CAPACITACIÓN Y ACTUALIZACIÓN EN TÉCNICAS DE MUESTREO - CURSOS FQA

TRABAJO PRACTICO: Toma de Muestras en Toxicología

CUESTIONARIO

El cuestionario debe ser respondido luego de terminado el módulo y dentro de las 72 horas,
consignando nombre y apellido.

1- a-Diferencias y similitudes, entre intoxicación crónica y aguda.

b-¿Que consideraciones puede hacer Ud. respecto de la toma de muestra para un
análisis toxicológico en cuanto a una intoxicación aguda?

2- Importancia de la Biotransformación de Xenobióticos en Toxicología en cuanto a la toma de

muestra

3- ¿En qué casos está absolutamente restringido el uso de etanol como antiséptico para la toma de
muestra de sangre y por qué?

4- Indique condiciones mínimas para la toma de muestra de pelos para análisis de metales.

5- ¿Qué es y para qué sirve la cadena de custodia en la toma de muestras?

6- ¿Que es la DL50, sus unidades y cuál es su importancia en Toxicología?

7- ¿Que muestras tomaría para un análisis de arsénico, suponiendo una intoxicación crónica y por
qué?

8- Cite las características más importantes de la muestra de orina.

Pregunta 1.

a-Diferencias y similitudes, entre intoxicación crónica y aguda.

En rasgos generales, una intoxicación aguda es aquella en la cual se consumió en un lapso pequeño
de tiempo una cantidad de sustancia suficiente para desarrollar una patología, en opuesto con una
intoxicación crónica que es el consumo de una sustancia en pequeñas cantidades por un lapso de
tiempo extendido y que se acumula más velozmente en el organismo de lo que él puede
eliminarlo, generando síntomas y lesiones.

En ambos casos, la intoxicación es causada por el consumo directo o indirecto de una sustancia
química que genera cambios en el organismo.

En el especifico caso de una intoxicación crónica o aguda de alcohol: Una intoxicación aguda tiene
en general una importancia medica/ legal si se encuentra relacionada a algún tipo de delito, por
ejemplo, un choque estando bajo los efectos del alcohol, o una situación de daño hacia una

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persona bajo los efectos del mismo. Genera en la persona perdida de reflejos, perdida de conducta
y otras. En el caso de una intoxicación crónica, los problemas radican en la presencia de síntomas y
lesiones como enfermedades debidas al desgaste de órganos, cirrosis hepática, por ejemplo, o
alteraciones psiquiátricas.

Ambas intoxicaciones generan conflictos en la persona, aunque al ser los tiempos de exposición y
la concentración de la ingesta muy diferentes, también lo son las consecuencias.

b- ¿Que consideraciones puede hacer Ud. respecto de la toma de muestra para un

análisis toxicológico en cuanto a una intoxicación aguda?

En el caso de una intoxicación aguda la toma de muestra debe ser rápida, ya que la velocidad de
metabolización del cuerpo para esa sustancia puede llegar a ser lo suficientemente alta para que la
concentración sea indetectable rápidamente. Debe analizarse los patrones químicos que verifican
que dicha muestra no fue alterada, por ejemplo, en el caso de la orina debe medirse la
concentración de creatinina. Debe seleccionarse la matriz biológica correcta para el análisis de la
sustancia, debe conocerse previo a la toma, el tipo de sustancia que quiere medirse, si se
desconoce el causal de la intoxicación en general la muestra de orina es de suma utilidad para un
screening general. Debe conocerse la biotransformación del metabolito. Las consideraciones
deben ser muchas ya que una muestra de una intoxicación aguda es una muestra única en tiempo
y espacio, un mal desempeño en este punto puede generar una pérdida total del análisis, por
ejemplo, si se desinfecta con alcohol el brazo del individuo antes de la toma de sangre del mismo
para medir concentración de alcohol en sangre por una posible intoxicación aguda, la muestra
puede dar una concentración mayor a la real y luego de visualizado el error tal vez no haya
oportunidad de una segunda muestra. En el caso de una posible intoxicación alcohólica también
debe tomarse por lo menos 2 muestras con una diferencia de una hora entre una y la otra para
conocer en qué punto de la curva de absorción se encuentra la muestra.

Se puede luego de un correcto análisis de la muestra hasta estimar la cantidad de alcohol en

sangre del individuo en el momento del hecho, el tipo o la cantidad de bebida que ingirió.

Pregunta 2
- Importancia de la Biotransformación de Xenobióticos en Toxicología en cuanto a la toma de
muestra

La importancia de la biotransformación de Xenobioticos en toxicología radica en la correcta

selección de la matriz biología para efectuar el análisis de una cierta sustancia química ya que se
conoce dónde y cómo puede encontrarse el químico que quiere estudiarse, sin saber esto, el
desconocimiento de las especies a estudiar o su ubicación generarían una gran duda en el
momento de la toma de muestra. Conociéndose que metabolitos pueden formarse y cuáles son las
matrices aptas para el estudio de la muestra se garantiza un correcto trabajo analítico y un
resultado confiable. Debemos saber el metabolito resultante de la biotransformación, en el caso

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de una intoxicación aguda, por ejemplo, un hueso no sirve para la determinación aguda por la falta
de tiempo que existió para que el químico pueda fijarse. Todo agente químico que ingresa desde el
exterior hacia el interior del organismo es considerado un Xenobiotico, las fuentes de ingreso
pueden ser variadas, desde alimentos hasta contaminación ambiental, el conocimiento de la
fuente de exposición ayuda a la elección de la matriz biología a analizar.

Pregunta 3

- ¿En qué casos está absolutamente restringido el uso de etanol como antiséptico para la toma de
muestra de sangre y por qué?

La determinación de alcohol en sangre es de suma importancia en la vida cotidiana, como es el

caso de un accidente de automóvil bajo los efectos del alcohol, episodios violentos, o
muertes/violaciones. Todas ellas con suma importancia de índole legal.

En la toma de muestras de sangre de personas vivas se desinfecta la piel y en el caso que la toma
sea para un posterior análisis de etanol en sangre deberán usarse soluciones libres de alcohol,
como lo son soluciones jabonosas, agua oxigenada o iodopovidona ya que, si uno limpia la
superficie con alcohol, cuando se hace la toma de muestras y se introduce la ajuga, puede que
cantidades de alcohol de la desinfección se recolecten y veamos una concentración en el análisis
más elevada que la real. Debe evitarse por lo tanto la desinfección de la superficie con químicos
que puedan modificar el análisis posterior. En el caso que una toma post mortem la desinfección
no tiene importancia y por lo tanto no tenemos el riesgo de la contaminación externa.

Pregunta 4
- Indique condiciones mínimas para la toma de muestra de pelos para análisis de metales.

En la toma de muestras de pelo debe tenerse en cuenta que muchos químicos quedan fijados en el
bulbo pilífero a través de la irrigación sanguínea, pero, además, la contaminación externa que el
pelo puede tener genera problemas en el análisis. La contaminación externa debe eliminarse con
un lavado exhaustivo de pelo para eliminar toda sustancia que venga desde el exterior y generar
un resultado de análisis confiable. Debe analizarse distintas longitudes en el pelo ya que
dependiendo de la longitud del pelo este puede ser útil para conocer el consumo de una droga
hasta meses/años luego del día de consumo. Al ser el almacenamiento sencillo y una toma de
muestra no invasiva, pueden tomarse más de una muestra y hasta mucho tiempo después. En el
caso de individuos calvos, el vello de otras partes del cuerpo es igual de útil.

Los tratamientos artificiales del cuero cabelludo como el tinte, la decoloración y la ondulación en
frío (permanente), alteran las propiedades naturales de absorción y adsorción de los elementos
metálicos

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Pregunta 5-
¿Qué es y para qué sirve la cadena de custodia en la toma de muestras?

El concepto de la cadena de custodia se aplica para todo tipo de muestra. Las pruebas materiales
que se generan en un proceso deben poseer documentación cronológica y minuciosa para
establecer su vinculación con el presunto delito. Esto nos permite garantizar trazabilidad y
continuidad de las pruebas, desde el lugar de origen hasta la sala de tribunal si así lo requiere.
Conceptualmente es un procedimiento de control que se aplica al material relacionado con el
delito, desde su localización por parte de una autoridad, hasta que ha sido valorada por los
órganos encargados de administrar la justicia. Así se busca evitar alteraciones, daños,
sustituciones, contaminación, obstrucción o toda acción que varié su significado original.

La cadena de custodia se expresa como un formulario de registro de información, donde se

informa un listado de cosas que incluye Lugar de entrega, relación causal, etc. Debe informarse con
detalle la naturaleza de la muestra que llega en cada nueva etapa para desligar la responsabilidad
en el caso que la muestra se haya alterado en algún punto. Esta cadena la inicia quien levanta la
muestra desde el lugar de los hechos y deja constancia de los numerosos pasos por los que la
muestra fue pasando.

Cuando hay un eslabón roto en la continuidad de la cadena, la prueba pierde validez, y el proceso
se anula.

En los pasos entonces se incluyen: El transporte, el análisis, recolección y embalaje.

Pregunta 6

- ¿Que es la DL50, sus unidades y cuál es su importancia en Toxicología?

La DL50 o dosis letal 50, se conoce como la dosis de una sustancia o radiación que resulta mortal
para la mitad de un conjunto de animales de prueba. Este parámetro se expresa en miligramos de
sustancia toxica por kilogramo de masa de animal. En general se especifica también el animal en el
cual fue probado para así poder generarse una extrapolación. Así puede compararse de forma
sencilla la toxicidad de varias sustancias y normalizarse además para una variedad de tamaños de
animales. Esta dosis puede variar dependiendo el método de administración, con lo cual a menudo
también se especifican (oral, intravenosa, etc). Cuanto menor sea la cantidad de principio activo
requerida para alcanzar el DL50, mayor será su toxicidad. Es entonces una forma de medir el
envenenamiento potencial a corto plazo (toxicidad aguda) de una sustancia.

Pregunta 7
- ¿Que muestras tomaría para un análisis de arsénico, suponiendo una intoxicación crónica y por
qué?

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En el caso de intoxicaciones crónicas, por ejemplo, una intoxicación con Arsénico, debe buscarse
una matriz biológica que sea capaz de fijar dicha sustancia de análisis y acumularla de manera de
efectiva para que en el momento de tomada la muestra y analiza, el resultado nos indique la
presencia cualitativa y cuantitativa de la misma.

Matrices biológicas con esa especificación pueden ser el cabello, ya que el bulbo pilífero tiene
conexión con el sistema de irrigación, y la melanina contenida en el cabello se fija con la sustancia.
Los huesos son también matrices elegidas para el análisis de este tipo de agentes tóxicos crónicos.
Dosis altas puntuales como lo son dosis de intoxicaciones agudas no pueden ser estudiadas en este
tipo de matriz, ya que la irrigación de la sangre en ese lapso corto de tiempo específico no es lo
suficiente para generar un almacenamiento en la matriz. El caso de pelo es una técnica no invasiva,
sencilla para la toma, un hueso es una matriz posible más en el caso post mortem.

El caso del análisis de tóxicos metálicos, este conlleva la destrucción de la muestra utilizando altas
temperaturas y ácidos oxidantes. Estudios afirman que los niveles de Arsenico desaparecen en
sangre luego de las 2 a 4 horas después de la ingestión, con lo cual esta matriz no sería la matriz
apropiada para el análisis de una intoxicación crónica.

En muchos casos y en el caso específico del análisis del posible envenenamiento de Napoleon por
Arsenico, se utilizaron muestras de cabello. Aunque en épocas antiguas el Arsenico estaba
presente en mucho de los productos para el cuidado capilar. Las uñas son posibles matrices
biológicas para el estudio de Arsenico aunque los estudios pueden tener interferencias por
contaminación externa de la muestra.

Pregunta 8
- Cite las características más importantes de la muestra de orina.

La orina es la matriz biológica por excelencia cuando se desconoce el origen de una intoxicación ya
que se utiliza para hacer estudios de “screening” de diferentes drogas. La ventaja comparativa de
la muestra de orina radica en la presencia de analitos variados en dicha matriz en comparación a
otras.

La falta de interferencia de índole proteica en los análisis de muestras de orina resulta muy
beneficiosa, además la cantidad de muestra es abundante, fácil de recolectar y de conservar.
Puede utilizarse el estudio de la creatinina para asegurar que la muestra no fue adulterada.

Se utiliza en el análisis cuali-cuantitivo de números analitos. Normalmente contiene los productos

finales, intermedios y hasta el toxico como tal en intoxicaciones agudas.

Entrega este Trabajo practico Santiago Bohner.

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