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  • Biología Lab 1

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    Mafe Suárez
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    Para preparar 250 mL de solución de lisis se necesitan las siguientes cantidades de cada solución stock: 20 mM de Tris-HCl pH 8.0, 5 mM de EDTA, 50 mM de NaCl y 0.5% (p/v) de SDS. Para preparar 200 mL de solución tampón TBE 0.5X se necesitan 2 mL de solución TBE 10X y 1.34 g de agarosa. Para agregar 40 ng de ADN a un tubo de PCR se necesita tomar 0.24 μL del extracto de ADN con una concentración de 160 ng/μL.

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    Para preparar 250 mL de solución de lisis se necesitan las siguientes cantidades de cada solución stock: 20 mM de Tris-HCl pH 8.0, 5 mM de EDTA, 50 mM de NaCl y 0.5% (p/v) de SDS. Para preparar 200 mL de solución tampón TBE 0.5X se necesitan 2 mL de solución TBE 10X y 1.34 g de agarosa. Para agregar 40 ng de ADN a un tubo de PCR se necesita tomar 0.24 μL del extracto de ADN con una concentración de 160 ng/μL.

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    Para preparar 250 mL de solución de lisis se necesitan las siguientes cantidades de cada solución stock: 20 mM de Tris-HCl pH 8.0, 5 mM de EDTA, 50 mM de NaCl y 0.5% (p/v) de SDS. Para preparar 200 mL de solución tampón TBE 0.5X se necesitan 2 mL de solución TBE 10X y 1.34 g de agarosa. Para agregar 40 ng de ADN a un tubo de PCR se necesita tomar 0.24 μL del extracto de ADN con una concentración de 160 ng/μL.

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    de 5

    5.

    Calcular las cantidades necesarias para preparar 250 mL de


    solución de lisis (Tris-HCl 20 mM, pH 8.0; EDTA 5 mM; NaCl 50 mM;
    SDS 0.5% (p/v) a partir de las siguientes soluciones stock: Tris-HCl pH
    8.0 (1 M), EDTA (0.5 M), NaCl (5 M) y SDS en polvo.
    6. Se necesita preparar 200 mL de una solución tampón TBE (0.5X) la
    cual será utilizada en la preparación de un gel de agarosa al 1.3% (p/v).
    Si para esta preparación se cuenta con una solución stock de TBE 10 X
    ¿Cuánta agarosa y cuanto TBE (10X) se necesita para preparar el gel?

    10x tapónx 2 mL
    =0,5
    200mL

    2
    22
    =

    015
    =

    *200
    2 = 10
    =

    200mL de volumen final -


    10 mide solucion
    stock

    190
    -

    m2 de diferencia

    d) UcCc VdCd b) UcCc vdCd


    =
    =

    190m) 1,3 200m) cd


    x
    =
    x
    180m(Xx =200 1,3
    x

    190mL 1,3 cd (
    Y
    =
    +
    =

    200 mL

    1,23 cd =
    ( 1,36
    =
    +100
    1,34. 9
    =

    g sto=1,3%x200mL
    100

    sto 2,6 agarosa


    g g
    =

    7. Usted realizó extracción de ADN a partir de sangre de un paciente.


    En la reacción de PCR (volumen de 15 μL) es necesario colocar 40 ng
    de ADN. Qué volumen del extracto (concentración del ADN 160 ng/μL)
    tiene que tomar para agregar al tubo del PCR?

    40ng
    2,6
    =

    15 ph

    Vo CC VdC d=

    !16019
    1542x2,6
    =

    NL

    15 x2,6 =Ve
    160

    Vo 0,24th=
    8. Un ADN extraído arroja los siguientes datos de absorbancia:
    A260 = 1.74 A280 = 0.95
    ¿La pureza de este ADN es aceptable?
    Calcule la concentración (1 Unidad de A260 = 50 ng/μL)

    R/ A260 1,74 =

    aceptable
    A280 0,95
    =

    no aceptable
    9. Usted prepara una solución estándar (patrón) de albúmina sérica
    bovina (BSA) a 15 mg/mL y a partir de ella realiza diluciones seriadas
    como se muestra en la siguiente figura. ¿Cuál es el factor de dilución
    utilizado? ¿Cuál es la concentración de las soluciones número 3 y 5

    Es

    ~14 - t
    3 3
    1,04x10
    de "" (4)
    =>

    =0,046
    x(5) (4)
    (a 15m =

    ds 55 (7) =

    x
    =
    6,51 105
    x

    x(5) (4)5
    15 2,92x103
    x
    =

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