MICROBIOLOGIA

PROFESORA NAVARRO ANAHI E.

AÑO: 2022

UNIDAD 4
ESTERILIZACIÓN Y BIOSEGURIDAD

>Objetivos Específicos: Adquirir información básica sobre los métodos de

control de los microorganismos por el hombre: a) esterilización, desinfección y
antisepsia.

>Contenidos:
Definición. Tipos de esterilización. Agentes desinfectantes.
Definición de términos utilizados en esterilización: limpieza, descontaminación,
desinfección, antisepsia, germicida, desinfectante, antisépticos.
Clasificación de los elementos de acuerdo a su capacidad infectante.
Soluciones desinfectantes. Lavado de manos.
Normas de Bioseguridad en Bancos de Sangre y Servicios de Medicina
Transfusional.
Manejo de residuos patógenos. Limpieza de manchas de sangre y fluidos
orgánicos.
Recolección y manipulación de muestras destinadas al análisis microbiológico.

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MATERIAL DE ESTUDIO
UNIDAD 4

ESTERILIZACIÓN Y BIOSEGURIDAD

Definiciones
Esterilización: proceso físico o químico que destruye toda forma de vida
microbiana, incluidas las esporas.
Desinfección: tiene por objeto la destrucción de microorganismos
mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes), con el fin de
disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos. No destruye los
organismos resistentes como las esporas bacterianas, bacilos tuberculosos,
enterovirus y virus de hepatitis.
Desinfectante: es la sustancia química que inhibe o destruye
microorganismos al aplicarla sobre material inerte sin alterarlo
significativamente.
Asepsia: término que se aplica a los procedimientos utilizados para
prevenir que los microorganismos progresen en un medio determinado
(quirófano, laboratorio. etc.)
Antisepsia: es el proceso por el cual se elimina o inhibe la mayoría de los
microorganismos presentes sobre los tejidos vivos.
Antisépticos: son agentes desinfectantes que se utilizan sobre
superficies corporales con el fin de reducir la cantidad de flora normal y de
contaminantes microbianos de carácter patógeno. Tienen un menor grado de
toxicidad que los desinfectantes y generalmente menor grado de actividad.
Determinados preparados pueden utilizarse como antisépticos o como
desinfectantes indistintamente, pero a diferentes concentraciones en cada
caso.
Antimicrobianos: son sustancias químicas producidas por
microorganismos o sintetizadas químicamente que a bajas concentraciones
son capaces de inhibir e incluso de destruir microorganismos sin producir
efectos tóxico en el huésped.
Germicida: es una sustancia química capaz de destruir o de inhibir un
microorganismo. Según su función se denominan bactericidas, fungicidas etc.
Limpieza: es la eliminación por arrastre de toda la suciedad de un objeto
mediante el lavado con agua y sustancias tensioactivas con la ayuda de una
acción mecánica enérgica.
Descontaminación; es el proceso a realizar sobre objetos contaminados
con sangre y/o secreciones con la finalidad de inactivar los agentes patógenos
y permitir su manipuleo y transporte seguro.

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TIPOS DE ESTERILIZACIÓN

Calor Seco
Flameado: es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la
exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Se
esteriliza de esta forma, Ej. ansas de cultivo de siembra.
Incineración: es el mejor sistema para esterilizar todas aquellos
productos en los que no importe su destrucción, p. ej. Material biológico
Estufa: calor seco a alta temperatura, 20 minutos durante 180º, 60
minutos a 160º, siendo suficiente la esterilización durante 60 minutos a 100-
140º, se lo utiliza para esterilizar material de vidrio debidamente envuelto en
papel, metal. etc.

Calor Húmedo.
La esterilización con calor húmedo (vapor de agua) es mucho más
rápida y eficaz que el calor seco debido a que las moléculas de agua
desnaturalizan las proteínas de forma irreversible mediante rotura de las
uniones H entre los grupos peptídicos a temperaturas relativamente bajas.
Autoclave: horno a presión, consiste en una cámara en la que el aire
puede ser sustituido por vapor de agua sometida a presión. Se opera a 121ºC y
1atm de presión durante 20 minutos. De esta forma se consigue destruir todas
las formas vegetativas y esporas. Se lo utiliza para esterilizar todo material
resistente a esa temperatura y es muy utilizado para la esterilización de medios
de cultivos
Tindalización: (esterilización intermitente) consiste en someter el
producto a calentamientos intermitentes entre 56 y 100ºC durante 30 minutos
con lo que se asegura destruir las formas vegetativas. En los intervalos se
mantiene a temperatura ambiente o a 37ºC, las esporas germinan y las
bacterias resultantes se hacen más sensibles al calentamiento posterior.

Radiaciones
Luz UV: es absorbida a una longitud de onda de 240 a 280nm por ácidos
nucleicos causando daños genéticos alterando las bases. Se la utiliza en la
preparación de vacunas, cabinas de seguridad biológica, lugares de trabajo
como mesadas de laboratorios, est.
Radiaciones ionizantes: actúan lesionando ácidos nucleicos. Se la utiliza
sobre todo en procesos industriales para esterilizar dispositivos quirúrgicos,
guantes, jeringas, etc.

Agentes Químicos
Los agentes químicos como el óxido e etileno, formaldehído o
glutaraldehído reaccionan con gran facilidad con diferentes grupos funcionales
de los ácidos nucleicos y proteínas alquilando estos radicales esenciales.
Óxido de etileno: Es un gas inflamable y potencialmente explosivo, muy
penetrante que inactiva microorganismos sustituyendo átomos de hidrógeno
lábiles por otros grupos como hidroxilos, carboxilos, etc. El material se expone
a esterilizar a un 5-10% de óxido de etileno en dióxido de carbono a 50-60º en
condiciones de humedad controlada durante 4 a 6 horas. Es necesario
someterlo después a un período de aireación debido a su carácter mutagénico.

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Es un agente efectivo en la esterilización de material termolábil como prótesis,

catéteres, etc.
Formol o formaldehído: Es un gas fácilmente soluble en agua que se
utiliza al 40% (formalina). Usado en forma gaseosa y en cámara cerrada se
emplea en la esterilización hospitalaria y en la industria farmacéutica. También
es muy utilizado como desinfectante ambiental de salas altamente
contaminadas que una vez tratadas deben airearse.
Glutaraldehído: Se emplea sumergiendo el material limpio en una
solución al 2%, se emplea sobre todo en la esterilización de instrumentos
ópticos y los utilizados en terapia respiratoria.
Pasteurización
Es un tratamiento térmico que elimina los microorganismos patógenos
de alimentos como la leche, el zumo y derivados. No es un método de
esterilización, ya que garantiza la destrucción de los microorganismos
patógenos, pero no de los microorganismos que no son patógenos; están
presentes en los alimentos pasteurizados. Consiste en calentar a temperaturas
comprendidas entre 62ºC y 72ºC durante 15 a 30 minutos seguido de
enfriamiento a menos de 8ºC. No destruye formas resistentes.
Esterilización por filtración
Hay determinados agentes que son termolábiles; para esterilizar estos
agentes se emplea la filtración. Suelen ser soluciones de enzimas, antibióticos.
La esterilización se logra pasando el líquido por filtros con poros de 1 micra o
menos que retenga las bacterias.

DESINFECTANTES Y ANTISÉPTICOS

Alcoholes: Actúan desnaturalizando proteínas. Su acción es rápida pero

se evaporan con facilidad. El alcohol etílico se utiliza en antisepsia a una
concentración del 70%, a esta concentración se reduce más la tensión
superficial de la célula bacteriana facilitando el proceso de desnaturalización.
Fenoles: Actúan precipitando proteínas. Son corrosivos e irritan la piel.
Algunos derivados fenólicos se unen a jabones originan compuestos estables.
Iones de Metales pesados: La actividad de los compuestos derivados de
metales pesados (como plata, mercurio, etc.,) se debe a la formación de sales
que se disocian con dificultad de los grupos sulfidrilos de las proteínas.
Nitrato de plata: Son buenos bactericidas. El nitrato de plata se ha
utilizado en el tratamiento de quemaduras en soluciones al 0,5% y en la
profilaxis de la oftalmia neonatorum por Neisseria gonorrhoeae.
Derivados mercuriales: El más utilizado como desinfectante de la piel es
el mercuriocromo, no es tóxico y sigue siendo activo en presencia de materia
orgánica.
Agentes oxidantes:
 Agua oxigenada (peróxido de hidrógeno): Es un agente oxidante de
efecto fugaz por ser descompuesto por las catalasas de los tejidos.
 Permanganato de potasio: Agente oxidante que se inactiva en presencia
de materia orgánica. Es poco utilizado. En dermatología es utilizado por
su propiedad antifúngica.
 Derivados clorados: Se inactivan en presencia de materia orgánica. El
cloro y derivados son agentes oxidantes muy usados en la potabilización
del agua en forma de cloro gaseoso en grandes establecimientos, y en

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forma de hipoclorito es utilizado para descartar material biológico

(sangre, suero, etc.)
 Derivados yodados: Son agentes oxidantes que se usan en forma de
solución acuosa, combinándolos con detergentes o sustancias
orgánicas. Los yodoformos son compuestos que se liberan
progresivamente. El Yodo se encuentra en la polivinilpirrolidona
(povidona yodada). Existen también soluciones alcohólicas.
Detergentes:
 Aniónicos. Actúan desorganizando las membranas citoplasmáticas.
Tienen escaso poder bacteriostático. Se pueden mejorar combinándolos
con desinfectantes
 Catiónicos. Tienen acción antiséptica, se inactivan en contacto con
jabón, algodón y materia orgánica. Son poco usados.

CLASIFICACIÓN DE LOS ELEMENTOS DE USO MÉDICO DE ACUERDO A

SU CAPACIDAD INFECTANTE

Elementos críticos: son todos aquellos que ingresan al torrente

circulatorio o áreas normalmente estériles del organismo. Ej: instrumental de
cirugía, catéteres. Deben ser esterilizados.
Elementos semicríticos: son todos los elementos que toman contacto
con la piel o mucosas. Ej. equipos de respiradores o anestesia. Deben ser
esterilizados o recibir desinfección de alto nivel.
Elementos no críticos: son los que toman contacto con la piel sana del
paciente. Ej. tensiómetro , mobiliario etc. Deben ser limpiados.

Lavado de manos
Es el procedimiento más importante para la prevención de infecciones
hospitalarias. Se define como la fricción vigorosa de la superficie de ambas
manos, seguido del enjuague con agua.
Existen tres tipos de lavado de manos:
 Higiénico o social: logra el arrastre mecánico de la flora transitoria de la
piel. Se realiza con agua y jabón.
 Antiséptico: eliminar la flora transitoria y disminuir flora residente o
habitual de la piel. Se utiliza una solución de iodopovidona jabonosa al
5%.
 Quirúrgico: eliminar la flora transitoria y disminuir flora residente o
habitual de la piel. Se utiliza una solución de iodopovidona jabonosa al
5%.

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NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN BANCOS DE SANGRE Y SERVICIOS DE

MEDICINA TRANSFUSIONAL

El personal de estas Instituciones está expuesto a una cantidad de

peligros potenciales, especialmente los vinculados con la transmisión
ocupacional de las enfermedades virósicas, hepatitis B, inmunodeficiencia
humana y hepatitis C.
Las medidas de bioseguridad están dirigidas a la protección del personal
que maneja material biológico potencialmente contaminado y evitar que los
agentes infecciosos excedan los límites del servicio.
Los modos de infección más frecuentes comprenden:
 Inoculación accidental por pinchazo o corte por agujas, lancetas, pipetas
u otros elementos punzantes.
 Exposición de piel o mucosas a sangre u otros fluidos biológicos
contaminados, especialmente cuando la permeabilidad de las mismas se
encuentra alterada por heridas, excoriaciones, eczemas, herpes,
conjuntivitis o quemaduras.
 Inhalaciones de aerosoles producidos al agitar muestras, al destapar
tubos, durante la centrifugación.
 Salpicadura en los ojos o aspiración bucal.

Precauciones Generales
Todos los ambientes de acceso restringidos deben ser mantenidos
limpios, ordenados y libres de materiales extraños, insectos y roedores.
No se permite comer, beber, fumar dentro del área de trabajo.
Antes de iniciar la tarea diaria debe asegurarse que la piel de las manos
no presente lastimaduras, en caso de haber alguna lesión, cubrir la herida
antes de colocar guantes.
Las mesadas y superficies de trabajo deben ser descontaminadas
diariamente con solución desinfectante.
Usar gafas, bozal, guantes y ropa apropiada; batas, ambos.
Todos los líquidos potencialmente infecciosos deben ser manipulados
por medios mecánicos.
El material contaminado debe ser decontaminado antes de rehusar
(tijeras, pinzas) o colocado en doble bolsa plástica para descarte. El material de
vidrio debe ser decontaminado con solución de hipoclorito de sodio al 0,3%
durante 30min. Y luego lavarlo.
Si se manipula material de desecho punzante hacerlo con mucho
cuidado, envolverlos en papel y descartarlo como basura infecciosa.
En los laboratorios y ambientes donde se manipula sangre o fluidos
orgánicos debe existir un recipiente con hipoclorito concentrado y otro para
preparar la solución diluida 1/10 donde se colocará el material usado para
decontaminar.
Los elementos punzantes o cortantes y los fluidos orgánicos deben
colocarse en contenedores con hipoclorito de sodio al 0,5% y deben ser
resistentes, con tapas seguras para evitar pérdidas en el transporte.

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Manejo de residuos patógenos

Involucra a los residuos generados como consecuencia de la actividad

hospitalaria tanto humana como animal que están en condiciones de transmitir
una o varias patologías por infestación a los seres vivos, como así también,
impactar negativamente en el ambiente.
Los residuos patológicos o infecciosos son de tres tipos: punzo-
cortantes, sólidos o líquidos. Los desechos de laboratorio que provienen de
pacientes infectados, se decontaminan antes de descartarlos. El manejo y
transporte de residuos peligrosos debe hacerse en forma adecuada para evitar
riesgos de infección.
Se siguen estos lineamientos generales:
 En caso de tener que transportar muestras de material biológico, colocar
los tubos en gradillas dentro de un recipiente hermético, de material
resistente y con tapa de seguridad.
 Se deberá colocar papel absorbente alrededor de los tubos o bolsas que
contengan material biológico.
 Se utilizan bolsas de color rojo para residuos patológicos.

Limpieza de manchas de sangre y fluidos orgánicos

Material de vidrio: sumergir el recipiente en una solución de hipoclorito

de sodio al 1% durante 30 minutos. Descartar y lavar con agua y detergente.
Instrumental metálico: desinfectar con hipoclorito de sodio o glutaldehido
y luego proceder al lavado habitual.
Ropa: Sacarse la ropa inmediatamente y descartar en bolsa de plástico.
Antes del lavado debe decontaminarse por inmersión en una solución de
hipoclorito de sodio al 1% durante 30 minutos, luego proceder al lavado.
Derrames: cuando se produzcan derrames de material infectado, el
operador debe ponerse guantes y proceder de la siguiente manera
 Absorber el derrame con papel absorbente seco y limpio y arrojarlo al
recipiente de desechos contaminados para su posterior eliminación.
 Limpiar el área con solución detergente.
 Derramar en el área solución de hipoclorito de sodio al 1% y dejar actuar
por lo menos 30 minutos.
 Secar
 Descartar todos los materiales incluidos los guantes en el recipiente de
residuos contaminados
No se recomienda el uso de alcohol ya que se evapora rápidamente y
además coagula los residuos orgánicos superficialmente sin penetrar en ellos.
Superficies: pisos, mesadas, paredes lavables, puertas, superficies de
aparatos, heladeras, computadoras, etc. Se decontaminan con agua con
hipoclorito 1/10, rejillas y trapos de piso.

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ACTIVIDADES
UNIDAD 4

1) Realizar un cuadro en el que consten los elementos de seguridad que debe

emplear un Técnico en Hemoterapia en su práctica profesional.

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BIBLIOGRAFÍA ESPECÍFICA

 LOBUE P. Adelina, Santamaría Mario, Castro José Luis. MANUAL DE

BIOSEGURIDAD PARA INSTITUCIONES DE SALUD PÚBLICAS Y
PRIVADAS Gobierno de Mendoza, Ministerio de Desarrollo Social y
Salud. República Argentina