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INTEGRANTES:
Grado: Tercero
Sección: “B”
ÍNDICE
Contenido
OBJETIVO GENERAL..................................................................................................................1
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.........................................................................................................1
INTRODUCCIÓN............................................................................................................................2
ANTIBIOGRAMA...........................................................................................................................3
LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS GENERALMENTE SE INFORMAN COMO:.......5
MÉTODOS PARA REALIZAR UN ANTIBIOGRAMA..........................................................6
ANTIBIOGRAMA DISCO-PLACA O MANUAL................................................................6
ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO MICROSCAN.....................................................16
MÉTODO DE EPSILON TEST (E-TEST)..........................................................................19
FOTOS TOMADAS EN LA PRÁCTICA DE LABORATORIO...............................................24
CONCLUSIONES..........................................................................................................................26
REFERENCIAS.............................................................................................................................27
II
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
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INTRODUCCIÓN
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ANTIBIOGRAMA
Pruebas de sensibilidad.
Pruebas de resistencia microbiana a fármacos.
Prueba de susceptibilidad microbiana. (Lab Test Online, 2019)
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Es utilizado cuando tenemos un cultivo positivo; cuando se tiene una infección y se han
cultivado y aislado un tipo de bacterias en un cultivo a partir de una muestra obtenida de la
zona de la infección; también es realizado cuando la infección no responde al tratamiento.
(López, 2019)
El antibiograma se utiliza para determinar qué agente antimicrobiano será capaz de inhibir
el crecimiento de bacterias causantes de la infección. Los resultados de esta prueba
ayudaran al médico a establecer el tratamiento más efectivo frente a la infección. Algunas
infecciones requieren la realización del antibiograma debido a que las bacterias que se
aíslan a partir del foco infeccioso presentan una susceptibilidad impredecible a los
antibióticos normalmente empleados. (Lab Test Online, 2019)
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Primero, se debe realizar un cultivo del área infectada en una muestra del sitio donde se
sospecha infección para ver si hay bacterias presentes que puedan estar causando la
infección. (López, 2019)
Durante el proceso de cultivo, los patógenos, si están presentes, son aislados, separados de
cualquier otro microorganismo presente, e identificados mediante pruebas bioquímicas,
enzimáticas o moleculares. Una vez que se han identificado, se puede determinar si se
requieren pruebas de susceptibilidad. Las pruebas de susceptibilidad no se realizan en todos
los patógenos; hay algunos que responden a los tratamientos estándar establecidos. (López,
2019)
Las pruebas de sensibilidad se realizan con cada tipo de bacteria que puede ser clínicamente
significativo en la muestra y cuya susceptibilidad al tratamiento puede no conocerse. Cada
patógeno se analiza individualmente para determinar la capacidad de los antimicrobianos
para inhibir su crecimiento. (López, 2019)
Intermedio: Puede ser efectivo a una dosis más alta o una dosificación más
frecuente o efectivo solo en sitios corporales específicos en donde el antibiótico
penetra para proporcionar concentraciones adecuadas. (López, 2019)
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Un patógeno puede ser resistente a todos los antimicrobianos utilizados normalmente para
el tratamiento de este tipo de infección. En este caso, el médico puede prescribir una
combinación de antibióticos que actúen conjuntamente para inhibir la bacteria cuando
ninguno de ellos es efectivo por sí solo. Sin embargo, estos tipos de tratamientos pueden ser
más caros, y en algunas ocasiones deben administrarse por vía intravenosa durante largos
períodos de tiempo. Algunas infecciones debidas a bacterias resistentes pueden llegar a ser
muy difíciles de tratar y resolver. (Lab Test Online, 2019)
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18-24 horas de incubación los discos aparecen rodeados por una zona de inhibición.
(Picazo, 2000)
Sin embargo, los métodos disco-placa no permiten una lectura directa del valor de la
concentración mínima inhibitoria (CMI). Esta determinación se realiza con cientos de
bacterias para minimizar errores. Se mide el diámetro de la zona de inhibición. Para
determinar la CMI de una cepa se procede a medir el diámetro de la zona de inhibición.
Existen, por tanto, unos diámetros de inhibición, expresados en mm, estandarizados para
cada antimicrobiano. La lectura de los halos de inhibición debe interpretarse como sensible
(S), intermedia (I) o resistente (R) según las categorías establecidas por el NCCLS. (Picazo,
2000)
Una vez que se han aislado colonias de un organismo que ha sido identificado como
patógeno potencial, es necesario proceder de la siguiente manera para realizar la prueba de
susceptibilidad. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)
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7. Medir las zonas de inhibición.
8. Interpretar los resultados. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)
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Preparación de la inoculación de la placa: Se debe de retirar el contenedor de discos del
congelador o refrigerador. Antes de abrir el contenedor, se debe permitir que los discos se
equilibren a la temperatura ambiente durante una a dos horas para minimizar la
condensación y reducir la posibilidad de que la humedad afecte la concentración de los
agentes antimicrobianos. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)
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Discos para antibiograma: Los discos, para antibiograma son producidos por casas
comerciales bajo un riguroso protocolo de control internacional. Cada disco contiene una
concentración predeterminada que permite una correlación más o menos precisa con la
concentración mínima inhibitoria que dicho antibiótico alcanza "in vivo" según los
resultados de resistencia o susceptibilidad. Solo deben utilizarse discos con nombre
genérico. (BERNAL, 1891)
¿Cómo aplicar los discos de antimicrobianos?: Colocar los discos con los agentes
antimicrobianos dentro de los 15 minutos siguientes a la inoculación de la placa MHA. Los
discos pueden ser colocados uno a uno o con un dispensador de discos multicanal.
Típicamente, se pueden aplicar hasta 12 discos en una placa de 150 mm de diámetro o hasta
5 discos en una placa de 100 mm. Se debe de presionar cada disco firmemente para
asegurar el contacto completo con la superficie del agar. No se olvide de este paso o los
discos pueden terminar en la tapa de la placa después de la incubación. (Cavalieri, Rankin,
& Harbeck, 2005)
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¿Cómo incubar la placa?: Incubar a 35°C por 16–18 horas. (Cavalieri, Rankin, &
Harbeck, 2005)
¿Cómo Medir las Zonas de Inhibición – Luz Reflejada?: Después de retirar la placa de
la incubadora:
Para medir las zonas de inhibición desde la parte posterior de la placa usando luz
reflejada:
Sostener la placa unos pocos centímetros sobre una superficie de color negro que no
refleje la luz.
Medir redondeando al milímetro más cercano con una regla o un calibrador.
La luz reflejada es usada para Enterobacteriaceae, como E. coli, otros bacilos gram
negativos, estafilococos y enterococos.
La luz reflejada también es usada cuando se miden zonas de inhibición en agar
Mueller-Hinton sangre. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)
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Interpretación de los resultados:
El diámetro de las zonas obtenido depende del medio utilizado, debido a la variación del
contenido de cationes y depende de la calidad del medio de Mueller-Hinton que ofrecen las
casas productoras. (BERNAL, 1891)
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Fuentes de error en el antibiograma por disco Frecuentemente algunos errores de tipo
técnico pueden comprometer la seguridad y confiabilidad del antibiograma por discos
invalidando el procedimiento. La siguiente lista incluye algunos de los errores más
frecuentes que el laboratorio de Bacteriología Clínica debe evitar:
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Lectura prematura de los resultados antes de un periodo de incubación de 16-18
horas.
Lectura incorrecta en la medición de los bordes de la zona de inhibición por
incorrecta iluminación. (BERNAL, 1891)
Informe de los resultados: El informe del resultado debe ser enviado al médico lo más
pronto posible. Dicho informe debe ser sencillo, claro y preciso. Debe incluir, nombre del
paciente, muestra estudiada, microorganismo aislado y el listado de antibióticos a los cuales
ha sido sensible. Para algunos médicos también es importante el listado de antibióticos a los
cuales el microorganismo es resistente, por tanto, dicha lista debe también incluirse. En
algunas ocasiones los médicos tratantes solicitan un antibiótico específico; este resultado
debe incluirse. (BERNAL, 1891)
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ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO MICROSCAN
¿Qué es MicroScan?
Es un sistema total para el laboratorio de microbiología, el cual permite realizar las pruebas
para identificación y susceptibilidad de microorganismos de interés clínico de una manera
rápida, sencilla, confiable y estandarizada. (Ortega, 2014)
Panel MicroScan
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La configuración del sistema de inoculación PROMPT utiliza una varilla única para crear
un inóculo estandarizado sin ajustes de turbidez que requieren de mucho tiempo. Las
suspensiones bacterianas se mantienen estables hasta 4 horas. (Ortega, 2014)
PASOS
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2. Dispensar inóculo
3. Sembrar en MicroScan
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d) Colocar sembrador/tapa cubeta encima del MicroScan.
e) Presionar el botón superior de dispensar.
f) Llevar el dispensador y tapa cubeta a la cubeta.
g) Oprimir las dos orejas y soltar la tapa. (Ortega, 2014)
4. Incubar
a) Colocar una gota de aceite a todo pozo señalado con una rayita.
b) Dejar en el extremo de la mesa y descartar todos los residuos generados.
c) Colocar los monitores a 37°C por 24 horas.
d) A las 24 horas leer los resultados. (Ortega, 2014)
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lado. El gradiente de agente antimicrobiano cubre un amplio rango de concentración, que
corresponde aproximadamente diluciones dobles. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)
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Dispensación de las tiras: Tanto si se utiliza el aplicador de las tiras como las pinzas, nos
debemos asegurar que la escala de CMI está orientada hacia arriba y que la concentración
máxima está cercana al extremo de la placa de Petri. Asegurarse que la tira contacta
completamente con la superficie del agar. Si es necesario, eliminar las gotas de aire que
puedan encontrarse por debajo de la tira presionándola ligeramente con las pinzas. Es
importante no mover las tiras una vez que han sido colocadas en la superficie del agar ya
que el antibiótico empieza a difundir rápidamente. Cuando se utiliza una placa de Petri de
100 mm depositar solo una tira por placa y poner la tira en el centro de la placa, mientras
que cuando se utiliza una placa de 150 mm no se deben colocar más de 6 tiras. (Picazo,
2000)
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Para determinar la susceptibilidad del Streptococcus pneumoniae a la penicilina.
Para bacterias de crecimiento lento que hace inaplicable el método por difusión.
Para confirmar patrones de resistencia a los antibióticos estudiados por difusión.
(Santiago, 2002)
Las culturas usualmente requieren de 24-48 horas antes de que los resultados estén
disponibles. Una vez que se completa el cultivo y se obtiene una muestra pura del
microorganismo, la prueba de susceptibilidad puede tardar mínimo otras 24-48 horas
dependiendo del método utilizado. Las culturas para los hongos y micobacterias como la
que causa la tuberculosis tardan mucho más tiempo, hasta de 6 a 8 semanas ya que su
crecimiento es más lento. (López, 2019)
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Algunas infecciones debidas a bacterias resistentes han demostrado ser muy difíciles de
tratar debido a las resistencias a los antibióticos. Las pruebas realizadas en los
antibiogramas no son útiles para virus ya que estos no son susceptibles al efecto de los
antibióticos. (López, 2019)
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FOTOS TOMADAS EN LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
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CONCLUSIONES
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REFERENCIAS
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Santiago. (2002). Scielo. Obtenido de Scielo: https://www.scielo.cl/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0716-10182002019200003
Urología basada en la evidencia. (24 de Agosto de 2020). Obtenido de Urología basada en
la evidencia: https://urologiabe.com/2020/08/24/como-interpretar-un-antibiograma/
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