DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO

DE LAS INFECCIONES DEL

TRACTO URINARIO

Diagnós(co Microbiológico TEM1135 -2019

Dr. Gustavo Medina Schwerter
 INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO

El sistema urinario humano es un conjunto de órganos encargados de la osmorregulación

y de la producción de orina mediante la cual se eliminan los desechos nitrogenados del
metabolismo (urea, creatinina y ácido úrico).

- RIÑONES
Producción de orina.
- PELVIS RENAL
Recoge la orina del riñón.
- URÉTERES
Conducen la orina desde los riñones a la vejiga.
- VEJIGA
Bolsa muscular y elásCca en la que se acumula la orina
antes de ser expulsada al exterior.
- URETRA
Conducto que transporta la orina desde la vejiga hasta el
exterior.
 INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO (ITU)

- Patología bacteriana no endémica más común en humanos.

- Invasión y colonización microbiana anormal del TU.
- El diagnósAco microbiológico de ITU es uno de los análisis de mayor
frecuencia en laboratorios de microbiología clínica.

BACTERIURIA ASINTOMÁTICA

CISTITIS

PIELONEFRITIS

SEPSIS

SHOCK – COMA – MUERTE

 MECANISMOS DEFENSIVOS DEL HUESPED

ORINA:
- Alta osmolaridad
- pH ácido
- Alta concentración de urea
- Elevada concentración de ácidos orgánicos.
- Glicoproteína de Tamm-Horsfall (THP o uromodulina)

• Inhibe la adherencia de las bacterias TPH

a las células epiteliales (manosa)
• THP secretada por las células de la
rama ascendente del asa de Henle
• Receptor soluble para las fimbrias
tipo I de E. coli
• Cadena de manosa que se une a la
fimbria tipo I
• Competición con receptores
manosilados de la superficie vesical.
 MECANISMOS DEFENSIVOS DEL HUESPED
VEJIGA URETER
- Evacuación total de la vejiga. - Peristal:smo
- Secreción de mucina que recubre la vejiga
y previene la adherencia de las bacterias.
- Mecanismos de defensa secundarios
(leucocitos y PMN – fagocitosis)
 MECANISMOS DEFENSIVOS DEL HUESPED

RIÑÓN
- Resistencia de la corteza renal
(osmolaridad, [amonio] y flujo sanguíneo).
- Se necesita una can>dad 10.000 veces mayor de
gérmenes para infectar la corteza.
- La medula renal es más suscep>ble a la infección
por la alta [urea] que inac>va el C y quimiotac>smo
de leucocitos.

MECANISMOS INMUNES
- Producción de IgG y/o IgM
- Únicamente en infección del parénquima renal, de pielonefri>s y de prosta>>s.
- Ac contra anRgenos O, K, fimbrias >po 1 y P.
 FACTORES PREDISPONENTES DE ITU

EMBARAZO
- Progesterona (atonía de la vía urinaria)
- Disminución del peristaltismo ureteral.
- Vaciamiento insuficiente de las vías urinarias.

DIABETES
- Vejiga neurogénica con mal vaciamiento

OBSTRUCCIÓN DEL FLUJO URINARIO

- Anomalías congénitas del uréter o uretra
- Li@asis, adenoma prostá@co, etc.
 FACTORES PREDISPONENTES DE ITU

INSTRUMENTACIÓN POR SONDEO VESICAL

O PROCEDIMIENTOS ENDOSCÓPICOS:
- Sondeo vesical tiene un riesgo del 1 a 2%
de desencadenar una ITU.
- La instrumentación de la vía urinaria
infectada está contraindicada ya que es
frecuente causa de septicemia.

SEXO Y EDAD
- Mayor prevalencia en edades extremas
- Mayor prevalencia en mujeres que en hombre
MECANISMOS DEFENSIVOS Y FACTORES PREDISPONENTES
RELACIONADOS CON ITU

FAVORECEN LA INFECCIÓN
EVITAN LA INFECCIÓN Retención urinaria
Vaciamiento Reflujo vesículo-uretral
Fact. antibacterianos Obstrucción TU
(liq. prostático) Sexo
Composición de la orina (largo y posición de la uretra)
Defensas mucosa vesical Instrumentación
Edad
CONSIDERACIONES CLÍNICAS Y BACTERIOLÓGICAS EN
EL DIAGNÓSTICO DE ITU
CLASIFICACIÓN ANATÓMICA DE LAS ITUS
IU TRACTO URINARIO BAJO IU TRACTO URINARIO ALTO

URETRITIS PIELONEFRITIS

CISTITIS (ABSCESO RENAL)

PROSTATITIS
 CONSIDERACIONES CLÍNICAS Y BACTERIOLÓGICAS EN
EL DIAGNÓSTICO DE ITU
ITUs COMPLEJAS
• POR DEFINICIÓN TODA ITU EN HOMBRES SE TRATA COMO
UNA ITU COMPLEJA*
• Individuos con:
Anomalías anatómicas o funcionales del TU
Microorganismos multirresistentes.
Instrumentación del TU
Insuficiencia renal crónica
Inmunodepresión
Diabetes
CONSIDERACIONES ESPECIALES
• Paciente pediátrico con síntomas inespecíficos (fiebre, vómitos)
• Los pacientes con vejiga neurogénica o con sonda vesical permanente
pueden debutar con cuadros de pielonefriGs o sepsis de origen urinarios.
*CONCEPTO CLÍNICO
 CONCEPTOS
BACTERIURIA
- Presencia de bacterias en la orina (no siempre implica una ITU)
- Para diferenciar bacteriuria producida por contaminación o por
infección se u:liza el término de bacteriuria significa:va.

ITU
BACTERIURIA SIGNIFICATIVA SÍNTOMAS
(disuria, poliaquiuria, tenesmo vesical)
Urocultivo positivo UroculLvo posiLvo
˃100.000 UFC /ml. ˂100.000 UFC /ml

NO APLICA COMO
REGLA GENERAL

NO SE CONSIDERA ITU RECUENTO ALTO

AUSENCIA DE SINTOMAS
 EXCEPCIONES A LA REGLA

ORINA POR PUNCIÓN VESICAL ITU DE ETIOLOGÍA FÚNGICA

CUALQUIER RECUENTO UROCULTIVO POSITIVO

SE CONSIDERA ITU ≥1.000 UFC /ml
 BACTERIURIA ASINTOMÁTICA

- Ausencia de síntomas clínicos atribuibles a ITU.

DOS MUESTRAS CONSECUTIVAS

MISMO MICROORGANISMO

Recuento ≥100.000 UFC /ml.

- Puede detectarse respuesta del huésped

(piuria, aumento de citoquinas y Ac)
- Se considera más correcto aplicar el termino de INFECCIÓN URINARIA
ASINTOMÁTICA.
- Frecuente en adultos mayores internos en centros asistenciales.
 INFECCIÓN URINARIA BAJA (CISTITIS AGUDA)
- Síntomas clásicos (disuria, polaquiuria, ardor miccional).
- Normalmente no es un cuadro febril
- El proceso inflamatorio se localiza en el recubrimiento interior de la vejiga
- No afecta al plano muscular.
- Los síntomas se originan por la continuidad muscular
- Orina turbia, mal olor y a veces hematuria.

ORINA 2° CHORRO

Recuento ≥100.000 UFC /ml

CisEEs: inflamación de la vejiga, pudiendo

o no ser causada por una infección
 CISTITIS RECURRENTE
TRES CISTITIS POR AÑO

RECIDIVAS REINFECCIÓN

OCURREN DENTRO DE LAS 3 SEMANAS RESPONSABLES DEL

SIGUIENTES AL TERMINO DEL 80% DE LAS ITUS
TRATAMIENTO ORIGINAL

• TRATAMIENTOS INADECUADOS REINTRODUCCIÓN DE MO

• PERSISTENCIA DEL MO EN FOCOS RENALES O DE LA FLORA PERIANAL.
PROSTÁTICOS
• ANORMALIDADES ANATÓMICAS
• OBSTRUCCIONES DE LAS VÍAS URINARIAS
 PIELONEFRITIS AGUDA

- Inflamación del riñón que involucra

el parénquima renal, la pelvis renal
y los cálices renales.
- Comienza como una infección
urinaria baja
- Compromiso renal por vía
canalicular ascendente.
- Fiebre, escalofríos, dolor lumbar,
vómitos.

PIELONEFRITIS SEPTICEMIA SHOCK – COMA - MUERTE

(E. coli)
SÍNDROME URETRAL AGUDO
SÍNTOMAS DISÚRICOS MUESTRA
Raspado uretral
Rcto ˂ 100.000 UFC /ml Orina de 1° micción y 1° chorro

INFECCIÓN URINARIA ASOCIADA A CATÉTER

Cursa generalmente en forma asintomá1ca (fiebre).
El riesgo de desarrollar una bacteriuria asociada a catéter es del 3 al 10 %,
A los 3 – 4 días de colocado el catéter se desarrolla ITU.

ITU INTRAHOSPITALARIA
Pacientes internos y con vía urinaria cateterizada.
Presentan una frecuencia del 10 – 12 %.
El 3 – 5 % de estos pacientes presenta sepsis, de los cuales fallecen cerca del 20%.
MICROORGANISMOS FRECUENTEMENTE
AISLADOS EN UROCULTIVOS
MICROORGANISMOS FRECUENTEMENTE
AISLADOS EN UROCULTIVOS
 MICROORGANISMOS CAUSANTES DE ITU

• LA MICROBIOTA FECAL DEL PACIENTE CONDICIONA EN GRAN MEDIDA LA ETIOLOGÍA DE LA ITU.

Las bacterias que causan ITU provienen generalmente de la biota fecal, pero
consHtuyen un grupo restringido de ellas.

• EL RESTO DE LAS ITUS TIENEN UNA ETIOLOGÍA EXÓGENA

MO introducidos en las vías urinarias por manipulación.
La pielonefriHs de origen hematógeno es rara (S. aureus y levaduras).

• EN GENERAL LAS ITU NO COMPLICADAS SON MONOMICROBIANAS

90% por enterobacterias.
80% corresponde a E. coli. 20% corresponde a Klebsiella y Proteus mirabilis.
Un 10 a 15% Corresponde a S. saprophy;cus.

• En pacientes hospitalizados E. coli sigue siendo el microorganismo más aislado

(40 a 50%).

• Las candidurias son raras (C. albicans) observables en pacientes con catéter vesical
que han recibido anHmicrobianos.
 E. COLI UROPATÓGENA
Microorganismo más aislado en ITUs
UPEC: O1, O2, O4, O6, O7, O8, O9, O11, O22, O25, O62, O75 y O150.

FIMBRIAS TIPO 1 INVASIÓN DEL EPITELIO

FORMACIÓN DE BIOFILMS
ITUS BAJAS O CISTITIS AGUDAS ADHERENCIA
SE UNEN A RECEPTORES DE MANOSA Epitelio de la mucosa
ABUNDANTES EN EL URETRA Y VEJIGA Matriz tisular del tracto urinario

FIMBRIAS P INDUCCIÓN DE CITOQUINAS

PRINCIPAL FACTOR DE VIRULENCIA
ITUS ALTAS O PIELONEFRITIS AGUDAS
SE UNEN A RECEPTORES (GAL – GAL)
ABUNDANTES A NIVEL RENAL
ADHERENCIA
Epitelio de la mucosa
Matriz tisular del tracto urinario
PRINCIPALES FACTORES DE VIRULENCIA DE E. COLI UROPATOGENAS
 PATOGÉNESIS DE ITUs CAUSADAS POR ECUP

1. Contaminación de la región periuretral

con cepas UPEC procedentes del
intestino grueso.
2. Adherencia a las células uroepiteliales
mediada por las fimbrias tipo 1 y P.
3. Invasión y multiplicación intracelular.
4. Apoptosis y exfoliación de las células
del epitelio de la vejiga.
5. Atracción de polimorfonucleares.
6. Selección de bacterias que expresan
fimbrias tipo 1 y baja tensión de O2.
7. Las cepas de E. coli ascienden hacia los
riñones.
8. Las fimbrias P se ligan a los receptores
de las células epiteliales de los túbulos
renales.
9. Inducción de citocinas.
10. Hemolisina daña el epitelio.
11. Vacuolización de las células epiteliales
y daño de los glomérulos por toxinas.
12. Cepas de E. coli atraviesan la barrera
del epitelio tubular e inician un cuadro
de bacteremia.
 Staphylococcus saprophy.cus Corynebacterium urealy.cum
Patógeno emergente y oportunista del TU.
Pacientes con tratamiento antibiótico de base
Pacientes que hayan sido sometidos a procesos
invasivos

Género Proteus
Causa ˃ 10% de complicaciones del TU
Lesiones celulares del epitelio renal
Cálculos renales

PATOGENO URINARIO
Capacidad selectiva de adherencia al uroendotelio humano UREASA
Descomposición de urea en CO2 y NH3
Flora normal del tracto genital femenino y perineo Aumento del pH de la orina.
10 -20 % de las ITUs Formación de cálculos
Mujeres de 17 -27 años es la 2ª casusa de ITU Alcalinidad afecta epitelio urinario
 DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE LAS ITUs
- El diagnostico microbiológico de la infección urinaria se basa principalmente en
demostrar la presencia de microorganismos en la orina.
- La orina contenida en la vejiga normalmente es estéril.
- Probabilidad de contaminación e interpretaciones erróneas de los hallazgos.
- La cuantificación de las bacterias en una muestra de orina permite diferenciar
estadísticamente una contaminación de una infección del tracto urinario.
 TOMA DE MUESTRA

Primera micción de la mañana (mínimo 3 horas de retención).

Para la toma de muestra debe seguirse los siguientes pasos:
1. Lavar cuidadosamente los genitales con agua y jabón sin anAsépAco.
2. Separar los labios mayores en la mujer y taponar la vagina con una gasa o algodón estéril.
3. En el hombre retraer el prepucio.
4. Desechar la primera parte de la micción.
5. Recoger la segunda porción directamente en un frasco estéril de boca ancha.
No se debe forzar la ingesta de líquidos (dilución de la orina y ↓ rcto de colonias/ml).
• Volumen recomendado a recolectar: 25 a 30 ml.
• Volumen mínimo: 3 ml.
 TÉCNICA PARA MUJERES
Primera orina de la mañana, segundo chorro previo aseo genital
 TÉCNICA PARA HOMBRES
Primera orina de la mañana, segundo chorro previo aseo genital
Bolsa plástica estéril
Si el niño no orina en media hora,
la bolsa debe retirarse y colocar
una nueva.
Personal Medico Permanente o Transitorio
Paciente pediátrico Desinfectar el cono de la sonda con OH 70%
IdenOficacion de todos Recoger asépticamente 5-10 mL de orina
los microorganismos utilizando una jeringa
Transferir la orina a un tubo o recipiente
estéril.
Nunca se debe recoger orina de la bolsa de
la sonda.
 TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA
- Recolección en frasco estéril
- Transportar antes de una hora al laboratorio.
- Alterna9va, mantener a 4° C hasta por 24 horas
- Nunca congelar la muestra.
- Tubos de transporte con conservantes
(ácido bórico con glicerol o con ácido bórico sódico liofilizado)
- Una vez procesadas las muestras, se recomienda conservarlas a 4° C por un máximo
de 48 horas para realizar posibles confirmaciones de los resultados.
 MÉTODOS DE SCREENING
Frotis Gram directo para recuento
- Colocar una gota de orina homogeneizada sin centrifugar en un portaobjeto.
- Secar a la llama del mechero o a temperatura ambiente, sin extender.
- Teñir con tinción de Gram.
- En orinas con rtos ˃ a 10# bact/ml hay de 1 a 5 bacterias por campo

Tiras reactivas nitritos y leucocitos

- Familia Enterobacteriaceae producen nitrato reductasa
- La presencia de nitritos es altamente específica de bacteriuria (97%)
- Los leucocitos humanos producen al menos 10 proteínas con actividad esterolítica
- Se mide la producción de esterasas
- Falsos positivos en orinas contaminadas con flujo vaginal

Detección de bacteriuria o bacteriuria y piuria mediante sistemas

automáticos

Detección de bacteriuria mediante métodos moleculares

 UROCULTIVO
SIEMBRA
Recuento microbiano
Colonias aisladas
Iden3ficación
An3biograma

RECUENTO SEMICUANTITATIVO USANDO ASAS CALIBRADAS DE 0,01 O 0,001 ML

 MÉTODOS PARA ESTUDIAR EL NÚMERO
DE UFC/ML DE ORINA

MÉTODO DE DILUCIONES DE KASS

1. Disponer de dos tubos con 9,9 ml de solución salina cada uno, rotulados 1 y 2.
2. Pipetear 0,1 ml de orina, previamente homogeneizada y depositarla en el tubo 1
(dilución 1:1000) y mezclar bien.
3. Sacar 0,1 ml del tubo 1 y depositarlo en el tubo 2, mezclar bien (dilución 1:10000).
4. Tomar 1 ml del tubo 2 y depositarlo en una placa Petri estéril, previamente rotulada.
5. Verter sobre la placa un tubo de agar peptona fundido y enfriado a 45° C.
6. Homogeneizar bien por rotación y dejar enfriar.
7. Incubar la placa a 37° C por 24 hrs.
8. MulSplicar el Nº de colonias desarrolladas en la placa por el factor de dilución.
 MÉTODOS PARA ESTUDIAR EL NÚMERO
DE UFC/ML DE ORINA
MÉTODO DE ASA CALIBRADA
Este método es de gran exactitud y de bajo costo
El protocolo es el siguiente:
1. Se utilizan asas calibradas de 0,01 ml o 0,001ml.
2. Se esterilizan a la llama del mechero, se enfría y se recolecta la orina del frasco.
3. Se siembra directamente en agar sangre y en algún medio selectivo.
4. Incubar a 37ºC por 24 hrs.
5. Contar las colonias y multiplicar por el factor de calibración del asa.

Placa con 10 colonias

X
1000 (0,001 ml)

10.000 UFC/ml
INTERPRETACIÓN MICROBIOLÓGICA DEL UROCULTIVO
Y CONDUCTA RECOMENDADA
 INFORMACIÓN DE RESULTADOS

NO OLVIDAR

SEDIMENTO URINARIO Presencia de piocitos

SUGERENTE DE ITU Bacterias: + ó más
Nitritos: + ó más

Si no se observa crecimiento Rcto significativo de 1 MO Cul2vo mixto donde corresponde

Rcto no significa2vo
NO HUBO DESARROLLO DE MO
A LAS 24 HRS DE INCUBACIÓN
valorar todos los morfo2pos
(trasplantado renal - punción vesical)
IDENTIFICACIÓN
(hubo desarrollo de….)
Rcto UFC/ml IDENTIFICACIÓN LOS MO
ANTIBIOGRAMA (hubo desarrollo de….)
Rcto UFC/ml de cada MO
ANTIBIOGRAMA de cada MO
 INFORMACIÓN DE RESULTADOS
Cul3vo mixto donde NO corresponda
valorar los morfo3pos
(≥ a 3 MO, sin predominio de alguno)
DESARROLLO POLIMICROBIANO
Rcto total UFC/ml
CORROBORAR MUESTRA
MAL TOMADA
Consultar sedimento urinario
“PRESENCIA DE ABUNDANTES
CÉLULAS EPITELIALES Y/O
MUCOSIDAD”
Añadir al informe
MUESTRA MAL TOMADA,
SE SOLICITA NUEVA MUESTRA
 DIAGNÓSTICO DE PROSTATITIS INFECCIOSA
Patología relacionada con el tracto urinario
Inflamación de la glándula prostática debido a una infección bacteriana aguda o crónica

CAUSAS
- Reflujo de orina contaminada o infectada a través de los conductos prostáticos que
desembocan a la uretra.
- Diseminación hematógena.
- Propagación de la flora fecal a través de los vasos linfáticos.

PROSTATITIS AGUDA PROSTATITIS CRÓNICA

Fiebre Sucesivas recaídas

Síntomas y signos genitourinarios Recurrentes ITUs

Agentes comunes de ITU

Mycobacterium (prostaDDs granulomatosa)
Neisseria gonorrhoeae (prostaDDs gonocócica)
AGENTES ETIOLÓGICOS
Ureaplasma urealy5cum
Chlamydia trachoma5s
Virus
 DIAGNÓSTICO DE PROSTATITIS INFECCIOSA

Urocultivos seriados diseñados por

Meares y Stamey en 1968.

1. Obtener una muestra de 10 ml de orina

de la primera micción, primer chorro
(muestra uretral).
2. Otra muestra de 10 ml de orina de 2º
chorro (vesical).
3. Una muestra durante e
inmediatamente después de un masaje
prostático.
4. El criterio de diagnóstico, es obtener un
recuento de la tercera muestra 10
veces mayor a las 2 primeras.
 INFECCIÓN URINARIA EN PACIENTES PEDIATRICOS

• En pacientes pediátricos con control de esfínter se

aplican los mismos criterios de diagnóstico para ITU
que en pacientes adultos.
• Debido al alto índice de contaminación un
urocultivo positivo obtenido por bolsa recolectora
no se considera ITU.
• Se debe repetir la toma de muestra por sondeo o
punción vesical para confirmar diagnóstico, previo a
iniciar tratamiento antibiótico.
• Actualmente si el resultado del urocultivo es el
desarrollo de un solo microorganismo con un
recuento ³ a 100.000 UFC/mL, acompañado de un
sedimento urinario sugerente de ITU y de la
sintomatología correspondiente, no debería ser
necesario corroborar el diagnóstico mediante un
urocultivo con muestra obtenida mediante el uso
de sonda urinario o punción vesical.
 INFECCIÓN URINARIA EN PACIENTES PEDIATRICOS

Ante urocultivos dudosos con escaso

desarrollo, o polimicrobianos (desarrollo ³
a 3 tipos de colonias diferentes, sin
importar el recuento) el clínico debe
priorizar el diagnostico basándose en la
sintomatología del paciente y aplicar u
tratamiento empírico. Si el paciente no
remite, se sugiere realizar urocultivo
mediante muestra de orina obtenida
mediante sonda urinaria o punción
vesical.
CRITERIOS MICROBIOLÓGICOS DE LOS DIFERENTES MÉTODOS DE
RECOLECCIÓN DE ORINA EN EL DIAGNÓSTICO DE ITU EN NIÑOS
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS DE TIRA
REACTIVA Y APROXIMACIÓN TERAPÉUTICA
RESUMEN
ANTIBIOGRAMA
CLSI – 2017
CASO CLINICO
BIBLIOGRAFÍA
- G. Wilson., 2003. Diagnóstico de la infección urinaria. Diagnostico Microbiológico – Universidad
Austral de Chile.
- E. Cercenado & R. Cantón. 2010. Diagnóstico microbiológico de las infecciones del tracto urinario.
Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades
Infecciosas y Microbiología Clínica.
- Koneman., 2008. Diagnóstico Microbiológico. 6° Edición. Pag. 81-86.
- http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/
- H. Bantar, H. Lopardo. 1997. Procedimientos, criterios de interpretación e informes. Urocultivo.
Apuntes de Laboratorio Britania.
- P. Leyán, 2008. Guías de Reforzamiento en el Diagnóstico Microbiológico.