usar en Streptococcus pyogenes Peptona de Caseína 15.0
de Tioglicolato sin Dextrosa y ensayos de control de Bueno Cloruro de Sodio 2.5
sin Indicador es una esterilidad, en diversos Clostridium perfringens Extracto de Levadura 5.0
modificación de la fórmula productos biológicos. Bueno L-Cistina 0.25
original del Medio de En microbiología clínica S. aureus Tioglicolato de Sodio 0.5
Tioglicolato, en la cual se también se usa por su Bueno pH 7.0 ± 0.2
elimina la dextrosa y se capacidad de favorecer el Bacteroides fragilis
incorpora una peptona libre desarrollo de una gran Bueno Para volver el medio liquido a medio
de carbohidratos variedad de microorganismos solido se le puede agregar agar agar
fermentables, lo cual lo hace aerobios y anaerobios. poner en un porcentaje del 1.5 al 2 %.
Medio tioglicolato útil para estudios de de manifiesto la presencia de En este medio el tioglicolato de
fermentación. En este medio microorganismos en sodio y la L-cistina favorecen un
el indicador materiales normalmente atmósfera con baja tensión de
de azul de metilito ha sido estériles que contienen oxígeno, permitiendo el desarrollo
eliminado para evitar preservativos derivados del de microorganismos anaerobios y
cualquier grado de toxicidad mercurio. otros. La peptona de caseína
que pueda interferir en la proporciona la fuente de nitrógeno.
recuperación de El extracto de levadura proporciona
microorganismos. la fuente de vitaminas. El cloruro de
sodio se
emplea para mantener la presión
osmótica.
enriquecido Este medio es básicamente Cultivos de especies de Haemophilus influenzae Mezcla de Peptonas 15.0
que el agar sangre pero con la Haemophilus y especies Colonias pequeñas, húmedas, Fosfato Dipotásico 4.0
adición de la sangre a la base patógenas de Neisseria perladas con característico Almidón de Maíz 1.0
mientras esta ultima está aún olor húmedo Fosfato Monopotásico 1.0
a 80C, las proteínas Neisseria gonorrhoeae Cloruro de Sodio 5.0
precipitarán, los glóbulos se Colonias pequeñas grisáceas Agar 10.0
lisarán y la hemoglobina se o incoloras, mucoides pH 7.2 ± 0.2
Agar chocolate convertirá en hematina, Neisseria meningitidis La Base de Agar GC es utilizada para
haciéndolo con ellos a estos Colonias medianas a grandes, preparar Agar Gelosa Chocolate
nutrientes más fácilmente de color azul grisáceo, cuando es suplementada con
accesibles para el crecimiento mucoides. hemoglobina al 2% que provee la
de los organismos exigentes Streptococcus pneumoniae hemina (Factor X) que
Colonias pequeñas, planas, proveen glutamina, cocarboxilasa,
pueden aparecer verdes por levadura, glutamina, coenzimas,
la decoloración del hemina, vitaminas, aminoácidos,
medio dextrosa y otros factores de
crecimiento.

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Selectivo y diferencial Recomendó su uso en forma Este medio de cultivo ha sido


rutinaria para la realización recomendado universalmente Infusión de carne 300.0
del antibiograma en medio para la prueba de sensibilidad Peptona ácida de caseína 17.5
sólido, debido a una serie de a los antimicrobianos. Además Almidón 1.5
factores que se detallan a es útil con el agregado de Agar 15.0
continuación: presenta buena sangre para el cultivo y pH final: 7.3 ± 0.1
reproducibilidad lote a lote en aislamiento de
las pruebas de sensibilidad, su microorganismos
contenido en inhibidores de nutricionalmente exigentes En este medio la infusión de carne y
Agar Mueller Hinton sulfonamidas, trimetoprima y la peptona de caseína proveen la
tetraciclina es bajo, la mayoría fuente de nitrógeno, vitaminas,
de los patógenos crece carbón y aminoácidos. El almidón es
satisfactoriamente y una gran agregado para absorber cualquier
cantidad de datos han sido metabolito tóxico y el agar es
evaluados y avalados usando adicionado como agente
este medio de cultivo. solidificante.
Cuando se suplementa con
sangre de carnero al 5%, es
útil para realizar las pruebas
de sensibilidad a los
antimicrobianos en especies
de estreptococos.
Enriquecido selectivo y El verde brillante Medio de enriquecimiento Las colonias típicas de Pluripeptona 10.0
diferencial actúa como inhibidor de altamente selectivo para el Salmonella aparecen como Extracto de levadura 3.0
bacterias Gram positivas y de aislamiento de Salmonella colonias de color rosa a Cloruro de sodio 5.0
la mayoría de bacterias Gram spp., excepto S. typhi y S. blanco, opacas rodeadas por Lactosa 10.0
negativas diferentes a paratyphi, a partir de el rojo brillante del medio. Sacarosa 10.0
Salmonella. muestras clínicas, alimentos, y Los pocos microorganismos Rojo fenol 0.08
El rojo de fenol es un otros materiales de que crecen en este medio Verde brillante 0.0125
indicador de importancia sanitaria. No se que son fermentadores Agar 20.0
Agar verde brillante las variaciones de pH y cambia recomienda para el de lactosa o sacarosa, son pH final: 6.9 ± 0.2
el color del medio a amarillo aislamiento de Shigella spp. fácilmente identificables
en presencia del ácido Es de un valor excepcional debido a la formación de En este medio las peptonas y el
derivado de la cuando se investiga un gran colonias amarillas- verdes extracto de levadura proporcionan la
fermentación de los número de muestras de heces rodeadas de una intensa zona fuente de nitrógeno, vitaminas y
carbohidratos. o alimentos, por su alta de color amarilla-verdosa. minerales. La lactosa y la sacarosa
capacidad de diferenciación Este medio no es adecuado son los carbohidratos fermentables.
de las colonias sospechosas. para el aislamiento El rojo de fenol es un indicador de
de S. Typhi ni de Shigella, sin las variaciones de pH. El cloruro de

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embargo algunas cepas de S. sodio mantiene el balance osmótico.


Typhi pueden desarrollar El verde brillante
dando colonias actúa como agente selectivo. El agar
rojas. es adicionado como agente
Escherichia coli Amarillo- solidificante.
verdosas sobre fondo
amarillento Salmonella
enteritidis Rosas, blancas o
transparentes sobre fondo
rojo Salmonella typhi
Crecimiento inhibido
Salmonella typhimurium
Rosas, blancas o
transparentes sobre fondo
rojo Shigella flexneri.
Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus
Crecimiento inhibido

selectivo La fórmula de este medio está Medio utilizado para el Se observa conforma al
desarrollada para favorecer la aislamiento selectivo de crecimiento: Peptona de gelatina 20.0 g/L
selección de P. aeruginosa y Pseudomonas aeruginosa y de Pseudomonas aeruginosa Cloruro de magnesio 1.4 g/L
estimular la formación de otras especies del género. A Bueno - excelente Sulfato de potasio 10.0 g/L
pigmentos. Es éste un medio partir de muestras clínicas y Escherichia coli Agar 13.6 g/L
muy semejante al King A, en el otros materiales. Inhibido Cetrimida 0.3 g/L
cual el cloruro de magnesio y Staphylococcus aureus pH final: 7.2 ± 0.2
el sulfato de potasio Inhibido
promueven la formación de La peptona sirve como fuente de
Agar cetrimida piocianina, pioverdina y nitrógeno. La producción de
piomelanina de P. aeruginosa. piocianina se estimula mediante el
La cetrimida es un detergente cloruro de magnesio y el sulfato
catiónico que actúa como potásico en el medio. La cetrimida
agente inhibidor, libera el (bromuro de cetil trimetil amonio) es
nitrógeno y el fósforo de las un compuesto de amonio
células de casi toda la flora cuaternario que inhibe una amplia
acompañante, aunque inhibe variedad de otros organismos,
también algunas especies de incluidos otras determinadas
Pseudomonas. especies de Pseudomonas y
organismos relacionados.

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Medio basico Por las características de sus Medio de cultivo utilizado Crecimiento:
componentes es un medio para propósitos generales, P. mirabilis Bueno- Pluripeptona 5.0 g/L
usado para el cultivo de para el aislamiento de excelente Extracto de carne 3.0 g/L
microorganismos poco microorganismos poco E. coli Bueno-excelente Cloruro de sodio 8.0 g/L
exigentes en sus exigentes en lo que se refiere S. aureus Bueno- Agar 15.0 g/L
requerimientos nutricionales. a requerimientos nutritivos. excelente pH final: 7.3 ± 0.2
Su uso está descripto en B. cereus Bueno-
muchos procedimientos para excelente No contiene inhibidores del
Agar nutritivo el análisis de alimentos, aguas E. faecalis Bueno- desarrollo bacteriano. La
y otros materiales de excelente pluripeptona es la fuente de carbono
importancia sanitaria. P. aeruginosa Bueno- y nitrógeno para el desarrollo
excelente bacteriano. El agregado de cloruro
de sodio permite el enriquecimiento
con sangre de carnero u otras
sustancias para facilitar el cultivo de
microorganismos exigentes.

Diferencial y enriquecido El medio es útil tanto para el Medio para propósitos Los estreptococos Infusión de músculo de corazón 375
aislamiento y cultivo de generales, para el aislamiento hemolíticos presentan g/L
microorganismos aerobios y y cultivo de numerosos colonias translúcidas u Peptona 10 g/L
anaerobios nutricionalmente microorganismos. opacas, grises, pequeñas y Cloruro de sodio 5 g/L
exigentes a partir de una gran mucoides con Agar 15 g/L
variedad de muestras, como una zona de hemólisis. Otros pH final: 7.3 ± 0.2
para la observación de organismos que pueden
reacciones de hemólisis. producir hemólisis incluyen a
Listeria, varias La infusión de músculo de corazón y
onirebacterias,estafilococcos la peptona de caseína proporcionan
Agar sangre de carnero hemolíticos, E. coli y la fuente de nitrógeno, carbono,
al 5% Pseudomonas. Las colonias aminoácidos y proteínas. El extracto
de neumococcos aparecen de levadura provee vitaminas y
planas, lisas, translúcidas, aminoácidos esenciales. El cloruro
grisáceas y algunas veces de
mucoides rodeadas por una sodio mantiene el balance osmótico
pequeña zona verdosa de alfa y el agar es usado como agente
hemólisis, Las colonias de solidificante. Este medio está
estafilococcos tienen una relativamente libre de azúcares
apariencia opaca, de color reductores los cuales interfieren en
blanco a amarillo y rodeadas las reacciones hemolíticas de

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de una zona clara por la beta estreptococos. El patrón de las


hemólisis. E. coli Abundante reacciones hemolíticas puede variar
sin hemolisis. S. aureus dependiendo del tipo de sangre
Abundante hemolisis Beta S. utilizada
pyogenes Abundante
hemolisis Beta S. pneumoniae
Abundante hemolisis Alfa S.
pneumoniae Abundante
hemolisis Alfa

Selectivo y diferencial La selectividad, está dada por Medio de cultivo utilizado Las enterobacterias pueden Pluripeptona 5 g/L
la sales biliares y el verde para el aislamiento de ser diferenciadas en base a su Extracto de carne 5 g/L
brillante, que inhiben el Salmonella spp. y de algunas capacidad de fermentar la Lactosa 10 g/L
desarrollo de bacterias Gram especies de Shigella spp. a lactosa . Las especies de Mezcla de sales biliares 8.5 g/L
positivas, de la mayoría de los partir de heces, alimentos y Salmonella y Shigella son no Citrato de sodio 8.5 g/L
coliformes y el desarrollo otros materiales en los cuales fermentadoras de la lactosa y Tiosulfato de sodio 8.5 g/L
invasor del Proteus spp. se sospeche su presencia. forman colonias incoloras en Citrato férrico 1 g/L
Es diferencial debido a la el Agar SS. Las especies de Agar 13.5 g/L
fermentación de la lactosa, y a Salmonella que son Verde brillante 0.00033 g/L
Agar salmonella la formación de ácido productoras de sulfuro de Rojo neutro 0.025 g/L
shigella sulfhídrico a partir del hidrógeno desarrollan pH final: 7.0 ± 0.2
tiosulfato de sodio. colonias con centro obscuro. En este medio las sales biliares No. 3
Los coloformes son y el verde brillante actúan como
parcialmente inhibidos. E. inhibidores de bacilos Gram
Coli produce colonias de positivos, de la mayoría de bacilos
color rosa a rojo y pueden coliformesdel swarming en Proteus
presentar una zona de spp.,mientras que permiten
precipitado. Las colonias de elcrecimiento de Salmonella spp. El
Enterobacter aerogenes son tiosulfato de sodio y el citrato férico
cremosas de color rosa. permiten la detección de
Citrobacter y Proteus spp. laproducción de H2S. La lactosa
Pueden crecer produciendo proporciona la fuente de

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colonias con centros de color carbohidratos, el rojo neutro y el


gris o negro debido a la verde brillanteactúan como
producción de H2 S. indicadores de pH y el agar es
Enterobacter faecalis es agregado como agente solidificante.
parcialmente inhibido
presentando colonias
incoloras. Klebsiella
pneumoniae Rosadas
cremosas y mucosas

selectivo y diferencial Las ventajas de este medio Es un medio selectivo para el 1-Fermentación de manitol: Extracto de levadura 2.5 g/L
por sobre los otros aislamiento y diferenciación agregar unas gotas de Tripteína 10 g/L
mencionados anteriormente, presuntiva de estafilococos, púrpura de bromocresol a las Gelatina 30 g/L
es que permite, en la misma en base a la producción zonas donde se encuentran Lactosa 2 g/L
placa, de pigmentos, la las colonias sospechosas y en D-Manitol 10 g/L
obtener pruebas de fermentación de manitol y la una zona de la placa donde Cloruro de sodio 75 g/L
identificación presuntiva de hidrólisis de gelatina, a partir no hay desarrollo bacteriano. Fosfato dipotásico 5 g/L
Agar Estafilococos 110 especie como ser: desarrollo de alimentos y otras Comparar el color Agar 15 g/L
de pigmentos, fermentación muestras. desarrollado entre estas dos pH final: 7.0 ± 0.2
de manitol e hidrólisis de la zonas.
gelatina. En 1942 Koch Prueba positiva: cambio de En el medio de cultivo, el extracto de
reportó que los estafilococos color del indicador del medio levadura y la tripteína aportan los
crecían selectivamente en en la zona de crecimiento nutrientes para el desarrollo de
medios con una bacteriano. El medio sin microorganismos. La gelatina es el
concentración alta de cloruro desarrollo de sustrato de la enzima gelatinasa. La
de microorganismos permanece lactosa y el manitol son los hidratos
sodio. Posteriormente sin cambio. de carbono fermentables. El cloruro
Chapman, Lieb y Curcio Prueba negativa: no hay de sodio, se encuentra en alta
reportaron que las cepas diferencias de color entre las concentración, para inhibir el
típicas de estafilococos zonas de crecimiento desarrollo de la flora acompañante
patógenos fermentan el bacteriano y la zona sin excepto Staphylococcus spp.,
manitol, producen pigmento y inocular. lográndose así un medio selectivo

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licuan la gelatina. Chapman 2-Hidrólisis de la gelatina: para el desarrollo de estos


utilizó estas propiedades para cubrir la placa 5 ml de una microorganismos.
desarrollar un medio selectivo solución saturada de sulfato
y de amonio y colocar en
diferencial llamado Agar estufa, a 35-37 ºC, en
Estafilococos 110. aerobiosis durante 10
minutos.
Positiva: halo transparente
alrededor de las colonias.
Negativa: ausencia de halo
transparente alrededor de las
colonias.

Altamente selectivo : por su Se trata de un medio Es recomendado para el Las bacterias que crecen en Extracto de carne 1 g/L
alto contenido de sal y altamente selectivo debido a aislamiento de estafilococos un medio con alta Pluripeptona 10 g/L
diferencial: porque diferencia su alta concentración salina. patogénicos a partir de concentración de sal y d-Manitol 10 g/L
los estafilococos Los estafilococos coagulasa muestras clínicas, alimentos, fermentan el manitol, Cloruro de sodio 75 g/L
fermentadores de manitol. positiva hidrolizan el manitol productos cosméticos y otros producen ácidos, con lo que Agar 15 g/L
acidificando el medio; las materiales de importancia se modifica el pH del medio y Rojo de fenol 0.025 g/L
colonias aparecen rodeadas sanitaria. vira el indicador de pH del pH final: 7.4 ± 0.2
de una zona amarilla brillante. También, este medio puede color rojo al amarillo.
Los estafilococos coagulasa utilizarse para el cultivo de Los estafilococos crecen en En el medio de cultivo, el extracto de
negativos, presentan colonias especies halófilas de Vibrio, si altas concentraciones de sal, carne y la pluripeptona, constituyen
rodeadas de una zona roja o no se dispone de medios y pueden o no fermentar el la fuente de carbono, nitrógeno,
Agar sal y manitol púrpura. Las colonias apropiados (TCBS Medio, manitol. vitaminas y minerales, el manitol es
sospechosas, se repicarán en Medio Marino, etc.), aunque Los estafilococos coagulasa el hidrato de carbono fermentable,
un medio sin exceso de algunas especies pueden no positiva fermentan el manitol el cloruro de sodio (que se
cloruro de sodio para desarrollar. y se visualizan como colonias encuentra en alta concentración) es
efectuarles, posteriormente, amarillas rodeadas de una el agente selectivo que inhibe el
la prueba de la coagulasa. zona del mismo color. desarrollo de la flora acompañante,
Los estafilococos que no y el rojo fenol es el indicador de pH.
fermentan el manitol, se El agar es adicionado como agente
visualizan como colonias solidificante.
rojas, rodeadas de una zona
del mismo color o púrpura. S.

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aureus Colonias pequeñas a


medianas con zonas amarillas
alrededor Micrococos
Colonias grandes de color
naranja a blanco Otros
estafilococos Colonias
pequeñas de color rojo sin
cambio en el color del medio
Bacterias Gram
negativas Inhibidas o muy
pocodesarrollo Estreptococos
Sin crecimiento

Ligeramente selectivo: Para el aislamiento y la Los coliformes fermentan la Digerido péptico de 10 g/L
debido a la combinación del diferenciación de la familia lactosa, produciendo colonias tejido animal
sulfito de sodio con fucsina Enterobacteriaceae y diversos color rosa oscuro a rojizo con Lactosa 10 g/L
básica, lo cual ocasiona la bacilos gram-negativos en un brillo metálico verdoso Fosfato dipotásico de 3.5 g/L
supresión parcial de los muestras clínicas y no clínicas. iridiscente y una coloración hidrógeno
Agar ENDO microorganismos gram- similar en el medio. Las Sulfito sódico 2.5 g/L
positivos y diferencial: colonias de microorganismos Fucsina básica 0.5 g/L
porque diferencia los que que no fermentan la lactosa Agar 15 g/L
fermentan lactosa de los que son incoloras o de color rosa pH final: 7,4 ± 0,2
no. pálido en contraste con el Las peptonas proveen la fuente de
fondo rosa claro del medio. nitrógeno. El sulfito de sodio y la
fucsina básica actúan como
inhibidores . La lactosa proporciona
la fuente de energía, las fosfatos
actúan como buffer y el agar como
agente solidificante.

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medio selectivo pues se la mezcla de sales biliares y el Recomendado para el cultivo Los microorganismos lactosa
utiliza para el aislamiento de cristal violeta son los agentes y aislamiento de positiva dan colonias de color Peptona 17 g/L
bacilos Gram negativos de selectivos que inhiben el microorganismos Gram rosa con o sin zona de Pluripeptona 3 g/L
fácil desarrollo, aerobios y desarrollo de gran parte de la negativos a partir de muestras precipitado alrededor. Lactosa 10 g/L
anaerobios facultativos. y flora Gram positiva. clínicas, de alimentos, agua, Los microorganismos lactosa Mezcla de sales biliares 1.5 g/L
diferencial porque Permite Por fermentación de la productos lácteos y negativos dan colonias Cloruro de sodio 5 g/L
diferenciar bacterias que lactosa, disminuye el pH productos farmacéuticos. En incoloras o de color muy Agar 13.5 g/L
utilizan o no, lactosa en alrededor de la colonia. Esto este medio se aislan y claro. Rojo neutro 0.03 g/L
muestras clínicas, de agua y produce un viraje del color del diferencían bacilos entéricos Escherichia coli: Rojas con Cristal violeta 0.001 g/L
alimentos. indicador de pH (rojo neutro), Gram negativos halo turbio. Klebsiella pH final : 7.1 ± 0.2
la absorción en las colonias, y fermentadores y no pneumoniae: Rosadas
la precipitación de las sales fermentadores de la lactosa mucosas. Salmonella Las peptonas, aportan los nutrientes
biliares. typhimurium, Shigella flexneri necesarios para el desarrollo
y Proteus mirabilis: Incoloras, bacteriano, la lactosa es el hidrato
transparentes. Enterococcus de carbono fermentable, y la mezcla
faecali: Diminutas, incoloras, de sales biliares y el cristal violeta
opacas son los agentes selectivos que
inhiben el desarrollo de gran parte
Agar Mac Conkey de la flora Gram positiva, el
indicador de pH es rojo neutro.
Siembra: Inocular las placas por
estría o con hisopo, asegurándose de
que con cualquiera de los dos
métodos se tengan colonias aisladas.
Incubar las placas a 35 ± 0.2°C
durante 18 a 24 hrs. Si no hay
desarrollo a las
24 hrs, reincubar las placas por 24
horas más.

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