PRACTICA 6.

LABORATORIO QUIMICA ANALITICA

CUANTIFICACIÓN DE HIERRO POR ESPECTROFOTOMETRÍA EN EL VISIBLE

Introducción

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración

de un compuesto en solución y se basa en que las moléculas absorben las radiaciones
electromagnéticas y a su vez la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la
concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se
puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de
luz absorbida por la misma.

Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la
que se absorben dependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH,
temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica), por lo que esta técnica constituye un valioso
instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas.

En espectrofotometría de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV cercano, de 195-
400 nm) y el visible (400-780 nm). En la región visible apreciamos el color visible de una solución y
que corresponde a las longitudes de onda de luz que transmite, no que absorbe, el color que
absorbe es el complementario del color que transmite. Por lo tanto, para realizar mediciones de
absorción es necesario utilizar la longitud de onda en la que absorbe luz la solución coloreada.

El FeCl3 no absorbe en la región del visible es por eso que se combina con el NH4SCN, los iones
tiocianato, SCN- reaccionan con los iones hierro (III), Fe -3, dando lugar al ion [Fe(SCN) 6]3- de color
rojo; el equilibrio dinámico que se establece entre los tres iones esta dado por:

Fe3+(ac) + 6SCN-(ac) ↔ [Fe(SCN)6]3-(ac)

Amarillo claro Transparente Rojo

La intensidad del color rojo nos indica, de manera cualitativa, la cantidad del ion [Fe(SCN)6]3- en la
mezcla en equilibrio.

Objetivo

El alumno determinará el espectro de absorción, elaborará la curva patrón de un analito y usará

esta información para cuantificar una muestra problema del mismo analito.
Materiales y reactivos

1 pipeta graduada de 1 mL
1 pipeta graduada de 5 mL
2 pipetas graduadas de 10 mL
12 tubos de ensayo con tapones de rosca
1 gradilla para tubos de ensayo
4 vasos de precipitados de 100 mL
1 propipeta
1 agitador de vidrio
1 piseta con agua destilada

Cálculos teóricos

150 mL de HCl 0.05 M

g = M*PM*V
g = (0.05 M)(36.458 g/mol)(0.15 L)
g = 0.273 g
ΡHCl = 1.18 g/mL; pureza 37% p/p
100 g de disolución – 37 g HCl
% p/v = (% p/p)( ΡHCl)
% p/v = (37g/g)(1.18g/mL)
% p/v =43.66 g/mL
43.66 g HCl – 100 mL disolución
0.273 g HCl – X
X = 0.626 mL de HCl

150 mL de FeCl3 0.0001 M

g = M*PM*V
g = (0.0001 mol/L)(162.2 g/mol)(0.15 L)
g = 0.0024 g de FeCl3
disolver en los 150 mL de HCl 0.05 M
25 mL de NH4SCN 0.5 M
g = M*PM*V
g = (0.5 mol/L)(76.122 g/mol)(0.025 L)
g = 0.9515 g de NH4SCN
Diagrama de método.
Preparación de Disoluciones

Determinación del Espectro de Absorción del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

Elaboración de la Curva de Calibración del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

DISOLUCION DE FeCl3 DISOLUCION DE NH4SCN
TUBO 0.0001 M (mL) 0.5 M (mL) H2O (mL)

1 0.5 0.15 4.35

2 1 0.15 3.85
3 1.5 0.15 3.35
4 2.5 0.15 2.35
5 3.5 0.15 1.35
6 4.5 0.15 0.35
7 (BLANCO) 0 0.15 4.85
Determinación de la Concentración de Fe3+ en la Disolución Problema
Resultados/discusión.
Determinación del Espectro de Absorción del Complejo Tiocianato de Fierro (III)

Con los resultados construya una gráfica de absorbancia contra longitud de onda y determine la
longitud de onda de máxima absorbancia para el complejo rojo de tiocianato de fierro (III).
Muestre a su profesor la longitud de onda seleccionada antes de continuar con la elaboración de
la curva de calibración y la cuantificación de hierro en su muestra problema.

Elaboración de la Curva de Calibración del Complejo Tiocianato de Fierro (III)

Construya una gráfica de absorbancia contra concentración molar de Fe 3+. Compruebe en que
intervalo hay linearidad, y por lo tanto, la ley de Beer se cumple. Obtenga la ecuación de la recta y
el coeficiente de correlación (R2) para ver que tan bien se ajustan sus datos a la línea recta.

Determinación de la concentración de Fe 3+ en la Disolución Problema

Obtenga la media de sus tres determinaciones de absorbancia y la desviación estándar. Con la

ecuación de la recta obtenida en el punto anterior, encuentre la concentración de FeCl 3 de su
muestra problema. Solicite a su profesor la concentración real de su muestra problema y reporte la
exactitud y la precisión de su determinación.

Cuestionario.

1. El cloruro férrico no absorbe en la región del visible, ¿qué pasa cuando se le combina con
el tiocianato de amonio? ¿Por qué se desarrolló un color rojo? ¿Cómo se llama a los
reactivos como el tiocianato de amonio que al combinarse con el analito generan un color
que puede absorber en la región del visible?

2. ¿Qué factores se deben tomar en cuenta para la determinación espectrofotométrica de

iones inorgánicos por formación de complejos?

3. ¿Cuál es la diferencia entre absortividad (a) y absortividad molar (ε)?

4. ¿Qué cuidados se deben tener con las celdas del espectrofotómetro?

Conclusiones y referencias bibliográficas.