BASES MICROBIOLÓGICAS PARA

EL DISEÑO DE BIORREACTORES
MICROBIOLOGÍA GENERAL E INDUSTRIAL
FACET - UNT / 2020
 BIOTECNOLOGIAS

• BIOTECNOLOGÍA ROJA

• BIOTECNOLOGIA VERDE

• BIOTECNOLOGIA AZUL

• BIOTECNOLOGIA BLANCA

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INGENIERÍA DE LA FERMENTACIÓN

• EL DISEÑO
• DESARROLLO
• CONSTRUCCIÓN - OPERACIÓN DE LA PLANTA
• EQUIPOS UTILIZADOS

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 OBJETIVO
• REDUCIR EL COSTO FINAL DEL PRODUCTO A
ELABORARSE

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MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL

• IDENTIFICACIÓN DE PROBLEMAS DEL PASO DE

UN PROCESO MICROBIOLÓGICO A GRAN
ESCALA
• SU SOLUCIÓN

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 PROBLEMAS
• NECESIDAD DE MANEJAR GRANDES
CANTIDADES DE MATERIALES
• ETAPAS DEL PROCESO QUE SE VEN
AFECTADAS POR EL TAMAÑO DE
OPERACIÓN

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 EL BIORREACTOR
DEFINICIÓN FUNCIONAL

• BIORREACTOR: RECIPIENTE EN EL QUE SE MANTIENE UN

AMBIENTE FAVORABLE PARA EL DESARROLLO DE DETERMINADO
PROCESO BIOLÓGICO

• "FERMENTADOR": DESIGNA, EN GENERAL A UN BIORREACTOR

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BIORREACTOR

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 EL MEDIO AMBIENTE
1. EL MEDIO QUÍMICO
 * COMPOSICIÓN DEL MEDIO DE CRECIMIENTO
 - NUTRIENTES
 - AUSENCIA DE SUSTANCIAS INHIBIDORAS O TÓXICAS
 - PH ADECUADO.
 - OXÍGENO DISUELTO
2. EL MEDIO FÍSICO
 * TEMPERATURA DEL SISTEMA
3. EL MEDIO FÍSICO-QUÍMICO
 POTENCIAL REDOX
 PRESIÓN OSMÓTICA
 DISPONIBILIDAD DE AGUA LIBRE
 PROPIEDADES REOLÓGICAS
4. EL MEDIO BIOLÓGICO
 ASEPSIA
 INOCULACIÓN
 PROPAGACIÓN Microbiología General e Industrial
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 FASES PRESENTES

• BIÓTICA
• ABIÓTICA

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 PRINCIPALES SISTEMAS DE
CULTIVOS
SISTEMAS DE CULTIVO DISPERSOS
• REACTIVOS, SUSTRATOS Y MICROORGANISMOS SE
PONEN EN CONTACTO. EL ORGANISMO SE DISPERSA
EN EL MEDIO LÍQUIDO

SISTEMAS DE CULTIVO INMOVILIZADO

• "LECHO FIJO"
• "LECHO FLUIDIZADO"

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 PRINCIPALES SISTEMAS DE
CULTIVOS
SISTEMAS DE CULTIVO INMOVILIZADO
LECHO FIJO LECHO FLUIDIZADO

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 BASES MICROBIOLÓGICAS PARA EL
DISEÑO DE UN FERMENTADOR
1. COMPLEJIDAD DE LA MEZCLA REACCIONANTE

2. INCREMENTO DE LA MASA MICROBIANA JUNTO A LA TRANSFORMACIÓN BIOQUÍMICA

3. CAPACIDAD DE LOS MICROORGANISMOS DE SINTETIZAR SUS PROPIOS CATALIZADORES

(ENZIMAS)

4. CONDICIONES SUAVES DE TEMPERATURA Y PH (NORMALMENTE)

5. DIFICULTAD DEL MANTENIMIENTO DE LA TRANSFORMACIÓN BIOQUÍMICA REQUERIDA

(ESTABILIDAD)

6. RESTRICCIÓN DE LA FASE ACUOSA

7. CONCENTRACIONES RELATIVAMENTE BAJAS DE SUSTRATO Y PRODUCTOS.

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 TRANSFERENCIA DE MASA

• NUTRIENTES
• OXÍGENO

Veloc. de transferencia  área y fuerza impulsora

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 TRANSFERENCIA DE MASA

PARA EL OXÍGENO
VTO = KL.A. ΔC
VTO = VELOCIDAD DE TRANSFERENCIA DE OXÍGENO [MOLES O2/M3.H]
KL = COEFICIENTE DE TRANSFERENCIA DE OXÍGENO [M/H]
A = SUPERFICIE ESPECÍFICA DE TRANSFERENCIA [M2/M3]
ΔC = GRADIENTE DE CONCENTRACIÓN, ENTRE INTERFASE GAS-LÍQUIDO Y EL LÍQUIDO
[MOLES O2/M3]

KLA = KV
COEFICIENTE VOLUMÉTRICO DE TRANSFERENCIA DE OXÍGENO [H-1])

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 TRANSFERENCIA DE O2 DEL GAS A LA
CÉLULA
Etapas en la transferencia de O2 del gas a la célula

III
II
Oxígeno V
I
VI
IV Etapa I: Film gaseoso
Etapa II: Interfase gas líquido
Etapa III: Film líquido
Etapa IV: Medio líquido
Etapa V: Film líquido
Etapa VI: Célula

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TRANSFERENCIA DE O2 DEL GAS A LA
CÉLULA

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EVOLUCIÓN DE X, CL, QO2X, QO2
X Biomasa
X

QO2 Consumo específico de

QO2.X

CL

QO2 Oxígeno

QO2X consumo total de

oxígeno

Tiempo
CL Concentración de
Oxígeno en el líquido

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 Coeficiente de consumo de específico de oxígeno en
función de la concentración de oxígeno disuelto
QO2

QO2 máx

Ccrít C

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 DEFINICIÓN DE KV

• El coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno, kv,

es un índice de la eficiencia de transferencia de oxígeno
de un dado dispositivo de aireación y diseño de reactor, se
mide en h-1.

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 MEDIDA DE KV

MÉTODO POR ELECTRODOS

1. MÉTODO ESTÁTICO
2. MÉTODO DINÁMICO

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 TRANSFERENCIA DE CALOR

* MANTENIMIENTO DE TEMPERATURA DE
PROCESO
* ESTERILIZACIÓN TÉRMICA.
Q=UAΔT
Q: VELOCIDAD DE TRANSFERENCIA DE CALOR [KCAL/H]
U: COEFICIENTE GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE CALOR
[KCAL/M2.H. º K]
A: SUPERFICIE DE TRANSFERENCIA [M2]
Δ T: DIFERENCIA DE TEMPERATURA [ ºK]

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 TRANSFERENCIA DE CANTIDAD DE
MOVIMIENTO
F 1 d (mv) dv
= = =
A A dt dt

 = ESFUERZO DE CORTE
F = FUERZA APLICADA
A = ÁREA
MV = CANTIDAD DE MOVIMIENTO
µL= VISCOSIDAD DEL FLUIDO

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 TRANSFERENCIA DE CANTIDAD DE
MOVIMIENTO
• HOMOGEINIZACIÓN
PARA UN BIORREACTOR:
NÚMERO DE REYNOLDS RE = N DI2  / µL

N: VELOCIDAD DE ROTACIÓN
DI: DIÁMETRO DEL AGITADOR
 : DENSIDAD DEL FLUIDO
µL : VISCOSIDAD DEL FLUIDO

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 MODOS DE OPERACIÓN

DISCONTINUO
(POR LOTES) CONTINUO

SEMICONTINUO
(LOTE ALIMENTADO) Pump

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 ESCALAMIENTO

MAGNITUDES FÍSICAS A TENER EN CUENTA:

- TEMPERATURA
- PRESIÓN DE VAPOR
- VISCOSIDAD
- TAMAÑO DE GOTA Y BURBUJAS
- TAMAÑO CELULAR Y OTRAS

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 PRINCIPIOS DE SEMEJANZA

 EL COMPORTAMIENTO DE DOS SISTEMAS SERÁ

EQUIVALENTE, SI ENTRE AMBOS EXISTE SEMEJANZA
PLENA O SIMILITUD.

 TIPOS DE SIMILITUD VÁLIDOS PARA SISTEMAS

QUÍMICOS:
 SIMILITUD GEOMÉTRICA
 SIMILITUD CINEMÁTICA
 SIMILITUD DINÁMICA
 SIMILITUDES TÉRMICAS Y QUÍMICAS

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 CRITERIOS DE SEMEJANZA
• P/V = CONSTANTE
• PG/V = CONSTANTE
• KLA = CONSTANTE
• NDI = CONSTANTE
• RE = CONSTANTE
• F/V = CONSTANTE

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 METODOS FRECUENTES EN EL CAMBIO DE
ESCALA

 AGITACIÓN POR UNIDAD DE VOLUMEN

 COEFICIENTE VOLUMÉTRICO DE TRANSFERENCIA DE MASA

 ESFUERZO DE CORTE MÁXIMO

 TIEMPO DE MEZCLADO

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 REGLAS BÁSICAS DE DISEÑO
 CORROSIÓN
 USO DE ACERO INOXIDABLE DEL TIPO CROMO-NÍQUEL CON
TRAZAS DE MOLIBDENO Y ESTABILIZADAS CON TITANIO
 RECUBRIMIENTO INTERIOR:
✓ ACERO BLANDO
✓ CAPA DE VIDRIO
✓ GOMA
✓ RESINA SINTÉTICA
✓ CAPA DELGADA DE ACERO INOXIDABLE
 UNIONES
 CUIDADO DE LAS SOLDADURAS:
➢ RESISTENCIA MECÁNICA
➢ OXIDACIÓN FAVORECE CONTAMINACIONES

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 REGLAS BÁSICAS DE DISEÑO
• VÁLVULAS:
• DEBEN RESISTIR LÍQUIDOS CALIENTES Y FRÍOS CON
SÓLIDOS EN SUSPENSIÓN Y VAPOR DE AGUA
• FERMENTACIONES NO-ASÉPTICAS
• MATERIALES MÁS BARATOS Y MÁS SÓLIDOS:
• HORMIGÓN
• LADRILLOS
• PLÁSTICO REFORZADO CON VIDRIO.
• MOVIMIENTOS DE FLUIDOS
• GRAVEDAD
• PRESIÓN CON GAS ESTÉRIL.
• PARTES MÓVILES
• DEBEN PREVERSE:
• CIERRES AL VAPOR
• ENTRADAS DE VAPOR

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 TRANSFERENCIA DE CALOR

* MANTENIMIENTO DE TEMPERATURA DE
PROCESO
* ESTERILIZACIÓN TÉRMICA.
Q=UAΔT
Q: VELOCIDAD DE TRANSFERENCIA DE CALOR [KCAL/H]
U: COEFICIENTE GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE CALOR
[KCAL/M2.H. º K]
A: SUPERFICIE DE TRANSFERENCIA [M2]
Δ T: DIFERENCIA DE TEMPERATURA [ ºK]

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 ESTERILIZACIÓN

• ESTERILIZACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO

• ESTERILIZACIÓN DEL FERMENTADOR
• ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES A SER AGREGADOS
• MANTENIMIENTO DE LAS CONDICIONES ASÉPTICAS

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 ESTERILIZACIÓN DEL AIRE

• ESTERILIZACIÓN DEL AIRE DE ENTRADA

• ESTERILIZACIÓN DEL AIRE DE SALIDA MEDIANTE INCINERADOR:

• RIESGOS DE CONTAMINACIONES ENTRE BIORREACTORES

• CONTAMINACIONES AMBIENTALES CON MICROORGANISMOS
PATÓGENOS

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 MEZCLADO
 ACELERAR Y MEJORAR EL CONTACTO ENTRE FASES

SÓLIDA (MICROORGANISMOS)
 GASEOSA (AIRE, O2, ETC)
FASE LÍQUIDA (MEDIO DE CULTIVO)

 RÁPIDO INTERCAMBIO TÉRMICO DEL SISTEMA

 CALENTAMIENTO
 ENFRIAMIENTO

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Microbiología General e Industrial
FACET - UNT
 AGITADORES ROTATIVOS

• PUNTOS DE CUIDADO
• EL MOTOR, EL REDUCTOR DE VELOCIDAD Y
LA GUÍA SUPERIOR DEBEN SER SOPORTADOS
POR LA TAPA DEL TANQUE
• SISTEMA DE ESTANQUEIDAD

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 AGITADORES DE
CORTE RADIAL Y AXIAL

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 AGITADORES DE
CORTE RADIAL Y AXIAL

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 AGITADORES DE
CORTE RADIAL Y AXIAL
• SE PUEDEN COMBINAR AMBOS EFECTOS
• AGITADOR DE CORTE RADIAL (TURBINA
RUSHTON) ALIMENTADO POR UN AGITADOR
DE CORTE AXIAL (HÉLICE A DOBLE FLUJO)
• TURBINA DE PALAS INCLINADAS.

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 BOMBAS

• BOMBAS PARA RECIRCULAR EL MEDIO LÍQUIDO

• FERMENTADORES DE BUCLE

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 FERMENTADORES AGITADOS

• CON AGITACIÓN MECÁNICA

• SIN CIRCULACIÓN INTERNA
• CON CIRCULACIÓN INTERNA
• CON AGITACIÓN NEUMÁTICA
• SIN CIRCULACIÓN (COLUMNA DE BURBUJAS)
• CON CIRCULACIÓN (AIR-LIFT):
• CIRCULACIÓN INTERNA
• CIRCULACIÓN EXTERNA

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 BIORREACTOR
CON AGITACIÓN
MECÁNICA

• SIN CIRCULACIÓN INTERNA

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 BIORREACTOR
CON AGITACIÓN
MECÁNICA

• SIN CIRCULACIÓN INTERNA

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 BIORREACTORES CON AGITACIÓN
MECÁNICA
SIN CIRCULACIÓN INTERNA:
TIPO CLÁSICO 100 M3
AGITACIÓN (TIPO PORTON) CON TRES
TURBINAS DE AGITACIÓN (TIPO RUSHTON) Y
UNA PALETA ROMPE ESPUMA.
REGULACIÓN DE TEMPERATURA CON
SERPENTÍN INTERIOR O POR MEDIO DE CAMISA
ROMPE CORRIENTES PARA EVITAR VÓRTICE.

APTO PARA PRODUCCIÓN DE ANTIBIÓTICOS

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BIORREACTORES CON AGITACIÓN
MECÁNICA
• CON CIRCULACIÓN INTERNA

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BIORREACTORES CON AGITACIÓN
MECÁNICA
CON CIRCULACIÓN INTERNA:
PARA PROCESOS MICROBIOLÓGICOS CON
GRAN DEMANDA EN O2
PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR O BIOMASA
MICROBIANA
FERMENTADOR CLÁSICO TIPO PORTON, ADICIONANDO UN
CILINDRO INTERIOR ARRIBA DEL AIREADOR
FERMENTADOR WALDHOF PARA PRODUCCIÓN DE LEVADURA
FERMENTADOR CHEMAPEC APTO PARA PRODUCCIÓN DE
BIOMASA, FERMENTACIÓN ACÉTICA
TURBINA EFFIGAS NO DISPERSA ENERGÍA: RELACIÓN P/V ES
MÁS ELEVADA

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BIORREACTORES CON AGITACIÓN
NEUMÁTICA
SIN CIRCULACIÓN (COLUMNA DE BURBUJAS)

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BIORREACTORES CON AGITACIÓN
NEUMÁTICA
BIORREACTORES SIN DISPOSITIVOS DE AGITACIÓN
MECÁNICA, PROVOCANDO LA AGITACIÓN CON LA
INTRODUCCIÓN DE AIRE COMPRIMIDO
SIN CIRCULACIÓN (COLUMNA DE BURBUJAS)
 FERMENTACIONES QUE NO NECESITAN UNA
TRANSFERENCIA DE 02 IMPORTANTE.
 TIPO COLUMNA
 APTO PARA BACTERIAS U HONGOS FILAMENTOSOS Y
CULTIVO DE TEJIDOS POR SER SENSIBLES AL CORTE.

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 BIORREACTORES CON
AGITACIÓN NEUMÁTICA
AIR LIFT

“Keys to bio reactor selection”, John A. Williams, PhD, P.E., EPS: Environmental & Production Solutions, LLC.

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 BIORREACTORES CON AGITACIÓN NEUMÁTICA

• CON CIRCULACIÓN (AIR-LIFT)

• CON CIRCULACIÓN INTERNA
• TIPO LEFRANÇOIS DE TRES TIPOS
• UN CILINDRO EN EL INTERIOR DE LA CUBA, DELIMITA DOS ZONAS

• RREDUCE ZONAS MUERTAS

• PRODUCCIÓN DE BIOMASA A PARTIR DE MELAZAS, SUERO DE LECHE O HIDROCARBUROS.
• I.C.I. (IMPERIAL CHEMICAL INDUSTRIES) CREÓ UN BIORREACTOR AIR-LIFT DE CIRCULACIÓN INTERNA PARA
PRODUCCIÓN DE BIOMASA BACTERIANA A PARTIR DE METANOL.

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BIORREACTORES CON AGITACIÓN NEUMÁTICA

AIR LIFT Con

circulación
interna

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 BIORREACTORES CON AGITACIÓN NEUMÁTICA

• CON CIRCULACIÓN (AIR-LIFT)

• CON CIRCULACIÓN EXTERNA
• LA CIRCULACIÓN DEL FLUIDO NO SE REALIZA EN EL MISMO REACTOR, SINO EN COLUMNAS
SEPARADAS. EN LA COLUMNA ASCENDENTE SE PRODUCE LA OXIGENACIÓN Y UNA SEGUNDA
OXIGENACIÓN SE REALIZA EN LA COLUMNA DESCENDENTE

• DISEÑADO POR I.C.I. PARA EL CULTIVO CONTINUO DE BACTERIAS USANDO METANOL COMO
SUSTRATO.

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BIORREACTORES DE AGITACIÓN MECÁNICA
Y NEUMÁTICA: COMPARACIÓN
AGITACIÓN MECÁNICA
(TANQUE AGITADO)
Mecánicamente complejos
Altas fuerzas de cortes
Turbulencia: irregular distribución
Difíciles de limpiar
Versátiles
AGITACIÓN NEUMÁTICA
(AIR LIFT, COLUMNA DE BURBUJEO)
Mecánicamente simple
Bajas fuerzas de corte
Distribución uniforme de la
turbulencia
Fácil limpieza
Limitada flexibilidad
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 BIORREACTORES CON AGITACIÓN POR BOMBA Y
RECIRCULACIÓN
• FERMENTADORES JET (JET LOOP REACTORS)

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 BIBLIOGRAFIA
• Atkinson, B. Reactores bioquímicos. Editorial Reverté. 1996
• Blanck, HW & Clark, DS. Biochemical Engineering. CRC Press.
1997
• Doran, PM. Principios de ingeniería de los bioprocesos.
ACRIBIA EDITORIAL.1998
• Leveau, J-I & Bouix, M. BIOTECHNOLOGIE. SCRIBAN, René;
Editorial Technique et Documentation (Lavoisier). 1984.
• Stanbury, PF & Whitaker, A. PRINCIPLES OF FERMENTATION
TECHNOLOGY; Ed. Pergamon Press. 1984.
• Wiseman, A. PRINCIPIOS DE BIOTECNOLOGIA. Ed. ACRIBIA
SA, Zaragoza, España, 1986.

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