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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL 1
1651

Practica 6.- características


macroscópicas de cultivos
(morfología colonial)
Equipo 6
Asesor del equipo de trabajo:

Q.F.B. María Galia Martínez Flores

Integrantes del Equipo

Ballesteros Díaz Marco A.


Espinoza Díaz Noemí
Mejía Trevilla Adriana
Rojas Morales Alberto
16/08/2010

El alumno llevara a cabo el estudio de características de las colonias bacterianas que crecen en la
superficie del medio del cultivo para proceder a la identificación presuntiva del genero ya que la
morfología colonial depende del microorganismo y del tipo del medio.
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Rojas Morales Alberto Laboratorio de Microbiología General I 1651

Análisis de Resultados

Staphylococcus

Cocos Gram positivos, tolerantes a medios con baja concentración de agua, resistentes a medios a hábitats
secos y salinos; a menudo son pigmentados. Son parásitos comunes del ser humano y animales
ocasionalmente sus infecciones son serias.

Staphylococcus aureus, de color amarillo y normalmente asociado con patologías como furúnculos ,
neumonía y osteomielitis, meningitis y artritis.

medio SS EMB AN chocolate agar sangre S110


M.O. S. aureus S. aureus S. aureus S. aureus S. aureus S. aureus
Tamaño Inhibido Inhibido Puntiformes Puntiformes 1 mm Puntiformes
Forma Inhibido Inhibido Puntiformes Puntiformes Circular Puntiformes
Color Inhibido Inhibido Blanca Blanco Blanco Blanco
Borde Inhibido Inhibido Entera Entero Entero Entero
Elevación Inhibido Inhibido Plana Plano Convexa Convexa
Superficie Inhibido Inhibido Lisa Lisa Lisa Lisa
Luz trasmitida Inhibido Inhibido Opaca Opaca Opaca Opaco
Luz reflejada Inhibido Inhibido Mate Mate Mate Mate

Otros
Pigmentación Inhibido Inhibido
Consistencia Inhibido Inhibido Cremosa Quebradiza Quebradiza Cremosa
Hemolisis
Fermentación Inhibido Inhibido

MEDIOS LIQUIDOS Y SEMISOLIDOS Staphylococcus aureus


CN Claro
TSI Sin cambios
MIO No hay movimiento

Observaciones:

Medio S-S:

La selectividad, está dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas,
de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.

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Rojas Morales Alberto Laboratorio de Microbiología General I 1651

Medio EMB:

La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo,
está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias
Gram positivas.

Medio AN:

Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus
requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano.

Medio A. sangre:

Con la adición de sangre, el medio es útil tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de
hemólisis.(beta en el caso de Staphylococcus aureus)

Medio S-110:

La lactosa y el manitol son los hidratos de carbono fermentables. El cloruro de sodio, se encuentra en alta
concentración, para inhibir el desarrollo de la flora acompañante excepto Staphylococcus spp., lográndose así un medio
selectivo para el desarrollo de estos microorganismos. permite, en la misma placa,
obtener pruebas de identificación presuntiva de especie como ser: desarrollo de pigmentos, fermentación de manitol e
hidrólisis de la gelatina

Medio MIO:

sirve para determinar si un microorganismo es móvil(presencia de flagelos)

Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende más allá de la línea de siembra.
Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra.

Medio TSI:

Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa,


lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico .

Medio C.N.

Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos
nutricionales

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Rojas Morales Alberto Laboratorio de Microbiología General I 1651

Escherichia:

Son habitantes universales de todos los animales de sangre caliente, tienen una función en el intestino
sintetizando vitaminas en especial la K; como anaerobio facultativo que es probablemente también
contribuye a la anaerobiosis del intestino grueso. existen algunas cepas patógenas y las estirpes silvestres
raramente tienen requerimientos nutricionales exigentes. Gram negativo

medio SS EMB AN chocolate agar sangre S110


M.O. Escherichia Escherichia coli Escherichia Escherichia coli Escherichia Escherichia
coli coli coli coli
Tamaño 1mm 1mm 2mm 2 mm 1mm 1mm
Forma Circular Circular Circular Irregular Circular Circular
Color Rosa Verde brillante Gris Gris Blanco-gris Amarillo
Borde Entero Entero Entero Entero Entero Entero
Elevación Convexa Elevada Plana Convexa Pulvinada Convexa
Superficie Lisa Lisa Lisa lisa Lisa Lisa
Luz trasmitida Opaca Opaca Transparente opaca Opaca Opaca
Luz reflejada mate Brillante Mate Mate Mate Brillante

Otros
Pigmentación Rosa Verde brillante blanco
Consistencia Cremosa Cremosa Cremosa Cremosa Viscosa Cremosa
Hemolisis
Fermentación lactosa Lactosa

MEDIOS LIQUIDOS Y SEMISOLIDOS Escherichia coli


CN Muy turbio
TSI Pico amarillo y fondo amarillo y burbujas
MIO Movimiento

observaciones:

Medio S-S:

La selectividad, está dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas,
de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el
indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.

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Medio EMB:

Para el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre
organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los
indicadores eosina y azul de metileno. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. Presentan un característico
brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las
que no lo hacen son incoloras.

Medio AN:

Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus
requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano.

Medio A. sangre:

Con la adición de sangre, el medio es útil tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de
hemólisis.(beta en el caso de Staphylococcus aureus)

Medio S-110:

La lactosa y el manitol son los hidratos de carbono fermentables. El cloruro de sodio, se encuentra en alta
concentración, para inhibir el desarrollo de la flora acompañante excepto Staphylococcus spp., lográndose así un medio
selectivo para el desarrollo de estos microorganismos. permite, en la misma placa,
obtener pruebas de identificación presuntiva de especie como ser: desarrollo de pigmentos, fermentación de manitol e
hidrólisis de la gelatina

Medio MIO:

sirve para determinar si un microorganismo es móvil(presencia de flagelos)

Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende más allá de la línea de siembra.
Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra.

Medio TSI:

Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa,


lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico .
1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2-Pico ácido/fondo ácido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.

Medio C.N.

Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos
nutricionales

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Rojas Morales Alberto Laboratorio de Microbiología General I 1651

CONCLUCIONES:

Para concluir estas 4 practicas:

Practica 3-Preparacion de material para microbiología, limpieza y esterilización.

Practica 4-Preparacion de medios de cultivo

Practica 5- Siembras

Practica 6- Características macroscópicas de cultivos (morfología colonial

Se llevo a cabo correctamente la esterilización del material de laboratorio así como la preparación de los medios de
cultivos ya que después de preparados los medios no se presento ningún tipo de contaminación en los mismos; las
siembras se llevaron correctamente logrando aislar a los microorganismos deseados (Staphylococcus aureus y
Escherichia coli) en todos los medios de cultivo excepto solo en 2 en los cuales el microorganismo resulto ser inhibido
por el medio, debido a que este microorganismo (Staphylococcus aureus ) es Gram positivo y los medios eran selectivos
para Gram negativos; también logros distinguir algunas fases del metabolismo de un Gram negativo (Escherichia coli) ya
que fermento lactosa con producción de color en el medio S-S, y también en el medio TSI donde fermento los tres
azucares y con producción de gas, y resulto ser móvil según el medio MIO, y se diferencio en EMB obteniendo un color
verde metálico.

en cuanto a la bacteria Gram positiva que se sembró (Staphylococcus aureus ) no fermento ningún azúcar según el
medio TSI y no hubo movimiento según MIO, tuvo una pigmentación blanca en varios medios, para Gram negativos y
enriquecidos, no se observo hemolisis ya que el agar sangre no estaba bien preparado siendo el color de este café claro
en vez de un rojo intenso por lo que se sospecho que había algún problema con los eritrocitos (sangre) en el momento
de mezclarlos con el agar base sangre; aunque no se observo la hemolisis esta reportado para esta bacteria una
hemolisis beta que estaría presente como un halo transparente alrededor de las colonias.

en cuanto a los dos microorganismos que se sembraron Staphylococcus aureus y Escherichia coli) según la investigación
realizada cumplían con las características antes mencionadas y descritas.

Referencias :

1. BD - Spain - Productos para diagnóstico de enfermedades infecciosas [Internet]. [cited 2010 Ago 30];Available from:
http://www.bd.com/scripts/es/productsdrilldown.asp?CatID=209&SubID=755&siteID=20076&d=&s=es&sTitle=BD+-
+Spain&metaTitle=Productos+para+diagn%C3%B3stico+de+enfermedades+infecciosas&dc=es&dcTitle=BD+-+Spain

2. Cultimed [Internet]. [cited 2010 Ago 30];Available from:


http://www.ictsl.net/productos/productosquimicos/cultimed/

3. Laboratorios Britania s.a. [Internet]. [cited 2010 Ago 30];Available from:


http://www.britanialab.com.ar/espanol/catalogo_r.html

4. Madigan M. Brock biología de los microorganismos. 10º ed. Madrid [etc.]: Pearson Prentice Hall; 2008.