FUNDACIÓN UNIVERSIDAD DE AMÉRICA

FACULTAD DE INGENIERÍA
PRE-INFORME DE LABORATORIO

NOMBRES
Sebastián Alejandro Rivera Jorge 6202213
Julián David Luque Valbuena 6202183
Kevin Santiago Diaz Nieto 6202227

DETERMINACION DE CONCENTRACION DEL HIERRO POR MEDIO DEL

MÉTODO ESPECTROFOTOMÉTRICO

1. PALABRAS CLAVES expresar de qué modo la materia absorbe

la luz. En óptica. La ley de Beer afirma
que la totalidad de luz que emana de una
● Espectrofotometría muestra puede disminuir debido a tres
● Espectrofotómetro fenómenos de la física.[5]
● Absorbancia
● Transmitancia
● Ley de Lambert-Beer.

2. INTRODUCCIÓN
3. OBJETIVOS
El hierro es el cuarto elemento más
abundante en la corteza terrestre [1] se
caracteriza por tener muchos orbitales de
valencia vacíos y electronegatividades
bajas dado a positivos donde
paulatinamente se aumenta de orbitales
de valencia vacantes y aumenta la
capacidad para atraer pares de electrones.
[2,3]
La espectrofotometría es el análisis
químico basado en la absorción de la
energía radiante por parte de la muestra
para capturar y evaluar el color. En el
espectro visible, toda sustancia que al
solubilizarse produzca una solución
coloreada, es susceptible a su análisis
mediante este método.[4]
Por lo cual se debe tener en cuenta la ley
de Beer-Lambert-Bouguer el cual es
utilizada para
3.1. Conocer y aplicar los criterios
de pre-muestreo, mediante la
aplicación de prácticas de
preparación de recipientes de
muestreo, adición de conservantes
e identificación de los recipientes
requeridos de acuerdo a las
cantidades requeridas y al tipo de
recipientes según corresponda.
3.2. Con la aplicación de los
protocolos de tratamiento de
recipientes de muestreo y de
recipientes de
trabajo de laboratorio el estudiante
interioriza la importancia de éste
aspecto en el procesamiento
de muestras.
 3.3. Preparar estándares "stock" y
patrones de trabajo.
3.4. Manejar el espectrofotómetro
mediante el estudio previo del
manual de funcionamiento.
3.5. Determinar la concentración
de hierro total mediante la técnica
espectrofotométrica visible
(colorimetría).
4. METODOLOGÍA
EXPERIMENTAL
4.1 RESUMEN DEL MÉTODO
El Método de Fenantrolina consiste en dar
un tratamiento a la muestra el cual reduce
al hierro a estado ferroso, por ebullición
con ácido clorhídrico e hidroxilamina y se
trata con 1,10-fenantrolina, hasta obtener
un pH entre 3.2 a 3.3 dando la formación
de un complejo rojo-naranja, siendo este
un quelato de tres moléculas de
fenantrolina por cada átomo de hierro
ferroso; la solución coloreada obedece a la
ley de Beer.
5. MATERIALES Y EQUIPOS
Para esta práctica se usó un
espectrofotómetro visible que permite
medir 510 nm, una balanza analítica con
precisión de 0,0001 g, celdas de cuarzo, un
sistema de filtración al vacío y una placa
de calentamiento y agitación magnética.
También se emplearon materiales de
laboratorio como un recipiente de
muestreo de plástico incoloro con una
capacidad de 1 a 4 litros, etiquetas de
identificación de muestras, 2 vidrios de
reloj, un par de microespátulas, 2 vasos de
precipitados (50 mL), 2 vasos de
precipitados (250 mL), 4 balones aforados
a 100 mL, un balón aforado a 1000 mL,
pipetas aforadas de 1 mL - 5 mL - 10 mL -
25 mL y 50 mL, 4 pipetas graduadas de 1
mL - 10 mL y 25 mL, una micropipeta de
100-1000 µL, un embudo cónico, un aro
con nuez y un pipeteador
6. REACTIVOS
A lo largo de la práctica se hizo uso de
reactivos tales como 1,10-fenantrolina
monohidratada, cloruro de hidroxilamonio,
acetato de amonio anhidro, ácido acético
glacial, sulfato de amonio y hierro (II)
hexahidratado (FAS), agua desionizada,
ácido sulfúrico (98%), ácido clorhídrico
concentrado y etanol (98%).
Durante el procedimiento se prepararon
distintas soluciones en las cuales se vieron
involucrados reactivos con bajas
concentraciones de hierro, junto con el
posible uso de la plancha de agitación
magnética para así homogeneizar las
mezclas realizadas. A continuación dichas
soluciones.
Solución de 1,10-fenantrolina. Esta
disolución se preparó a partir de 1,00 g de
1,10-fenantrolina monohidratada
(C12H8N2∙H2O) a la cual se le agregó
agua destilada hasta alcanzar un volumen
de 1000 mL, seguido a esto se le
adicionaron 20 gotas de ácido clorhídrico
concentrado (HCl).
Solución de hidroxilamina. Para esta
solución se disolvieron 10,0 g de cloruro
de hidroxilamonio (NH2OH∙HCl) junto
con agua destilada hasta alcanzar un
volumen de 100 mL.
Solución amortiguadora. Para preparar el
buffer se disolvió 250 g de acetato de
amonio (NH4C2H3O2) en 150 mL de
agua destilada. A ello se adicionó 700 mL
de ácido acético concentrado
(CH₃COOH-glacial).
Solución madre de Fe(2+). Para la
solución madre se pesó en la balanza
analítica de precisión un valor aproximado
de 0,0700 g de FAS, se pre disolvió en
agua y se transfirió a un balón aforado de
1000 mL. Luego se agregó 2,5 mL de
ácido sulfúrico concentrado (H₂SO₄) y se
dejó diluir la disolución hasta el aforo.
Disoluciones patrón a partir de la solución
madre de Fe(2+). Para preparar estas
disoluciones se tomaron seis balones
aforados de 100 mL; limpios y
recientemente purgados con agua
destilada. Después fueron marcados como
P1, P2, P3, P4, P5 y P6. Luego, haciendo
uso de micropipetas y pipetas aforadas, se
tomaron alícuotas de 0,1; 0,5; 1,0; 5,0;
10,0 y 25,0 de la solución madre de hierro
(II) y se adicionó cada una a un respectivo
balón aforado previamente marcado.
Seguidamente se agregó a cada balón 1
mL de solución de hidroxilamina, 10 mL
de solución amortiguadora y 10 mL de
solución de o-fenantrolina; luego se diluyó
hasta la marca con agua. Se homogeneizó
muy bien y se dejó en reposo por 10
minutos para alcanzar el máximo
desarrollo de color.
Blanco analítico. En un balón aforado de
100 mL; limpio y purgado con agua
destilada, se adicionó 50 mL de agua
destilada aproximadamente (esta es una
solución testigo, permaneció durante el
procedimiento en las mismas condiciones
que las demás muestras y contiene todo,
menos la muestra y el estándar).
7. PROCEDIMIENTO
HIERRO TOTAL
1.) Mezcle cuidadosamente la solución
estándar y mída 50.0 mL en un erlenmeyer
de 125 mL. Si este volumen de muestra
contiene más de 41 200 µg de hierro,
utilice una porción más pequeña medida
con precisión y diluir hasta 50.0 mL.
2.) Añada 2 mL de HCl concentrado y 1
mL de solución NH2OH.HCl (solución de
hidroxilamina).
3.) Añada unas cuantas perlas de
ebullición y caliente hasta que hierva. Para
asegurar la disolución de todo el hierro,
continúe la ebullición hasta que el
volumen se reduzca entre 15 y 20 mL, (si
la muestra ha sido sometida a combustión
seca, diluya el residuo en 2 mL de HCL
concentrado y 5 mL de agua. Verificar el
tiempo al que se llega esta condición).
4.) Enfríe hasta temperatura ambiente y
pásese a un matraz volumétrico de 50.0 o
100.0 mL.
5.) Añada 10 mL de solución tampón de
NH4C2H3O2 (acetato de amonio) y 4 mL
de solución fenantrolina y diluya con agua
hasta la señal.
6.) Homogenizar la solución
cuidadosamente y déjese al menos durante
10 a 15 minutos para que se desarrolle el
color al máximo.
7.) Realizar las lecturas de la muestra a
510 nm, en el espectrofotómetro Shimadzu
UV 1800.
8. TABLA 1
A partir de los datos obtenidos por
espectrofotometría, podemos interpretar en
detalle las diferentes concentraciones de
hierro. Se realizó una comparación a partir
de los datos obtenidos, enfatizando que se
respetaron los parámetros establecidos y el
análisis estadístico mostró que el método
utilizado fue 99,4% y 99,5% de precisión.
Este es un valor positivo, sobre el que se
realiza una comparación eficaz.
 9. CURVA ESPECTRAL
Gráfica 1.
La curva espectral describe la composición
de la luz en base a diferentes longitudes de
onda. [7] En la gráfica 1 se puede observar
que la longitud de onda de máxima
absorción es de 0.686 nm con una
absorbancia de 545 y fue a esta longitud de
onda a la que se calibró el
espectrofotómetro UV-VIS para una
lectura más precisa de los patrones a
analizar.
10. TABLA 2
El espectrofotómetro brinda información
en base a una longitud de onda impuesta.
Para el caso de la práctica de laboratorio se
hizo la máxima longitud de onda (510 nm)
encontrada al usar el patrón No. 4 con una
absorbancia de 0,118.
Partiendo de esa base se enlistan las
absorbancias de los otros 5 patrones y
finalmente hallamos el dato de la muestra
problema, la cual tuvo que ser diluida para
que su absorbancia se encuentre en el
rango de los 6 patrones anteriormente
mencionados y así presentar la curva de
calibración.
11. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Con esta práctica de laboratorio se
evidenció que la cascada contigua al
ecocampus de la fundación Universidad de
América tiene una alta concentración de
hierro. Esto podemos afirmarlo porque
incluso fue necesario hacer una segunda
dilución al momento de calcular su
absorbancia para que así estuviese dentro
del rango de las soluciones patrón.
Respecto a esto podemos decir que la
presencia de hierro en el agua no presenta
grandes riesgos para la salud pero sí
genera sabores desagradables, manchas y
acumulación del mismo.
Para eliminar la presencia de hierro en el
agua se puede usar dióxido de manganeso,
el cual es un conjunto granulado
comúnmente utilizado para la eliminación
de sulfuro de hidrógeno, hierro y
compuestos de manganeso en agua. Este
medio funciona como un filtro y a la vez
como oxidante ya que genera una acción
catalítica por su capacidad de acelerar la
reacción entre el oxidante y cualquier y
cualquier oxígeno disuelto con hierro en el
agua. [8,9].
12. CONCLUSIONES
A partir de la práctica de determinación de
hierro por método espectrofotométrico, se
evidenció el manejo adecuado de los
recipientes de laboratorio. Por ejemplo, al
momento de hacer uso de recipientes
volumétricos (tales como balones
aforados) se debe evitar llevar a secado en
estufa, puesto que esto puede generar
cambios en la estructura del recipiente qué,
aunque no necesariamente perceptibles, sí
son relevante al momento de aforar una
sustancia o reactivo debido a que las
cantidades estarán erradas.
Por otro lado, también se aplicaron
conocimientos previos y adquiridos
durante la práctica respecto a preparación
de soluciones, adición de reactivos,
preparación y protocolo de recipientes de
muestreo y el procesamiento de una
muestra problema, enfocándose en este
último caso en la muestra de agua
recolectada en la cascada contigüa al
ecocampus de los cerros de la Universidad
de América. Muestra de la cuál se analizó
la concentración de hierro.
También se estudiaron conceptos de
preparación de estándares “stock” o
solución patrón. La solución patrón es
aquella solución de la que se conocen las
concentraciones de los reactivos que
participan en la misma. Estas soluciones se
desempeñan como función principal en
cualquier método o procedimiento
volumétrico [6]. Para esta práctica de
laboratorio se profundizó en la preparación
de dichas soluciones y se dispuso de 6
soluciones patrón, un blanco y la muestra
problema; los cuales cumplieron con el
objetivo de realizar una comparación de
absorbancia y conocer la concentración de
hierro presente en esta última. Para ello se
empleó el espectrofotómetro UV - VIS, del
cual se hizo un resumen detallado de sus
funciones y las distintas longitudes de
onda que permitía usar.
Gracias a los datos brindados por el
espectrofotómetro se logró hacer la curva
de calibración; graficando y linealizando la
misma en Microsoft Excel (versión 2016).
13. ANEXOS
A) El muestreo es el proceso para obtener
una pequeña cantidad de una masa de un
material cuya composición representa
exactitud a todo el material muestreado
B) muestreo aleatorio simple
muestreo aleatorio sistemático
muestreo aleatorio estratificado
muestreo aleatorio por conglomerados
C) Existen dos tipos de muestreo que son
el muestreo aleatorio o probabilístico y el
muestreo no aleatorio o no probabilístico,
todos útiles para la selección de muestras,
sin embargo, se escogerán dependiendo
con los recursos con que se cuente y el tipo
de investigación a realizar.
D)
E) Esta ley establece que cuando pasa luz
monocromática por un medio homogéneo,
la disminución de la intensidad del haz de
luz incidente es proporcional al espesor del
medio, lo que equivale a decir que la
intensidad de la luz transmitida disminuye
exponencialmente al aumentar
aritméticamente el espesor del medio
absorbente.
F) La espectrofotometría UV-visible es
una técnica analítica que permite
determinar la concentración de un
compuesto en solución. Se basa en que las
moléculas absorben las radiaciones
electromagnéticas y a su vez que la ● https://n9.cl/2ovqpq (amonio y
cantidad de luz absorbida depende de hierro (II) sulfato en solución)
forma lineal de la concentración. ● https://n9.cl/6mpva (agua
desionizada)
G) Se denomina solución madre o stock a ● https://n9.cl/tadqk (ácido sulfúrico)
composiciones concentradas de nutrientes ● https://n9.cl/miomf (ácido
las cuales están formuladas por sales clorhídrico concentrado)
minerales que se emplean en un medio ● https://n9.cl/q1ko (etanol 98%)
particular.

I)
● Se refiere a cuán cerca del valor
real se encuentra el valor
medido.En términos estadísticos, la
exactitud está relacionada con el 15. BIBLIOGRAFÍA
sesgo de una estimación. Cuanto
menor es el sesgo más exacto es Para la elaboración del presente trabajo se
una estimación.
realizó una revisión bibliográfica en:
● Se refiere a la dispersión del
conjunto de valores obtenidos de
mediciones repetidas de una ● http://dx.doi.org/10.4067/S0366-16
magnitud, cuanto menor es la 442001000100009 [2,3]
dispersión mayor la precisión.
● https://ri.conicet.gov.ar/handle/113
36/87008 [4]
J) Es la representación gráfica, en un
plano cartesiano, de la Concentración (C)
en función de la Absorbancia (A). Se ● https://www.uv.mx/personal/aherre
preparan varias disoluciones de ra/files/2014/05/L.-Ley-de-Bougue
concentración conocida y se determinan r-Lambert-Beer-0.pdf [5]
sus A, y con estos datos se construye la
curva de calibrado, que es una recta. ● https://glosarios.servidor-alicante.c
om/quimica/solucion-patron [6]
K)Se determinó preparando tres niveles de
concentración, los cuales fueron valores
menores que el límite cuantificable, ● http://www.glosariografico.com/cu
simultáneamente se prepararon cinco rva_distribucion_espectral [7]
blancos.
● https://www.carbotecnia.info/apren
dizaje/eliminadores-de-fierro-y-ma
14. FICHAS TÉCNICAS (R)
nganeso/fierro-y-manganeso-en-el-
● https://n9.cl/nhqj7 agua/ [8,9]
(1,10-fenantrolina)
● https://n9.cl/djuf (cloruro de ● https://bdigital.uniquindio.edu.co/b
hidroxilamonio) itstream/handle/001/5855/VALIDA
● https://n9.cl/m7hn1 (acetato de CI_N_DE_M_TODOS_ANAL_TI
amonio)
COS_E_INSTRUMENTALES%20
● https://n9.cl/9832b (ácido acético)
2.pdf?sequence=1&isAllowed=y
● http://depa.fquim.unam.mx/amyd/a
rchivero/Manual_18910.pdf

● https://www.uv.mx/personal/aherre
ra/files/2014/05/L.-Ley-de-Bougue
r-Lambert-Beer-0.pdf

● https://www.um.es/documents/487
4468/11830096/tema-1.pdf/1c49a0
77-8b02-405d-9100-ee5f7f1b1b7b

● https://miprofe.com/minimos-cuadr
ados/