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María José Díaz Valentina Vásquez

Debbie Upegui Muñoz Sneyder Virguez

PRODUCCIÓN DE UN BIOFERTILIZANTE A BASE DE BACTERIAS DE VIDA LIBRE


FIJADORAS DE NITRÓGENO

PROBLEMA

Los suelos fértiles presentan una capa vegetal rica en microorganismos eficientes; sin embargo,
cuando son usados para cultivar se le agregan fertilizantes químicos que con el tiempo generan un
impacto sobre el suelo. " A nivel mundial el consumo de fertilizantes nitrogenados aumentó de 8 a 17
Kg ha-1 de suelo agrícola en un periodo de 15 años (1973-1988)”
La fijación del nitrógeno es dada en bacterias adaptadas en ambientes ecológicos y estilos de vida
muy diversos. Todas poseen el sistema enzimático responsable de la reducción del nitrógeno: La
nitrogenasa.

"El nitrógeno molecular (N2) es la única reserva de nitrógeno (N) accesible en la biosfera.
Prácticamente ilimitada, esta reserva no es directamente utilizada por los vegetales y animales. El N
es un constituyente esencial de moléculas fundamentales de todos los seres vivos: aminoácidos,
proteínas, ácidos nucleicos, vitaminas, etcétera. Para que el N2 pueda ser asimilado, es necesario que
sea reducido. Los únicos seres vivos capaces de realizar esta reacción son las Eubacteria y Archaea,
por el proceso denominado fijación biológica de nitrógeno (FBN)".

OBJETIVOS
● Objetivo General: Producción de un biofertilizante a base de bacterias fijadoras de Nitrógeno
de vida libre.

● Objetivos Específicos:
- Realizar el aislamiento de bacterias fijadoras de Nitrógeno empleando un medio de cultivo
selectivo.
-Determinar el potencial del fenotipo seleccionado obtenido en el aislamiento de bacterias
fijadoras de Nitrógeno.

MARCO TEÓRICO

MATERIALES
● Cajas de Petri
● Asa microbiológica
● Agar selectivo para bacterias fijadoras de nitrógeno
● Erlenmeyer
● Tubos de ensayo
● Micropipeta
● Levadura manitol Agar
● Azul de bromotinol
● Agar XLD y hektoen
María José Díaz Valentina Vásquez
Debbie Upegui Muñoz Sneyder Virguez

METODOLOGÍA

Aislamiento primario de Rhizobium spp a partir del estudio de nódulos: Se buscarán en las
muestras del suelo rastros de nódulos los cuales realizan una relación simbiótica con las raíces de la
plantas.

Siembra de rhizobium spp: Los nódulos se seccionaron con un bisturí estéril, luego transferidos a
placas con Levadura Manitol Agar con Azul de Bromotimol como indicador (YMA + AB), y se
incubaron a 30ºC

Evaluación del crecimiento de las cepas


en Agar XLD y Hektoen. Se tomaron inóculos, realizando siembra por agotamiento en placas con
agar XLD (Xilosa Lactosa Desoxicolato) y Hektoen, para lograr determinar la especificidad de
crecimiento de bacterias.
María José Díaz Valentina Vásquez
Debbie Upegui Muñoz Sneyder Virguez

Bibliografía
● Dobbelaere, S., Croonenborghs, A., Thys, A., Broek, A. V., & Vanderleyden, J. (1999).
Phytostimulatory effect of Azospirillum brasilense wild type and mutant strains altered in
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● Baca, B. E., Soto Urzua, L., & Pardo Ruiz, M. P. (2000). Fijación biológica de nitrógeno.
● Hernández, J. L., Cubillos-Hinojosa, J. G., & Milian, P. E. (2012). Aislamiento de cepas de
Rhizobium spp., asociados a dos leguminosas forrajeras en el Centro Biotecnológico del
Caribe Isolation of Rhizobium spp., associated two forage leguminous in the Caribbean
Biotechnological Center. Revista Colombiana de Microbiología Tropical. Vol, 2(2).
● (Mora, 1995; Bécquer et al., 2000; Rincón et al., 2000; Salazar et al., 2001; Matos y Zúñiga,
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● Matos, G. & D. Zúñiga. 2002. Comportamiento de cepas nativas de Rhizobium aisladas de la
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● Mayz, J., A. Lárez & N. Alcorcés. 2010. Efectividad de cepas rizobianas nativas de sabana .

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