Informe De Laboratorio N° 3 De Espectroscopia De Absorción

Atómica

DETERMINACIÓN DE PLOMO EN MUESTRAS LIQUIDAS

POR ESTANDAR EXTERNO, USANDO ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN
ATÓMICA POR HORNO DE GRAFITO.

Universidad De Cartagena

Facultad De Ciencias Farmacéuticas

Herrera Marrugo J, Herrera Rodríguez F, Manjarrez Cardales D, Márquez Polo D,

Martinez Useche S.
1. Estudiantes, universidad de Cartagena, facultad de ciencias farmacéuticas, Programa
de química farmacéutica, V semestre, análisis instrumental de espectroscopia de
absorción atómica.
2. Docente de espectroscopia de absorción atómica, universidad de Cartagena, sede
Zaragocilla, Cartagena de indias,Colombia.
Correspondencia: dmarquezp@unicartagena.edu.co (Márquez Polo D).

Resumen
El plomo es un metal pesado, grisáceo, maleable, denso y dúctil. Se encuentra en la
corteza terrestre de un modo relativamente abundante este elemento fue uno de los
primeros metales extraídos por el hombre. Esta práctica se realizó con el fin de
determinar plomo en muestras líquidas empleando el método más adecuado siendo este
el estándar externo por espectroscopia de absorción atómica con horno de grafito en esta
práctica se realizó una solución patrón de 50 Ppb de plomo partiendo de una de 1000
Ppm de pb, se preparó una curva de calibración a partir de 5 estándares en un rango de
1.0 y 25.0 Ppb de plomo y se empleó el uso un modificador de matriz. Al realizarse
dichos estándares se procede a tomar lectura se las absorbancias en el equipo teniendo
precaución de que el equipo esté debidamente en funcionamiento, una vez tomadas las
absorbancias estas se evalúan en términos de exactitud si y solo si existe un valor de
referencia.
Palabras claves: plomo, estándar externo, modificador de matriz, GFAAS.
Abstract
Lead (Pb) is a heavy, grayish, malleable, dense and ductile metal. It is found in the
earth's crust relatively abundantly, this element was one of the first metals extracted by
man. This practice was carried out in order to determine lead in liquid samples using the
most suitable method, this being the external standard by atomic absorption
spectroscopy with graphite furnace. In this practice a standard solution of 50 Ppb of lead
was made starting from one of 1000 Pbp of pb, A calibration curve was prepared from 5
standards in a range of 1.0 and 25.0 Ppb of lead and use as a matrix modifier. When
these standards are carried out, it is necessary to read the absorbances in the equipment
taking care that the equipment is properly in operation once the absorbances are taken,
they are evaluated in terms of accuracy if and only if there is a reference value.
Keywords: lead, external standard, matrix modifier, GFAAS.
1. INTRODUCCIÓN:
La técnica de espectroscopia por horno de grafito, es una de las formas de EAA de
mayor sensibilidad (permite detectar concentraciones hasta 1000 inferiores que las
detectables con llama), siendo por tanto muy útil en el análisis de ultra-trazas. Otra gran
ventaja es que se requiere muy poca cantidad de muestra (pocos microlitros,
normalmente). La energía requerida para la atomización es obtenida aplicando una
diferencia de potencial eléctrico a través de un tubo de grafito dentro del cual ha sido
colocada la muestra. (Departamento de medicina legal, toxicología, 2011). El tubo está
alineado con la luz procedente de la lámpara espectral. Así, el vapor atómico generado
por la muestra cuando el horno está encendido, absorberá luz proveniente de la lámpara
del elemento a determinar. En este caso, la señal de absorción es transitoria, en forma de
pico, de tal modo que se eleva la concentración y posteriormente cae a medida que los
átomos difunden fuera del horno. En el proceso de atomización existen 4 etapas
esenciales:
Secado: permite eliminar el disolvente o diluyente.
Calcinación: destruye la materia orgánica.
Atomización: consigue llevar los átomos al estado fundamental.
Limpieza: elimina los restos que puedan quedar en el tubo.
Durante los años se observa un creciente interés por determinación de plomo en
productos naturales y alimenticios, como lo demuestra el gran número de trabajos de
investigación publicados sobre la determinación de plomo en material biológico
(sangre, orina, pulmón y cabello), en productos alimenticios (cereales, leche y cerveza)
y en problemas relacionados con la contaminación (aguas naturales, mar y polvo
atmosférico) (Aznaréz, 2002).
El plomo es un elemento normal en la naturaleza que corresponde a los metales pesados
más difusamente distribuido en toda la superficie de la tierra. Una de las maneras como
se ha utilizado de forma particularmente frecuente es como tetraetilo de plomo, siendo
el antidetonante de gasolinas y de ahí su vertimiento a la atmósfera. El plomo puede
ingresar al organismo por vía digestiva, riesgo más frecuente por la ubicuidad de sus
aplicaciones o bien, por vía respiratoria, riesgo menos frecuente pero más directo; de la
primera vía se ab-sorbe el 10%, de la respiratoria se puede absorber hasta el 40% del
ingreso total posible a un individuo. Da lugar a intoxicación aguda o bien puede
acumularse de manera crónica en dientes, huesos y sistema hematopoyético. Se le
asocia a alteraciones en el desarrollo del sistema nervioso central así como a
interferencia con los mecanismos de defensa del organismo donde participe el sistema
retículo endotelial; además se ha observado que la deficiencia de hierro y calcio
aumentan la absorción de plomo a nivel intestinal (Bueno Brito, 2015). Desde hace
siglos se reconocen los riesgos de la exposición laboral a plomo, y desde hace varias
décadas, diferentes organismos e instituciones han establecido lineamientos para limitar
y reducir este tipo de exposición, a medida que aumenta el conocimiento de los efectos
tóxicos del metal.
La determinación de plomo en muestras sometidas a contaminación ambiental, como
aguas naturales y productos alimenticios es de creciente interés debido a los efectos
fisiológicos de la ingestión de plomo. La espectrometría de Absorción Atómica no tiene
suficiente sensibilidad para la determinación de plomo a nivel de ppb y es necesario
utilizar la atomización electrotérmica mediante horno de grafito (Aznaréz, 1982).

2. MATERIALES Y MÉTODOS:
El equipo usado para la determinación de Pb en muestra liquida fue un espectrómetro de
absorción atómica de horno de grafito (ICE 3000 series AA spectrometer, GFS Furnace
Autosampler). El equipo fue calibrado y ajustado antes de su operación. Las
condiciones instrumentales para las mediciones de los metales fueron: longitud de onda
de Pb usada por GFAAS a 217nm. La corrección de fondo empleada fue una lámpara de
deuterio. El método utilizado fue ajuste lineal de mínimos cuadrados, con ajuste
aceptable de 0,94.

En cuanto a los reactivos, la preparación del patrón debe tener una concentración al 1%
de HNO3, los estándares utilizados para realizar la curva de calibración fueron
preparados usando una solución modificadora de matriz fosfato ácido de amonio
(NH4H2PO4 al 10%) y HNO3 concentrado al 1%.

2.1 Preparación del patrón.

Se prepararon 10mL de una solución patrón de 1ppm de Pb partiendo de un patrón de

1000ppm, esta solución debe tener una concentración de HNO3 al 1%.

2.2 Preparación de la curva de calibración.

Se preparó una curva de calibración por estándar externo con cuatro estándares y un
blanco, los estándares con un volumen final de 10mL con concentraciones de 0, 10, 15,
20 y 25ppb de Pb, usando una solución modificadora de matriz fosfato ácido de amonio
(NH4H2PO4 al 10%) y HNO3 concentrado al 1%.

2.3 Preparación de la muestra

Se prepararon dos replicas con un volumen fijo de muestra de 200μL y 800μL de

solución modificadora de matriz. Se calcularon los volúmenes de las soluciones
estándar, modificador y ácido nítrico necesarias para obtener concentraciones
establecidas, siendo la concentración final del modificador de matriz de 0.2%.
Adicionalmente, se completaron los volúmenes hasta 10mL con agua desionizada (tabla
1).

Tabla 1. Cantidad de estándar, modificador y ácido nítrico para curva de calibración.

 Concentració Volumen Volumen Volumen
n de estándar de de de HNO3
en ppb estándar modificado en (μL)
de ppm r (μL)
Blanco 0,0 20 100
5,00 50 20 100
10,0 100 20 100
15,0 150 20 100
20,0 200 20 100
25,0 250 20 100

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS:

Tabla N02. Lectura del equipo de concentraciones y absorbancias de blanco, patrones y

muestra.

Estándar Concentración (ppb) Absorbancia

BLANCO 0.0000 0,12580

1 5 0,34020
2 10 0,52870
3 15 0,58130
4 20 0,85360
5 25 0,95160
Muestra Concentración (ppb) Absorbancia
Muestra 1 0.4239 0,01896
Replica 2 0.3851 0,00690
 CURVA DE CALIBRACIÓN
1
0.9
0.8
0.7
Absorvancia

0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 5 10 15 20 25 30

Concentracion de estadar en ppb

Figura 1. Gráfico de la curva de calibración absorbancia-concentración.

La curva de calibración se realizó usando el método de los mínimos cuadrados y
estableciendo como valor mínimo de linealidad un valor de R2 > o = a 0,94.
Para hallar la concentración de Pb en la muestra se utilizó la siguiente formula y=mx+b
Y=mx+b
Y −b 0,01896−0,186
X= = =−5,568 ppb
m 0,030
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos nos indica que la muestra no contenía una
cantidad significativa de plomo, esto pudo ser debido a que la muestra utilizada como
ya se encontraba preparada quizás fue utilizada y el plomo que contenía se descompuso.
Es bastante inferior lo que conlleva a pensar que se pudo presentar perdida de analito en
alguna de las etapas previas a la lectura o durante las etapas previas a la atomización, ya
que en el método GFAAS se trabaja a temperaturas bastante altas las cuales pueden
ocasionar proyecciones de la muestra dentro del tubo de grafito (interferencias no
espectrales). Esto a su vez pone de manifiesto que cualquier pérdida por mínima que sea
tiene gran impacto en los resultados por el hecho de que se trabajó en concentraciones
demasiado bajas
El plomo es un metal muy tóxico, la contaminación por este es un problema detectado
hace décadas en un principio en el ambiente laboral y posteriormente en sectores
urbanos o rurales cercanos a fundidoras, minas u otras fuentes de emisión (Cinthia &
Pillaca, 2010). Esta problemática hoy día ha traído grandes consecuencias no solo en la
salud del ser humano sino también a nivel ambiental, es por esto que se recomienda
tenerlo en concentraciones muy mínimas las cuales están establecidas en la normativa
de cada país para las diferentes áreas propensas a este contaminante; por lo
anteriormente dicho es muy importante cuantificar la presencia de este metal en
muestras de alimento, suelo, agua, sangre, etc.
La absorción atómica por horno de grafito permite la determinación de algunos metales
con gran sensibilidad y límites de detección de 20 a 1000 veces mayor que las técnicas
convencionales sin necesidad de extracción o preconcentración de la muestra, esta alta
sensibilidad se pudo evidenciar en los resultados obtenidos al observar el valor de la
concentración de la muestra analizada, la sensibilidad de este método se debe al
incremento del tiempo de residencia de los átomos en estado fundamental en el paso
del camino óptico; este método además de ser sensible tiene la gran ventaja de trabajar
con volúmenes de muestra muy pequeños que van de 1 a 20 µL (Jiménez & padilla,
2017).
4. CONCLUSIÓN:
La Espectrofotometría de Absorción Atómica utilizando el horno de grafito puede
diferir con respecto a las demás en cuanto a la utilización de pocas cantidades de
muestras y la detección y de elementos metálicos a muy bajas concentraciones (ppb).
Por tanto, la precisión y exactitud de los resultados se garantizan en la preparación de la
curva de calibración y la corrección de fondo.
Esta técnica puede ser más eficiente que la de llama debido a su límite de detección es
menor y por ende su sensibilidad es mayor, lo que permite detectar concentraciones tan
pequeñas.

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