"Año de la unidad, la paz y el desarrollo"

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS MÉDICAS

CONTROL DE MICROORGANISMOS
INTEGRANTES CURSO
ESTRELLA SAAVEDRA SANDRA
MICROBIOLOGÍA Y
FABIAN ALFARO ANGEL
FALLA CASTILLO MARIANA
PARASITOLOGÍA
FERNANDEZ HERRERA LESLY
FERNANDEZ LAVADO EDUARDO
GALVEZ RODRIGUEZ ESTEFANI
DOCENTES
GAMBOA MÉNDEZ SHEYLA DR. TONY CHÁVEZ
GAMBOA PORTOCARRERO SEBASTIÁN UCEDA
GARCÍA CARBAJAL CRISTIAN
GARCÍA CHÁVEZ XIMENA
GAYTAN PAREDES DEXI
GOICOCHEA ORTECHO LUCERO
GUERRERO LOZANO ANGEL ALEXIS
ZAMBRANO DELGADO STEFANIE

Mesa 04
DEFINICIONES
 DEFINICIONES
Limpieza < Desinfección Antisépticos < Esterilización Asepsia
Uso de Uso de Agente que Uso de procedimientos Procesos diseñados
procedimientos procedimientos destruye o inhibe el físicos y agentes químicos para prevenir que los
físicos y sustancias físicos y agentes crecimiento de que destruyen o eliminan microorganismos
químicas que brindan químicos para microorganismos de un objeto o ambiente alcancen un
una sensación de destruir mayoría de en tejidos vivos o todas las formas de vida ambiente protegido.
higiene y cuidado microorganismos fluidos biológicos microbiana

No elimina esporas No elimina esporas Elimina esporas bact., Esterilización +

bacterianas, micobacterias bacterianas micobacterias, virus sin desinfección + limpieza
virus y hongos envoltura y hongos

Ej. Pasteurización (calor)

GERMICIDAS

Destruye todo excepto Autoclave

D.A.N. gran número de esporas
bact. Alcohol Yodóforos
Destruye todo excepto
D.I.N. endosporas bacterianas.
Destruye mayoría de Triclosano
D.B.N. bacterias vegetativas y
virus.

Carroll KC, Morse SA, Mietzner T, Miller S. Jawetz, Melnick & Adelberg. Microbiología médica. 27a. edición. Mexico: McGraw-Hill Education; 2016.
Gas oxido de etileno
Ryan KJ, Ray GC. Sherris. Microbiología médica. 6a. edición. Mexico: McGraw-Hill Education; 2014.

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 DEFINICIONES

Carroll KC, Morse SA, Mietzner T, Miller S. Jawetz, Melnick & Adelberg. Microbiología médica. 27a. edición. Mexico: McGraw-Hill Education; 2016.

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 DEFINICIONES

Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiología médica. 9a. edición. Barcelona, España: Elsevier; 2021.

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AGENTES FÍSICOS
 CALOR HÚMEDO Y SECO
CALOR HÚMEDO CALOR SECO
Con vapor de aire →
mejor distribución del calor Produce la destrucción de los microorganismos por oxidación de sus
Más rápido y eficiente para la esterilización componentes celulares.

Desnaturalizan en forma irreversible las proteínas

DESVENTAJAS VENTAJAS
Presión Temperatura Tiempo Elimina
Requiere temperaturas
100 °C
Matará a todas
10 psi 2-3 min las eubacterias
Se usa cuando es inadecuado
más altas y tiempos más el contacto con el vapor.
prolongados que en calor
15 psi 121 °C 10-15 min Matará las
esporas húmedo.
No corroe utensilios de cristal
ni metálicos
Interfiere con estabilidad Puede emplearse para
de algunos materiales esterilizar polvo y aceite
Acero pierde temple (materiales no miscibles con el
Para caucho y telas la agua)
alta temperatura es
destructiva (objetos
termosensibles)

MÉTODOS

AIRE CALIENTE LLAMA DIRECTA INCINERACIÓN

Esteriliza material médico
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 CALOR SECO

AIRE CALIENTE LLAMA DIRECTA INCINERACIÓN

Se lleva a cabio en hornos que Colocar el material directamente al Material en cámaras especiales que
permiten la distribución uniforme del fuego hasta que este se ponga al rojo alcanzan elevadas temperaturas.
calor vivo

Se queman los contaminantes hasta
160 a 170ºC durante 2 a 3 horas Eficacia depende de la calidad de la reducirlos a cenizas

llama
Oxidación de constituyentes celulares y
desnaturalización de proteínas EJEMPLOS EJEMPLOS

EJEMPLOS Procedimiento de rutina en Para material contaminado a descartar:

Para esterilizar: microbiología para esterilizar el asa de Bolsas
Materiales de vidrio siembra Papel
Instrumentos quirúrgicos Uniformes desechables
Agujas de metal Cadáveres animales
Material no miscible en agua

Esterilización por calor seco [Internet]. Universidad César Vallejo; 2010. Disponible en:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Esterilizaci%C3%B3n_por_calor_seco.pdf

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 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE EL CRECIMIENTO
Cada bacteria (y suponiendo que el resto de condiciones ambientales se
mantienten constantes) muestra una curva característica de tasa de
crecimiento en función de la temperatura

TEMPERATURAS CARDINALES

TEMPERATURA MÍNIMA

Por debajo de ella no hay crecimiento

MARGEN DE
TEMPERATURA MÁXIMA CRECIMIENTO
Margen entre la
Por encima de ella no hay crecimiento temperatura mínima y
máxima
TEMPERATURA ÓPTIMA

Permite la máxima tasa de crecimiento

MICROORGANISMOS SEGÚN LA TEMPERATURA

PSICRÓFILOS MESÓFILOS TERMÓFILOS
Obligados: Temperatura Temperatura Temperatura óptima
óptima a 15-18 ºC óptima a 25-40 ºC a 50-75 ºC y
Facultativos: Temperatura y máximas entre 35 máximas entre 8' Y
óptima en 20-30ºC y -47ºC 113ºC
máxima en 35ºC
Agentes físicos [Internet]. [citado el 13 de agosto de 2023]. Disponible en: https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/13agfisicos.htm#_Toc59451619

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 ¿CÓMO PODEMOS CARACTERIZAR O MEDIR EN LA PRÁCTICA LA INACTIVACIÓN POR CALOR DE UNA
SUSPENSIÓN BACTERIANA?

He aquí unos parámetros utilizados

TIEMPO TÉRMICO MORTAL TIEMPO DE REDUCCIÓN DECIMAL PUNTO TÉRMICO MORTAL

Tiempo mínimo requerido para que Tiempo requerido para reducir al 10% Es la temperatura mínima que mata a
mueran todas las bacterias de una la densidad de la suspensión, a una todas las bacterias en un tiempo
determinada suspensión a una determinada temperatura (también determinado (normalmente el tiempo
determinada temperatura llamado valor D) de referencia empleado es de 10 min).

Agentes físicos [Internet]. [citado el 13 de agosto de 2023]. Disponible en:

https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/13agfisicos.htm#_Toc59451619

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 RADIACIONES
RADIACIÓN IONIZANTE Rayos X Rayos γ Rayos catódicos

Mayor energía ---> ↑Poder de penetración Son altamente letales Emisión: Cesio-137 y el Corriente de electrones
Producción costosa Cobalto-60 pueden esterilizar
Componentes celulares materiales a
Utilización eficiente difícil ↓longitud onda → temperatura ambiente
Formación de iones y (emisión de rayos ↑energía con una breve
exposición. Tienen un
radicales libres multidireccionales) Alta penetración y poder de penetración
letalidad limitado.
Mecanismo de acción Esterilización comercial
Formación de Alteración de
radicales libres estructuras moleculares
(OH*, H*) (ADN, proteínas) Aplicaciones Principal método de estirilización
Radiación gamma
Fuentes: cadena
transportadora de e-, Estrés oxidativo Desechables como jeringas de plástico,
reacciones de oxido- juegos de infusión, suturas catgut,
reducción catéteres, guantes y apósitos adhesivos
Muerte celular antes de su uso.
Ventajas Hueso, injertos de tejido, antibióticos y
hormonas.
Alto poder de penetración
Rapidez de acción
La temperatura no aumenta
Flexibilidad

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 RADIACIONES
RADIACIÓN NO IONIZANTE Radiación ultravioleta
Menor energía ---> ↓Poder de penetración Radiación con longitudes de onda entre 100 y
400 nm. Las de mayor actividad microbicida
son las comprendidas entre 260-270 nm.

Mecanismo de acción

Formación de
Inhibición de la
dímeros de
replicación de ADN
pirimidina
Acumulación de
mutaciones
Radiación infrarroja
Aplicaciones
Rayos electromagnéticos de baja energía, con
Son útiles para desinfectar superficies, aire
longitud de onda más alta que la luz visible y agua que no absorben los rayos UV.
Mecanismo
Desinfección de áreas cerradas
Matan microorganismos Esterilización masiva (laboratorios bacterianos, viveros,
mediante oxidación de rápida de jeringas y campanas de inoculación, flujo
moléculas por calor catéteres laminar y quirófanos)

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 BAJAS TEMPERATURAS

REFRIGERACIÓN Y CALENTADOS para

Evitar consumo de
microorganismos
CONGELACIÓN
deben ser

son
CONGELADORES para
Conservación de
ALIMENTOS (-30 o -70°C) cultivos microbianos
TÉCNICAS CONVENIENTES
MICROBIOLOGÍA DE
DEL CONTROL DE usados
cuentan con

LOS ALIMENTOS CONSERVACIÓN POR

MICROORGANISMOS por ello LABORATORIOS
LARGOS PERÍODOS
porque
útil
Ausencia de agua líquida libre.
Inhiben multiplicación en CONGELACIÓN ocurre -20°C
Cristales de hielo rompen membranas.
en

REFRIGERACIÓN Mayoría de patógenos son mesófilos. No se multiplican a 4°C.

hay
DETERIORO DE PRODUCTOS
↓microbiano
Crecimiento REFRIGERADOS
por
Crecimiento de microorganismos
psicrófilos y psicrotróficos

pero
CONSERVACIÓN POR CORTOS PERÍODOS
No es completo
De F, De C, Salud LA, Luis M, Sanchez A, Microbiología A, et al. AGENTES FISICOS Y AGENTES QUÍMICOS: CONCEPTOS GENERALES [Internet]. Edu.pe. Disponible en:
https://files.uladech.edu.pe/docente/17817631/mp/Sesion_3/Contenidos_de_la_sesi%C3%B3n_3/01.%20Agentes_fisicos_y_quimicos_antimicrobianos_lectura.pdf

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 FILTRACIÓN

FILTRACIÓN consiste Paso de líquido / gas a través Material específico que Retiene microorganismos

empleado para
Materiales termosensibles como Medios de cultivo, antibióticos, azúcares, etc.
TIPOS

EQUIPOS DE FILTRACIÓN
FILTROS DE PROFUNDIDAD FILTROS DE MEMBRANA
Selección de equipo de filtración
Elaborados por material Elaborados de acetato o Depende de volumen a filtrar
fibroso (papel, asbesto o fibra nitrato de celulosa.
de vidrio) dispuesto al azar Volúmenes pequeños Volúmenes pequeños

Contiene poros de tamaño Esterilizados por Filtro se dispone

separado en un cartucho
Crea vías tortuosas donde se uniforme Ensamblados al Se coloca en
retienen microorganismos. momento de estuche de acero
V: Selección de tamaño de filtración inoxidable
V: Alta capacidad de retención, poro y filtro adecuado para
filtra grandes volúmenes. retención de microbios. FILTROS HEPA Filtros de alta eficacia de retención de partícula de aire

D: Saturación rápida y Sistema de filtración de aire más importante

D: Tamaño de poro variado,
posible liberación de velocidad de filtración lenta. ELIMINA EL 99.97% DE PARTÍCULAS
microorganismos que crecen
en el filtro. FILTRACIÓN ESTERILIZANTE Utilizados en las
Protección de
cabinas de
seguridad biológica trabajador y de
U: "Prefiltros" elimina FP + FM ( 0.22 µm) de flujo laminar contaminación
partículas grandes
The Pharmacopeia of the United States of America. Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles. Cap 1211. 32 Edition. Rockville: USP; 2008.

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 LIOFILIZACIÓN
preservación
Inicio del siglo XX Shackell Método eficaz transporte microorganismos a largo plazo
almacenamiento
PROCEDIMIENTO ✅➡️ NO ASEGURA LARGA VIDA ÚTIL EN CONDICIONES AMBIENTALES
⬆️SUPERVIVENCIA ➡️⬇️ Tº DE ALMACENAMIENTO
CONGELADO SECADO PRIMARIO (SUBLIMACIÓN) SECADO SECUNDARIO (DESORCIÓN)

inmovilización de los componentes ⬇️efectos de concentración ❌ la humedad residente

SECADO ➡️⬇️
desnaturalización agua restante U fz ➡️ ⬆️Ex
Vacío ➡️ ❌
ebullición evitando poroso
microestructura ➡️
PRODUCTO SECO producto sellado al vacío
✅ : concentración mínima
producto activo
reactivos
organizacion espacial= original
⬆️ ➡️⬆️
vel T preservacion de viabilidad
seco
❌ingreso ❌ ingreso de reactivos
gases atmosféricos
VENTAJAS TIEMPO DE VIABILIDAD
Manejo fácil y económico Dependen género y la especie bacteriana
Estabilidad parámetros y medio de liofilización
⬇️descomposición química ⬇️➡️GRAM - estado fisiológico de las células
Largo tiempo de viabilidad

DESVENTAJAS largos tiempos de procesamiento y necesidad de utilizar diluyentes

manipulación estériles
Grauer A, Grunberg K, Zardo S. PUESTA A PUNTO DE UN PROTOCOLO DE LIOFILIZACIÓN PARA LA CREACIÓN DE BANCOS BACTERIANOS. Univ ORT Uruguay. 2015

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 LIOFILIZACIÓN

CATEGORÍAS
Tray style, manifold y rotary

Bomba de vacío
⬇️ presión del ambiente de la cámara
En la etapa sublimación y desorción.
50 y 100 μbar.

Cámara de secado
Tº controlada
Estantes + sistema de sellado de viales
asociado bomba de vacío
sistema de refrigeración
condensado
Condensador
atrapar el solvente
Tº: -50°C y -80°C
Santelices C, Castro J. Capítulo 06: Preservación de microorganismos por liofilización. Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA
Estantes
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AGENTES QUÍMICOS
 ALCOHOL

DEFINICIÓN INDICACIONES

compuestos orgánicos del agua

buen solvente de otros productos ➡️⬆️ax
alcohol etílico o etanol : 70% o 96%

❌
alcohol isopropílico : 70% o 100%

ACCIÓN ⬇️TS
❌membrana celular ➡️
Factor de eficacia: H20
Acción ⚡: 15 seg
92% < 17%
Clostridium difficile ➡️agua+ jabón > alcohol
EFECTOS ADVERSOS irritación
Acción esporicida
desinfección y antisepsis San H, Arriarán B, Pacheco AD, Diomedi A, Chacón E, Delpiano L, et al. Antisépticos y desinfectantes: apuntando al uso racional. Recomendaciones del Comité Consultivo de
Infecciones Asociadas a la Atención de Salud, Sociedad Chilena de Infectología [Internet]. Conicyt.cl. [cited 2023 Aug 13]. Available from:
Preservantes y potenciar ax de biocidas https://scielo.conicyt.cl/pdf/rci/v34n2/art10.pdf

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 HALÓGENOS
YODO CLORO
PROPIEDADES DEL YODO COMO DESINFECTANTE PROPIEDADES Y APLICACIONES DEL CLORO

El yodo actúa como desinfectante mediante yodación u
oxidación en células microbianas.
Uso original como tintura de yodo al 2% en alcohol al 50%
para desinfección rápida y eficiente.
Desventajas: reacciones de hipersensibilidad y tinción de
materiales.
EVOLUCIÓN EN EL USO DEL YODO
Reemplazo de la tinción de yodo con yodóforos (yodo
combinado con portadores o detergentes no iónicos).
Liberación gradual de yodo, menos manchas y
deshidratación en la piel.
Uso en preparación cutánea previa a cirugías, menor
alergenicidad pero precauciones en pacientes sensibles.
Ahmad N, Drew WL, Plorde JJ. Sherris. Microbiología médica. 5a ed. Ryan KJ, Ray CG, editores. México: McGraw-Hill; 2010.
Cloro como agente oxidante letal para microbios.
Ácido hipocloroso en soluciones acuosas, producción de
cloro libre en diversas condiciones de pH.
Eficacia en desactivar bacterias y virus, uso en agua potable
y desinfección de albercas.
Reacción rápida con proteínas y compuestos orgánicos,
pérdida de actividad en presencia de materia orgánica.
Utilización para descontaminar superficies y artículos de
vidrio contaminados.
LIMITACIONES
Resistencia relativa de Legionella pneumophila a
concentraciones comunes de cloro.

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 PERÓXIDO DE HIDRÓGENO

Agente Oxidante
Desinfectante de alto nivel

[ ] 3 - 6% → Mayoría
[ ] 10 - 25% → Total

Radical OH⁻ activo

Desinfección de materiales
endoscópicos con plástico
(previa remoción de material
orgánico), lentes de
contacto, etc.

Desestabilización de la membrana
Alteración del metabolismo
Inducción de estrés oxidativo Iniciación → Propagación → Terminación
Peroxidación de lípidos
Inactivación de virus
Angelova MB, Pashova SB, Spasova BK, Vassilev SV, Slokoska LS. Oxidative stress response of filamentous fungi induced by hydrogen peroxide and paraquat. Mycol Res. 2005 Feb;109(Pt 2):150-8. doi: 10.1017/s0953756204001352. PMID: 15839099.
Pietrysiak, Ewa & Smith, Stephanie & Ganjyal, Girish. (2019). Food Safety Interventions to Control Listeria monocytogenes in the Fresh Apple Packing Industry: Murray PR, Roshental KS, Pfaller MA. Microbiología médica. 8 ed. España: Elsevier; 2017
A Review. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 18. 10.1111/1541-4337.12496. Alvaro, Anzalone. (2008). Herbicidas: Modos y mecanismos de acción en plantas.

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 FENOLES

Antimicrobiano
Desinfectante de medio nivel

Cociente de actividad
germinicida > o <

Esporicida a 100°C

Halogenación ↑ Potencia
Desinfección de materiales
endoscópicos (previa Unión a lípidos de membrana
remoción de material Desnaturalización proteica
orgánico).
Cloroxifenol
↓ Potencia en materia órganica
Hexaclorofeno
Bacteriostático en Gram +

Triclosán
Frente a Gram + y -

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 ALDEHIDOS alquilación desinfectantes (A.N) esterilizantes

FORMALDEHÍDO GLUTARALDEHÍDO

high-level
dessinfection
proc. térmicos

aa en proteínas
FA + H2O = formalina bacterias

bacteriostáticos microbicida

kill all microorganismos FA + ALCOHOL

MENOS toxicidad

USO LIMITADO en contextos asistenciales PH actividad

est.
tóxicos y carcinógenos INACTIVADO x materia orgánica

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COMPUESTOS DE AMONIO CUATERNARIO

Estructura
unión covalente comp. catiónico
4 grupos orgánicos + N

grupos orgánicos (naturaleza)

actividad germinicida
8-18 C (longitud)

Ej. cloruro de benzalconio cloruro de cetilpiridino

desnaturalización bacteriostáticos
MEMBRANA CELULAR
bactericidas

Mycobacterium, Pseudomonas y Trichophyton *RESISTENTES*

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¡GRACIAS!