AREA DE CIENCIAS 2021-I

GUIA DE PRACTICAS DE LABORATORIO

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE BIOLOGIA
MEDICINA CELULAR

MANUAL DE PRACTICAS BIOLOGIA CELULAR

PRESENTACION
La Biología Celular es sin duda la ciencia que más ha aportado al desarrollo de la Medicina,
basada en una rigurosa aplicación del método científico de la investigación experimental.

La experiencia curricular (EC) de Biología Celular de la Escuela de Medicina de la Facultad de

Ciencias Médicas de la UCV filial Piura, cuenta con una Guía de Práctica, cuyo objetivo es que
los estudiantes a partir de los conocimientos adquiridos en los diálogos, seminarios y casos
clínicos, puedan complementar con un experimento seguido en forma ordenada,
desarrollando destrezas, obteniendo resultados y al final poder discutirlos en grupo con el
docente, logrando con ello complementar sus conocimientos teóricos.

El presente manual de prácticas, reúne un conjunto de técnicas y procedimientos útiles para

lograr un mejor aprendizaje de la asignatura.

Se explica al estudiante, el fundamento de la experiencia y se induce su aplicación en el área

biomédica para lograr el aprendizaje de calidad universitaria y la consecución de sus
competencias.

Deseamos, que esta guía cumpla con la finalidad con que fue elaborada, y se agradece a las
personas que nos hagan llegar sus sugerencias y valiosas críticas que sin duda servirán para
mejorar y enmendar errores.

El autor
 AREA DE CIENCIAS 2021-I
GUIA DE PRACTICAS DE LABORATORIO
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE BIOLOGIA
MEDICINA CELULAR

PRACTICA N 01

MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Y RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE

LABORATORIO

I. INTRODUCCIÓN:

El laboratorio de Biología, constituye un importante lugar de aprendizaje ya que contribuye en

afianzar la información teórica mediante actividades prácticas en donde el estudiante es el
principal responsable de su aprendizaje motivado por el docente quien guía y da las pautas a
seguir.

Es así que el laboratorio es un ambiente con mesas de trabajo, equipos y materiales que
permiten un buen desarrollo de las actividades. Los materiales necesarios en laboratorio
de Biología convenientemente se clasifican en:

Biológicos (protozoarios, erizos de mar, cultivos bacterianos, catáfilas y meristemos

de cebolla, células epiteliales humanas, hígado, huevos de ave, espermatozoides, sangre, bilis,
esputo, suero, orina, etc.), de vidrio (probetas, buretas, pipetas, vasos de precipitación,
tubos de ensayo, etc.), de plástico (pipetas, probetas, gradillas, frascos lavadores, goteros,
etc.), de madera (de uso limitado por su fácil deterioro), de metal(de aluminio o acero
p.ej. cubetas, gradillas, espátula, bisturí, tijera, pinzas, etc.), instrumentos (microscopio,
espectrofotómetro, balanza de platillos, etc.), equipos (estufa, baño María, centrifuga,
refrigeradora, horno, autoclave) y reactivos químicos; todo ello importantes para la ejecución
de procedimientos y experimentos necesarios para consolidar la información teórica basadas
en evidencias prácticas. En este sentido el laboratorio, constituye parte fundamental del
desarrollo de competencias curriculares de todo estudiante del área de ciencias.

II. OBJETIVOS:

 El alumno de Biología celular aplicara las normas de bioseguridad en su estadía en el

laboratorio
 Identificará y usará correctamente los materiales de laboratorio (vidrio, metal, madera
y equipos de laboratorio)

III. PROCEDIMIENTO:

3.1. BIOSEGURIDAD

El trabajo en el Laboratorio requiere de la observación de una serie de normas de seguridad

que eviten posibles accidentes debido al desconocimiento de lo que se está haciendo o a una
posible negligencia de los alumnos que estén en un momento dado, trabajando en el
Laboratorio. A continuación se enumeran una serie de medidas e indicaciones de
seguridad que deben tomarse durante las prácticas de laboratorio.
A. NORMAS PERSONALES

1. Ingresar al laboratorio con su guardapolvo. Esta ropa protectora deberá ser

quitada inmediatamente antes de abandonar el laboratorio.

2. Es obligatoria la utilización de mandil que le cubra brazos, piernas y torso; deben portar
además guantes de látex y mascarilla.

3. Está prohibido el uso de sandalias, pantalones y faldas cortos , gorras, bufandas y

otros accesorios en el laboratorio. La persona inapropiadamente vestida para trabajar en el
laboratorio no podrá ingresar.

4. Toda persona con cabello largo, deberá sujetarlo y recogerlo.

5. Lea con atención, antes de cada práctica, las indicaciones de su guía. Siga todas las
instrucciones a menos que el profesor realice alguna modificación, esperar sus instrucciones.

6. Sobre la mesa de trabajo debe existir solamente materiales, reactivos e instrumentos

de laboratorio y su guía o manual de práctica. No colocar sobre la mesa de trabajo mochilas,
carteras u otros objetos personales, estos deberán ser colocados en lugares asignados.

7. Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su material. Se

trabajará con cuidado y de manera organizada. Así mismo se mantendrá cada mesa de trabajo
limpia, seca y ordenada.

8. Los grupos de práctica deberán contar con una franela o papel toalla para limpieza de su
área de trabajo y bolsa de plástico para eliminar sus residuos.

9. No se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comidas así como el uso de cualquier
otro ítem personal (ej. cosméticos, cigarrillos) dentro del área de trabajo.

10. No arroje basura al piso o lavaderos, procure colocarlos en bolsa de plástico para desechar
en el tacho de basura. El laboratorio deberá ser mantenido limpio, ordenado y libre de
materiales extraños.

11. Usar guantes de látex cuando se trate de material biológico o sustancias químicas que
tengan riesgo potencial. Cambiar los guantes de látex cada vez que hayan sido contaminados,
lavarse las manos y ponerse guantes limpios. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos
enguantadas.

12. Lavar las manos con jabón (líquido o sólido suspendido) y agua inmediatamente después
que el trabajo haya sido terminado.

13. Informe inmediatamente a su profesor de cualquier accidente ocasionado con elementos

o equipos del laboratorio.

14. Al finalizar la práctica, deberá quedar el material, equipos y lugar de trabajo

perfectamente limpios.

B. MANEJO DE REACTIVOS QUIMICOS

1. Usar lentes de seguridad cuando trabaje con reactivos químicos peligrosos que puedan
salpicar o derramarse.
2. Antes de utilizar un compuesto, asegurarse bien de su necesidad, fijarse bien en el rótulo. 3.
Como regla general, no coger ningún producto químico. El profesor o profesora te lo
proporcionará.

4. Nunca devuelva los sobrantes de los productos a los frascos de origen sin consultar con el
profesor.

5. Es muy importante que cuando los productos químicos de desecho se viertan en la pila de
desagüe, estén debidamente neutralizados, debe dejarse que circule por la misma, abundante
agua.

6. No tocar con las manos y menos con la boca, los productos químicos.

7. No pipetear con la boca. Utilizar una bombilla de succión .

8. Los ácidos requieren un cuidado especial. Cuando queramos diluirlos, siempre echaremos
el ácido sobre agua.

9. Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) deben estar lejos de fuentes de calor.
Si hay que calentar tubos con estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la
llama.

10. Manipule con precaución los solventes volátiles e inflamables como el éter, acetona y
metanol. Nunca evapore estos solventes en una hornilla al abierto. Utilice siempre un
sistema de condensación eficiente.

11. Si por accidente cae o se vierte sobre ti cualquier ácido o producto corrosivo,
lávate inmediatamente con mucha agua y avisa al profesor.

12. Al preparar cualquier disolución se colocará en un frasco limpio y rotulado

convenientemente.

13. Si fuera necesario durante la practica encender un mechero, encienda el fuego en el

laboratorio solo si no existen solventes inflamables en la vecindad. La persona que encienda el
fuego debe primero verificar que no exista otra persona que esté trabajando con solventes
inflamables en el laboratorio.

C. MANEJO DE MATERIAL DE VIDRIO

1. Use material de vidrio limpio y no rajado.

2. El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frío. Para evitar quemaduras use
guantes o trapos.

3. Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa

cuidadosamente estas dos normas: Tener extremo cuidado y cerciórate que la boca del
tubo de ensayo no apunte a ningún compañero. Puede hervir el líquido y salir disparado,
por lo que podrías ocasionar un accidente. Calienta por la pared lateral del tubo de ensayo,
nunca por el fondo; agita suavemente.

D. MANEJO DE EQUIPOS ELÉCTRICOS

1. Manipule cualquier equipo eléctrico con las manos secas y asegúrese que el área de trabajo
también este seca.

2. Ningún cordón eléctrico debe colgar fuera de la mesa de trabajo.

3. Cuando desconecte algún equipo del tomacorriente, jálelo por el enchufe y no por el
cordón.

E. MANEJO Y UTILIZACION DE BALANZAS

1. Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza, se colocará papel sobre
los platos de la misma y si el producto fuera corrosivo, se utilizará una luna de reloj.

2. Se debe evitar cualquier perturbación que conduzca a un error, como vibraciones debidas a
golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre los platos de la balanza, etc.

F. ANIPULACIÓN DE MATERIAL BIOLÓGICO

1. Se debe utilizar guantes de látex para la toma de muestras de pacientes y el manejo de

exudados, secreciones, sarro dental, orina, semen, sangre, tejidos, etc.

2. Desechar correctamente los guantes de látex en los tachos respectivos.

3. Manipule los microorganismos crecidos en una placa petri o tubo de cultivo con cuidado
extremo.

4. Nunca llevar a la boca plantas o partes de ellas como semillas, frutos y hojas.

3. 2.- MATERIAL Y EQUIPOS DE LABORATORIO

En el curso de Biología Celular, se utiliza material de laboratorio así como equipos que
ayudan a comprender los temas teóricos revisados, a través de la experimentación, motivo por
el cual es necesario el reconocimiento de estos materiales diversos de laboratorio.

1. Pipeta.-es un tubo de vidrio abierto por los dos extremos que se emplea para
transvasar o medir pequeñas cantidades de líquido en el laboratorio

2. Probeta.- instrumento de laboratorio que se utiliza, sobre todo en análisis químico, para
contener o medir volúmenes de líquidos de una forma aproximada. Es un recipiente cilíndrico
de vidrio con una base ancha, que generalmente lleva en la parte superior un pico para verter
el líquido con mayor facilidad.

3. Tubos de ensayo.- tubos de cristal con base convexa y en el otro extremo una apertura que
puede ser lisa o en rosca, y sirven para contener sustancias líquidas, sólidas y semisólidas, y
efectuar reacciones en ellos. Los más usados son los vidrios de alta resistencia térmica (Pirex o
Kimax) los cuales son de diversas medidas.

4. Vaso de precipitados.- es un recipiente cilíndrico de vidrio fino que se utiliza en el

laboratorio, sobre todo, para preparar o calentar sustancias y trasvasar líquidos. Suele llevar
marcada una escala graduada en mililitros, que permite medir distintos volúmenes, aunque no
con gran precisión. Las capacidades de los vasos de precipitados suelen variar entre los 25 y los
2.000 mililitros.

5. Placas petri.- son recipientes planos de forma circular con rebordes elevados y tapa, que
sirven para colocar medios de cultivo sólidos o muestras.

6. Láminas portaobjetos.- son placas de vidrio rectangular que sirven para realizar diferentes
tipos de frotis,

7. tienen medidas estándar de 3x1pulgadas y pueden tener o no bordes biselados.

8. Laminillas cubreobjetos.- son placas de vidrio muy delgadas, de forma cuadrada o
rectangular que sirven para colocarlas sobre frotis húmedos o fijos, tienen diversos tamaños,
siendo los más usados las de 18 x 18mm.

9. Matraz Erlenmeyer.-Es un recipiente que permite contener sustancias o calentarlas.

10. Embudo de vástago corto.- Sirve para transvasar líquidos de un recipiente a otro, también
se usa para separar sólidos de líquidos.

11. Frascos goteros.- Recipientes transparentes o de color ámbar, con tapa rosca o esmerilada.
Se usan para guardar los reactivos, colorantes o indicadores.

12. Piseta: También llamada frasco lavador o matraz de lavado, la piseta es un frasco cilíndrico
de plástico o vidrio con pico largo, que se utiliza en el laboratorio de química o biología, para
contener algún solvente, por lo general agua destilada o desmineralizada, aunque también
solventes orgánicos como etanol, metanol, hexano, etc. Este utensilio facilita la limpieza de
tubos de ensayo, precipitados y electrodos.

13. Gradillas.- pueden ser de madera, laminada o alambre galvanizado. Se emplean para
colocar los tubos de ensayo.

14. Mortero de porcelana con pistilo.- Son utensilios hechos de diferentes materiales como:
porcelana, vidrio ágata, los morteros de vidrio y de porcelana se utilizan para triturar
materiales de poca dureza y los de ágata para materiales que tienen mayor dureza.

15. Mechero.- Es un instrumento de laboratorio de gran utilidad. Fue diseñado con el propósito
de obtener una llama que proporcione máximo calor. La llama del mechero es producida por
un combustible (alcohol, gas natural).

16. Pinzas de madera.-Las pinzas de madera o pinzas para tubos de ensayo sirven para sujetar
los tubos de ensayo mientras se calientan o manipulan. Esto permite, por ejemplo, calentar el
contenido del tubo sin sostener el tubo con la mano (lo que podría dar lugar a quemaduras).

17. Centrífuga.- Instrumento que utiliza la fuerza centrífuga para lograr separar estratos
de diferente densidad.

18. Microcentrífuga.- es un equipo que sirve para centrifugar solo capilares.

19. Baño de agua.- aparato de forma cuadrangular con tapa, que contiene agua a
determinada temperatura (de 20° a 80°), graduada por un termostato y controlada por un
termómetro. Usado para incubar medios enzimáticos y sustancias liquidas.

20. Estufa.- mantiene cultivos celulares a temperaturas ambientes de 20° a 40°.

21. Horno.- genera calor seco hasta temperaturas de 600°C, utilizado para el cocimiento de
productos y obtener cenizas.

22. Microscopio.- Es un Instrumento óptico destinado a observar de cerca objetos

extremadamente diminutos. La combinación de sus lentes produce el efecto de que lo que se
mira aparezca con dimensiones extraordinariamente aumentadas, haciéndose perceptible lo
que no lo es a simple vista.

23. Balanza de un platillo.- Determina la masa de una sustancia.

24. Láminas histológicas (montadas).- Un corte histológico es una sección fina de un tejido
biológico adherida sobre un portaobjetos y generalmente coloreada con alguna tinción
específica para resaltar una parte de la estructura. Por lo general, se cortan con un micrótomo
con un espesor de unos 0,5 a 10 micras, porque deben ser atravesados por la luz para que
puedan ser observados bajo un microscopio. Se emplean con frecuencia en los laboratorios de
histología y de anatomía patológica.

25. Microscopio.- El microscopio es uno de los instrumentos más versátiles usado por la
ciencia. Es difícil encontrar algún campo de la ciencia o de la industria donde no se utiliza el
microscopio. Este instrumento permite amplificar la imagen de un objeto pequeño. La imagen
puede ser observada directamente, fotografiada o percibida por fotocélulas u otros
receptores, dependiendo de la naturaleza y del uso que haya de hacerse de esta imagen. La
microscopia tiene como base: * La radiación aprovechable por la longitud de onda, como
fuente de poder, que permite usar la longitud de onda del espectro de luz, en la
microscopia óptica a las ondas electrónicas en la microscopia electrónica. * El poder de
resolución * La magnificación. Estas propiedades fundamentales de la microscopia, permiten
examinar detalles mínimos de la estructura y ultraestructura de la célula y de sus organelas, y
de los microorganismos. Así mismo permite detectar imperfecciones en metales, cristales,
cerámica, tipo de rocas, minerales, fósiles, etc.

Clases de microscopios Los microscopios pueden clasificarse como microscopio simples o

estereoscópicos y microscopios compuestos. Entre los primeros que forman una imagen vi
rtual y derecha se encuentra la lupa.

Los microscopios compuestos se caracterizan por formar una imagen real e invertida y son de
varios tipos. Entre los que pertenecen a la microscopia óptica tenemos: * Microscopio
compuesto de campo claro * Microscopio de contraste de fases * Microscopio de
interferencia de Normanski * Microscopio de fluorescencia * Microscopio con focal, que
utiliza un sistema de foto detección computarizada. Este microscopio permite escanear o
barrer la superficie de las muestras y rotarlas 360 grados.

Entre los que pertenecen al microscopio electrónico tenemos: * Microscopio electrónica de

transmisión * Microscopio electrónico de barrido * Microscopio de alto voltaje *
Microscopio rastreador de efecto túnel

Componentes del microscopio óptico Fuente de luz. Muchos microscopios básicos, utilizan
espejos o focos de bajos voltajes. La luz natural o artificial es focalizada, vía un sistema de
lentes colectores en el condensador. Condensador En los microscopios de luz
transmitida, el condensador concentra un cono de luz de la misma apertura numérica (AN)
del objetivo con el que se observa la muestra Objetivos. Lentes donde se forma a la imagen
real, invertida y aumentada del espécimen que se observa. El aumento de cada objetivo se
encuentra en la parte exterior del mismo, son los números de mayor tamaño. Los objetivos
secos (5X, 10X, 20X, 40X,) y 100X utiliza como medio óptico del aceite de inmersión.
IV. RESULTADOS

1. Dibuja los equipos y materiales de laboratorio, más comunes en Biología.

2. ¿Cuáles son las medidas de bioseguridad que consideras indispensables en laboratorio

de biología? Fundamenta.

3. Dibuja o pega la simbología de riesgo y peligrosidad dentro de un laboratorio como el de

biología.

V. DISCUSIÓN

VI. CONCLUSIONES

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

VIII. ANEXOS

REGLAS BÁSICAS DE SALUD, SEGURIDAD E HIGIENE DURANTE EL TRABAJO DE PRÁCTICAS DE

LABORATORIO DE CIENCIAS MÉDICAS
 Asistir puntualmente a la práctica programada portando sus implementos de
bioseguridad (mandil blanco ò guardapolvo blanco, guantes y mascarilla), una libreta
de apuntes y su guía de práctica.
 Conocer la ubicación de los elementos de seguridad en el laboratorio como el botiquín
de primeros auxilios, las salidas de emergencia, el extinguidor de CO2.
 Las mesas de trabajo deben estar limpias y despejadas de libros, cuadernos,
vestimentas y otros objetos personales.
 Las rutas de escape ò pasillos deben permanecer libres de objetos como bancos, sillas,
máquinas u otros elementos que entorpezcan la libre circulación.
 Queda prohibido: o Comer, beber y fumar dentro de laboratorio o Jugar ò hacer ruidos
molestos o Faltar el respeto o agredir a los docentes, administrativos y compañeros de
clase o Presentarse en estado de ebriedad o Manipular equipos, reactivos y materiales
no autorizados por el docente o Hacer mal uso de los equipos y ensuciar los ambientes
 Permanecer en el lugar asignado y atento a las explicaciones del docente sobre la
práctica correspondiente, la manipulación de equipos, reactivos químicos y otros
materiales a usar en la práctica.
 No pipetear directamente con la boca, usar propipetas de goma cuando se trata de
cualquier sustancia líquida, altamente tóxica, corrosiva o nociva.
 No tocar los reactivos químicos con las manos, para manipularlos existen espátulas,
pinzas, pipetas, micro pipetas, etc.
 Comprobar cuidadosamente los rótulos de los frascos de reactivos antes de usarlos.
Consultar al docente o al técnico de laboratorio en caso de dudas o complicaciones.
 Mantener siempre limpia el área de trabajo y no cargar con material innecesario.
 Tomar nota de todos los datos, observaciones y resultados, lo que servirá para realizar
el informe respectivo.
 Si alguna sustancia química le cae en la piel o los ojos, lávelos inmediatamente con
bastante agua y avisar al docente.
 Cuando trabaje con equipos de vidrio, tubos y termómetros, preste mucha atención
pues el vidrio es frágil y se rompe fácilmente, el cual puede causar cortes o heridas.
 Cuando se manejan compuestos químicos peligrosos cómo ácidos, álcalis o fluidos
como sangre, manipularlos con mucho cuidado y hacer uso de guantes y mascarillas de
protección.
 Al término de la práctica todos los desechos y residuos sólidos generados durante la
misma, depositarlos en los recipientes en mesas, tachos acondicionados en el
laboratorio y los residuos líquidos no peligrosos desecharlos por el desagüe agregando
bastante agua.
 Use mascarillas en caso de manipulación de agentes tóxicos durante operaciones de
pesado
 Usar correctamente los implementos de bioseguridad cuando obtenga o manipule
muestras biológicas o patógenas, cuidar de no causar contaminación en las mesas de
trabajo o el ambiente. Queda prohibido descartar el material biológico por el
desagüe, dichos residuos deben ser depositados en recipientes especiales
acondicionados en el laboratorio.
 Las muestras de cultivos microbianos deben autoclavarse antes de ser eliminadas
al recipiente correspondiente, luego lavarlas como de rutina.
 En caso de derrame de muestras contaminadas, inoculadas o medios sembrados, rotura
de tubos con cultivos, avise inmediatamente al personal docente o técnico de
laboratorio para el recojo y desinfectado del área de trabajo.
 En el caso de rotura de algún material de práctica por negligencia, el grupo es
el responsable tiene un plazo máximo de 15 días para reponer dicho material.
 Al terminar la práctica, la mesa, equipos, reactivos y otros materiales deben quedar
ordenados. Cerciórese de que las llaves de agua y luz queden cerradas.
 Al término de la práctica el personal de limpieza de los laboratorios debe desinfectar las
mesas de trabajo con una solución de hipoclorito de sodio lo 0.5%. Queda prohibido
descartar el material biológico por el desagüe, dichos residuos deben ser depositados
en recipientes especiales acondicionados en el laboratorio y transportados al centro de
acopio de desechos de la universidad.
 El personal de limpieza de los laboratorios deben estar capacitados en la manipulación
de los desechos biocontaminados, punzocortantes entre otros y deben usar elementos
de protección de bioseguridad: mandil, guantes, mascarillas.
 Todo el personal que trabaje en los laboratorios de la Facultad de Ciencias Médicas
(docentes, técnicos de laboratorio y estudiantes) debe contar con sus vacunas
correspondientes: tuberculosis, hepatitis B.