ASIGNATURA: ANÁLISIS CLÍNICOS

UNIDAD 2: ÁNÁLISIS FÍSICO, QUÍMICO Y MICROSCÓPICO

DE ORINA
Examen químico de orina

DOCENTE: IRINA M. VILLACRÉS GRANDA, PhD

Examen de rutina: pH, proteínas, glucosa, cetonas, sangre oculta, bilirrubina,
urobilinógeno, nitritos, leucocitos, densidad.
 Tiras reactivas
• Almohadillas impregnadas de químicos.
• Reacción química colorimétrica
• Comparación de colores obtenidos con las especificaciones del fabricante
• Método:
• Mezclar bien la muestra
• Impregnar completamente las tiras reactivas con la muestra
• Retirar el exceso
• Esperar el tiempo requerido por el fabricante según la prueba
• Dificultades:
• Sedimentación de compuestos, no llegan a la tira
• Mucho tiempo en muestra….desprendimiento de químicos
• Exceso de líquidos…. Mezcla de químicos
• Correcto almacenamiento de las tiras reactivas
 pH
• Riñones: Regulan contenido ácido-base del cuerpo. Secreción de hidrógeno
(iones de amonio, fosfato de hidrógeno y ácidos orgánicos) y reabsorción de
bicarbonato ( Filtrado en túbulos)
• Orina de primera mañana (En organismos sanos): pH ácido 5 a 6.
• Orina alcalina después de comidas
• Promedio de rango 4,5 a 8
• Los valores de pH deben compararse con otra información para determinar
un valor significativamente clínico.
 SIGNIFICADO CLÍNICO pH
• Existencia de desórdenes en el equilibrio ácido-base
• Debe haber un diagnóstico previo o sospecha de la enfermedad
 Tiras reactivas y pH
• Dos indicadores: rojo de metilo y azul de bromotimol
• Rojo de metilo: rojo a amarillo en pH ácido (4-6)
• Azul de bromotimol: amarillo a azul en pH básico (6 a 9)
• Reporte: 5,6,7,8,9
 PROTEÍNAS
• Indicativo de enfermedad renal
• Presencia de proteínas (proteinuria): asociado con enfermedad renal
temprana
• Orina normal: - de 10 mg/dL o 100 mg por 24 horas.
• Proteínas de bajo peso molecular filtradas por el glomérulo o
producidas en el tracto genitourinario.
• Albúmina: más encontrada (bajo peso molecular).
• Otras: microglobulinas, TammHorsfall (de túbulos), proteínas de
secreciones prostáticas, seminales y vaginales.
 PROTEINAS: SIGNIFICADO CLÍNICO
• Proteinuria clínica: ≥30 mg/dL (300 mg/L).
• Variedad de causas: Prerenal, renal y postrenal
• Prerenal: condiciones que afectan el plasma antes de que llegue a los riñones.
Incremento de proteínas plasmáticas de bajo peso molecular como
hemoglobina, mioglobina y reactantes de fase aguda de episodios de infección
e inflamación. No se determina generalmente porque las tiras reactivas
detectan sólo albúmina.
• Renal: enfermedad renal. Daño glomerular o tubular.
• Proteinuria glomerular: sobre lo normal hasta 4 g/día. Daño en membrana, se altera la
filtración selectiva. Paso de proteínas y células sanguíneas (GB y GR).
• Proteinuria tubular: mayor a 4 g/día. Incremento de albumina. Daño en la reabsorción
tubular.
• Postrenal: proteínas del tracto urinario bajo (uréteres, vejiga, uretra, próstata y
vagina). Infecciones e inflamación por bacterias y hongos. Sangre por lesión y
fluido prostático y espermatozoides.
 Tiras reactivas y Proteínas
• Indicadores que reaccionan a la presencia de proteínas (Albúmina) y no de pH.
• Proteínas aceptan iones de hidrógeno de la sustancia indicadora.
• Test más sensible a la Albumina porque tiene más grupos amino (acepta más
hidrógeno)
• Dependiendo del fabricante: Azul de tetrabromofenol o 3´,3´´, 5´,5´´
tetraclorofenol-3,4,5,6-tetrabromosulfontaleine y buffer ácido (mantener el pH
constante)
• Cabio de amarillo a verde y azul.
• Reporte: Negativo o en valores 30,100, 300, 2000 mg/dL
 Tiras reactivas y Proteínas
• Interferencia de la reacción
• Orina altamente alcalina—sobrepasa el Sistema del buffer ácido
• Falsos positivos: orina altamente pigmentada, contaminación con
detergentes.
• Falsos negativos: otras proteínas que no son albumina.
• Confirmación con otros análisis de proteínas: (Acido sulfosalicílico
(SSA))
 GLUCOSA
• El más analizado
• Monitoreo de diabetes
• Inicio de síntomas de diabetes
• Normal: pequeñas cantidades. Reabsorción tubular por
transporte activo.
 GLUCOSA: SIGNIFICADO CLÍNICO
• Hiperglicemia: elevadas concentraciones de glucosa en sangre: no se reabsorbe
y pasa a la orina. 160 a 180 mg/dL, se detiene la reabsorción y el resto pasa en
la orina.
• Glicosuria: Alta concentración de glucosa en la orina
 TIRAS REACTIVAS Y GLUCOSA

• Test de glucosa oxidasa: en almohadilla: glucosa oxidasa,

peroxidasa, cromógeno y buffer
• Diferentes Cromógenos: ioduro de potasio (verde a café) y
Tetrametilbenzidina (Amarillo a verde)
• Se reporta como negativo o positivo en valores 50-100-300-
1000 mg/dL
 INTERFERENCIA DE LA REACCION

• Falsos positivos: Otros azúcares que no son glucosa.

Recipiente contaminado por peróxido o detergentes
altamente oxidativos.
• Falsos negativos: sustancias que interfieren con al reacción
o agentes reductores (acido ascórbico) que previenen la
oxidación del cromógeno.
 CETONAS
• Tres productos intermediarios del metabolismo de las grasas
(cetonas, ácido acetoacético y ácido betahidroxibutírico)
• Normal: Negativo
• Detección: incremento del metabolismo de grasas para
generar energía a falta de reserva de carbohidratos.
 SIGNIFICADO CLÍNICO
• Inhabilidad de metabolizar carbohidratos
• Pérdida de carbohidratos por vómito
• Poca ingesta de carbohidratos por malnutrición o mal
absorción
• Ayuno prolongado, problemas en el páncreas (deficiencia en
producción de insulina), exceso de ejercicio,
• Cetonuria: cetonas en la orina
 TIRAS REACTIVAS
• 78% Acido beta-hidroxibutírico
• 20% acido acetoacético
• 2% cetonas
• Ácido acetoacético + Nitroprusiato de sodio (en medio alcalino)=color
púrpura
• No mide Acido-beta-hidroxibutírico y reacciona poco a las acetonas.
• Resultados: Negativo o positivo en valores 10-50-150 mg/dL.
 INTERFERENCIA DE LA REACCIÓN

• Después de usar procedimientos de diagnóstico con

colorantes
• Orina pigmentada de color rojo
• Medicamentos que den color a la orina
 SANGRE
• Hematuria( glóbulos rojos): orina roja y turbia
• Hemoglobinuria (glóbulos rojos rotos, hemoglobina): orina roja y clara
• Más de 5 células por microlitro: clínico. Sólo en microscopio.
Importancia de análisis químico.
 SIGNIFICADO CLÍNICO
• Positivo: presencia de glóbulos rojos, hemoglobina o mioglobina
• Hematuria: desórdenes de origen renal o aparato genitourinario. Sangrado por
trauma o daño en estos órganos. Cálculos renales, enfermedad glomerular,
tumores, pielonefritis, exposición a químicos tóxicos y terapia anticoagulante.
• Hemoglobinuria: Lisis de glóbulos rojos= hemoglobina. Anemia hemolítica,
reacción a transfusiones, quemaduras severas, infección, ejercicio extremo.
• Mioglobinuria: mioglobina, proteína en tejido muscular. Destrucción muscular:
Traumatismo, síndrome de aplastamiento, ejercicio extremo. Puede llevar a
fallo renal.
 TIRAS REACTIVAS
• Actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina= catálisis de reacción entre
peróxido de hidrogeno y el cromógeno tetrametilbenzidin
• Produce oxidación del cromógeno con color verde azulado
• Resultados: negativo o positivo según escala 10-25-50-250 Ery/uL
 INTERFERENCIA DE REACCIÓN
• Falso positivo: contaminación con sangre menstrual.
Detergentes oxidativos. Peroxidasa vegetal y enzimas
bacterianas (E. coli peroxidasa)
• Falsos negativos: ácido ascórbico. Alta densidad de células
sedimentadas.
 BILIRRUBINA
• Detección temprana de enfermedad de hígado
• Pigmento Amarillo en orina: degradación de la hemoglobina
• 120 días de vida de los glóbulos rojos: destrucción en bazo e
hígado= liberación de hemoglobina (hierro, proteínas y
protoporfirinas).
• Protoporfirinas= bilirrubina se une a albumina y va al hígado
(conducto biliar, intestino)
 SIGNIFICADO CLÍNICO
• Interrupción del ciclo de degradación: obstrucción de conducto biliar
o daño hepático. Hepatitis y cirrosis, ictericia.
 TIRAS REACTIVAS
• Reacción de Diazo
• Sal de diazonio ( 2,4-dicloroanilina diazonio)+bilirrubina=colorante rosado a
violeta
• Reporte: negativo o positivo en valores 1-3-6 mg/dL
 Interferencia de la reacción

• Falso positivo: pigmentos amarillos en orina

• Falsos negativos: muestra no fresca. Biliverdina no reacciona. Ácido

ascórbico y altos nitritos
 UROBILINOGENO
• Formación: bacterias intestinales (bilirrubina conjugada).
• Reabsorbido desde el intestino a la sangre, regresa al hígado y es eliminado
por el intestino.
• En su ruta al hígado pasa por los riñones: menos de 1 mg/dL
 Significado Clínico
Enfermedad hepática y desórdenes hemolíticos (anemia)
Resultados elevados= puede ser por estreñimiento
• Ausencia= no detectable con tiras reactivas. Obstrucción del
conducto biliar
 TIRAS REACTIVAS
• Dos tests
- Reacción Aldehído de Ehrlich: urobilinógeno + reactivo de Ehrlich = rosado
pálido a rosado obscuro
- Reacción de diazonio: 4-metoxibenzeno.diazonio.tetrafluoroborato +
urobilinógeno= color blanco a rosado (reacción más específica)

• Resultados: valores desde 0,2-1-4-8-12 mg/dL

 Interferencia de la reacción

• Reacción de Ehrlich: varios compuestos pueden dar falsos

positivos sobre todo el porfobilinógeno, además
incremento de temperaturas.
• A los dos test: pigmentos en la orina
• Falsos negativos: Altas concentraciones de nitritos y
metales pesados
 NITRITOS
• Infección de vías urinarias
• No reemplaza al cultivo
• Infección empieza en vejiga: puede avanzar a uréteres y riñón
• Generalmente en cistitis: etapa inicial
• Importante para evaluar éxito de terapia antibiótica, personas con infecciones
recurrentes.
• Usado en combinación con el test de esterasa leucocitaria para determinar si
es necesario realizar cultivo.
 TIRAS REACTIVAS
• Base: habilidad de las bacterias de reducir los nitratos a nitritos
• Reacción de Greiss: nitrito+amida aromática= sal de diazonio+
tetrahidrobenzoquinolina=colorante rosado
• Resultados: negativo o positivo
 Interferencia de la reacción
• Resultados negativos de nitritos con sintomatología clínica de infección deben
complementarse con cultivo.
• Bacterias que no reducen los nitratos y levaduras
• Muestra debe ser tomada en la primera mañana. Bacterias deben estar en
contacto con los nitratos de la orina para producir nitritos (orina de al menos 4
horas de concentración)
• Nitratos en orina: falso negativo por dieta
• Muchas bacterias: nitratos directo a nitrógeno. Falso negativo porque no hay
reducción a nitritos.
• Nitrito positivo=esterase leucocitaria positiva
 ESTERASA LEUCOCITARIA

• Incremento de leucocitos (microscopio)

• Químico-no determina cantidad de leucocitos. Determina
leucocitos lisados
• Presencia de Esterasa en glóbulos blancos granulosos
(neutrófilos, eosinófilos, basófilos y monocitos)
 Significado clínico
• Valores normales determinados por microscopía 0-5 por campo.
• Mujeres mayor número por contaminación vaginal
• Incremento de leucocitos=UTI= Neutrófilos
• Infecciones por Trichomonas, Chlamydia, levaduras, y la inflamación
de tejido renal=leucocituria sin bacterias.
• Correlación con test de nitritos para determinar si se hace cultivo
 TIRAS REACTIVAS
• Esterasa leucocitaria cataliza hidrólisis de un ácido éster= compuesto aromático
y ácido.
• Compuesto aromático + sal de diazonio=color morado
• Es la que más tiempo requiriere ( 2 minutos)
• Resultados: negativo o positivo en rango 1+,2+,3+
 Interferencia de la Reacción
• Agentes oxidantes y formalina= falsos positivos
• Orina con pigmentos y nitrofurantoina: obscurecen el color
de la reacción
• Falsos negativos: altas concentraciones de proteínas, glucosa,
ácido oxálico y ácido ascórbico.
• Antibióticos: gentamicina, cefalexina, cefalotina y
tetraciclinas reducen la sensibilidad de la reacción.
 GRAVEDAD ESPECIFICA
• Reducción del tiempo de diagnóstico en tira reactiva
• La tira reactiva: cambios en la constante de disociación pKa (capacidad de las
moléculas de disociarse en una solución acuosa) de un polielectrolito en medio
alcalino.
• Polielectrolito ioniza=descarga de iones de hidrógeno (en proporción al número
de iones en la solución): mayor concentración mayor descarga de
iones=disminuye el pH.
• Indicador de pH azul de bromotimol.
• Mayor gravedad específica=orina ácida: de azul a verde y Amarillo.
• Resultados: escala de color= valores de 1.000 a 1.030.
 BIBLIOGRAFÍA
• King Strasinger, S. & Schaub Di Lorenzo, M. 2008. Urianalysis and
body fluids. F.A. David company Philadelphia.

• Mundt, L. & Shanahan, K. 2011. Graff’s Text book Urinalysis and

body fluids. Second edition. Lippincott Williams & Wilkins.

• Brunzel, N. Fundamental of Urine and Body Fluids analysis. 2018.

Fourth edition. ElSevier.