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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Revisión :

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Fecha : 26.02.23
LABORATORIOS CIENCIAS Página : 01 de 114
ESCUELA PROFESIONAL DE OBSTETRICIA
PROCEDIMIENTO ELABORACIÓN DE MANUALES DE LAS ASIGNATURAS PRÁCTICAS DEL
LABORATORIO DE CIENCIAS

ASIGNATURA:
BIOLOGÍA

ELABORADO POR:
Mg.

Obst. Patricia Suyo Villar

REVISADO POR :
Dra.
Teresa del C. Montenegro Salazar
Coordinadora Laboratorios de Ciencias FOE-USMP
APROBADO POR :

Dra.

Nancy Castañeda Farro

Directora Departamento Académico FOE-USMP

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 ÍNDICE

Pág.
- Introducción 03

- Directiva para la Práctica en el Laboratorio de Ciencias 04

- Practica Introductoria 09

- Práctica N° 1: El Método Científico en la evolución histórica cognitiva 16

de la Biología

- Práctica N° 2: Microscopía 24

- Práctica N° 3: Células procariotas: Observación de bacterias 33

- Práctica N° 4: Reconocimiento de macromoléculas 36

- Práctica N° 5: Extracción de ADN de células de hígado de pollo 40

- Práctica N° 6: Mecanismo de transporte de las células 44

- Práctica N° 7: Células Eucarióticas 52

- Práctica N° 8: Síntesis de proteínas 62

- Práctica N° 9: Glucolisis Anaeróbica y Fermentación 71

- Práctica N° 10: Estudio del Cariotipo Humano 74

- Práctica N° 11: Mitosis 83

- Práctica N° 12: Meiosis 90

- Práctica N° 13: Herencia mendeliana 96

- Práctica N° 14: Biotecnología 108

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 INTRODUCCIÓN

El presente manual contiene los procedimientos básicos en un Laboratorio de Biología Celular y

Molecular, con el fin de conocer los procesos o fenómenos biológicos de los organismos vivos con
énfasis en el hombre.

En este manual de laboratorio se establece una relación entre los principios teóricos y los hechos
experimentales, lo cual nos permitirá desarrollar habilidades y conocimientos en este campo que
puedan ser empleadas en la solución de problemas de nuestra vida diaria.

Así mismo se hace mención a la Directiva de Bioseguridad para el Laboratorio de Ciencias

resaltando la importancia de la formación de los estudiantes con actitud responsable, buenos hábitos
de trabajo, orden, limpieza y un desarrollo seguro de las prácticas con la correcta aplicación de esta
Directiva.

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 FACULTAD DE OBSTETRICIA Y ENFERMERÍA

Directiva
para las Prácticas en el
Laboratorio de Ciencias

Dpto. Académico

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5
 DIRECTIVA PARA LOS ALUMNOS QUE REALIZAN PRÁCTICAS EN EL
LABORATORIO DE CIENCIAS

Artículo I. Los laboratorios de docencia de la Facultad de Obstetricia y

Enfermería de la Universidad de San Martín de Porres son unidades
de servicio académico donde se desarrollan las prácticas de las
asignaturas de química, bioquímica, histología, microbiología.
Artículo II. Es objetivo del presente reglamento dar las pautas que permitan evitar
accidentes durante la realización de ellas.

DE LA PRESENTACION DE LOS ESTUDIANTES:

Artículo III El alumno debe presentarse obligatoriamente con:

 Con mandil de algodón o drill que cubra desde el tórax hasta las
rodillas y las mangas que cubran todo el brazo con presencia de
puño. El mandil no debe ser de material sintético (Ej. Nylon).
 Con gafas de seguridad de polipropileno.
 Mascarilla que cubra la boca y la nariz.
 Guantes quirúrgicos cuando se trabaja con material biológico o
con material solvente de fácil absorción.
 Pantalones y zapatos que cubra todo el pie y no deje zonas
descubiertas. No debe presentarse con sandalias.
 Cabellos recogidos.

Artículo IV. El alumno NO puede ingresar al laboratorio con:

 Portando pulseras, anillos, collares o cualquier otra prenda metálica.
 Maletines, mochilas, sacos, abrigos, entre otros, los que deben
ser guardados en los casilleros indicados.
 Bebidas, goma de mascar o cualquier tipo de alimento.
 Los teléfonos celulares deben quedar sin sonido en los casilleros.

Artículo V. Solamente deben ingresar a la mesa de trabajo el material que va a ser

utilizado en la práctica. Como guía de práctica, lápices, entre otros.
Artículo VI. Está terminantemente prohibido fumar en la práctica.

DEL TRABAJO EN EL LABORATORIO

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Artículo VI. Los estudiantes no podrán comenzar las prácticas y experimentos sin la
presencia, orientación y autorización del profesor.

Artículo VII. El alumno debe iniciar la práctica:

- Habiendo leído la guía de práctica de tal manera que conozca las
advertencias, materiales, reactivos y procedimientos que se van a
realizar.
- Portando gafas, guantes, mascarillas y mandil.

Artículo VIII. En la práctica debe:

 Realizar sólo los experimentos programados.
 Realizar la práctica sin prisa.
 No bromear ni jugar en la práctica.
 No utilizar ni tocar instrumentos o dispositivos que no estén
señalados en la práctica.
Artículo IX. Debe mantenerse el orden y la limpieza:
 Mantener los cajones y puertas de los muebles cerrados.
 No colocar sillas, bancas o cualquier otro mueble que impida el
libre desplazamiento por los pasadizos del laboratorio.
 Evitar humedecer el piso para evitar accidentes.

Artículo X. Todo movimiento debe hacerse con cautela para evitar choques que
puedan producir roturas del material de laboratorio

Artículo XI. No debe succionar la pipeta con la boca, debe utilizarse bombillas
pipeteadoras.

Artículo XII.- Cuando se trabaja con tubos de ensayo se recomienda:

Siempre deben estar colocados y no en otra localización (mesa, bolsillos,
etc.). No llenarlos con más del 25% de su capacidad total. Sujetarlos con
pinzas cuando son calentados.
 La posición del tubo al momento de calentarlo debe presentar una
inclinación que impida que la salida de los vapores o líquidos entren en
contacto con la cara del operador o de los compañeros.
 Nunca calentar tubos tapados o cerrados.
 No agregar ningún reactivo a un tubo que esté calentando.

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 Artículo XIII: Los productos químicos:
 No deben ser inhalados colocando directamente la nariz sobre
la boca del recipiente.
 No deben ser tocados.
 Cada reactivo debe ser manipulado con un instrumento
exclusivo para cada uno de ellos.
 No deben ser probados.

Artículo XIV. Los trabajos de la práctica deben realizarse sobre la mesa del
laboratorio sin excepción alguna.

Artículo XV. Cuando tenga que mezclar un ácido con agua, vierta el ácido sobre
el agua y no al contrario, puede generar calor excesivo,
salpicaduras u otras reacciones inesperadas.

Artículo XVI. Al terminar la práctica:

- La mesa debe quedar ordenada y limpia.
- Los tubos den quedar limpios sobre las gradillas y los desechos
en ello recipientes correspondientes. Todo ello bajo la
supervisión del profesor.
- En los lavatorios no se puede verter sólidos o papeles que
puedan obstruir el desagüe.
- Deben cerciorarse que las llaves de gas estén cerradas.
- Lavarse las manos prolijamente.

Artículo XVII. Comunicación al profesor en caso de:

 Fuego.
 Quemaduras.
 Salpicaduras.
 Ingestión, inhalación, derrame sobre la piel de productos químicos.

PRÁCTICA INTRODUCTORIA

I- Competencias:

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  Analiza y aprecia en forma clara las normas de bioseguridad en el laboratorio, así
como valora su aplicación en las ciencias de la salud.
 Identifica los materiales y equipos de Laboratorio de uso corriente en el Laboratorio
de Biología.
 Aprecia la importancia de la Biología en la aplicabilidad en las ciencias de la salud.

II- Fundamento teórico:

Es necesario que antes de comenzar cualquier trabajo experimental, el estudiante conozca el

material que se utiliza
En el laboratorio de Biología se trabaja principalmente con material biológico por lo tanto
es importante utilizar equipo de protección adecuado a cada práctica.
En caso de utilizar sustancias químicas en el laboratorio es importante leer sus etiquetas y
tomar las precauciones debidas.
Cumplir con las normas tanto generales como de seguridad es muy importante para el
desarrollo de cada uno de los laboratorios.

III- Materiales:
 Videos ilustrativos.
 Lecturas y Artículo de revisión bibliográfica.

IV- Procedimiento:
1. Reconocimiento de materiales y equipos de laboratorio:
Revisión de los vídeos aplicativos:
Observar las figuras de materiales de vidrio, porcelana, plástico y material diverso y equipos,
con la finalidad de identificarlos. Completa el cuadro con los materiales y equipos que se
muestran, los cuales son de uso corriente en los laboratorios de Biología.

MATERIAL IMAGEN PRESENTACIÓN USOS

Microscopio

Porta y
cubreobjetos

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 Lupa

Equipo de
disección

ASA
BACTERIOLOGI
CA

AGUJA DE
DISECCION

GOTERO

LUNA DE
RELOJ

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 Pipeta graduada

Mortero con pilón

PAPEL FILTRO

PAPEL INDICADOR

Gradilla

PLACA
PETRI

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 PIPETA
PASTEUR

Tubo de ensayo

TUBO DE ENSAYO
CON TAPA

Probeta

PLACA DE
CALENTAMIENTO

MATERIAL IMAGE PRESENTACIÓN USOS

N

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 Baño
María

Estufa
bacteriológica

pH – metro o
potenciómetro

Balanza de
precision

13
 Centrífuga
mecánica

 Cuadro 1.5: Material diverso de uso común

MATERIA IMAGEN PRESENTACIÓN USOS

L

Bombilla de
succión o propipeta

Pisceta o frasco
lavador

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2. Normas de Bioseguridad
Realiza la lectura y el análisis de la Directiva para las prácticas en los laboratorios de Ciencias,
observa los videos de Bioseguridad. Grafica y explica cuatro medidas que consideres son las más
importantes.

V- Actividad Aplicativa
1- ¿Qué materiales emplearías al realizar una filtración? Explica el procedimiento y grafíca.
2- ¿Cómo se realiza el calentamiento de líquidos, que materiales se utilizan y que medidas de
bioseguridad debemos de tener presente.
3- Investiga en que consiste la disección, explica y grafica cada instrumento que constituye el
equipo de disección.

VI- Fuente bibliográfica:

 Cervantes RM, Hernández HM. Biología General. 1a ed. México: Grupo Editorial Patria;
2015. Recuperado de https://ebookcentral.proquest.com/lib/bibliotecafmhsp/reader.action?
docID=4569670&query=biolog%C3%ADa
 Curtis H, Sue N, Schnet A, Massarini A. Biología. 7ª ed. Buenos Aires: Editorial
Panamericana; 2013
 Karp G. Biología Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. 6ª ed. México: Editorial
Mc Graw-Hill; 2014.
 Starr C, Evers C, Starr L. Biología: Conceptos y aplicaciones. 8a ed. México: Cergage
Learning Editores. 2013.
 Vásquez CR. Biología 1. 3a ed. México: Grupo Editorial Patria; 2016. Recuperado de
https://ebookcentral.proquest.com/lib/bibliotecafmhsp/reader.action?
docID=4849813&query=biolog%C3%ADa

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 PRÁCTICA N° 1:

MÉTODO CENTÍFICO

COMPETENCIAS
El alumno identifica y describe los componentes del metodo científico, explica y
experimenta con responsabilidad a través de la ejecución de trabajos demostrativos y de
experiencias planificadas
(observaciones y experimentaciones), como enunciados (problemas, hipótesis y tesis) ésta
metodología científica y valora el significado de éste método en el avance de la ciencia

FUNDAMENTO

En la búsqueda del conocimiento científico será necesario tener una idea muy clara de
todos los elementos que se deben considerar en este proceso a través del presente
esquema:

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 Etapas del conocimiento
Científico (fáctico)

Experiencias Enunciados

Registra Comunica
hechos experiencias

Observación Experimentación
Problema hipótesis Tesis
No varia
Manipula Se formula Respuestas
procesos Respuestas
- Recoge datos procesos como una supuestas probadas
- Investigación - prueba hipótesis del
interrogante problema
descriptiva - investigación Teorías
explicativa Leyes
Principios
Conceptos

Desde el momento en que el hombre saltó a la racionalidad, empezaron sus problemas, se

multiplicaron sus inquietudes, sus nostalgias y su deseo de interpretar quién era?, de donde venía?,
cuál era su destino?, qué hacía y por qué era diferente al resto?, dándose infinidad de respuestas.
Desde hace aproximadamente 2,500 años, su sola existencia como especie humana significó la gran
posibilidad de describir y explicar hechos (como predecir y reproducir) de la naturaleza, los estados
cambiantes, el comportamiento y las relaciones de los objetos de los diferentes campos de la
realidad, para luego contribuir a constituir el inmenso bagaje que constituye el conocimiento
científico, que es finalmente el producto de su actividad dentro de un proceso, esfuerzo obstinado
en su quehacer diario, su afán de aprehender con rigor y exactitud los diferentes aspectos de la
realidad, la ciencia avanza en mérito a una concatenación armoniosa de observaciones
experimentales e interpretaciones teóricas.

De otro lado si partimos de una serie de observaciones podemos intentar extraer alguna conclusión,
aquí, nos encontraríamos frente a un proceso eminentemente deductivo, que a menudo es posible
proponer muchas explicaciones o plantear muchas hipótesis para la misma observación.

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En este caso el método científico resuelve el problema de manera práctica y efectiva, donde
infinidad de generalizaciones son posibles, tomándose como hipótesis correcta a la más sencilla y
de verificación fácil, en biología se conoce con el nombre de principio de parsimonia o “navaja de
Occam” (Guillermo Occam filósofo del siglo XIV) cercena las partes no esenciales de toda teoría.
Caen sobre el filo de esta navaja explicaciones religiosas, o la invocación de fuerzas sobre
naturales, estos aspectos planteados como hipótesis, que no se pueden verificar resultan
inaceptables.
Toda hipótesis enunciada debe de ser verificada a través de nuevas observaciones o experimentos
para decidir si se acepta o se rechaza, este proceso se puede repetir muchas veces, de allí que una
hipótesis puede ser correcta hasta cierto punto, pero, podría ceder a otras más acordes con los
hechos, de este modo las hipótesis confirmadas, que forman el sustento teórico de la ciencia, se
acerca cada vez más a la realidad.
Sabemos además a través del método científico que no existen las verdades absolutas, todo lo que
hay son hipótesis probables, cuya verdad dependerá de las observaciones que son su fundamento
y su característica.
METODO
DISEÑO DE INVETIGACIÓN CIENTÍFICA EXPERIMENTAL
“Determinación Cromatográfica de la mancha de tinta”

Observación, problema y Objetivos

1.- Observación
Cotidianamente observamos el color de las manchas de tinta de los plumones, la variedad y matices
de sus colores.

2.- Problema
Nos formulamos la siguiente interrogante: ¿Es el color rojo (por ejemplo) homogéneo o
heterogéneo?. Si es heterogéneo ¿De cuantos colores esta compuesto el color X?

¿Cuáles son?. ¿Qué densidad relativa tiene cada uno de ellos?

3.- Objetivos
Generales:

Determinar la composición homogénea o heterogénea de los colores observados

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Específicos:
1 Determinar la composición de colores de las manchas heterogéneas.
2. Determinar la densidad cualitativa relativa de los colores en las manchas heterogéneas

4. MARCO TEÓRICO
ANTECEDENTES. Estudios cotidianos con técnicas de cromatografía en medicina, bioquímica,
química orgánica etc.
TEORÍAS. Relativas a la composición de los colores y el comportamiento de los solutos en los
solvente

DEFINICIÓN DE TÉRMINOS
Cromatografía de colores
Soluciones
Difusión y Difusión Absorción Filtración Densidad

5. HIPÓTESIS Y VARIABLES
En las investigaciones experimentales las hipótesis nula (HO) Es respuesta
negativamente de las variables. Rechaza la hipótesis.
Hipótesis alternativa (H 1) Es respuesta positiva de las variables. Acepta la hipótesis Ej.

HIPÓTESIS CENTRAL DE TRABAJO.

 H O El color verde no es homogéneo.
 H 1 El color verde si es homogéneo
HIPÓTESIS DERIVADAS.
Si se acepta la hipótesis nula entonces el color verde indicado es heterogéneo, por lo tanto se
puede postular:

1. Los supuestos de los colores que lo constituyen.

2. La densidad relativa de cada uno de ellos.

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MATERIALES, MÉTODO Y TÉCNICA.
6.- MATERIAL:
 Plumones
 Papel de filtro
 Etanol
 Tubos de prueba
 Gradilla
 Tijeras
 Goma

7.- MÉTODO. Analítico experimental, con grupo testigo y grupo experimental.

8.- TÉCNICA.- Cromatografía, procedimientos por el que se separan mezclas complejas de

moléculas mediante múltiples particiones entre una fase fluida (móvil) y una fase estacionaria. En el
presente diseño se aplica cromatografía en papel filtro con una fase fluida el alcohol y la otra
estacionaria la mancha de tinta.

9.- PROCEDIMIENTOS: I ETAPA

Se recortan tiras de papel de Grupo testigo

filtro para colocarlos en tupos Grupo experimental
de prueba, 5 cm más grande
que estos

Se manchan con el mismo

plumón en el extremo superior del
papel (grupo testigo) y a 5cm del
extremo inferior(grupo
experimental)

Se introduce los
papeles dentro de
tubos con 2cm de
alcohol

Se espera 10 minutos

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 RESULTADOS HOMOGÉNEOS Y HETEROGÉNEOS

II ETAPA

El alcohol es absorbido y se filtra a

través del papel hasta alcanzar la
mancha del grupo

Los componentes heterogéneos se

distribuyen en fases de acuerdo a su El alcohol disuelve la mancha, si es
densidad homogéneo en un solo color, si es
heterogéneo en dos o más

10 DISCUSIÓN Y 11 RESULTADOS
- El alcohol (fase móvil) es un disolvente efectivo de las manchas de la tinta de los plumones
(fase estacionaria), lo que permite analizar los colores componentes de las manchas
correspondientes.
- Las manchas homogéneas están compuestas por un solo color
- Las manchas heterogéneas están compuestas por más de un color
- En las manchas heterogéneas se distribuyen los colores de acuerdo a las densidades.
- Se puede por lo tanto aceptar o rechazar las hipótesis nulas o alternativas de acuerdo
a los resultados obtenidos.
12 APLICACIONES.
- Las técnicas de cromatografía, dentro del método analítico experimental se aplica en
diversas áreas de las ciencias físicas, biológicas, químicas, médicas, industriales, etc. Así
por ejemplo:
- La cromatografía de intercambio iónico separa los aminoácidos por su carga eléctrica. Se
utilizan resinas aniónicas y catiónicas.
- La cromatografía de adsorción separa los lípidos de absorción diferente. Se utiliza un gel de
sílice en una columna de vidrio delgada y larga y mezcla de lípidos en solución clorofórmica

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 - Dos métodos cromatográficos para purificación de proteínas. (a) cromatografía de exclusión
de tamaño de gel de filtración (en función de su tamaño). (b) cromatografía de afinidad en
función de los ligados.
- Cromatografía de intercambio iónico y de gel de filtración pueden servir para separar
mezclas de glúcidos en sus componentes individuales.

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO.-

1. - Con tus propias palabras escribe un concepto acerca del método científico.

2. - ¿Crees que todos los conocimientos descubiertos por el hombre han sido a través del uso
del método científico?
3- ¿Cuál será el mayor mérito del método científico?

4. - ¿Podrías citar un hecho u hechos descubierto haciendo uso del método científico?

5. - Menciona conclusiones de la presente práctica.

FUENTE BIBLIOGRÁFICA

 Bunge M. La Ciencia su método y su filosofía. México. Siglo veinte; 1999.

 Chataing B., Nieves E. Manual de laboratorio de Biología. Universidad Los Andes.

Venezuela. [Internet]. 2011 [citado 31 de julio de 2023). Disponible de:
http://www.serbi.ula.ve/serbiula/librose/pva/Libros%20de%20PVA%20para%20libro
%20digital/ManualBiologia.pdf

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