PRODUCCIÓN

DE ENZIMAS
DE INTERÉS
INDUSTRIAL
PRODUCCIÓN
PRODUCCIÓN
PRODUCCIÓN
MEDIO DE CULTIVO
PRODUCCIÓN
PRODUCCIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
RECUPERACIÓN
PURIFICACIÓN
PURIFICACIÓN
PURIFICACIÓN
 Método de purificación. Separación de proteínas basándonos en
características físicas (masa, tamaño), químicas (pH, solubilidad,
comportamiento frente al agua) y estructurales (centro activo de la
enzima)

La centrifugación utiliza la fuerza de

gravedad para separar los diferentes
componentes del homogeneizado
(restos de tejido u organelos),
basándose en su tamaño, forma y
densidad. Después de la centrifugación,
algunas de las partículas más pesadas,
que normalmente permanecían en
suspensión, sedimentan.
https://www.youtube.com/watch?v=OaMsuLm9CeQ
ACABADO
ACABADO
ACABADO
La precipitación de proteínas es obtenida por la adición de sales,
inducida por el cambio de pH o potencial iónico, o por adición de
solventes -ya sean orgánicos, inertes o polímeros-. Los precipitados
pueden ser recuperados por filtración o centrifugación, por lavado o
por resuspensión en un buffer adecuado (Harris y Angal, 1995).
En la ultrafiltración, el agua y otras pequeñas moléculas son pasadas a través de
una membrana semi-permeable mediante una fuerza transmembranal tal como
la centrifugación o las altas presiones (Harris y Angal, 1995). La superficie de estas
membranas contienen poros de diámetros lo suficientemente pequeños como
para distinguir los tamaños y formas de las moléculas disueltas; aquellas por
encima de un rango de tamaño determinado son retenidas, mientras que aquellas
por debajo de dicho rango pasan a través de la membrana junto con el flujo de
solvente permeado (Schratter, 1996).
 Para el desarrollo de un sistema inmovilizado se requiere de cuatro
elementos básicos: 1. La enzima 2. El soporte 3. La técnica de
inmovilización 4. El reactor La elección específica de cada elemento está
condicionada por la naturaleza de la enzima, la aplicación que tendrá el
sistema, la facilidad de recuperación de la enzima y el costo de la misma.

SOPORTES. Estos materiales difieren en tamaño, densidad, porosidad y forma;

generalmente se encuentran en forma de cilindros, hojas, fibras o como esferas. Los
soportes pueden clasificarse en dos grandes grupos: •

a. Soportes orgánicos. Generalmente tienen más sitios de enlace por gramo, pero con
frecuencia no poseen propiedades deseables de fluidez, y son a menudo afectados
excesivamente por factores ambientales como pH o deterioro por microorganismos.
Entre los soportes orgánicos más utilizados se encuentran: Los
polímeros naturales, como los polisacáridos (tales como la celulosa,
almidón, dextranos, agarosa, agar− agar, alginatos, quitina y
quitosán); y proteínas fibrosas (como el colágeno y la queratina). Y los
polímeros sintéticos como las poliolefinas (poliestirenos), polímeros
acrílicos (poliacrilatos, poliacrilamidas y polimetacrilatos) y otros
polímeros como los basados en el anhídrido maleico, poliamidas y
polímeros alílicos y vinílicos.
b. Soportes inorgánicos. Estos son más estables aunque generalmente
tienen menos sitios de enlace que los soportes orgánicos. Los soportes
inorgánicos con frecuencia tienen mejores propiedades de flujo y
algunos son bastante económicos.

Dentro de este grupo tenemos una gran variedad de soportes, que

pueden ser naturales (arcillas como la bentonita, piedra pómez, arena,
rocas, tierras diatomeas y sílice) o materiales manufacturados (pantallas
de níquel, bolas de acero inoxidable, titanio, óxidos de metales, vidrio
de tamaño de poro controlado, vidrio no poroso, cerámicas y gel de
sílice). Los soportes porosos ofrecen una mayor área de superficie pero
presentan más problemas de difusión en un reactor.
 VENTAJAS

• Mejora de la estabilidad de la enzima frente al pH, temperatura,

disolventes, contaminantes e impurezas.
• La posible reutilización del derivado, por lo que disminuyen los costes
del proceso.
• La capacidad de detener rápidamente la reacción mediante la
eliminación de la enzima a partir de la solución de reacción (o
viceversa)
• El producto no está contaminado con la enzima
• Fácil separación de la enzima a partir del producto (especialmente útil
en la industria alimentaria y farmacéutica).
 DESVENTAJAS

• La gran heterogeneidad del sistema enzima-soporte donde

pueden existir distintas fracciones de proteínas inmovilizadas
con un diferente número de uniones al soporte.
• Siempre suele haber una pérdida de actividad de la enzima
durante la movilización.
• El biocatalizador es más caro que la enzima nativa
 USOS Y APLICACIONES DE LA
INMOVILIZACIÓN DE ENZIMAS

La inmovilización de enzimas permite una mejora significativa de su

estabilidad, lo que hace posible su empleo en la producción
industrial de productos químicos, farmacéuticos, alimentos; en el
tratamiento de residuos; en el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades, y otras muchas aplicaciones (Arroyo, 1998). Las
aplicaciones más importantes de las enzimas inmovilizadas se
pueden clasificar en tres partes: como sensor analítico, en el campo
de la medicina y en el sector industrial.
Enzimas inmovilizadas por un propósito clínico (Pastor y col., 2013)
Enzimas inmovilizadas Industria alimentaria
Proceso para la obtención de jarabes de alta fructosa a partir de almidón de
maíz utilizando glucosa isomerasa inmovilizada como catalizador. Adaptado
de Renneberg R. (2008).
CONCLUSIONES…
 WEBGRAFÍA

CINETICA DE LAS REACCIONES DE HIDRÓLISIS CON LAS ENZIMAS

INMOVILIZADAS. Disponible en
http://webs.ucm.es/BUCM/tesis/19972000/X/0/X0043802.pdf

ELABORACION DE UN PREPARADO A BASE DE ENZIMAS

INMOVILIZADAS POR ATRAPAMIENTO EN GEL DE AGAR, PAR A EL
TRATAMIENTO DE DESECHOS ORGANICOS PRESENTES EN AGUAS
RESIDUALES. Disponible en
http://ri.ues.edu.sv/id/eprint/6058/1/10102929.pdf

EVALUACIÓN DE MÉTODOS DE EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE

ENZIMAS. Disponible en
https://repository.eafit.edu.co/bitstream/handle/10784/373/Vict
orRene_RojasMu%C3%B1oz_2009.pdf?sequence=1&isAllowed=y
 WEBGRAFÍA

https://www.ucm.es/otri/complutransfer-biotecnologia-enzimatica-y-
biotransformaciones-de-interes-industrial

https://slideplayer.es/slide/4972489/

http://www.revista.unam.mx/vol.15/num12/art96/