Universidad de Santiago de Chile

Facultad de Química y Biología

Segunda Evaluación
Botánica y Fitoterapia
2-2020

Nombre:

1. Ud., se encuentra realizando un estudio de calidad de productos fitoterapéuticos, por

lo cual compra dos tinturas madres de Boldo, en la misma cadena, pero en sitios
diferentes. Al realizar un análisis de los productos, Ud., encuentra que no presentan la
misma actividad. Discuta como podría analizar las causas de estas diferencias.

Como se dijo en el enunciado las dos tinturas madre de Boldo a pesar de ser adquiridas de
la misma cadena estos van a diferir en su actividad, esto puede ser debido a que las
condiciones en el almacenamiento de estos y en la conservación, los cuales pudieron haber
variado al ser de lugares distintos. El almacenamiento que estos tuvieron pudo no ser el
adecuado para ellos, posiblemente alguna de las tinturas de Boldo no se mantuvo en algún
lugar fresco y seco o estuvo por ejemplo mucho tiempo en contacto con la luz lo que pudo
afectar las condiciones. La conservación también pudo ser deficiente o no haber sido la ideal
para las dos tinturas de Boldo, lo que pudo a la larga haber causado alteraciones
fisicoquímicas, como por ejemplo la humedad, la radiación, hidrólisis, polimerización, entre
otros muchos factores.
Para poder tener una mejor seguridad sobre las causas de esta diferencia de actividad, se
pueden realizar análisis en el control de calidad y así poder conocer mucho mejor las
condiciones en las cuales estas tinturas de Boldo fueron sometidas, estos ensayos nos van
a indicar el grado de humedad, o algún otro factor que a la larga puede afectar de mala
manera la pureza y la calidad del vegetal que estamos analizando, afectando también la
actividad de estos.

Primero para poder hacer un buen análisis, tenemos que tener la seguridad y la certeza de
que las muestras a analizar sean tinturas de Boldo, para lograr eso hay que hacer ensayos
botánicos, en las cuales podemos tomar en consideración estos dos tipos de ensayos: un
ensayo organoléptico, en la cual se evalúa el olor, sabor y la sensación al tacto y un ensayo
microscópico, en el cual se observan componentes celulares de la muestra a analizar.
Debido a que lo que se está analizando es una muestra ya extraída de la planta, no se puede
hacer un ensayo macroscópico.

Estos dos ensayos van a permitir que podamos descartar adulteraciones en las tinturas de
Boldo, para posteriormente poder realizar ensayos fisicoquímicos cualitativos, entre esto
podemos encontrar ensayos de reacciones de coloración y cromatografía y ensayos
fisicoquímicos cuantitativos que pueden ser específicos y generales, estos ensayos van a
encargarse de determinar la presencia de grupos de metabolitos y también la presencia o
ausencia de algunos tipos determinados de moléculas. Entre todos los métodos de análisis
que hay, el que vamos a ocupar en este caso va a ser el de cromatografía, debido a que es
el más completo y es el que entrega más información en cuanto a sus componentes y la
posible actividad que tengan. Entre los ensayos generales de los ensayos fisicoquímicos
cuantitativos vamos a tener de materia extraña, humedad, materia extraíble, cenizas,
microbiológicos, pesticidas y radioactividad. Tomando en consideración las condiciones a
las que fueron cultivadas estas plantas, que se puede asumir que fueron las mismas porque
es la misma cadena la que vende el Boldo, podemos descartar algunos tipos de análisis
generales, como por ejemplo la contaminación, ya que no debería ser distinta en este caso.
Teniendo en cuenta lo anterior podemos hacer un análisis de estos mediante un ensayo de
materia extraña y un análisis de humedad.

El análisis de materia extraña nos va a permitir conocer si existen partes de otros órganos
de las plantas o de otras materias orgánicas las cuales puedan afectar en su pureza, calidad
y autenticidad y evaluar que este no supere el 2%, la cual puede afectar su actividad y su
comercialización.
El análisis de humedad, va a ser por método volumétrico el cual va a permitir la
determinación del contenido de agua por un arrastre azeotrópico, en este caso el agua de
la droga a analizar va a ser arrastrada por destilación con un disolvente que va a ser
inmiscible con el cual forma una mezcla azeotrópica cuando se somete a una temperatura
constante de ebullición, en un aparato de destilación a reflujo, estos se van a condensar por
refrigeración y se van a separar el agua del disolvente para poder medir el volumen de agua
separada de la droga.

En cuanto a los ensayos específicos, podemos dividirlos en tres: espectrofotométricos,

cromatográficos y volumétricos, los cuales se aplican a drogas vegetales específicas y
valoran o cuantifican los principios activos relacionados con la actividad biológica.

Con toda la información adquirida, va a ser posible determinar cuales son las causas por la
cuales hay una diferencia en la variabilidad de la actividad de las tinturas de Boldo, teniendo
el cuenta que el ensayo que más puede dar resultados pueden ser el de humedad, esto es
debido a que este ensayo puede indicarnos el posible mal almacenamiento que puedo
haber tenido una de las tinturas madre de Boldo o también el segundo ensayo que nos
puede dar pruebas contundentes sobre la diferencia de esta actividad puede ser el de
materia extraña porque este identificaría altiro si hay partes de otros órganos de las plantas
o de otras materias orgánicas como para que hubiera ocurrido esa diferencia.

2. A Ud., se le entrega una droga medicinal y se le pide determinar su autenticidad.

Desarrolle un protocolo que le permita responder este requerimiento. Fundamente.

Para poder determinar la autenticidad en la droga medicinal primero hay que realizar
ensayos botánicos, los cuales nos van permitir detectar falsificaciones y nos permitirán
hacer más ensayos para poder determinar su autenticidad, tomando en consideración que
no se sabe específicamente como es la droga vegetal a analizar, lo primero que vamos a
realizar serán ensayos botánicos, para eso vamos a ocupar tres tipos de ensayos, el
organoléptico, el macroscópico y/o el microscópico. Como se dijo anteriormente los
ensayos organolépticos evalúan el olor, sabor y la sensación al tacto, los ensayos
microscópicos analizan los componentes celulares y los ensayos macroscópicos estudian las
características morfológicas propias de cada órgano de la droga medicinal.

Lo segundo que se va a realizar es que para poder asegurarnos de la autenticidad podemos

también hacer ensayos fisicoquímicos cualitativos para poder determinar la presencia de
grupos de metabolitos y también para determinar la presencia o ausencia de algunos tipos
determinados de moléculas para saber si la droga está falsificada o no. Para este tipo de
análisis vamos a tomar en consideración el método de cromatografía, el cual es una técnica
de separación y aislamiento de compuestos, dependiendo de cual tipo de cromatografía se
use, podemos obtener como resultados, algunos compuestos que no sean parte de la droga
medicinal para poder comprobar su autenticidad, las técnicas más utilizadas van a ser:
- Cromatografía de capa fina (CCF)
- Cromatografía de columna (CC)
- Cromatografía de gases (CG)
- Cromatografía líquida de alta resolución (CLAR o HPLC)

En tercer y último lugar tenemos que hacer ensayos de calidad y pureza, para esto se van
realizar ensayos fisicoquímicos cuantitativos, que como se dijo anteriormente estos se van
a dividir en específicos y generales.
Tomando en consideración que lo que queremos analizar en esta droga es su autenticidad,
solo vamos a realizar ensayos de análisis fisicoquímicos generales de materia extraña y
determinación de cenizas.
1. El ensayo de materia extraña como se dijo anteriormente nos va a permitir conocer
si existen partes de otros órganos de las plantas o de otras materias orgánicas las
 cuales puedan afectar en su pureza, calidad y autenticidad y evaluar que este no
supere el 2%.

2. El ensayo de determinación de cenizas nos va a permitir conocer si la droga vegetal

que se está analizando tiene presencia de adulterantes inorgánicos o si esta tuvo
procesos inadecuados de recolección y almacenamiento los cuales afectan su
autenticidad. Dependiendo del tipo de droga medicinal que se esté analizando se
van a poder ocupar 3 métodos para realizarlo:
1. Método de cenizas totales: Son las cenizas fisiológicas y no fisiológicas.
2. Método de cenizas sulfatadas totales: Son los metales sulfatados.
3. Método de cenizas insolubles en ácido: Son las tierras silíceas y sílicas (arena).

Se pueden realizar también ensayos fisicoquímicos específicos, los cuales nos van a permitir
valorar el principio activo de la droga medicinal que estamos analizando. Para poder lograr
esto se pueden ocupar 3 tipos de métodos:

1. Método volumétrico: Se puede determinar una sustancia por su reacción con otra
sustancia estandarizada conocida con un volumen medido, por lo que la reacción
final nos indica cual es el contenido de este tipo de compuestos presentes en la
muestra que estemos caracterizando.
2. Método espectrofotométrico: Es la capacidad de absorción energética que
presentan ciertas moléculas al ser expuestas a una determinada intensidad de
energía y con una longitud de onda determinada.
3. Método cromatográfico.

3. Un organismos de salud, le solicita un proyecto para elaborar para convertirse en

un proveedor de una droga vegetal.
Discuta de manera secuencial todas las etapas requeridas para generar de manera
sustentable la droga solicitada. Fundamente

Para poder convertirse en un proveedor de alguna droga vegetal y poder generarlas de

manera sustentable es necesario llevar a cabo las distintas etapas:

Lo primero que hay que hacer es realizar una fase de descubrimiento, para lograr esto hay
que hacer una elección del material vegetal a analizar a través de alguna revisión
bibliográfica o a través de un análisis de bioinformática para poder evaluar la actividad de
estas plantas.

Después debemos adquirir la muestra vegetal que estamos analizando a través de la semilla
de esta misma, la cual va a ser recolectada desde una plantación, lo que va a permitir que
se conserve la especie y se reduzcan las adulteraciones, para posteriormente hacer una
selección del genotipo de esta muestra vegetal y optimizarla.

Posterior a eso, se va a llevar a cabo la obtención de productos de la planta mediante una

caracterización de productos de esta misma, se van a establecer condiciones específicas de
la producción de la planta que va a depender de la obtención, recolección, conservación y
almacenamiento. Para lograr su sustentabilidad es necesario que los procesos ocupados
sean los más “ecológicos” posibles como por ejemplo ocupar una desecación natural.
Posteriormente es necesario realizar una metodología para incorporar un modelo
experimental in vitro y así poder validar la eficacia que tiene el producto.

Lo obtenido en el proceso de separación se va a evaluar en cada paso para poder conocer

mejor las partes efectivas (principio activo) que vamos a obtener y así determinar los
principios activos en el estudio de estos. Después es necesario que se realice un estudio
toxicológico, de estabilidad, para poder determinar la seguridad de esta planta y aumentar
la biomasa para la extracción de principios activos.

Finalmente se va a realizar una aplicación al instituto de salud pública, el cual se va a

encargar de regular los ensayos clínicos en fase 1 y 2 que considera estudios toxicológicos,
estudios farmacocinéticos, interacción droga-droga y protocolos de producción GMP
(buenas prácticas de producción), para que en la fase 3, se testeen estas drogas en personas
y esta se pueda aprobar en organismos como el ISP, FDA,etc y así poder comercializarlos.

4. Ud., encuentra una planta que presenta actividad antibacteriana muy relevante. Decide
aislar los principios activos responsables de esta actividad.
Desarrolle un protocolo, que le permite obtener y caracterizar las moléculas bioactivas.
Fundamente.

Para poder realizar un proceso que me permita obtener y caracterizar las moléculas
bioactivas, es necesario que primero se realice un proceso que me permita identificar los
principios activos presentes en la planta que se encontró.

Primero lo que hay que hacer es conservar de buena manera la planta con la actividad
antibacteriana para no provocar en esta alteraciones físicas y químicas y poder obtener un
buen resultado al extraer el principio activo, para esto hay que tomar en consideración los
distintos factores que afectan a las plantas, como los factores externos, que son la
humedad, el calor, la radiación, los microorganismo, hongos e insectos y los factores
internos como las reacciones enzimáticas.
En segundo lugar tenemos que aplicar algún método de desecación, para eliminar la mayor
parte del contenido hídrico del tejido y un método de estabilización para inhibir la actividad
enzimática de forma irreversible por desnaturalización de los sistemas enzimáticos. Dentro
de los métodos de desecación tenemos: el secado al aire libre y al sol, secado a la sombra y
al vacío, secado al aire caliente, secado bajo vacío, secado por rayos infrarrojos y
criodesecación, siendo también divididos entre desecación natural como los 3 primeros que
se nombraron o desecación artificial, con el método del uso de estufas. Entre los métodos
de estabilización tenemos: con calor hirviendo, con calor húmedo y con calor seco.

En tercer lugar y posterior a eso, tenemos que almacenar la planta una vez que fue
estabilizada, este almacenamiento va a depender de las características propias de cada
especie y de la parte de la planta que se va a utilizar para analizar, para eso hay que seguir
ciertas condiciones generales de almacenamiento como: Almacenar en lugar fresco y seco,
preservar de la luz ultravioleta, aislar de la atmósfera y ver el tiempo de almacenamiento.

En cuarto lugar, hay que empezar el proceso de extracción, en el cual se separa de la planta,
la fracción medicinalmente activa mediante el uso de un solvente a través de
procedimientos estándares, para eso es necesario hacer una extracción estandarizada, para
obtener la porción terapéutica y eliminar la parte que no tiene actividad. El solvente
ocupado no puede tener un efecto nocivo en la salud humana y este está determinado por
el tipo de principio activo que queremos extraer, como por ejemplo de la polaridad que
tiene este.

En quinto y último lugar, hay que elegir el método de extracción, tomando en consideración
que se pueden ocupar métodos costosos, podemos ocupar el método de extracción
continua en calor o el método de Soxhlet, en la cual la droga cruda se muele finamente y se
coloca en un sistema poroso de extracción para luego colocarlo en el sistema de Soxhlet,
posterior a esto se coloca el solvente en uno de los componentes y se le aplica calor, este
va a provocar que el solvente genere vapores, los cuales van a pasar a través de la droga y
van ser condensados usando agua fría, esta condensación va a ser la mezcla de la droga con
el solvente con el cual estuvo en contacto, este proceso es continuo y se lleva a cabo hasta
que una gota de solvente del tubo sifón no deja residuo al evaporarse.

Con los 5 pasos nombrados anteriormente, se puede realizar una buena extracción del
principio activo de una planta, lo que también nos va a permitir obtener y caracterizar las
moléculas bioactivas que están contenidas en la planta con la actividad bacteriana.