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Facultad de Bioanálisis, Veracruz.

Manual de Procedimientos de Laboratorio

UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE BIOANALISIS

REGION VERACRUZ

MANUAL DE TOXICOLOGÍA APLICADA

ELABORÓ:
M EN E. MARIBEL JIMENEZ BERMUDEZ

VERACRUZ, VER AGOSTO DEL 2018

TOXICOLOGIA 0
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INDICE
Pag.

INTRODUCION 2

REGLAS DEL LABORATORIO 4

MATERIAL REQUERIDO PARA EL LABORATORIO DE TOXICOLOGIA 6

MATERIAL QUE DEBE TENER EN SU GAVETA. 7

PRACTICA 1 Manejo de RPBI en el area ocupacional 8

PRACTICA 2 Manejo de Residuos Químicos en el area ocupacional 12

PRACTICA 3 Determinación de Metales pesados (Hg, Bi, Sb y As) en 18


Hígado

PRACTICA 4 Determinación de Metales pesados (Hg, Bi, Sb y As) en 22


Orina

PRACTICA 5 Determinación de Mercurio en medio Ambiente 27


PRACTICA 6 Analisis de contaminantes en agua de consumo.
31

PRACTICA 7 Correlación clinica del punteado basófilo en intoxicación por


plomo y otros metales pesados. 36

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INTRODUCCIÓN

El trabajador contemporáneo se encuentra sometido hoy, por concepto de su


actividad laboral diaria, a una amplia variedad de factores y procesos potencialmente
lesivos para su salud. Estos factores y procesos de traba- jo difieren sustancialmente
en cuanto a su naturaleza y magnitud.

Todos estos factores y procesos concomitan e interactúan necesariamente sobre el


organismo del trabajador, teniendo en cuenta su permanencia en el entorno laboral
durante la jornada diaria y durante toda su vida de trabajo. 
En particular, la
contaminación del ambiente ocupacional por sustancias químicas se produce en los
procesos de trabajo como consecuencia directa o indirecta de la manipulación,
empleo, transportación y(o) almacenamiento de materiales y productos que generan
o dispersan gases, vapores y(o) partículas sólidas o liquidas en el aire. El contacto
del hombre con estas sustancias químicas posibilita su entrada al organismo por
diferentes vías, provocándole o no, de acuerdo con la dosis absorbida, enfermedades
u otras alteraciones en su estado de salud. 
Las enfermedades y demás eventos de
salud producidos específicamente por las sustancias químicas en el trabajador,
determinaron históricamente la necesidad de estudiar sistemáticamente los agentes
etiológicos correspondientes, sus propiedades y mecanismos de acción en el
organismo, y el control y la prevención imprescindibles de su presencia en el
ambiente laboral. La diversidad de sustancias quimiotóxicas y los diferentes estados
de agregación en que se manifiestan en el aire, así como los efectos diversos que
producen en el hombre que trabaja y se expone a los factores de riesgo, han
propiciado la aparición y desarrollo de toda una serie de disciplinas que hoy
confluyen, se complementan e integran en una especialidad mucho más amplia y
abarcadora que se ocupa de la atención no sólo a la salud y seguridad de los

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trabajadores, sino también al propio ambiente en que éstos se desenvuelven. 


Por una parte, la Toxicología en Salud ocupacional tiene como objetivo central el
estudio de los agentes químicos que pueden causar alteraciones biológicas al
trabajador por su exposición durante la actividad laboral. Aunque pudiera
considerarse parte de la Toxicología ambiental, la Toxicología en Salud ocupacional
ha logra do ser una rama particular por las características de las tecnologías y las
exigencias de los trabajadores en la protección de su salud. Es indudable que los
trabajadores se encuentran expuestos con mayor frecuencia que la población general
a factores de riesgo que pueden afectar su salud, y éstos, al tomar conciencia de
estos fenómenos, han exigido respuestas que necesitan de investigaciones en este
campo. El contenido de esta rama es de gran interés para trabajo higiénico sanitario
diario, estando muy vinculada a los aspectos generales de la Higiene Industrial y de
la Medicina del Trabajo.

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REGLAS DE LABORATORIO

No se permitirá la entrada al laboratorio al alumno que llegue 10 min. Después


de la hora de entrada.
Las prácticas se iniciarán y se pasará lista a la hora indicada en los horarios,
con una tolerancia de 10 min. a la entrada; no habrá retardos y se pondrá falta
a quien no llegue a la hora
El alumno que falte a una sesión de laboratorio tendrá una calificación de cero
en la práctica correspondiente.
Durante el desarrollo de la práctica, queda estrictamente prohibida la estancia
en el laboratorio de personas ajenas al grupo.
Es obligatorio usar bata blanca en todas las sesiones.
Todos los objetos personales deben de quitarse de la mesa de trabajo.
El alumno deberá estar provisto del material personal y del material biológico
indicado de lo contrario no podrá permanecer en el laboratorio.
El alumno deberá traer su diagrama a cada sesión de laboratorio que asista.
El alumno deberá realizar el 100% de las prácticas establecidas para este
semestre
Al final de la práctica deberá presentar una bitácora de la práctica, los no
entregados en esta fecha serán evaluada como práctica no realizada.
A los ocho días de realizada la práctica deberá entregar su reporte en limpio, si
por algún motivo no es entregada en esta fecha, solo se recibirá a los ocho
días siguientes con la consecuente disminución en la calificación.
Queda estrictamente prohibido comer, beber, fumar y en general llevarse las
cosas a la boca dentro del laboratorio.
El material de vidrio que usará durante la práctica deberá estar limpio y seco.

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Todo el material no contaminado tal como: Algodón, papeles, cerillos etc.,


deben de ser depositados en el bote de basura. No se debe tirar la basura en
el suelo ni en el lavadero
Limpiar las mesas al terminar las prácticas.
El material contaminado (Pipetas, tubos de ensaye, placas de vidrio, puntas de
pipetas, etc.) deberán depositarse en un recipiente que contenga agua con
hipoclorito de sodio en una solución 6%, y enjuagar con agua destilada.
Las muestras biológicas deberán colocarse en recipiente adecuado de RPBI.
Si durante la práctica se emplean orinas, tirarlas directamente en los baños.
Lavarse las manos inmediatamente en caso de una probable contaminación.

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MATERIAL REQUERIDO PARA EL LABORATORIO DE TOXICOLOGIA


QUE SE PIDE AL LABORATORIO
(Material por equipo de 2 personas )

10 Tubos de ensaye 13 x 100

10 Tubos de ensaye 15 x 150

2 Pipetas pasteur

2 Pipetas graduadas de 10 ml

1 Gradilla

1 Vaso de precipitado 250 ml

1 Mortero con Pistilo

8 Alambre de cobre

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QUE DEBE TENER EN LA GAVETA

Tijeras

Jabón de manos

Detergente

Toalla

Franela

Guantes desechables

Rollo de papel absorbente

Cloro de uso casero

Gasas

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PRACTICA 1
MANEJO DE RPBI EN AREA OCUPACIONAL
1.- INTRODUCCIÓN

Residuos tóxicos biológicos e infecciosos, se aplica a aquellos materiales sólidos,


líquidos biológicos que representan un riesgo para la salud humana, según la Norma
oficial mexicana NOM-052- SEMARNAT-1993, establece las características de los
residuos peligrosos el listado de los mismos y los límites que hacen a un residuo
peligroso por su toxicidad a al ambiente. El código CRETIB es el código de la
clasificación de las características que contienen los residuos peligrosos y que
significa C de corrosivo, R de reactivo, E de explosivo, T de toxico, I de inflamable, B
de biológico infecciosos. Según la NORMA mencionada, la mezcla de un residuo
peligroso con un residuo no peligroso será considerado residuo peligroso. En la
realización de las prácticas del laboratorio, se generan RPBI por lo que es importante
conocer y aplicar las normas oficiales mexicanas en especial la Nom 087- Ecol 2002.
Para el manejo de los RPBI se deberán utilizar los implementos de protección
personal e identificar los sitios designados en el laboratorio para depositarlos. El
depósito y envasado de RPBI se realizará llenando los recipientes hasta las ¾ partes
de su capacidad. Los depósitos se etiquetarán con la leyenda peligro: residuo
peligroso (sólido o líquido) biológico infeccioso. El área de depósito se encuentra
previamente señalado en el laboratorio por el símbolo universal que lo identifica y
todos los recipientes que contiene RPBI deben ser colocados en estos sitios. El
personal responsable del manejo de los RPBI de acuerdo con la norma NOM – 087
Ecol 1993, también es responsable de la recolección y transporte al almacén general
de almacenamiento y entrega a la empresa tratadora, registro y elaboración de
bitácoras y reportes, disposición y tratamiento interno y externo, así como su
capacitación y monitoreo.

2.- OBJETIVOS
2.1.- El alumno comparará la Higiene y Seguridad Ocupacional de un establecimiento
de salud y uno de Servicio Público.
2.2.- Se capacitará al alumno para que conozca el material y equipos para los
desechos de RPBI
2.3.-El alumno Identificará las normas de Higiene y Seguridad Ocupacional en toma
de muestras.

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3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN


3.1.- El laboratorio es el lugar en el que se desempeñan actividades de
experimentación, análisis, síntesis, destinadas a un fin determinado; en el caso
particular de Toxicología Aplicada.
Para el establecimiento del laboratorio deben tomarse en consideración lo
siguiente:
• Higiene y Seguridad Ocupacional de un establecimiento de salud y uno de
Servicio Público.
• Material y equipos para los desechos de RPBI.
• Normas de Higiene y Seguridad Ocupacional en toma de muestras.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
No requeridos.

4.2 Equipos de Laboratorio


4.2.1 Para su almacenamiento.
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Refrigerador
2 1 Congelador

4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1 Material de RPBI

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN COLOR


1 1 Recipiente Hermético Rojo
2 1 Bolsa de plástico Rojo
3 1 Bolsa de plástico Rojo
4 1 Bolsa de plástico Amarillo
5 1 Bolsa de plástico Amarillo
6 1 Recipiente Rígido Rojo

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5.-TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
5.1.1. Investigar la NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-1995, Que establece
los requisitos para la separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte,
tratamiento y disposición final de los residuos peligrosos biológico-infecciosos que se
generan en establecimientos que presten atención médica.

5.1.2. Investigar la aplicación de la NOM 087 ECOL 1995 en un establecimiento de


salud y uno de Servicio Público.
5.1.3 conocer el material y equipos para los desechos de RPBI que se utilizan en el
laboratorio ocupacional
5.1.4 Analizar las normas de Higiene y Seguridad Ocupacional utilizadas en toma de
muestras.
5.1.5. Observar la aplicación de material de RPBI en toma de muestra

5.2 Reporte de resultados


5.2.1 Resultado:
5.2.1.- El alumno realizará una tabla comparativa de Higiene y Seguridad
Ocupacional de un establecimiento de salud y uno de Servicio Público.
5.2.2.- Se realizará una investigación sobre la aplicación de la norma para los
desechos de RPBI
5.2.3.-Se realizará una investigación sobre las normas de Higiene y Seguridad
Ocupacional en toma de muestras.

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


6.1. La bibliografía debe ser clara y completa para confirmar la investigación.
No requiere
7.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)
7.1. La certificación del lugar ocupacional de que se trate.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1 El analista puede ser un alumno de química clínica supervisado por el docente
ó el técnico académico.

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9.- REFERENCIAS

9.1 http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html
9.2 Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales. Norma Oficial Mexicana
NOM-087-ECOL-SSA1-2002.

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PRACTICA 2

Manejo de Residuos Químicos en el área ocupacional.

1.- INTRODUCCIÓN

Los residuos peligrosos, en cualquier estado físico, por sus características corrosivas,
reactivas, explosivas, inflamables, tóxicas, y biológico-infecciosas, y por su forma de manejo
pueden representar un riesgo para el equilibrio ecológico, el ambiente y la salud de la
población en general, por lo que es necesario determinar los criterios, procedimientos,
características y listados que los identifiquen.

Los avances científicos y tecnológicos y la experiencia internacional sobre la caracterización


de los residuos peligrosos han permitido definir como constituyentes tóxicos ambientales,
agudos y crónicos a aquellas sustancias químicas que son capaces de producir efectos
adversos a la salud o al ambiente.
El código CRETIB hace referencia a las características que hacen que un residuo sea
considerado peligroso; el cumplimiento de una o más de esta convierte en peligroso a un
residuo; así mismo, residuos no peligrosos mezclados con residuos peligrosos son
contaminados y se convierten en peligrosos.
En México la norma NOM-052-SEMARNAT-1993 define CRETIB como:
"El código de clasificación de características que contienen los residuos peligrosos y que
significan: corrosivo, reactivo, explosivo, tóxico, inflamable y biológicos infeccioso"
El nombre correcto de la norma es CRETIB, pero también se usa CRETIP (la P es por
patógeno, el cual es considerado sinónimo de biológico) se usa informalmente por
conocedores del área para definir un residuo peligroso bajo un acrónimo sencillo.
De acuerdo a la NOM-052-SEMARNAT-2005, un material puede presentar una o varias
características que están definidas por el código CRETIB el cual significa:

• C : corrosivo, Capacidad de un compuesto de disolver a otro. Se indica por el pH y se


identifica como una característica dentro .

• R : reactivo, Característica para los residuos peligrosos, porque residuos inestables


pueden poseer un problema explosivo en alguna etapa dentro del ciclo de manejo de
residuos.

• E : explosivo, Capacidad de las sustancias químicas que provocan una liberación


instantánea de presión, gas y calor a temperatura, ocasionado por un choque repentino,
presión o alta temperatura. De otra forma son aquellas que producen una expansión
repentina, por turbulencia, originada por la ignición de cierto volumen de vapor

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inflamable, acompañado por ruido, junto con fuerzas físicas violentas capaces de dañar
seriamente las estructuras por la expansión rápida de los gases.

• T : tóxico, Capacidad de una sustancia para producir daños en los tejidos vivos, lesiones
en el sistema nervioso central, enfermedad grave o en casos extremos la muerte, cuando
se ingiere, inhala o se absorbe a través de la piel.
a) Te: Toxicidad Ambiental
La característica de una sustancia o mezcla de sustancias que ocasiona un desequilibrio
ecológico.
b) Th: Toxicidad aguda
El grado en el cual una sustancia o mezcla de sustancias puede provocar, en un corto
periodo de tiempo o en una sola exposición, daños o la muerte de un organismo.
c) Tt: Toxicidad Crónica
Es la propiedad de una sustancia o mezcla de sustancias de causar efectos dañinos a largo
plazo en los organismos, generalmente a partir de exposiciones continuas o repetidas y que
son capaces de producir efectos cancerígenos, teratogénicos o mutagénicos.

• I : inflamable, es la medida de la facilidad que presenta un gas, líquido o sólido para


encenderse y de la rapidez con que, una vez encendido, se diseminarán sus llamas.
Cuanto más rápida sea la ignición, más inflamable será el material. Los líquidos
inflamables no lo son por sí mismos, sino que lo son debido a que su vapor es
combustible.

• B : Biológico-Infeccioso, Un residuo es biológico- infeccioso cuando: el residuo contiene


bacterias, virus u otros microrganismos con capacidad de infección; contiene toxinas
producidas por microrganismos con capacidad de infección.
Cada una de las anteriores propiedades cuenta con pruebas específicas a nivel laboratorio,
a condiciones estándar, que permiten verificar las propiedades de la sustancia a analizar.

2.- OBJETIVOS
2.1. . El alumno reconoce la Norma Oficial Mexicana 052-SEMARNAT 2005 para aplicarla
en higiene y seguridad ocupacional.
2.2. El alumno identificar si un residuo es peligroso, el cual incluye los listados de los
residuos peligrosos y las características que hacen que se consideren como tales.
2.3. Que el alumno conozca los riesgos en a los que se encuentra expuesto dentro de un
laboratorio clínico y la manera de cómo se puede manipular, usar y almacenar el material
con seguridad.

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3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN


3.1. El alumno identifica la NOM-052-SEMARNAT- 2005 por medio de una presentación.
3.2. El alumno con los conocimientos adquiridos realizará una actividad de clasificación de
los residuos en una tabla en base a CRETIB.
3.3. El alumno recibe el nombre de algunos reactivos, los cuales identifica para
posteriormente decida cuál va a ser clasificación (de acuerdo a su incompatibilidad)
para ponerlo en su destino final.
3.4. El alumno se involucra en el almacén de reactivos de la facultad para observar su
clasificación de almacenaje de los reactivos que se utilizan en el programa de Química
Clínica.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
• Ácidos fuertes
• Bases fuertes
• Fenol
• Bromo
• Destapacaños
• Baterías de plomo ácido
• Baterías Alcalinas
• Residuos de detergentes, jabones y
agentes dispersantes, surfactantes,
desengrasantes en general.

Ø Nitratos
Ø Metales alcalinos
Ø Metil isicianato
Ø Magnesio
Ø Cloruro de acetileno

v Peróxidos
v Cloratos
v Percloratos
v Ácido pícrico
v Trinitrololueno (TNT)
v Cianuros
v Arsénicos y sales
v Plomo
v Anilina
v plaguisidas

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v Lámparas fluorescentes y de vapor


de mercurio
v Liquido revelador
v Aceites lubricantes Usados
v Baterías de plomo ácido
v Baterías Alcalinas
v Textiles Impregnados hidrocarburos
v Envases impregnados , pintura seca,
solventes, hidrocarburos
v Lodos con hidrocarburos
v Tambos y contenedores con
residuos de tintes y colorantes
v Residuos de detergentes, jabones y
agentes dispersantes, surfactantes,
desengrasantes en general.

Hidrocarburos aromáticos
Alcoholes
Aldehídos
Cetonas
Aceites lubricantes Usados
Envases impregnados , pintura seca,
solventes, hidrocarburos

­ Sangre
­ Muestra biológica (orina,
excremento)
­ Jeringas
­ Tejidos, órganos y partes que se
extirpan o remueven
­ Residuos no anatómicos
­ Objetos Punzo cortantes

4.2 Equipos de Laboratorio

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN


Gabinetes
Refrigeradores
Climas
Extractores

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4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1 Material: Carpetas de hoja de seguridad

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO


No se requiere
5.3.-Preparación del sistema de Medición
No se requiere

5.4.-Uso del sistema del equipo.


Num. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Cubre bocas
2 1 Gafas

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS


6.1 Calculo de Resultados
No requiere
6.2 Reporte de resultados

6.2.1 . Realizar una tabla de clasificación de residuos en base a CRETIB.


6.2.2 . Realizar una tabla de incompatibilidad de desechos químicos.
6.2.3 . Anotar observaciones del almacén de reactivos del programa de Química Clínica.

7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


7.1 Basada en el uso y aplicación de la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-052-
SEMARNAT-2005, que establece las características, el procedimiento de identificación,
clasificación y los listados de los residuos peligrosos.

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8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)


8.1. Certificación del almacén de reactivos de la Licenciatura en Química Clínica.

9.- PRACTICABILIDAD

9.1 El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el


técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-052-SEMARNAT-2005, QUE ESTABLECE LAS


CARACTERÍSTICAS, EL PROCEDIMIENTO DE IDENTIFICACIÓN, CLASIFICACIÓN
Y LOS LISTADOS DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS.

Anexos

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PRACTICA 3
Determinación de Metales Pesados (Hg, Bi, Sb y As) en
hígado

1.- INTRODUCCIÓN
El término “metal pesado” suele referirse a metales cuyo peso específico es superior
a 5 g.cm-3 y que tiene un número atómico por encima de 20. No obstante, no todos
los elementos que tienen esas características tienen análogas funciones biológicas.
Debido a las pequeñas cantidades que se manejan se denominan, a veces,
“elementos traza” o “metales traza” y se incluye el aluminio que no se puede calificar
de metal pesado.
Estos metales pueden jugar un papel importante en el metabolismo normal o bien
pueden ser tóxicos aún en concentraciones bajas, como el cadmio, plomo, mercurio,
arsénico, berilio y bario. La toxicidad depende de la dosis que se ingiera, así como la
cantidad excretada. Debe tenerse presente que la forma metálica o elemental no
suele ser la más tóxica, sino la forma iónica (sales).
En el humano las tres principales vías entradas al cuerpo son: la inhalatoria ya sea en
forma de partículas (gas o vapor) en forma elemental o como combinaciones
inorgánicas u orgánicas, la dérmica a través de la piel y la oral cuando se ingiere
bebidas o alimentos contaminados.

2.- OBJETIVOS
2.1. El alumno comprenderá la importancia de la determinación de los metales
pesados
2.2. El alumno aprenderá a realizar y a interpretar los resultados

3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN



3.1.- Esta prueba se basa en la reacción de Reinsh, ya que el cobre metálico en
presencia de ácido reduce al arsénico a la forma elemental. El arsénico se deposita
en el cobre como una película obscura visible

HCl
3Cu0 + 2As 3 3Cu2 + 2As0

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
1. Ácido Clorhídrico concentrado (HCl)

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2. Cianuro de potasio al 10% (tóxico para el organismo no pipetear con la boca)


3. Sulfito sódico al 5% (NaSO3)
4. Reactivo de Bismuto (Preparación: 1 gr de sulfato de quinina en 100 ml de
ácido nítrico al 0.5% y 2 gr de yoduro potásico)

4.2 Equipos de Laboratorio


4.2.1
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
Parrilla eléctrica o evaporador

4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1 Material:

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN


1 1 Gradilla
2 4 Matraces Erlenmeyer con tapones
3 6 Tubos de ensaye de 15 x 150 mm
4 6 Hoja de cobre de 5 x 10 mm o
alambre de cobre (espiral)
5 1 Cuba hidroneumática
6 1 Mortero con pistilo
7 2 Tapones para tubo de ensaye
8 2 Pinzas pata tubo de ensaye
9 1 Varilla de vidrio
10 1 Pipeta de 5 ml

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
5.1.1 Orina
5.1.2 Hígado o Riñón Macerado

5.2 Muestreo
5.2.2 Solicitar al alumno una muestra de hígado de pollo y de orina

5.3.-Preparación del sistema de Medición


5.3. No requerido

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5.4.-Uso del sistema del equipo.


5.4.5No Requerido

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS


Hg
• Colocar 10 ml de riñón o hígado macerado en un tubode 15 x 150 mm.
• Se añade 2 ml de ácido clorhídrico concentrado.
• Adaptar un alambre de cobre.
• Tapar el matraz y calentar suavemente por una hora aproximadamente, se
debe evitar la ebullición para impedir la evaporación demasiado rápida.
• Si hay elevadas cantidades de Hg tendrá lugar en menos de una hora
depósitos plateados muy evidentes
As
• Colocar 10 ml de riñón o hígado macerado en un tubode 15 x 150 mm.
• Agregar 15 gotas de cianuro de potasio al 10%.
• Adaptar un alambre de cobre.
• Se observa un negro deslustrado
Bi
• Colocar 10 ml de riñón o hígado macerado en un tubode 15 x 150 mm
• Añadir 15 gotas de sulfito sódico al 5% y 1 ml de ácido nítrico al 15%.
• Adaptar un alambre de cobre.
• Tapar el matraz y calentar suavemente por una hora aproximadamente, se
debe evitar la ebullición para impedir la evaporación demasiado rápida.
• OJO: si hay bismuto el alambre permanece igual, el arsenico y antiminio no se
disuelven.
• A la solución disuelta (Presencia de bismuto) añadir 1 ml de agua destilada y
continuar con el procedimiento para determinación de Bismuto.

6.1 Calculo de Resultados


No requeridos

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6.2 Reporte de resultados

METAL PESADO ASPECTO DEL COBRE SENSIBILIDAD DE LA


PRUEBA

Mercurio Deposito color plata brillante 0.05 mg/ 10 ml

Arsénico Deposito negro deslustrado 0.01 mg/ 10 ml

Bismuto Deposito negro brillante 0.02 mg/ 10 ml

Antimonio Brillo purpura obscuro 0.02 mg/ 10 ml

Nota: el antimonio no es afectado por ninguno de los tratamientos anteriores.

7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


7.1 El precipitado formado debe ser claro y definido

8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)


8.1. La muestra de hígado debe ser suficiente y estar perfectamente macerada

9.- PRACTICABILIDAD

9.2 El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el


técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-052-SEMARNAT-2005, que establece las


características, el procedimiento de identificación, clasificación y los listados de
los residuos peligrosos.
10.2 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-087-ECOL-SSA1-2002, protección
ambiental-salud ambiental-residuos peligrosos biológico-infecciosos-
clasificación y especificaciones de manejo

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PRACTICA NÚMERO 4
Determinación de metales pesados en orina (Hg, Bi, Sb y As).

1.- INTRODUCCIÓN
Se llama metales a los elementos químicos situados a la izquierda y centro de la
tabla del sistema periódico. Sus características químicas se basan en su estructura
electrónica que condiciona las preferencias de enlace en que predominan el enlace
metálico, que se establece entre átomos del mismo elemento, caracterizado por la
formación de estructuras cristalinas en que cada átomo comparte los electrones de
muchos de sus vecinos, y el enlace iónico, sobre todo entre los metales alcalinos y
alcalinotérreos y los no metales1. Así, los elementos metálicos dan lugar a diferentes
tipos de compuestos: Metales en estado elemental, compuestos inorgánicos:
halogenuros, hidroxilos, oxoácidos y compuestos orgánicos: alquilos, acetatos,
fenilos.
En la actualidad la exposición a elementos metálicos se produce de forma específica
en la actividad laboral, como ha sucedido a lo largo de la historia, pero además la
población general entra en contacto con ellos a través del agua, los alimentos y el
ambiente, donde su presencia se ha incrementado por la intervención de la actividad
industrial humana sobre los ciclos hidrogeológicos.
Los metales, como cualquier otro grupo de agentes químicos, pueden producir una
patología aguda, desarrollada rápidamente tras el contacto con una dosis alta, o
crónica por exposición a dosis baja a largo plazo. La toxicidad aguda por metales es
poco frecuente.
Las intoxicaciones subagudas o crónicas, predominantemente de origen laboral, han
disminuido con el control en las empresas de los valores límites ambientales para
agentes químicos. Las exposiciones a dosis bajas a largo plazo, procedentes de
fuentes alimentarias o ambientales, pueden producir los cuadros típicos de
intoxicación crónica, como ha sucedido en el caso mencionado del As o manifestarse
en forma de efectos aislados.
El conjunto de los elementos metálicos se beneficia de un tipo de tratamiento
específico basado en su reactividad química que les capacita para la formación de
complejos con diversas substancias denominadas agentes quelantes. Los agentes
quelantes deben ser hidrosolubles, capaces de penetrar en los tejidos de
almacenamiento de metales y tener baja afinidad por metales esenciales.

2.- OBJETIVOS
2.1. El alumno por medio de la técnica empleada identificará la presencia de metales
pesados en orina (Hg, Bi, Sb y As).
2.2. El alumno aprenderá a realizar y a interpretar los resultados

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3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN


3.1.- La presencia de iones de metal pesado libres en orina, significa que nuestro
organismo no ha conseguido desintoxicarnos, por lo tanto existe el riesgo de que
estos sean reabsorbidos para intoxicarnos de nuevo.
Esta prueba está científicamente documentada y permite a detección de iones
de metales pesados eléctricamente activos en una solución acuosa a través de
un procedimiento simple y tan solo en minutos. Esta prueba se basa en la
reacción de Reinsh, ya que el cobre metálico en presencia de ácido reduce al
arsénico a la forma elemental. El arsénico se deposita en el cobre como una
película obscura visible.
HCl
3Cu0 + 2As 3 3Cu2 + 2As0

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
1. Ácido Clorhídrico concentrado
2. Cianuro de potasio al 10% (toxico para el organismo no pipetear con la boca)
3. Sulfito sódico al 5% (NaSO3)
4. Reactivo de Bismuto (1Gr de sulfato de quinina en 100 ml de ácido nítrico al
0.5% y 2 Gr de yoduro potásico)

4.2. Equipos de Laboratorio


4.2.1 Parrilla eléctrica o evaporador

4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Gradilla
2 4 Tubos de ensaye de 13 x 100
3 4 Hoja de cobre de 5 x 10 mm o
alambre de cobre (espiral)
4 1 Cuba hidroneumática
5 4 Tapones para tubos de ensaye
13 x 100

TOXICOLOGIA 23
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5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
5.1.1 Orina.

5.2. Muestreo
5.2.1 Solicitar al alumno traer muestra de orina positiva para la determinación de materiales
pesados (Hg, Bi, Sb y As).

5.3.-Preparación del sistema de Medición


5.3.1 No requerido

5.4.-Uso del sistema del equipo.


5.4.1 No requerido

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS


6.1.1 Colocar orina 5 ml, aproximadamente, en el tubo de ensaye solicitado.
Se añade 2 ml de ácido clorhídrico concentrado y un pequeño alambre de
cobre enrollado, que se encuentre por debajo de la disolución.
Tapar el tubo y calentar suave mente por una hora aproximadamente, hay que
evitar la ebullición para impedir la evaporación demasiado rápida.
Si hay elevadas cantidades de Hg tendrá lugar en menos de una hora.
Depósitos plateados muy evidentes

6.1.2 Calculo de Resultado


No se requiere

6.2 Reporte de resultados

6.2.1 Si el color del alambre de cobre no presenta ningún cambio en su coloración, así
como que no presenta los colores de referencia de acuerdo a cada metal, esto
significara que no hay presencia de metales pesados. Es importante que a la hora de
observar si hay presencia de color se haga en contra luz. Otro punto importante que
se debe mencionar es si el paciente pudo haber consumido ciertos medicamentos los
cuales pueden alterar la prueba. A continuación, se presenta una tabla con los
aspectos que presentara el cobre de acuerdo al metal presente.

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METAL PESADO ASPECTO DEL COBRE SENSIBILIDAD DE LA


PRUEBA
Mercurio Deposito color plata brillante 0.05 mg/ 10 ml

Arsénico Deposito negro deslustrado 0.01 mg/ 10 ml

Bismuto Deposito negro brillante 0.02 mg/ 10 ml

Antimonio Brillo purpura obscuro 0.02 mg/ 10 ml

Se coloca la muestra en los tubos


de ensaye con un alambre de
cobre. Y colocarlos a baño maría
sin dejar hervir el agua
posteriormente observar el cambio
de coloración del alambre a contra
luz.

TOXICOLOGIA 25
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7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


7.1 Esta prueba proporciona resultados altamente confiables que deben ser
considerados como preliminares de manera analítica.
8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)
8.1. Las muestras deben estar perfectamente etiquetadas.

9.- PRACTICABILIDAD

9.1. El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el


técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 Line, E. O. (s.f.). Toxicología-Sustancias Mercurio. Obtenido de


https://www.estrucplan.com.ar/Producciones/imprimir.asp?IdEntrega=780
boca, M. e. (2006). Test Portátil de Detección de Metales Pesados . Obtenido de
http://www.mercurioenlaboca.org/test_metales_pesados_mercurio_amalgamas.
php
Salud, O. M. (Marzo de 2017). El mercurio y la salud. Obtenido de who.int:
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs361/es/

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PRACTICA 5
Determinación de Mercurio en Medio Ambiente.

1.- INTRODUCCIÓN

El Mercurio es un elemento que puede ser encontrado de forma natural en el medio


ambiente. Puede ser encontrado en forma de metal, como sales de Mercurio o como
Mercurio orgánico.
El Mercurio metálico es usado en una variedad de productos de las casas, como
barómetros, termómetros, bombillas fluorescentes. El Mercurio en estos mecanismos
está atrapado y usualmente no causa ningún problema de salud. De cualquier
manera, cuando un termómetro se rompe una exposición significativamente alta al
Mercurio ocurre a través de la respiración, esto ocurrirá por un periodo de tiempo
corto mientras este se evapora. Esto puede causar efectos dañinos, como daño a los
nervios, al cerebro y riñones, irritación de los pulmones, irritación de los ojos,
reacciones en la piel, vómitos y diarreas.
El Mercurio no es encontrado de forma natural en los alimentos, pero este puede
aparecer en la comida, así como ser expandido en las cadenas alimentarias por
pequeños organismos que son consumidos por los humanos, por ejemplo, a través
de los peces. Las concentraciones de Mercurio en los peces usualmente exceden en
gran medida las concentraciones en el agua donde viven. Los productos de la cría de
ganado pueden también contener eminentes cantidades de Mercurio. El Mercurio no
es comúnmente encontrado en plantas, pero este puede entrar en los cuerpos
humanos a través de vegetales y otros cultivos. Cuando sprays que contienen
Mercurio son aplicados en la agricultura.

2.- OBJETIVOS
2.1 El alumno aprenderá a realizar tiras reactivas para identificar (análisis cualitativo)
la presencia de Mercurio en el medio ambiente.
2.2. El alumno aprenderá a identificar (análisis cualitativo) mercurio en zonas de
riesgo en el medio ambiente.
2.3 Interpretar los resultados.

3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN



3.1.- Una reacción sencilla que se basa en la acción del yodo cuproso (CuI), sobre el
mercurio (Hg) formado un complejo coloreado de rosado con salmón,
correspondiente al tetrayoduro mercuriato cuproso (Cu2HgI4), constituyen
fundamentos para simple ensayo de mercurio.

TOXICOLOGIA 27
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Una de las maneras de utilizar esta reacción, es a través de papeles sensibles, que
se preparan impregnando tirillas de papel filtro, con el yoduro cuproso, para luego ser
utilizados de idéntica manera como se ensaya con el papel indicador de tornasol.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
Sulfato de cobre forma hidratada (CuSO45H2O)
1 5g
Agua destilada
2 150ml
Sulfito sódico (Na2SO3)
3 5g
Yoduro de potasio (KI)
4 11g
Tiras de papel filtro
5

4.2 Equipos de Laboratorio


NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Balanza analítica
2 1 Horno a 37°C

4.3 Materiales de laboratorio


NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Probeta
2 3 Vasos de precipitado
3 2 Pipetas graduadas de 5 ml
4 2 Espátulas
5 2 Agitadores
6 1 Perilla
7 1 Caja Petri
8 3 Pipetas Pasteur
9 1 Pinza de disección

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
5.1.1 Áreas que se crean en contaminación:

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Ø Almacén de reactivos
Ø Almacén de CRETIB
Ø Área de CRETIB

5.2 Muestreo
5.2.1 Solicitar al alumno que las tiras de papel sensibles sean colocadas en las áreas
de contaminación ya mencionadas, por una noche o bien durante una semana
para observar mejor los resultados de la prueba.

5.3.-Preparación del sistema de Medición


5.3.1 No requerido

5.4.-Uso del sistema del equipo.


5.4.1 No requerido

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS

6.1 Preparación del papel sensible


Pesar 5g de CuSO45H2O y se disuelven en 75ml de agua destilada (solución A)
Pesar 5g de Na2SO3, 7H2O y 11g de KI disueltos en 75 ml de agua destilada (
solución B)
En una caja petri colocar solución A y solución B 1:1
Impregnar la tira de papel filtro con solución preparada anteriormente, dejar
secar por unos minutos a 37°C.

6.2 Ensayo para vapor en mercurio


6.2.1 Colocar un papel filtro en la boca del matraz Erlenmeyer de 125ml y que
contiene una mínima cantidad (pequeño granulo) de mercurio metálico el color
se desarrolla rápidamente.
6.2.2 Si el mercurio existe, ya sea en la ralladuras de piso, en la soborna de un
laboratorio, en el ambiente general de las bodegas, desagües, laboratorios,
etc., es necesario exponer nuestros papeles sensibles, por un tiempo mayor
como durante toda la noche o mejor aún, durante el fin de semana.

6.3 Ensayo de mercurio en solución de agua


6.3.1 Colocamos una gota de agua de la solución acuosa que se va a ensayar, sobre
la tirilla de papel sensible, si existe mercurio, se debe desarrollar una
coloración salmón.
6.3.2 Este ensayo es sensible para detectar una pequeña cantidad (menos de
microgramo) para compuestos tanto de Hg2, como Hg.

TOXICOLOGIA 29
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6.4 Calculo de Resultados


No requeridos

6.5 Reporte de resultados

METAL PESADO COLOR

Mercurio Viraje a un rosa salmón

7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


7.1 Esta prueba proporciona resultados altamente confiables que deben ser
considerados como preliminares de manera analítica.

8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)


8.1. Se verificará las tiras reactivas con control negativo (agua destilada) control
positivo (cloruro de mercurio HgCl2 y mercurio Hg)
8.2 Observar resultados

9.- PRACTICABILIDAD
9.1 El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el
técnico académico.

10.- REFERENCIAS
10.1 LENNTECH. Elementos químicos ordenados por su energía de ionización
Read more: http://www.lenntech.es/tabla-peiodica/energia-de-
ionizacion.htm#ixzz4DFbRGwqU. Consultado el 2 de julio de 2016.
10.2 C&EN (3 de octubre de 2007). Mercury Tetrafluoride Synthesized.Consultado
el 2 de julio de 2016.
10.3 Hammond, C. R The Elements in Lide, D. R., ed. (2005). CRC Handbook of
Chemistry and Physics (86th ed.). Boca Raton (FL): CRC Press. ISBN 0-8493-
0486-5.

TOXICOLOGIA 30
Facultad de Bioanálisis, Veracruz. Manual de Procedimientos de Laboratorio

PRACTICA 6
ANALISIS DE CONTAMINANTES EN AGUA DE CONSUMO
1.- INTRODUCCIÓN
El agua es un alimento esencial en la vida de las personas. Las enfermedades
relacionadas con la contaminación del agua de consumo tienen gran impacto en la
salud de las personas. Por lo que aquellas medidas destinadas a mejorar la calidad
del agua de consumo, así como conocer la calidad de la misma, proporcionan
beneficios significativos para la salud, dato que es de gran interés para el Químico
clínico.
El monitoreo de contaminantes en el agua de consumo por el ser humano es de gran
importancia en la prevención de la salud.
La seguridad y la calidad del agua son fundamentales para el desarrollo y el bienestar
humanos. Brindar acceso al agua potable es uno de los instrumentos más efectivos para
promover la salud y reducir la pobreza. Como autoridad internacional en salud pública y
calidad del agua, la OMS lidera los esfuerzos mundiales para prevenir la transmisión de
enfermedades transmitidas por el agua. Esto se logra promoviendo regulaciones basadas en
la salud a los gobiernos y trabajando con socios para promover prácticas efectivas de
gestión de riesgos a proveedores de agua, comunidades y hogares.

2.- OBJETIVOS

2.1. El alumno identificará contaminantes químicos y microbiológicos en agua de


consumo.

2.2. El alumno realizará pruebas fisicoquímicas (Dureza total, Cloro libre, Cloro total,
alcalinidad total, pH, nitratos) en agua de consumo.

2.3 El alumno realizará prueba de coliformes en agua de consumo.

TOXICOLOGIA 31
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3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN


3.1.- Fundamento de la técnica Water Check Now.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
4.1.1 Kit de reactivo .
4.1.2 Agua destilada.

4.2 Equipos de Laboratorio


4.2.1
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Incubadora a 37oC

4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1 Material:

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN


1 1 Frasco para DBO
2 1 Pipeta graduada de 10 ml.
3 1 Jeringa de 10 ml.
4 1 Guantes de latex
5 1 Cubrebocas

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
Agua de consumo.

5.2 Técnica:

Seis pruebas: dureza total, cloro libre, cloro total alcalinidad total, pH, nitrato

Llenar el tubo de plástico hasta la línea grabada con la muestra de agua

1) Sumerja la tira reactiva de seis determinaciones por 2 segundos


2) Remueva la tira con las almohadillas boca a arriba, agite suavemente una vez para
remover el exceso de agua.

TOXICOLOGIA 32
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3) Inmediatamente compare el color con la escala dada para las determinaciones de:
dureza total, cloro libre, cloro total, alcalinidad total y pH.
4) Después de 30 segundos compara el color con la escala para el test de nitrato
Después de realizar el test deseche la muestra y la tira reactiva.

Cloraminas

Para el cálculo de cloraminas:

Cloro total – cloro libre= cloraminas

Test de cobre:

1) Llenar el tubo de plástico hasta la línea grabada con la muestra de agua


2) Sumergir la tira reactiva para la determinación de cobre, girar en forma de remolino 10
veces
3) Remueva la tira con las almohadillas boca a arriba, NO agite para remover el exceso
de agua.
4) Espere 15 segundos y compare el color con el de la escala proporcionado
5) Después de 30 segundos descartar la tira reactiva y la muestra

Test de hierro:

1) Llenar el tubo de plástico hasta la línea grabada con la muestra de agua


2) Sumergir la tira reactiva para la determinación de hierro por 2 segundos
3) Remueva la tira con las almohadillas boca a arriba, agite suavemente una vez para
remover el exceso de agua.
4) Espere 60 segundos y compare el color con la escala proporcionada
5) Desechar después de 90 segundos la tira reactiva y la muestra

TOXICOLOGIA 33
Facultad de Bioanálisis, Veracruz. Manual de Procedimientos de Laboratorio

Test de plomo/ pesticida

Abrir la bolsa de aluminio marcada como: “Pe/Pb”. Utilizando el gotero, colocar exactamente
2 gotas de la muestra de agua dentro lo del vial de prueba pequeño incluido en la bolsa.
Para recoger la muestra, apretar fuertemente el bulbo del gotero y sumergirlo en el agua
muestra, una vez dentro soltar el bulbo, una vez lleno el gotero sacarlo de la muestra de
agua para depositarlo en el vial de muestra presionar de nuevo el bulbo suavemente, para
depositar solo las 2 gotas requeridas.

Girar el vial formando un remolino desde la base por varios segundos, después colocar en
una superficie plana.

Colocar ambas tiras reactivas dentro del vial de test con las flechas apuntando hacia ABAJO

Esperar 10 minutos, NO mover las tiras o el vial durante este tiempo

Tome las tiras fuera del vial y colóquelas en una superficie plana con las flechas señalando
hacia la izquierda y lea los resultados

Resultado negativo (menos de 15 ppb):

La línea izquierda, a lado del número 1, es más oscura que la línea derecha a lado del
número 2

O si únicamente se observa una línea el resultado es negativo.

Resultado positivo (mayor a 15 ppb):

La línea derecha a lado del número 2, es, más oscura que la línea izquierda a lado del
número 1, o si ambas, la línea derecha e izquierda son igual de oscuras el resultado será
positivo.

Nota:

Si no aparece ninguna línea, o si las líneas son muy tenues la prueba no se realizó de
manera adecuada y el resultado no será válido.

TOXICOLOGIA 34
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5.3.-Preparación del sistema de Medición


5.3.1. Verificación de la temperatura de la incubadora.

5.4.-Uso del sistema del equipo.

5.4.1 Calibración de la incubadora.

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS


6.1 Calculo de Resultados
No requiere
6.2 Reporte de resultados
Entrega de resultados bajo el formato validado y autorizado por el docente.
7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA
La Muestra debe cumplir con la esterilización adecuada en la toma.
8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)
Se evaluará la calidad de los resultados obtenidos.

9.- PRACTICABILIDAD

9.1 El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el


técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 Water Check Now.


Recuperado de: https://www.who.int/water_sanitation_health/water-quality/en/

TOXICOLOGIA 35
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PRACTICA 7
CORRELACIÓN CLINICA DEL PUNTEADO BASÓFILO EN
INTOXICACIÓN POR PLOMO Y OTROS METALES
PESADOS
1.- INTRODUCCIÓN
Descripción: el punteado basófilo corresponde a pequeños gránulos, variables en tamaño y
número, distribuidos en todo el citoplasma de los eritrocitos que se visualizan de color azul
grisáceo con los colorantes convencionales de hematología.
Sinónimos: basofilia difusa.
Fisiopatología: el punteado basófilo está compuesto por ácido ribonucleico y representa
agregados de ribosomas.
Correlación clínica: la presencia de punteado basófilo en el extendido de sangre periférica
es muy inespecífica debido a que es un hallazgo que se asocia con una amplia gama de
etiologías tanto hereditarias como adquiridas, en donde característicamente hay
eritropoyesis inadecuada o diseritropoyesis. Dentro de las enfermedades hereditarias están
los síndromes talasémicos, especialmente la ß-talasemia (anemia de Cooley) y las
hemoglobinopatías inestables. A este grupo también pertenecen la deficiencia hereditaria de
la enzima pirimidina 5’nucleotidasa, una enzima necesaria para la degradación del ARN de
la célula, como una condición autosómica recesiva y la enfermedad de Wilson. Al segundo
grupo, el correspondiente a las enfermedades adquiridas, pertenecen la anemia
megaloblástica por deficiencia de vitamina B12, incluida la anemia perniciosa, o de ácido
fólico, las anemias sideroblásticas, la intoxicación por metales pesados como el plomo y el
arsénico, en donde se correlaciona estrechamente con el grado de intoxicación y en los
síndromes dismielopoyéticos y en las leucemias

2.- OBJETIVOS
2.1. El alumno buscará inclusiones eritrocitarias anormales
2.2. El alumno Correlacionará el punteado basófilo con una posible intoxicación por
plomo y otros metales pesados.

3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN


3.1.- Fundamento de la tinción rápida.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS


4.1 Reactivos
Tinción rápida.
Agua destilada.

TOXICOLOGIA 36
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4.2 Equipos de Laboratorio

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN


1 1 Microscopio óptico con luz
incorporada

4.3 Materiales de laboratorio


4.3.1 Material:

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN


1 1 Jeringa ó sistema vacutainer
para toma de muestra
2 1 Ligadura
3 1 Portaobjetos
4 1 Aceite de inmersión
5 1 Gotero

5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
Sangre periférica

Técnica: Tinción Rápida


a) Seleccionar un portaobjetos nuevo de 25 X 75 mm para hacer extendidos, que
tenga la orilla relativamente lisa.
b) Obtener una pequeña cantidad de muestra de sangre periférica.
c) Colocar una pequeña gota de sangre a 2 ó 3 mm de la orilla de un portaobjetos
limpio y seco. Colocar el portaobjetos para hacer extendido en un ángulo de 30 a 45
grados con respecto al portaobjetos que tiene la muestra y hacer contacto con la
gota. Esta debe extenderse rápidamente a lo largo de la orilla del portaobjetos para
hacer los extendidos. Deslizar el portaobjetos de extensión sobre la superficie
dispersando la muestra de sangre. El extendido de sangre debe medir aprox. 30 mm
de largo. El portaobjetos de extensión no se despegará hasta haber extendido toda la
sangre. El grueso del extendido de sangre puede regularse modificando el ángulo del
portaobjetos de extensión, variando el tamaño de la gota de sangre, la presión ó la
velocidad de extensión.
d) El extendido de sangre se seca con el aire. Una vez seco, se escribe con lápiz el
nombre del paciente en una orilla del portaobjetos.

TOXICOLOGIA 37
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e) Una vez la muestra seca, la introducimos 4 veces en la primera duquesita, una vez
por segundo.
f) Inmediatamente después, el mismo proceso en la segunda duquesita.
g) introducir una vez en agua destilada
h) La misma operación con última duquesita
i) Lavamos con agua destilada y dejamos secar.
j) Para la observación al microscopio, colocamos un cubre encima de la muestra o
directamente con aceite de inmersión

5.2.-Preparación del sistema de Medición


Verificación del microscopio.

5.3.-Uso del sistema del equipo.

Aquí anotará como debe utilizar el microscopio está en el manual de


instrumentación básica

6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS


6.1 Calculo de Resultados
No requiere
6.3 Reporte de resultados
Se emitirá el reporte de la lectura de la laminilla. con las observaciones dadas en la
introducción: el punteado basófilo corresponde a pequeños gránulos, variables en tamaño y
número, distribuidos en todo el citoplasma de los eritrocitos que se visualizan de color azul
grisáceo con los colorantes convencionales de hematología

7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA


7.1 La laminilla debe presentar calidad al momento de ser observada al microscopio.

TOXICOLOGIA 38
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8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)


8.1. Se evaluará la calidad de la extensión y de la tinción.

9.- PRACTICABILIDAD

El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el


técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 Ruiz Argüelles, G J,. Fundamentos de Hematología. 4 edición Ed: México


Médica Panamericana S.A.(2009)
10.2 Rodak F.B.Hematología: Fundamentos y aplicación clínica.2 edición. Buenos
Aires, Médica Panamericana; 2004.

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