Práctica No.

10
Pigementos
vegetales

Objetivo:
Realizar la extracción y
separación de pigmentos a partir
de diferentes fuentes de
organismos fotosintéticos.

Para la elaboración de
esta practica se
necesitaran los
siguientes materiales y
soluciones.

Materiales
-Hojas de espinaca y de Zebrina pendula.
-Baño de incubación.
-Pinzas.
-Frascos de 15 y de 30 ml.
-Pipetas de 10 y 1ml.
-Capilares o puntas de micropipeta.
-Tubo de ensayo de 15 ml.
-Embudo de separación.
-Mortero con mano.
-Probeta de 25 ml.
-Embudo de vidrio.
-Gasa, papel filtro.
-Frasco de vidrio de 6 x 13 cm.
-Etanol.
-Éter de petróleo-benceno (9:1)
-Acetona.
-Agua.

¿Tienes los Consigue el

material, sin
materiales de la No él no hay
practica? práctica.

Si

2. Quita el peciolo
y la nervadura
principal a una
hoja pequeña (o
media grande) de
espinaca.

3. Corta los restos foliares en pequeños

pedazos y colócalos en el frasco de 15
ml, agrega 1 ml de acetona.

4. Macera
cuidadosamente con
un agitador.

5. Toma una alícuota del extracto con un

capilar y aplica 10 gotas, de una en una,
en un cromatograma de papel,
previamente marcado a 0.5 cm del borde
mas angosto, seca levemente después
de cada aplicación.

6. Desarrolla el cromatograma en un
frasco cerrado con una mezcla de éter de
petróleo-benceno 9:1. Retira el
cromatograma una vez que el desarrollo
de la cromatografía llegue a 0.5 cm del
extremo papel.

7. Observa la separación de los

pigmentos y marca las manchas de color
de cada pigmento con lápiz.

8. Dibuja la
cromatograma resultante,
identifica los pigmentos
separados.

9. Corta en trozos
pequeños dos hojas
de Zebrina pendula.

10. Colócalos en un frasco, 12. Mezcla suavemente,

macera con el agitador y 11. Decanta en un tubo de con mucho cuidado , y
agrega 3 ml de acetona; si ensaye de 15 ml y agrega 3 ml deja reposar 2 minutos.
se evapora agrega otros 3 de éter de petróleo.
Agrega 1 ml de agua
ml.
destilada.

15. Dibuja un esquema 14. Observa las 13. Deja reposar hasta
FIN de lo observado en el que se dé la separación
características de de dos fases (orgánica
embudo de separación.
ambas fases. y acuosa).