Universidad Católica de El Salvador – UNICAES

Facultad de la ciencia de la salud – Medicina

Bioquímica
Docente: Dr. David Federico Pineda Meléndez

Primera practica de laboratorio.

REGLAMENTO PARA EL USO ADECUADO DEL LABORATORIO DE BIOQUIMICA

MÉDICA
1. Todos los estudiantes deberán estar presentes a la práctica de laboratorio por lo
menos 15 minutos antes de la hora de inicio.
2. Deberá traer consigo gabacha manga larga de color gris (blanca o celeste)
3. Sus pertenencias y útiles serán depositados en un locker personalizado para cada
grupo de laboratorio (los cuales son pocos y no tienen llave por lo cual se
recomienda no llevar ningún bolso o mochila).
4. Se le proporcionara guantes y mascarilla si se tiene en existencia, de lo contrario el
alumno deberá llevar guantes y mascarías.
5. Queda estrictamente prohibido el estar hablando durante la práctica, únicamente
interactuaran los integrantes de cada grupo entre si.
6. Queda completamente prohibido el consumo de alimentos o bebidas dentro del
laboratorio
7. Queda estrictamente prohibido el uso de celulares durante la práctica de laboratorio.
8. Ningún estudiante puede abandonar el laboratorio si no es con el permiso del
docente encargado de la práctica.
9. Todo estudiante que se encontrase realizando otra actividad diferente a la práctica
será sancionado.
10. El material Bio infeccioso será manipulado con guantes y será depositado en un
recipiente adecuado (agujas, torundas con sangre, estiletes, muestras de orina).
11. Al final de cada practica cada grupo de laboratorio será el responsable de dejar en
orden cada mesa de trabajo, de lo contrario no podrán retirarse.
PRACTICA 1

TEMA: “REGULACIÒN DEL EQUILIBRIO ÀCIDO-BASE DESPUES DEL EJERCICIO

MUSCULAR INTENSO Y DE LA INGESTIÒN DE BICARBONATO DE SODIO”

Tiempo de la práctica: 2 horas clase

PARTE I
OBJETIVOS:

1. Constatar las actividades reguladoras del pulmón y el riñón para mantener el

equilibrio ácido-base en condiciones que tienden a desequilibrarlo.

2. Verificar cómo cambia el pH de la orina después de realizar un ejercicio muscular

intenso.

3. Relacionar los resultados obtenidos con los cambios metabólicos originados por el
ejercicio muscular intenso.

4. Que el estudiante comprenda la importancia que tienen los sistemas buffers en la

regulación del pH corporal.

5. Al final del laboratorio el alumno podrá resolver la guía de preguntas relacionadas

con la práctica realizada.

PARTE II

OBJETIVOS

1. El alumno constatara el papel del riñón en el mantenimiento del equilibrio ácido-

base en una situación de ejercicio intenso y tras la ingestión de bicarbonato de
sodio.
 2. Mediante la medición del pH, observar la variación de este en la orina de un
individuo posterior a haber realizado el ejercicio y posterior a una carga de
bicarbonato de sodio.

INTRODUCCIÒN
El cuerpo humano está formado por ácidos y bases débiles para poder desarrollar su
función reguladora. Existen algunos líquidos biológicos de interés en clínica como: suero,
plasma, orina, líquido cefalorraquídeo etc., los cuales son soluciones que contienen algunas
sustancias en estado casi completo de ionización.

El equilibrio ácido-base es definido como el balance entre la producción y eliminación de

hidrogeniones, con el objetivo de mantener el pH interno dentro de límites muy estrechos
(7.35- 7.45). El pH sanguíneo es una función de dos variables independientes: la presión de
Co2 (PCO2), regulada por el mecanismo excretor respiratorio y las bases (en exceso o en
defecto) reguladas por el mecanismo renal. Entre estas bases se destaca el ion bicarbonato,
el cual desempeña un papel de importancia fundamental.

Según los conceptos de Bronsted: Un ácido se define como una sustancia (ion, molécula,
partícula) que en solución sede iones hidrogeno ò protones (H+). Una base como una
sustancia que puede aceptar iones hidrogeno.

Además del Bicarbonato la defensa del cuerpo contra la acidosis incluye otros
amortiguadores como aniones fosfato y las proteínas (hemoglobina). La facultad que tienen
los líquidos extracelulares de transportar ácidos desde el sitio donde se forman (células)
hasta el lugar donde se excretan (pulmones, riñones) sin modificación perjudicial del pH
depende principalmente de que estos líquidos y los eritrocitos posean sistemas
amortiguadores eficaces. En este sentido cabe señalar que como resultado de la oxidación
de los alimentos, un humano adulto promedio produce alrededor de 20 moles de CO2 al día
, al difundir a la sangre gran parte de dicho gas se combina con el agua en el interior de los
eritrocitos, produciendo acido carbónico ( H2CO3 ), reacción que es seguida de por la
disociación del H2CO3 para producir el anión bicarbonato HCO3- y un ión hidrogeno
( H+ ), dado el carácter del ácido débil de ácido carbónico, la fracción disociada del mismo
es pequeña; sin embargo, considerando la gran cantidad de CO2 que produce el organismo,
la acidificación de los fluidos extracelulares sería importante en ausencia de mecanismos
reguladores. En el hombre, la intervención de los pulmones y los riñones evita que ocurra
tal acidificación manteniendo en un nivel constante la concentración de H+ y por
consiguiente, del pH.

MATERIAL

 Frascos de orina estériles

 Orina (la cual será proporcionada por los estudiantes o sujetos que se someterán a la
prueba)

 Solución de Bicarbonato de Sodio a 3% (será traída por el estudiante)

 Comburt - test (tira reactiva para medir el pH en la orina)

 Papel toalla

 Guantes

 Mascarillas

NOTA: TODOS LOS ESTUDIANTES TRAERAN GABACHA MANGA LARGA DE LO

CONTRARIO NO ENTRARAN AL LABORATORIO.

METODOLOGIA
Un alumno por equipo comerá normalmente evitando la ingestión de jugos ácidos o carnes
o Proteínas después hará lo que se le indica a continuación:

1. Tomar una hora antes de la practica 500 ml de agua (vaciar la vejiga y descartar esa
orina).

2. Volver a tomar 500 ml de agua inmediatamente antes de la práctica del ejercicio.

3. Orinar en un vaso de precipitado o vaso colector de orina de 100 ml

4. Realizar ejercicio muscular intenso (como subir o bajar varias veces las gradas de 3 a 4
pisos u otro ejercicio sugerido por el profesor) durante 15 minutos exactos.

5. Un estudiante por grupo será el responsable de elaborar una tabla de resultados y

graficarlos.

6. Obtener una muestra de orina cada 15 minutos hasta completar por lo menos cuatro
muestras.

7. A cada muestra se le determinará en pH inmediatamente después de haber sido obtenida

(con el Comburt – test- tira reactiva) ya que con el tiempo el pH tiende a aumentar debido a
la perdida de dióxido de carbono y a que el crecimiento bacteriano produce amoniaco a
partir de la urea.

8. Después de obtener la muestra número tres se le dará al sujeto una solución con
bicarbonato de sodio al 3%.

9. Recoger la muestra y evaluar el resultado posterior a la ingestión de Bicarbonato.

AUTOEVALUACION

1. ¿Qué sustancia Acida o Básica se espera encontrar en el sujeto sometido a ejercicio

extremo durante 15 minutos en esta práctica:
R:_________________________________________________________________
___________________________________________________________________
2. Defina que es un Acido o una Base (según  Bronsted-Lowry):
ACIDO____________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
BASE______________________________________________________________
___________________________________________________________________
3. El mantenimiento del pH sanguíneo en esta práctica de laboratorio es llevado a cabo
a través de:
A__________________________________________________________________
B__________________________________________________________________

4. ¿Qué es un sistema TAMPON o BUFFER:

R__________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
5. Es el principal Buffer de nuestro organismo que amortiguo en esta práctica el
desequilibrio acido - básico:
R__________________________________________________________________
6. ¿Qué tipo de alteración acida - básica fue provocada posterior a un ejercicio intenso
en el sujeto que se utilizó como prueba para la presente practica:
R__________________________________________________________________

7. ¿En dónde se produce el Bióxido de Carbono o CO2 en nuestro organismo:

R__________________________________________________________________
___________________________________________________________________
8. ¿Cuál es la principal función del BICARBONATO en esta prueba de laboratorio:
R__________________________________________________________________
___________________________________________________________________
9. ¿Cómo esperaría encontrar el pH urinario en las tres primeras muestras de orina:
R__________________________________________________________________
___________________________________________________________________