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REPORTE
FORMA DE REACTIVOS
NOMBRE COMPOSICIÓN FUNDAMENTO UTILIDAD INCUBACIÓN INTERPRETACIÓN DE REPRESENTACION
INOCULAR ADICIONADOS
PRUEBA
LÍQUIDOS
LÍQUIDOS
ROJO DE
Se basa esencialmente en si los
FENOL +
(fermentación microrganismos llevan a cabo el
En aerobiosis o
POSITIVO:: color amarillo,
POSITIVO
Peptona………….……….10g proceso de fermentación. Formas de producción de gas variable
de Extracto de carne …...1g anaerobiosis según
La fermentación es un proceso fermentación Con hisopo u (Observación de burbujas
Cloruro de sodio ……...5g el microorganismo
carbohidratos)
carbohidratos) Agua desionizada ….…1L
metabólico de redox en medio características para asa
que se sospecha.
en la campana POSITIVO
anaerobio y un sustrato especies bacterianas bacteriológica Durham.)ÁCIDO A/F
GLUCOSA
GLUCOSA Rojo de fenol……….0.018g A 35o C por 18 a 24 Carbohidrato al 1%
Sin inocular naranja pH
orgánico sirve como aceptor específicas por difusión por
h
7.4 final de hidrógeno (electrones). Diferenciando entre agitación NEGATIVO: color rosa-
NEGATIVO: color
Puede ser hasta por
LACTOSA
LACTOSA Ácido: amarillo pH 6.8 géneros y especies. Inóculo denso rojo. ALCALINO NEGATIVO
30 días para
Alcalino : rosa-rojo Sacarosa--glucosa +fructosa Gram (-) y (+)
considerarse
SACAROSA
SACAROSA pH 8.4 Maltosa----2 Glucosa .Enterobacteriace RETARDADA: color naranja
RETARDADA:
negativo
Lactosa----glucosa+ galactosa (volver a inocular)
MANITOL
MANITOL
SORBITOL
SORBITOL
En esta prueba se detecta una POSITIVO:: presencia d
POSITIVO
respiración anaerobia donde el color rosa-rojo en 30 seg.
oxígeno se obtiene del nitrato
nitrato NEGATIVO:: amarillo; fase2
NEGATIVO
CALDO (oxidación). Los nitratos se
Reactivo A: intensifica
NITRATO Extracto de carne…….3g Diferenciación de el color, 1ml
reducen a nitritos y algunas FASE 2: agregar
2: agregar zinc
Peptona…………………..5g especies (Haemophilius α-naftilamina 0.5%
bacterias reducen los nitritos a 35o C de 12 a 24 h (20mg) (reductor)
Nitrato de potasio…….1g vaginalis y Neisseria Inóculo denso. Dimetil-α-naftilamina
productos gaseosos (N2 y N2O). Rara vez se Confirmación de negativo:
negativo: POSITIVO +
Agua destilada………….1L mucosa ) Inoculación por 0.6%
1ml x tubo Las enzimas responsables de prolonga hasta 5 desarrollo de color rosa- NEGATIVO -
(Reducción de Identificación de difusión. Sales de diazonio
amarillo transparente ambas reducciones se días; 24-48 h rojo.
Enterobacteriaceae, por Reactivo B: da color,
nitratos a pH 7 denominan nitrato y nitrito Positivo: ausencia
Positivo: ausencia de
lo general + 1ml
reductasa, respectivamente. desarrollo de color
nitritos)
nitritos) NO3 + 2e- + 2H+ NO2 + H2O
2NO3 + 10e + 12H N2 + 6 H2O
- +
Ácido sulfanílico 0.8% .Liberación de gases.
SEMISÓLIDOS
Se utiliza como apoyo
taxonómico para la
identificación y clasificación
de bacterias fermentadoras y
Determinar la capacidad de un Al termino
no fermentadoras,
GELATINA Extracto de carne…..….3g
organismo de producir enzimas de
tipo proteólico que licuan la
principalmente para
identificar cultivos puros.
Punción en
vertical hasta
colocar el tubo
en
NUTRITIVA gelatina. una profundidad 35oC de refrigeración
POSITIVO: Medio
Peptona…………..………..5g
licuado (líquido)
Gelatina……………..….120g Las proteínas que se producen Ayuda a la diferenciación de 1.5 a 2.5 cm, 24-48 h por 2 horas POSITIVO +
Agua destilada…….…….1L naturalmente son muy grandes entre géneros (S aureus + del inóculo denso
denso Hasta 14 para NEGATIVO -
pH 6.8 a 7 S epidermidis + lento; y NEGATIVO: Medio
para entrar en la célula Mantener en días determinar si
(licuefacción amarillo pálido bacteriana; por lo tanto para monocytogeness – de
Listeria monocytogene
refrigeración se ha
sólido
de la gelatina)
gelatina) algunas Corynebacterium)
utilizarlas deben ser catabolizadas hasta inocular producido la
Ayuda a la identificación de
en componentes más pequeños. Serratialiquefaciens +,
licuefacción
Serratiamarcescens +, P
aeruginos a + rápida,
Flavobacterium +
Se debe
Si el tubo de oxidación "O" se informar:
Medio de cultivo, que al torna amarillo, pero el de
fermentación "F" queda verde producción de
ser suplementado con la bacteria es una oxidadora,
Picar dos tubos ácido (A),
hidratos de carbono, se no fermenta ese carbohidrato
Determinar el metabolismo hasta 0.6 mm del Si el tubo "O" permanece ácido con gas
O/F GLUCOSA Peptona (triptona)…….2g usa para determinar el 35oC 48 h o Carbohidratos
oxidativo o fermentativo de un fondo con verde y el tubo "F" se torna (AG),
Cloruro de sodio………..5g metabolismo oxidativo- más, en solución
carbohidrato solo en condiciones inóculo poco amarillo: la bacteria fermenta alcalino (K)
Fosfato de potasio….0.3g fermentativo de las puede acuosa al 10% pero no oxida, es una
aerobia (oxidación) mientras que denso y cubrir o sin cambio (-).
(prueba de Azul de bromotimol…0.03-
otras producen acido tanto de
bacterias Gram
los tubos
necesitar Lactosa, fermentadora, una anaerobia
También,
0.08g negativas. Esta prueba es de 3 a 4 sacarosa, estricta, no oxida.
oxidación- Agar………………………3-5g modo anaerobio como anaerobio (sellado y Si ambos tubos quedan puede
útil para diferenciar días o manitol, amarillos: bacteria anaerobia
fermentación)
fermentación) Agua destilada………….1L
destilada………….1L (Fermentación). cerrado) con 1ml informarse si el
especies bacterianas. hasta 14 sorbitol, etc. facultativa, oxida y fermenta el
de vaselina, carbohidrato
organismo es
También, permite
aceite mineral Si ambos tubos quedan móvil, cuando
determinar movilidad verdes: bacteria inerte, no
producción de gas. y utiliza el carbohidrato por
crece lejos de la
línea de
ninguna vía metabólica
inoculación.
Movilidad:
Medio de cultivo semisólido, Permite determinar si un
(+) Presencia de
altamente nutritivo debido a la microrganismo es móvil
turbidez o crecimiento
presencia de extracto de levadura, (presencia de flagelos )o
más allá de la línea de
peptona y tripteína. Además, la inmóvil (carentes de
siembra.
tripteína aporta grandes flagelos)
Reactivo (-) crecimiento
cantidades de triptofano, sustrato
Kovacs: 150ml solamente en la línea
de la enzima triptofanasa, para la 35o C de 24 de alcohol de siembra.
realización de la prueba del indol, a 48 h, si el
amílico o
MIO Dextrosa……………………..1g el trip. Es un a.a que peude ser
Punción al
resultado
butílico + 10g Prueba del indol:
Extracto de levadura…..3g oxidado por algunas bacterias es negativo ornitina (+) o (-)
Peptona…………………….10g centro del medio de ρ- La prueba de indol se
para formar tres metabolitos incubar a
Tripteína…………………..10g Permite determinar la con aguja de dimetilamino- realiza una vez que se
indolicos (indol, escatol y ácido 21-25o C
Clorhidrato de L- capacidad del inoculación benzaldehído ha determinado la
ornitidina……………….…..5g
indol acético). La dextrosa es el por 5 días Indol (+) o( -)
microorganismo para hasta una + 50ml de HCL movilidad y la prueba
(movilidad, Purpura de hidrato de carbono fermentable, Añadir
formar indol a partir de la profundidad de concentrado de ornitina.
bromocresol……….…0.02g la ornitina es el sustrato para la reactivo
indol, degradación del 1.2 cm (+): color rojo al agregar
Agar……………………………2g detección de la enzima ornitina posterior a Movilidad(+) o (-)
Triptófano(a.a) Agregar 5 el reactivo revelador.
ornitina)
ornitina) destilada……………1L
Agua destilada……………1L decarboxilasa, el púrpura de la
gotas del (-): el color del reactivo
bromocresol es el indicador de incubación
reactivo de revelador permanece
pH, que
color en medio
púrpura alcalino
y en medio es de
ácido es Kovacs y agitar incoloro-amarillento.
suavemente
amarillo.
Ornitina decarboxilasa:
Por su composición, es posible
Determina si un (+): Color púrpura.
detectar 3 reacciones en un
microorganismo es capaz (-): color amarillo. A
mismo tubo: movilidad, presencia
de descarboxilar la L- veces se puede
de ornitina decarboxilasa e indol.
ornitinina a putrescina. desarrollar un color
violáceo en la superficie
del medio.
Movilidad:
Reactivo (+) Presencia de turbidez o
Kovacs: 150ml crecimiento más allá de la
SÓLIDOS
1-Pico alcalino/fondo
ácido (pico rojo/fondo
amarillo): el
microorganismo
solamente fermenta la
TSI
TSI Extracto de carne…….3g
glucosa.
2-Pico ácido/fondo ácido K/A (glucosa +)
TRIPLE Puiripeptona……………20 Determinar la capacidad de un (pico amarillo/fondo
AZUCAR g
Cloruro de sodio……….5g organismo de atacar un
carbohidrato específico incorporado Medio universalmente amarillo): el
microorganismo fermenta
A/A (glucosa
lactosa +) y
HIERRO Lactosa……………………10g
en un medio de crecimiento básico, empleado para la glucosa, lactosa y/o K/K (no
Sacarosa………………….10g
con producción o no de gases, junto diferenciación de sacarosa. fermentación)
Glucosa…………………….1g Por punción y
con la determinación posible de Enterobacterias, en base 35o C de 18 3-Pico alcalino/fondo Pico de flauta/
Sulfato de hierro estría
amonio…………………..0.2g ácido sulfhídrico. a la fermentación de a 24 h alcalino (pico rojo/fondo profundidad
Inoculo liviano
(Fermentación Tiosulfato de sodio…0.2g 1) bacteria + Tiosulfato de
1) glucosa, lactosa, sacarosa rojo): el microorganismo K: alcalino
y a la producción de ácido es no fermentador de A: acido
d carbohidratos Rojo de
sodio ácido sulfhídrico azúcares.
fenol………0.025g sulfhídrico. Producción de
con producción Agua 2) SH2 + iones férricos
2) 4-La presencia de
gas (+) o (-)
de gas o sin destilada……………1L sulfuro ferroso pp burbujas, o ruptura del
medio de cultivo, indica
Color café
ella) que el microorganismo
produce gas.
5-El ennegrecimiento del
medio indica que el
microorganismoproduce
ácido sulfhídrico.
Decarboxilación de la A: ácido
lisina: K: alcalino
-Prueba Positiva: Pico N: neutro
violeta/fondo violeta. R: rojo
-Prueba Negativa: Pico (desimanación
Mide la capacidad enzimática de un violeta/fondo amarillo. oxidativa)
LIA
LIA organismo para descarboxilar un aa k/k:
Peptona………………..…..5g para formar una amina, con la azul de prusia/
LISINA HIERRO Extracto de levadura...3g Medio de cultivo utilizado azul de Prusia
AGAR L-lisina……………………..10g
Citrato de amonio y consiguiente alcalinidad.
descomposición La
de aa se produce para diferenciar
microorganismos,
Desaminación de la
lisina: Desaminación ox/
descarboxilación
hierro……………………..0.5g anaeróbicamente, no oxidativo y 35-37o C Pico rojizo/fondo
Tiosulfato de especialmente Salmonella Por punción y K/A azul de
requiere una coenzima común, el de 18 a 24 amarillo. Esto sucede
sodio…………………….0.04g spp., basado en la estría Prusia/ lila no
(prueba de Glucosa……………………..1g fosfato de piridoxal. h hasta 4 con cepas del género desaminación
decarboxilación / inóculo liviano
descarboxilacion Agar…………………………15g La L-lisina sufre la descarboxilación días Proteus, Providencia y
Purpura de desaminación de la lisina
para dar cadaverina y CO2 por alguna cepas de
de la lisina) bromocresol………...0.02g y en la producción de
Aguadestilada………….1L
acción de lisina-descarboxilasa Morganella spp.
ácido sulfhídrico.
Color púrpura
Producción de ácido
sulfhídrico:
-Prueba positiva:
Ennegrecimiento del
medio (especialmente
en el límite del pico y
fondo
Limitaciones
-Si se usa un
Determinar si un organismo es inóculo denso para
capaz de utilizar citrato como única sembrar el medio
fuente de carbono para el de cultivo, puede
Sulfato de magnesio..0.2g variar el color del
Monofosfato de amonio o metabolismo, provocando pico del verde al
CITRATO DE fosfato de amonio alcalinidad y fosfato de amonio 35o C de 24 amarillo- POSITIVA: Crecimiento
dihidrogenado…………….1g Medio utilizado para la
SIMMONS Fosfato dipotásico……...1g
como fuente de nitrógeno. Inóculo liviano a 48 h, a amarronado. con color azul de prusia
El metabolismo de l citrato diferenciación de Únicamente en veces es Esto no afecta el
intenso en pico
Citrato de sodio………….2g
enterobacterias,
enterobacterias, en base a la color verde del POSITIVO +
Cloruro de sodio……..….5g
(aprovechamiento Agar…………………….15-20g comprende
acetilo conuna condensación
la CoA (citritasa) yde capacidad de usar citrato cola
sobredeelpescado
pico de necesario
prolongar resto del medio de
cultivo, pero puede NEGATIVA: No NEGATIVO -
de citratos como Azul de bromotimol como única fuente de
oxalacetato para entrar en el ciclo flauta hasta por 4 afectar la crecimiento, ni cambio
única fuente de (1.5%sln carbono y energía visualización azul
alcohólica)……………..0.08g de Krebs. días de color (verde)
energía ) Aguadestilada…………….1L
de un resultado
pH alcalino: + acetato y formiato positivo.
Color verde
pH 6.9
pH ácido: acetoína y lactato -Inóculos muy
densos, pueden
principales productos
originar resultados
falsos positivos.
POSITIVO: medio de
Determinar la capacidad e un color púrpura-azul con
organismo de hidrolizar el aalmidón
lmidón un área incolora
por medios enzimáticos y probar la Yodo de Gram: alrededor del
desaparición de este por uso de un I2 1g + KI 2g + crecimiento
reactivo con yodo. 300ml agua
AGAR Peptona……………………5g
La primear dextrina
dextrina formada es la
Extracto de carne…….3g
ALMIDON Cloruro de sodio………5g eritrodextrina que da un color con es utilizado en la Inoculo denso Yodo de Lugol: POSITIVO +-
NEGATIVO
Agar……………………….20g yodo q progresa de azul al violeta al selección de I2 5g + KI 10g + PARCIAL: violeta a rojo
Agua rojo castaño, a medida q la hidrólisis microorganismos 100ml agua castaño
desionizada……….1L progresa el color del yodo no se Siembra por
(hidrólisis del productores de amilasas 35°C 24-48
Almidón 0.2%............20g produce por la formación de estría en cuatro
y también en los cultivos h Bañar con el
almidón) pH 7.2 acrodextrinas que son incoloras cuadrantes
NEGATIVO: Color
de hongos. reactivo e
Almidón - amilasa (azul) + púrpura-azul en el
interpretar de
amilopectina (rojo castaño)
inmediato crecimiento
Amilopectina dextrinas +
acrodextrinas -maltosa glucosa
ROJO-ROSADO (A): ácido,
lactosa y glucosa
fermentadas
Diferenciar los organismos sobre la AZUL PURPÚREO (NC/-):
base de sus múltiples reacciones en Sin fermentación
un medio con leche. AZUL(ALC/K): Alcalina, sin
La leche contiene 3 proteínas fermentación de lactosa,
principales: caseína, lactoalbúmina y acción sobre
Diferenciar especies de lactoalbúmina con NH3
lactoglobulina Por tanto en m.o.
Clostridium ( cuadro
cuadro ) BLANCO(reducción):
puede exhibir una o varias
Leche Enterococcus-color blanco
Enterococcus-color 35o C 18- reducción del tornasol,
propiedades metabólicas: elimina el oxígeno
desnatada……100g Stretococcus bovis de S 24 h o A
fermentación de la lactosa formando compuestos
Tornasol en polvo…5g equinus hasta 14 NC/-
(reducción) formando ácido láctico leucotornasolados
AGAR LECHE Agua Propionibacterium acnés días K
u ácido butírico, no fermentadoras incoloros
desionizada………1L + y P avidum+ de P Estría o difusión
difusión Seudomón Red
TORNASOL producen amoníaco con pH alcalino; COÁGULO (C):pp por ácido
*Peptona……………….. granulosum – adas de lactosa, no retrae y C
10g reducción
de niveles de
de tornasol
oxígeno, por reducción
formación de
Leuconostoc lactis y L fluorescent soluble en álcalis G
pH 6.8 ± 0.2 pseudomesenteroides
pseudomesente roides es 25o C de Caseína en paracaseína S
coágulo ácido y firme por pp de
color purpura ( ácido
ácido coágulo ) de L 4 a 7 días por rennina, retrae, suero
caseína por ácidos orgánicos, PEPTONIZACIÓN (D,
mesenteroides – y y L
formación de cuajo por conversión digestión): proteína de la
citreum
de caseína en para caseína por leche digerida, medio
rennina, pepsina; peptonización claro, disolución del cuajo
por pp de caseína mediante la por enzimas proteolíticas
formación de ácido y formación de GAS (G): burbujas en el
gases (CO2 y H2) que pueden romper medio
Fermentacióntormentosa
el coágulo ácido.
(S): coágulo ácido se
rompe por gas