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Práctica No.

10
Pigementos
vegetales

Para la elaboración de
Objetivo: esta practica se
Realizar la extracción y
separación de pigmentos a partir necesitaran los
de diferentes fuentes de siguientes materiales y
organismos fotosintéticos.
soluciones.

Materiales
-Hojas de espinaca y de Zebrina pendula.
-Baño de incubación.
-Pinzas.
-Frascos de 15 y de 30 ml.
-Pipetas de 10 y 1ml.
-Capilares o puntas de micropipeta.
-Tubo de ensayo de 15 ml.
-Embudo de separación.
-Mortero con mano.
-Probeta de 25 ml.
-Embudo de vidrio.
-Gasa, papel filtro.
-Frasco de vidrio de 6 x 13 cm.
-Etanol.
-Éter de petróleo-benceno (9:1)
-Acetona.
-Agua.

¿Tienes los Consigue el


material, sin
materiales de la No él no hay
practica? práctica.

Si

2. Quita el peciolo
y la nervadura
principal a una
hoja pequeña (o
media grande) de
espinaca.

3. Corta los restos foliares en pequeños


pedazos y colócalos en el frasco de 15
ml, agrega 1 ml de acetona.

5. Toma una alícuota del extracto con un


4. Macera capilar y aplica 10 gotas, de una en una,
en un cromatograma de papel,
cuidadosamente con previamente marcado a 0.5 cm del borde
mas angosto, seca levemente después
un agitador. de cada aplicación.

7. Observa la separación de los 6. Desarrolla el cromatograma en un


pigmentos y marca las manchas de color frasco cerrado con una mezcla de éter de
de cada pigmento con lápiz. petróleo-benceno 9:1. Retira el
cromatograma una vez que el desarrollo
de la cromatografía llegue a 0.5 cm del
extremo papel.

8. Dibuja la 9. Corta en trozos


cromatograma resultante,
identifica los pigmentos
pequeños dos hojas
separados. de Zebrina pendula.

10. Colócalos en un frasco,


11. Decanta en un tubo de macera con el agitador y
ensaye de 15 ml y agrega 3 ml agrega 3 ml de acetona; si
de éter de petróleo. se evapora agrega otros 3
ml.

12. Mezcla suavemente, 13. Deja reposar hasta


con mucho cuidado , y
que se dé la separación
deja reposar 2 minutos.
Agrega 1 ml de agua
de dos fases (orgánica
destilada. y acuosa).

15. Dibuja un esquema 14. Observa las


FIN de lo observado en el características de
embudo de separación.
ambas fases.

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