DEMOSTRACIÓN DE LA PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN

DIFERENTES AMBIENTES

C= 3,8 Orrego, Ángela María. (2042344);

Idrobo, Andrea (2043659);
Narváez Gonzalez, Stella Lucero (2060076),
Jojoa Cristian(184393)

Escuela de Ingeniería de Alimentos – Universidad del Valle.

Fecha de entrega:4 de Abril del 2022
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RESUMEN

La importancia de comprender la presencia de los microorganismos en múltiples lugares, nos

permite realizar diferentes prácticas de laboratorio que cumplan con los requerimientos
necesarios para indagar en cada uno de los medios que presenten reproducción de
microorganismos, por consiguiente, en la práctica realizada se permitió caracterizar e
identificar diferentes tipos de microorganismos y colonias que se encuentran en distintas
superficies como la suela del zapato, el celular, un billete y un dedo; para esto se realizaron
siembras en agares nutritivos y se sembraron dos cultivos en tubo inclinado Bacillus cereus y
en caldo nutritivo con klebsiella sp, estas muestras se llevaron a incubar durante 24h y se
observó el crecimiento microbiano en los medios dispuestos. En conclusión las diferentes
técnicas de siembra permiten caracterizar el tipo de microorganismos y sus aspectos más
comunes; también se determinó que la bacteria Klebsiella pneumoniae no presenta turbidez
debido a que es un bacilo anaerobio facultativo y la bacteria Bacillus cereus corresponde a
un bacilo gram positivo anaerobio facultativo por su crecimiento equinulado.

Palabras clave: Microorganismos,ubicuidad, colonias, medios, siembra, morfología.

1. INTRODUCCIÓN La numeración de la introducción va implícita

Los microorganismos son los seres más primitivos que existen en el mundo, los cuales tienen
la capacidad de colonizar cualquier tipo de ambiente, Anton van Leeuwenhoek hace 300
años, conoció y observó por primera vez un microscopio a unos llamados anteriormente
"pequeños animálculos"(Buritaca H., Mejía, and Álvarez 2017), ahora se les conoce como
microorganismos, estos seres también participan de forma vital en todos los ecosistemas,
también en diversos procesos metabólicos, ecológicos y biotecnológicos, los
microorganismos forman conjuntos en diferentes ambientes formando colonias.
Estos medios de cultivo se pueden clasificar según la naturaleza de sus ingrediente, su
afinidad o por el estado físico en el que se encuentre, es decir, pueden ser líquidos, los cuales

1
no contienen un gel gelificante, se denominan caldos y la siembra se realiza por medio de una
asa bacteriológica en forma de espiral, debido a esto su crecimiento se da por todo el medio;
los sólidos contienen una proporción de agar( gel solidificante) de 1,5% y su crecimiento se
desarrolla en la superficie del medio, favoreciendo el crecimiento puro y la formación de
colonias; o semisólidos los cuales tiene una proporción de gar inferior a 0.5%, se utilizan en
pruebas bioquímicas y de movilidad (rodriguez & zhurbenko,2018)
De acuerdo a lo anterior se deriva la importancia de establecer el medio cultivo ideal y las
condiciones de incubación óptimas para cada uno de los microorganismos y así lograr la
formación de colonias visibles aisladas para su respectiva identificación y caracterización,
además al facilitar su reconocimientos se podrá determinar rápidamente el origen de
contaminación.
En esta práctica se realizó la siembra de las bacterias klebsiella sp y bacillus cereus en forma
de zigzag en un medio líquido (caldo) además de la siembra de microorganismos tomados de
ciertas superficies elegidas, todo esto con el objetivo de observar el crecimiento en el medio
en que se encontraban y la respectiva caracterización de sus colonias.

2. OBJETIVO GENERAL
Verificar la morfología de microorganismos basada en sus características que les permiten su
dispersión y adaptabilidad a condiciones ambientales cambiantes.
Verificar el crecimiento microbiano tomado de diferentes ambientes

2.1 Objetivos específicos

2.1.1 Comprobar la existencia de microorganismos en diversos ambientes y con ello validar
el concepto de ubicuidad microbiana.
Describir la morfología de las colonias formadas obtenidas de la siembra en diferentes
lugares y medios de cultvo
2.1.2 Sembrar las bacterias (Klebsiella pneumoniae, Bacillus cereus) en caldo y
agar inclinado para observar y verificar la variación de su crecimiento en este medio
después de 24h.

3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 Los materiales para la ralización de la práctica fueron:
●
● Aplicadores # 3
● Mechero
● Goteros
● Alcohol
● Toallas de papel
● Cinta vinipel para sellar cajas
● Tubo agua destilada 10 ml
● Asas de inoculación
● Tubo de caldo nutritivo por 5 ml
● Tubo de agar inclinado aproximadamente 8 ml
● Con bacterias
2
3.2 Métodos
3.2.1 Presencia de microorganismos en diferentes ambientes
Toma de muestras para verificar el crecimiento microbiano de los diferentes ambientes.
Se dio inicio a la práctica rotulando con el nombre de cada muestra al tomar 4 cajas de Petri
con agar nutritivo , luego se procedió a marcarlas de la siguiente manera:
● Billete: Se colocó un billete de dos mil sobre el agar y después de unos segundos de
contacto se retiró.
● Dedo índice: Uno de los integrantes del grupo colocó el dedo índice sobre el agar y lo
retiró rápidamente. Luego se tomó un copo de algodón impregnado en alcohol etílico de 70°,
y se lo paso por el dedo, Dejó que se evaporara el alcohol, lo colocó nuevamente sobre el
agar.
● Zapato: Se pasó un hisopo estéril por el piso, luego se trazó sobre el agar varias líneas
paralelas con el hisopo.
●Celular: Se pasó un hisopo estéril por diferentes partes de un celular, luego se trazaron
varias líneas paralelas con el hisopo sobre el agar.
Luego de esto, las muestras previamente rotuladas se sellaron con cinta vinipel y se
incubaron durante 24h

3.2.2 Prueba de siembra en tubo inclinado y en caldo de cultivo

se realizó con la ayuda de un asa de inoculación previamente esterilizada calentándose
directamente en un mechero hasta que alcanzara un color rojo intenso que posteriormente se
dejó enfriar; esta se usó para tomar una muestra del cultivo de la bacteria Klebsiella sp y
bacillus cereus para sembrarla con un ligero movimiento en zigzag en el agar (nutritivo e
inclinado), se observó en crecimiento en ambos medios de cultivo

4. RESULTADOS

4.1Crecimiento de colonias microbianas en cajas petri

Después de 24h horas de incubación de los microorganismos de las muestras tomadas y
sembradas en caja petri, se obtuvieron los resultados que se exponen en las figuras 1,2,3,4 y
los resultados de la observación están reflejados a continuación en las tablas 1,2,3 y 4

3
 Figura 1. Colonias presentes en la muestra del Dedo índice

Tabla 1.Descripción de las colonias presentes en el Dedo índice (Figura 1.)

No. Color Forma Borde Elevación Superficie
Colonias

Blanco - Lisa
1 amarillo Puntiformes Entero Convexa Brillante
opaco Cremosa
Superficial

Figura 2. Colonias presentes en la muestra del billete

Tabla 2. Descripción de las colonias presentes en el billete (Figura 2.)

No. Color Forma Borde Elevación Superficie
Colonias

Lisa
1 Amarillo Irregular Entero Convexa Mate
opaco Seca

4
 Superficial

2 Rugosa
Blanco Puntiforme Ondulado Elevado Brillante
Cremosa
Superficial

3 Lisa
Blanco Circular Entero Elevado Brillante
Cremosa
Superficial

Figura 3. Colonias presentes en la muestra del zapato

Tabla 3. Descripción de las colonias presentes en el zapato (Figura 3.)

No. Color Forma Borde Elevació Superficie
Colonias n

Lisa
1 Crema Filamentoso Filamentoso Plana Mate
Seca
Superficial

2 Crema Lisa
Irregular Ondulado Plana Mate
Seca
Superficial

3 Amarillo Circular Entero Convexo Lisa

opaco Brillante
Cremosa
Superficial

5
 Figura 4. Colonias presentes en la muestra del celular

Tabla 4. Descripción de las colonias presentes en el celular (Figura 4.)

No.
Colonias Color Forma Borde Elevación Superficie

Blanco - Lisa
1 amarillo Circular Entero Convexa Brillante
opaco Cremosa
Superficial

4.2 Crecimiento microbiano en agar inclinado

La siembra en agar inclinado de las bacterias Bacillus Cereus se exponen en las figura 5 el
tipo de crecimiento que se presentó con base en la descripción de la forma.

Figura 5. Muestra de Bacillus Cereus en agar inclinado

En la siembra de Bacillus Cereus como se muestra en la figura 5, se observó crecimiento

uniforme a lo largo de la línea de inoculación así que se categorizó como un crecimiento
microbiano equinulado.

6
4.3 Crecimiento superficial en caldo nutritivo

En la figura 6 se expone el crecimiento en medio líquido de la bacteria Klebsiella

pneumoniae

Figura 6. Muestra de Klebsiella pneumoniae

en caldo nutritivo

En la figura 6 se identificó que la superficie del microorganismo Klebsiella pneumoniae tenía

película membranosa, floculenta es decir (masas de bacterias flotantes) debido a esto se
determinó que su crecimiento superficial es de superficie. Ojo con la redacción

5. DISCUSIÓN

Por lo general en las Inducciones para empezar las prácticas de laboratorio se hace énfasis a
los estudiantes sobre la importancia de aplicar la Bioseguridad en los procesos, a través del
cumplimiento de marcos normativos y reglamentarios (con inclusión de instrumentos) para
con ello, establecer prácticas de trabajo seguro para el desarrollo de actividades que implican
riesgo biológico en el laboratorio de microbiología en la Universidad del Valle, con el fin de
reducir accidentes y/o enfermedades y evitar la alteración de las muestras de cultivos. Por
ello, también se verifica la ubicuidad de los microorganismos en diversos ambientes, que lo
hacen gracias a sus características morfológicas como su tamaño pequeño, su transferencia
horizontal de genes que le permite gran capacidad de dispersión. Todos estos protocolos con
marcos teóricos, se hace para concientizar al personal que ingresa al laboratorio, como
estudiantes y trabajadores, pero solo algunas personas cumplen con las normativas.

La limpieza de manos sigue siendo la medida más efectiva y menos costosa para prevenir la
transmisión de infecciones nosocomiales; sin embargo, es una práctica que en ocasiones se
descuida y permite el establecimiento de bacterias en los dedos y uñas, en un estudio
realizado en un hospital de cartago en costa rica a 46 trabajadores de la

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salud(Hernández-Chavarría, Alvarado, and Madrigal 2003) reportan que los aislamientos
más frecuentes en los dedos y uñas del personal contienen presencia de Staphylococcus, S.
aureus, S. epidermidis, S. warneri, esto debido a que las manos sirven de vehículo para
transportar agentes patógenos de un paciente a otro, infecciones, transmisión de gérmenes y
son fuente potencial de contaminación por contacto continuo con diferentes superficies a lo
largo del día, es por esto que se debe poner atención a las prácticas de lavado de manos
constante y promulgarlo como una norma que debe realizarse frecuentemente.

Diversos estudios sobre la microbiota bacteriana asociados al papel moneda realizados por
lázaro et al.,(2006)reportan que los aislamientos más frecuentes en billetes contienen la
presencia de Bacillus, Staphylococcus,Streptococcus, Pseudomonas, Enterobacter,
Acinetobacter, Escherichia y Klebsiella. Esto debido a que son fuente potencial de
propagación por contacto continuo, esta contaminación se da por factores como:las manos de
diferentes individuos, costumbres de almacenamiento y condiciones higiénicas

En cuanto a los agentes bacterianos que se presentan en las suelas de los zapatos, en un
estudio realizado por Iván renato(Jes 2020.) encontró que en las suelas de los zapatos de las
personas que participaron en el estudio agentes infecciosos que pueden hallarse en los pisos,
y las bacterias que están más colonizadas en estas superficies son las Staphylococcus aureus,
Streptococcus spp., Bacillus spp., Pseudomonas spp. y hongos como Aspergillus spp.,
Penicillium spp. y Mucor spp., entre otros hongos; estos últimos coinciden con las
características del hongo señalado como número 1 en la figura 3, en donde se exponen las
bacterias y hongos presentes en la suela de los zapatos.

Respecto al celular analizado se encuentran diferentes tipos de bacterias debido al albergue de

suciedad, a la emisión de calor que se desprende de este y al sudor expulsado por las manos
de las personas que lo utilizan, estos crean un medio propicio para la colonización y el
crecimiento de microorganismos. En base en un estudio realizado en una farmacología
terapéutica en Caracas (Muñoz et al. 2012) las bacterias identificadas fueron: Staphylococcus
sp, Staphylococcus aureus, Klebsiella sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella sp, Streptococcus
sp, Streptococcus pneumoniae, Micrococcus sp, Pseudomonas sp, Pseudomonas aeruginosa,
Enterococcus sp, Enterococcus faecalis, Salmonella sp, Bacteroides vulgaris, Escherichia
coli, de acuerdo a lo hallado de forma experimental en el laboratorio, concuerda con la
mismas caracteristicas de la bacteria Staphylococcus sp, convexa, de color blanco, forma
circular; esto justifica la importancia de la restriccion de los celulares en areas de trabajo,
para asi contribuir a la prevencion de infecciones cruzadas por el uso de telefonos.

El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente para caracterizar todo tipo de
bacteria, es muy útil porque permanece sólido incluso a relativas altas temperaturas, además
el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distingue mejor
las colonias pequeñas, la selección del medio de cultivo varía en función del objetivo de
incubación del microorganismo. por ejemplo para aislar colonias se emplea medio sólido en
placa, mientras que para conservar un cultivo durante un periodo de tiempo prolongado se
emplea agar inclinado (sólido en tubo) el cual permite una mayor disponibilidad de nutrientes

8
para el microorganismo, por otra parte, para detectar la presencia del crecimiento microbiano
se emplean medios líquidos(Medina 2012).

Respecto a la muestra de Bacillus cereus en agar inclinado que se expone en la figura 5,

según un artículo de revisión de Sanchez(2016) Bacillus cereus corresponde a un bacilo
Gram positivo, es anaerobio facultativo y presenta movilidad debido a la presencia de
flagelos. Las bacterias anaerobias facultativas son aquellas que proliferan mediante procesos
oxidativos, utilizando oxígeno como aceptor terminal de electrones, o en anaerobiosis
utilizando reacciones de fermentación para la obtención de energía En el agar inclinado
(figura 5) se observa un crecimiento equinulado que se refiere a un crecimiento uniforme a lo
largo de la línea de inoculación con una tonalidad blanca.

La bacteria, Klebsiella pneumoniae es un bacilo gram negativo y es un anaerobio facultativo.

No tiene requerimientos específicos para su crecimiento, pueden cultivarse fácilmente en
medios de cultivos sencillos, siendo sus condiciones óptimas 37°C y pH 7 (cubero,2015). En
el caldo de cultivo se evidenció turbidez en todo el tubo como se expone en la figura 6, lo que
afirma que la respiración celular si corresponde a una bacteria anaerobia facultativa, ya que
presenta una sedimentación considerable y perceptible.

6. CONCLUSIONES

Las bacterias se encuentran en diferentes superficies de la vida cotidiana,

fisiológicamente presentan características específicas como la disposición, formas,
bordes, superficies y coloraciones de las colonias lo cual permite identificar
fácilmente qué tipo de bacteria, hongo o microorganismo es.

Los medios de cultivo en la microbiología permiten el crecimiento y desarrollo de

diferentes microorganismos (bacterias, levaduras y mohos) necesarios para la
industria de alimentos, ya que permiten caracterizar el tipo de microorganismo en
función de la disposición de las colonias(morfología), estudios requeridos de un
microorganismo en específico y con esto el beneficio de aportar efectos definidos en
el proceso de creación y cuidados del mismo.

Es importante tener en cuenta las instalaciones físicas y sanitarias del entorno en el

lugar del laboratorio en conjunto con los procesos de mantenimiento del mismo, en
concordancia con los protocolos de limpieza y desinfección que conllevan a un
ambiente libre de agentes contaminantes y que no repercutan en problemáticas para la
salud, de las personas que frecuentan este lugar como sitio de trabajo o de
aprendizaje. Pues los laboratorios contienen en su interior muchos lugares que
permiten el crecimiento de microorganismos, actuando como amplificadores de
la contaminación biológica aportada. Razón por la cual el personal que ingresa al
laboratorio debe utilizar los componentes de bioseguridad y aplicar las normas antes
y después del ingreso.

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7. CUESTIONARIO

1. ¿Qué es una colonia bacteriana?

Una colonia bacteriana es una población formada por la incubación adecuada de cada célula
bacteriana en una superficie y que se ha multiplicado lo suficiente como para ser observada a
simple vista. (Forbes, B. A. 2009)

2. ¿Podría usted observar colonias bacterianas en un medio líquido?

No es posible observar colonias bacterianas en un medio líquido puesto el crecimiento de
estas en ese medio hace que el líquido se torne turbio, evitando la observación a simple
vista.(Alarcón, L. R. 2004)

3. De qué modo podrían incidir los microorganismos del aire en los trabajos del
laboratorio? Explique.
La atmósfera no tiene una microbiota autóctona pero es un medio para la dispersión de
muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y hongos), procedentes de otros
ambientes ("El aire: hábitat y medio de transmisión de microorganismos", 2002).
La principal y más sencilla manera de que las muestras de laboratorio se contaminen con los
microorganismos del aire es dejando, bien sea, las cajas de petri o tubos abiertos con los
medios de cultivos expuestos, el tiempo en que se contaminan es, por lo general
relativamente corto, por tal motivo los recipientes se deben tener abiertos el menor tiempo
posible para evitar la contaminación (Yaque Sánchez, 2013)

4. ¿Cómo evitaría que los trabajos del laboratorio se contaminen?

La contaminación a menudo puede provenir de la persona que realiza las pruebas de
laboratorio, por lo que es importante tomar precauciones para evitar que ocurra la
contaminación.
El personal de laboratorio debe usar guantes estériles y debe cambiarse los guantes cada vez
que trabaje con muestras. En el laboratorio siempre es recomendable llevar recogidos los
cabellos, ya que el pelo largo puede engancharse en los montajes y equipos y también es más
fácil que se contamine con los productos químicos que se utilizan. (“Accidentes de
laboratorio ¿Qué tan seguro es tu espacio?” Viresa, 2021)

5. Al incrementar el tiempo de incubación se presenta un aumento indefinido en el

tamaño de las colonias?
No, las colonias de microorganismos no pueden estar en un proceso de crecimiento
indefinido, ya que después de cierto tiempo las bacterias empiezan a morir, y por lo tanto
ocurre un descenso en la población El crecimiento bacteriano se caracteriza por tener cuatro
etapas principales, la fase de latencia, la fase de crecimiento exponencial, la fase estacionaria
y la fase de muerte.
La fase de crecimiento exponencial es la cual en las que las colonias de bacterias crecen a un
ritmo alarmante, pero llegado cierto punto, el crecimiento desaparece y permanece constante.
Si las condiciones se vuelven desfavorables para las colonias comienza la etapa de muerte y
por último la desaparición de colonias vivas. (“Manual de protocolos de Microbiología
general by Edward Carvajal”)

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6. ¿Qué factor podría limitar ese crecimiento?
El crecimiento bacteriano depende fundamentalmente del tipo de bacteria, también influyen
el pH, composición del medio, temperatura de incubación, edad del cultivo, entre otros,
(Pumarola, 1990) por lo que la alteración de estos factores limitaría considerablemente el
crecimiento bacteriano.
Factores intrínsecos (características propias del alimento): pH, disponibilidad de agua
(Aw), potencial redox (Eh), nutrientes, microestructura, antimicrobianos naturales,
viscosidad.
Factores extrínsecos: temperatura de almacenamiento, atmósfera gaseosa ambiental,
humedad ambiental.
Procesamiento: tratamientos térmicos (cocción), tipo de envasado, aditivos, presiones Otros:
flora natural (competencia-sinergismo), microorganismos (fisiología, injuria). (Organización
Panamericana de la Salud,OPS. Peligros Biológicos)

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 8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● .Higiene de manos / Guía de Prevención de Infecciones Intra Hospitalarias /

Herramientas - Funlarguia. (n.d.). Org.ar. Retrieved October 22, 2022, from
http://www.funlarguia.org.ar/Herramientas/Guia-de-Prevencion-de-Infecciones-Intra-
Hospitalarias/Higiene-de-manos
● “Manual de protocolos de Microbiología general by Edward Carvajal.” Issuu, 27
January 2011, https://issuu.com/carvajal/docs/protocolosmicrobiologia/26.
● Organización Panamericana de la Salud. “OPS/OMS | Peligros biológicos.”
PAHO/WHO,https://www3.paho.org/hq/index.php?option=com_content&view=artce
&id=10838:2015-peligros-biologicos&Itemid=0&lang=es#gsc.tab=0.
● Romero Bohórquez, C. A., Castañeda Alvarado, D. F., & Acosta Peñaloza, G. S.
(2016). Determinación de la calidad bacteriológica del aire en un laboratorio de
microbiología en la Universidad Distrital Francisco José de Caldas en Bogotá,
Colombia. Nova, 14(26), 101. https://doi.org/10.22490/24629448.1756
● Yaque Sánchez, A. (2013). Operaciones auxiliares elementales en laboratorio y en
procesos en la industria química y afines. Madrid: IC Editorial.
● Buritaca H., Hector Mario, Michelle Mejía, and María del Mar Álvarez. 2017.
“Aislamiento de Microorganismos En Diferentes Ambientes (Suelo, Agua y Aire).”
Mente Joven 6: 09–20.
● Hernández-Chavarría, Francisco, Karina Alvarado, and Warren Madrigal. 2003.
“Microorganismos Presentes En El Reverso de Las Uñas de Trabajadores de La
Salud, Hospital Max Peralta, Cartago, Costa Rica.” Rev Costarr Ciencias Med
24(1–2): 45–51.
http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?pid=S0253-29482003000100005&script=sci_artte
xt.
● Jes, Reyna Miliar-de. “ZAPATOS :” 33(133): 1708–12.
● Medina, María. 2012. “Medios de Cultivo En Un Laboratorio de Microbiología.”
Revista de Investigación 2(4): 1–42.
https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-laborat
orio-de-microbiologc3ada.pdf.
● Muñoz, José Jesus et al. 2012. “Bacterias Patógenas Aisladas de Teléfonos Celulares
Del Personal y Alumnos de La Clínica Multidisciplinaria (CLIMUZAC) de La
Unidad Académica de Odontología de La UAZ.” Archivos Venezolanos de
Farmacologia y Terapeutica 31(2): 23–31.
● Quistián, Hylary. 2014. “Microbiología: Cultivo Puro.” Microbiología.
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/10/cultivo-puro.html.

Las referencias deben ser presentadas en orden bibliográfico

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