Psilocybe cubensis

Taller de cultivo

MicoCiencia
Ciclo de vida
Las 3 etapas del hongo
• Esporas
• Micelio
• Seta
 Esporas
• Células reproductoras. No necesitan ser fecundadas.
• Se dispersan naturalmente con fines de preservación.
• Sobreviven a condiciones adversas por tiempo prolongado.
• Se convierten en micelio.
Micelio
• Parte estructural del hongo.
• Compuesto por filamentos llamados hifas.
• Crecimiento rápido.
• Sensible a secarse.
• Da paso a la seta.
Seta
• Cuerpo fructífero del hongo.
• Aparato reproductor.
• Corta vida.
• Su sombrero libera esporas.
Ejes del cultivo en interior
• Recrear un medio de cultivo con los nutrientes y parámetros de la
naturaleza exclusivos para el hongo.
• Eliminar agentes competidores.
• Cultivo a bajo costo con materiales en mercados, almacenes,
farmacias y viveros.
Los pasos del cultivo
• Inoculación: Las esporas deben propagar micelio en algún grano,
usaremos arroz integral.
• Propagación: Dichos granos con micelio deben luego mezclarse con
un sustrato, usaremos estiércol de caballo y vermiculita.
• Incubación: La mezcla de granos con micelio y sustrato se mantendrá
con alta humedad y sin ventilación.
• Fructificación: Se ventila y baja un poco la humedad para la aparición
de la seta.
Parámetros
• Temperatura ideal de incubación: 25 a 28º C
• Temperatura ideal de frutificación: 18 a 24º C
• Humedad en incubación 99% +
• Humedad en fructificación 90%
Técnica bulk
• YPr en monotub
oduc
• Baj ción
o cos a gra
to n esc
• Sim ala
ple y
efecti
va
Materiales
• Olla a presión
• Olla simple
• Arroz integral
• Tarro de vidrio o polipropileno con tapa
• Papel aluminio
• Cautín
• Jeringa
• Sello de esporas
• Contenedor plástico mínimo 15 litros
• Contenedor plástico de 60 litros
Materiales
• Escurridor
• Estiércol de caballo
• Vermiculita
• Funda de almohada
• Piedra pesada
• Cinta micropore
• Napa o relleno de cojines
• Guantes y mascarilla
• Papel toalla
Materiales
• Lysol (opcional)
• Spray para agua
• Alcohol de 70%
• Agua de mesa
• Ampolla de agua bidestilada
• Bisturí
• Tupper biofood Rey 0.16 L
• Balde
Presupuesto
Aproximado 300 a 400 soles.
Asepsia
Es muy importante trabajar en un ambiente limpio. La mayoría de
procedimientos requieren:

• Alcohol 70% para todas las superficies, manos y envoltorios

• Guantes y mascarilla
• Lysol en el ambiente
• Cero corriente de aire
• Esterilizado de instrumentos
• Ducha y ropa limpia
Asepsia
Cleanbox

• Los procedimientos se hacen dentro de un contenedor de 60L con 2

huecos para las manos.
• Debe limpiarse con alcohol de 70 antes de usar.
• Usar con guantes y mascarilla.
Jeringa de esporas
Vamos a necesitar:

• Cleanbox
• Jeringa
• Sello de esporas
• Ampolla de agua bidestilada
• Bisturí
Jeringa de esporas
1. Se pasa alcohol de 70 por todos los materiales y se ingresan al
cleanbox. Opcional aplicar Lysol y esperar 20 mins.
2. Armar bisturí y jeringa, mantenerlos cerrados.
3. Abrir la ampolla y sacar el sello de su bolsa.
4. Doblar el sello en dos y raspar una pequeña sección con el bisturí,
de tal modo que el doblez del papel permita que las esporas caigan
en la ampolla.
5. Aspirar y expulsar un par de veces el líquido dentro de la ampolla
con la jeringa para mezclar. Mantener refrigerado.
Ahora que tenemos lista la jeringa...
Preparación de arroz integral
Materiales:

• Arroz integral
• Olla simple
• Tarros de polipropileno
• Cinta micropore
• Balde
Preparación de arroz integral
1. Enjuagar el arroz en el balde con abundante agua, al menos 5 veces.
2. Poner el arroz en una olla al fuego, con el doble de agua que indica
la bolsa.
3. Remover cada 5 mins con cuchara de madera.
4. Probar el grano: cuando esté blando por fuera y crudo por dentro,
se debe apagar el fuego y echar agua fría para detener la cocción.
5. Colar durante 1 hora hasta que escurra el exceso de agua.
6. Colocar el arroz en el tarro y esterilizar.
Esterilizado con olla a presión
Es muy importante usar correctamente la olla a presión a fin de evitar
accidentes y esterilizar de manera eficiente.
• Se debe poner siempre un paño de algodón o base de metal, de tal
modo que los tarros no toquen el fondo de la olla.
• Llenar de agua con lo mínimo que indique la olla.
• Se empieza a contar desde que la olla silba.
• A cada tarro: se le hace un hueco con el cautín en medio de la tapa y
se recubre con micropore. La tapa debe quedar suelta y ser recubierta
con papel aluminio. No llenar por completo con arroz.
Esterilizado con olla a presión
• Fuego alto hasta que empiece a silbar y se baja a fuego medio
durante 1 hora. La olla debe mantenerse silbando.
• Apagar el fuego y dejar enfriar para que baje la presión.
• Nunca abrir mientras el indicador de presión se mantiene arriba.
• Ajustar las tapas al sacar los tarros, manteniendo el papel aluminio.
Una vez listo el arroz integral...
Inoculación
Se necesita:

• Cleanbox
• Tarros con arroz
• Jeringa de esporas
• Encendedor
Inoculación
1. Preparar el cleanbox y pasar alcohol a los materiales.
2. Frotar con alcohol a la altura del hueco del tarro.
3. Inocular 1 a 2 ml de solución de esporas.
4. Cubrir cada pinchazo con cinta micropore.
5. Si es más de un tarro, calentar la aguja al rojo vivo entre cada
inoculación.
6. Mantener el tarro a máximo 28º C. El tarro debe llenarse de micelio
en un aproximado de 2 a 3 semanas.
Tenemos micelio. Es hora de...
Propagación: sustrato bulk
Usaremos:

• Estiércol de caballo
• Vermiculita
• Funda almohada
• Olla simple
• Piedra pesada
• Yeso (opcional)
Propagación: sustrato bulk
1. Mezclar en seco el estiércol y la vermiculita en proporciones iguales.
2. Se coloca la preparación en una olla con abundante agua se coloca una
piedra encima para que no flote.
3. Apenas empieza a hervir, se baja a fuego mínimo y se mantiene así por 1
hora sin que siga hirviendo. Con esto pasteurizamos el sustrato.
4. Una vez frío se presiona por puñados para retirar el exceso de agua y se
echa en el contenedor de 15 L, al cual se le hacen previamente con el
cautín 6 orificos de 4cms equidistantes.
5. Se agregan los granos con micelio, se mezcla de manera uniforme y se
tapan los huecos con cinta adhesiva. Se deja el contenedor a oscuras.
Propagación: sustrato bulk
En este punto debemos esperar a que el micelio colonice toda la
mezcla, que se conoce como “pan de setas”.
Incubación
Mientras se mantiene el monotub en oscuridad y todo cerrado, se
garantiza alta humedad en su interior, ideal para incubar.
Incubación: casing
Es un recubrimiento de vermiculita que se agrega a la superfie del
cultivo para mantener la humedad. No es obligatorio.

1. Humedecer vermiculita con agua hirviendo.

2. Retirar el exceso de agua y cuando haya enfriado, aplicar una capa
delgada sobre el cultivo, cuya mezcla se conoce como “pan de
setas”.
3. Regresar a la oscuridad hasta que la superficie se colonice de
micelio.
Ahora que el cultivo incubó...
Fructificación
Una vez que la superficie de vermiculita se ponga blanca de micelio, se
procede a fructificar para gatillar la aparición de primordios, los futuros
hongos.
Fructificación
1. Reemplazar la cinta adhesiva por cinta micropore.
2. Pasar a un ambiente con luz indirecta.
3. Atomizar agua con ayuda de un spray y ventilar con la tapa, de 2 a 3
veces por día.
4. Al cabo de unos días empiezan a salir los primordios.
Cosecha y secado
• Los hongos se cosechan cuando rompen el velo o justo antes de
romper.
• Se toma por la base y se gira a la vez que se jala.
• Se debe cosechar todo, incluidos los abortos.
• Secar en deshidratador de alimentos a 50º C.
Almacenamiento

• Las setas deben quedar secas al punto de quebrarse.

• La mejor manera de preservar es al vacío, pero en una bolsa con
cierre en la parte baja del refrigerador duran varios meses.
PDA
• Significa agar de papa dextrosa.
• Se prepara en base a agar agar, caldo de papa y dextrosa (miel,
azúcar)
• Sirve para germinar esporas, reproducir micelio, clonar y depurar.
PDA: ingredientes

• Papa blanca con cáscara 200g

• Jarabe de maíz o miel 8ml
• Agar agar 20g
• Agua destilada o agua de mesa 1L
• Colorante para comida (opcional)
PDA: preparación
1. Hervir 200g de papa con cáscara en el agua durante 30 mins.
2. Colar a través de una tela o filtro de café.
3. Regresar el caldo de papa a la olla y agregar el agar agar, revolver
hasta que se disuelva por completo.
4. Añadir el jarabe de maíz o miel y agregar agua hasta completar un
litro.
5. Verter en una botella con la tapa suelte y recubierta de aluminio.
6. Esterilizar por 25 minutos.
7. Ajustar la tapa y refrigerar uan vez frío.
PDA: llenado
• Usualmente se esteriliza el PDA y las placas de Petri por separado,
para llenarlas dentro de un cleanbox y luego sellarlas con alguna
cinta.
• Es un procedimiento delicado, ya que el PDA se contamina muy
fácilmente.
PDA: llenado
• Alternativa: llenar con 5 mm de PDA tuppers biofood Rey 0.16L, y
luego esterilizar todo junto.
• No requiere cleanbox, ni sellado con cinta porque cuenta con tapa.
• Almacenar de cabeza.
PDA: germinación de esporas
Se germinan esporas en PDA para descartar contaminación y elegir la
sección de micelio de más rapido crecimiento.

Se necesita:
• Tupper con PDA
• Sello de esporas
• Ampolla de agua bidestilada
• Asa de siembra
PDA: germinación de esporas
1. Pasar alcohol por el cleanbox y materiales.
2. Abrir el sello y raspar una pequeña sección, de tal modo que caigan
esporas al agua bidestilada, tal como se hizo con la jeringa de
esporas.
3. Mezclar la solución de esporas con el asa de siembra.
4. Abrir lentamente el tupper con PDA y hacer trazos con el asa, así se
depositarán las esporas.
5. Cerrar el tupper e incubar. El micelio debería aparecer en los
siguientes días, así como la contaminación en caso hubiese.
PDA: depuración de micelio
• Pasado unos días, puede aparecer micelio junto a contaminación.
• Es muy fácil distinguirla porque no es blanca como el micelio ni tiene
su apariencia.
• Debemos elegir la parte que luzca sana y con ayuda del bisturí, retirar
dicha sección y traspasarla a otro tupper con PDA. A esto se llama
repicar.
• Repetir el proceso hasta que la muestra crezca libre de
contaminantes.
PDA: clonación de micelio y tejido
• Los mejores cultivos se dan en base a buenas genéticas.
• Podemos clonar desde micelio o desde una seta.
• Si es con micelio, se debe elegir la sección que más cerca esté del
borde. Sabremos que hemos clonado con éxito cuando el repique
crezca de manera uniforme.
PDA: clonación de micelio y tejido
• Si es desde una seta, debemos primero partir la seta a lo largo y con
ayuda del bisturí retirar tejido interno y ponerlo en PDA.
• La ventaja de clonar es que los siguientes cultivos serán más
homogéneos, con una mejor producción.
PDA: Preservar la variedad
• El PDA sirve también para mantener micelio vivo de determinada
variedad, de tal modo que el siguiente cultivo no parte de esporas
sino directamente de micelio.
Técnicas de propagación
Existen algunas técnicas que nos permiten reproducir el micelio
infinidad de veces.

• Grain to grain - G2G

• Líquido inoculante desde PDA
• Líquido inoculante desde tarro
• PDA a arroz
Técnicas de propagación: G2G
Se trata de simplemente de transferir granos con micelio a tarros con
granos estériles.

• Se recomienda usar cleanbox.

• Desgranar el arroz con ayuda de un tenedor.
• A más granos, mayor velocidad de colonizado
Técnicas de propagación: LI desde PDA
Esta técnica consiste en agregar una sección de micelio PDA en agua
estéril.

Materiales:
• Tupper biofood Rey 0.16L
• Agua de mesa
• Jeringa
• Bisturí
• Micelio PDA
Técnicas de propagación: LI desde PDA
1. Hacer un hueco a un costado de la tapa con ayuda del cautín y
cubrir con micropore.
2. El tupper debe quedar con la tapa floja y cubierto por aluminio.
3. Esterilizar por 20 mins.
4. Dentro del cleanbox, elegir la sección de micelio y agregar ésta al
agua esterilizada.
5. Esperar 24 horas para que se libere más micelio en el agua.
6. Aspirar con jeringa.
Técnicas de propagación: LI desde tarro
Esta variante usa directamente un tarro en vez de PDA

• Consiste en inocular agua estéril en un tarro para luego aspirar el

líquido con la misma jeringa.

• Los LI tienen vida corta, por lo que se recomienda usar a la brevedad.

PDA a arroz
• Se consigue mediante la tranferencia de un trozo de PDA a arroz
estéril.
• Mientras mas garnde sea el trozo de PDA, más rapido colonizará