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Pipetas

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Pipetas Pipetas y técnica de pipeteo Uso, Limpieza, Mantenimiento y Control de Calidad En general (excepto las volumétrica) g son largos

tubos cilíndricos de vidrio estirados por un extremo de forma que terminan en punta cónica. Están hechas de borosilicato de sodio-aluminio con un exceso de sílice que las hace resistentes al calor. calor

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Tipos de Pipetas
Existen dos tipos de estas: • Para contenido (TC). Éstas d b É t deben enjuagarse con el j l disolvente apropiado: Poseen una sola marca y debe transferirse todo su contenido. Se les conoce con los siguientes nombres: Micro-Folin, Sahli, Kirk Micro, lambda. Ninguna de estas pipetas reúne las especificaciones de clase A.

Tipos de pipetas
• Las de transferencia (TD). Existen dos tipos: – Las más conocidas son las volumétricas y las de Mohr de pico largo y las bacteriológicas. – Y las de Ostwald-Folin, serológicas de pico largo o de pico ancho. Las pipetas de Mohr reúnen las condiciones de clase “A”. Las graduaciónes estan hechas a intervalos uniformes con el extremo de éstas afinado. Las graduaciones están distribuidas pero lejos del extremo de la pipeta.
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Pipetas para transferir
Las soluciones se dispensan entre dos las dos marcas deseadas. La exactitud establecida para estas pipetas es para el volumen total. Si se desea emplear volúmenes menores, la exactitud decrece proporcionalmente. Por lo que la selección de la pipeta para transferir un volumen pequeño es muy crítica, debido a que se debe elegir aquella que proporcione su máximo volumen, logrando así una mayor exactitud.
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Código de colores de las pipetas
Volumen de la pipeta 0.1 mL 0.2 mL 1.0 mL 1/100 1.0 mL 1/10 2.0 mL 5. 0 mL 10.0 mL Código de color Blanco Negro Amarillo Rojo Verde Azul Naranja
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Técnica de Pipeteo
1. Coloque una perilla de seguridad en el vástago de la pipeta. 2. 2 Introdúzcase la pipeta en la solución, cuyo volumen ha de ser suficiente para llenar la pipeta por encima de la marca de calibración. 3. Aplíquese la succión y cárguese la pipeta hasta un punto situado por encima de la marca de calibración. 4. Retírese la pipeta de la solución. Límpiese la punta con una gasa, paño o trozo de papel absorbente (tisú).
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Técnica de Pipeteo (continuación)
5. Manténgase la pipeta en posición vertical y vacíese lentamente hasta la que el menisco inferior toque la marca d l calibración. T del lib ió Tome en cuenta los posibles errores de paralaje. Aplíquese la punta contra un recipiente limpio y seco para retirar cualquier gota colgante. Drénese la pipeta libremente en posición vertical y que la punta de vertical, ésta entre en contacto con la pared del recipiente receptor del líquido, de esta manera asegura que todo el volumen sea dispensado.
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Micropipetas
Pueden transferir volúmenes fijos o variables y van desde 1 hasta los 500 μL también se les conoce como pipetas lambda puesto que 1 lambda = 1 μL. Las más conocidas son las de la figura puesto que fueron introducidas en el laboratorio clínico por la casa Eppendorf. Ésta consta de un pistón y un sistema de mangueras y émbolos que permite succionar el líquido y posteriormente dispensarlo. Además cuenta con un sistema de puntas, cada una de ellas es para un volumen fijo.
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Técnica de Pipeteo en las Micropipetas

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Pipetores Manuales
Sirven para transferir repetidamente volúmenes específicos de reactante o diluyente. Existen muchos tipos pero el Oxford Repipetter (figura), es el más conocido. Un largo tubo de vidrio que parte del pipetor es colocado en el interior de líquido. Este aparato instrumento consta de un émbolo, un sistema de válvulas y un extremo o pico para transferir el líquido. La exactitud de éste es del 1%.

Pipetores Automáticos
Estos instrumentos pipetean una alícuota seleccionada de muestra y de diluyente dentro de un recipiente. La mayoría de éstos pertenecen al tipo de doble pistón. Cuando se da una señal electrónica, ambos pistones son activados. El pistón más pequeño, por acción valvular aspira la muestra dentro del pico de la pipeta. El segundo pistón, simultáneamente llena la segunda jeringa con el disolvente . A la segunda señal la válvula cambia y el diluyente es enviado a través del pico de la pipeta. Esto desplaza la muestra y enjuaga el pico de la pipeta.

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Calibración de pipetas
Se realiza con las pipetas de transferencia mediante pesadas del agua que vierten. La pipeta limpia y seca se llena hasta el enrase con agua destilada a temperatura conocida. Cualquier gotita adherida a la parte externa se seca (tal como se menciono en el apartado de la técnica de pipeteo), se deja drenar la pipeta en posición vertical, a un matraz previamente tarado, cuidando que la punta inferior de la pipeta toque una de las paredes del recipiente. No debe soplarse para expulsar el agua residual de la punta Con el peso del agua y la punta. fracción apropiada del número que corresponde a la adición al peso aparente puede calcularse la capacidad de la pipeta hasta el errase. O hasta la marca que se desea verificar su calibración.
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Lavado de pipetas 1.Se sumergen en una solución de hipoclorito de sodio al 1% por 5 minutos. 2.Se 2 Se les colocan en una bandeja que contenga un detergente no iónico de preferencia a pH = 7. 3.Se retiran de la solución jabonosa y se j g g j enjuagan con agua de la llave y se dejan escurrir por 15 minutos. 4.Se realizan dos enjuagados con agua destilada-desionizada (clase I o II).
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Si se les emplea para determinación de metales
1. 2. 2 Se realizan los procedimientos anteriores hasta el punto 2. Se enjuagan con agua desioni ada de clase I y se enj agan ag a desionizada sumergen por 24 h en una solución de agua regia (HCl + HNO3) 1:1. Se pasan de manera escalonada por cada una de las cinco bandejas con agua bidestilada y desionizada clase I. Se d dejan escurrir y se utilizan. l

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En ambos casos se pueden someter a secado a 80°C por 30 minutos.
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