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Universidad San Carlos de Guatemala

Centro Universitario de Oriente -CUNORI-


Curso: Microbiología
Licenciado: Álvaro Patzán
Carrera: Medico y Cirujano

PRÁCTICA DE LABORATORIO “ANTIBIOGRAMA”

INTEGRANTES:

(Coordinadora) Marelly Suseth de León Orellana 202042370


Sofía Isabel Vides Sosa 202042530
Leslie Anahí Javier Aldana 202040241
Jonathan Josué Rosales Oliva 202042110
Princesa Andrea Saraí Valdez Rosa 202046221
David Jonathan Cantarero Martínez 202080052

Grado: Tercero
Sección: “B”
ÍNDICE

Contenido
OBJETIVO GENERAL..................................................................................................................1
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.........................................................................................................1
INTRODUCCIÓN............................................................................................................................2
ANTIBIOGRAMA...........................................................................................................................3
LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS GENERALMENTE SE INFORMAN COMO:.......5
MÉTODOS PARA REALIZAR UN ANTIBIOGRAMA..........................................................6
ANTIBIOGRAMA DISCO-PLACA O MANUAL................................................................6
ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO MICROSCAN.....................................................16
MÉTODO DE EPSILON TEST (E-TEST)..........................................................................19
FOTOS TOMADAS EN LA PRÁCTICA DE LABORATORIO...............................................24
CONCLUSIONES..........................................................................................................................26
REFERENCIAS.............................................................................................................................27

II
OBJETIVO GENERAL

 Establecer la importancia del antibiograma dentro de la práctica médica.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Conocer la función del antibiograma.


 Determinar la importancia del antibiograma para una adecuada elección terapéutica.
 Explicar cómo se obtienen los resultados del antibiograma.
 Identificar los tipos de antibiograma.

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INTRODUCCIÓN

La resistencia de las bacterias es el principal obstáculo para la eficacia terapéutica de los


antibióticos, pues no sólo puede anular la acción curativa si se manifiesta en el curso del
tratamiento, sino que tiene a la larga consecuencias todavía más graves para el conjunto de
la población, ya que provoca la desaparición de las cepas susceptibles y la propagación de
las resistentes. Ese es el motivo por el cual la determinación de la sensibilidad de las
bacterias a los antibióticos haya adquirido tanta importancia y sea indispensable para hacer
de los antibióticos un uso racional y para preservar la eficacia de este grupo tan valioso de
agentes terapéuticos. El conocimiento de la sensibilidad a los antibióticos, del
microorganismo causante de una enfermedad, no es sólo importante para hacer la selección
inicial del agente terapéutico correspondiente, sino que además en aquellos casos en los
cuales el paciente presente intolerancia a determinado fármaco, permite seleccionar el más
adecuado para ese paciente en particular.

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ANTIBIOGRAMA

Es también conocido como:

 Pruebas de sensibilidad.
 Pruebas de resistencia microbiana a fármacos.
 Prueba de susceptibilidad microbiana. (Lab Test Online, 2019)

El nombre sistemático es simplemente: Antibiograma. (Lab Test Online, 2019)

El antibiograma es un examen que tiene como objetivo determinar el perfil de sensibilidad


y resistencia de las bacterias a los antibióticos. A través del resultado del antibiograma el
médico puede brindar el antibiótico más indicado para tratar la infección del paciente,
evitando así el uso de otros antibióticos que no son necesarios y que no tratan la infección,
además del surgimiento de resistencia. (Lemos, 2020)

El estudio de la sensibilidad a antimicrobianos de las diferentes bacterias aisladas en


muestras biológicas tiene 2 objetivos fundamentales: guiar al clínico en la elección del
mejor tratamiento individual, y monitorizar la evolución de la resistencia bacteriana
con objeto de revisar el espectro del antimicrobiano y poder actualizar los
tratamientos empíricos. (Cercenado & Saavedra-Lozano, 2009)

Normalmente el antibiograma se realiza después de la identificación de microorganismos


en gran cantidad en la sangre, orina, heces. Así, de acuerdo con el microorganismo
identificado y perfil de sensibilidad, el médico puede indicar el tratamiento más adecuado.
(Lemos, 2020)

Con un antibiograma se pueden obtener resultados cualitativos que indican si la bacteria es


sensible o resistente a un antibiótico, o cuantitativos que determinan la concentración
mínima inhibitoria (CMI) de antimicrobiano que detiene o inhibe el crecimiento bacteriano.
(Cercenado & Saavedra-Lozano, 2009)

El antibiograma se realiza para determinar la probabilidad de que un antibiótico concreto


sea eficaz para detener el crecimiento de las bacterias que causan una infección. (López,
2019)

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Es utilizado cuando tenemos un cultivo positivo; cuando se tiene una infección y se han
cultivado y aislado un tipo de bacterias en un cultivo a partir de una muestra obtenida de la
zona de la infección; también es realizado cuando la infección no responde al tratamiento.
(López, 2019)

El antibiograma se utiliza para determinar qué agente antimicrobiano será capaz de inhibir
el crecimiento de bacterias causantes de la infección. Los resultados de esta prueba
ayudaran al médico a establecer el tratamiento más efectivo frente a la infección. Algunas
infecciones requieren la realización del antibiograma debido a que las bacterias que se
aíslan a partir del foco infeccioso presentan una susceptibilidad impredecible a los
antibióticos normalmente empleados. (Lab Test Online, 2019)

Se determina la susceptibilidad, que es un término utilizado para describir la condición en


la que los microorganismos no pueden crecer en presencia de uno o más medicamentos
antimicrobianos. Las pruebas de susceptibilidad determinan la efectividad potencial de un
agente antimicrobiano en el organismo que causa una infección y / o determina si el
organismo ha desarrollado resistencia a ciertos antibióticos. Los resultados de esta prueba
pueden usarse para predecir el efecto potencial en el paciente. (López, 2019)

Aunque los virus son microorganismos, la prueba de su resistencia a los medicamentos


antivirales se realiza de forma diferente. El antibiograma sólo se refiere al estudio de la
sensibilidad a fármacos de bacterias. (López, 2019)

Las bacterias tienen el potencial de desarrollar resistencia a los agentes antimicrobianos en


cualquier momento. Esto significa que los antibióticos que una vez se usaron para inhibir el
crecimiento pueden dejar de ser efectivos. Las pruebas de susceptibilidad son una forma de
determinar si este es el caso cuando el cultivo es positivo ante la presencia de
patógenos. (López, 2019)

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Primero, se debe realizar un cultivo del área infectada en una muestra del sitio donde se
sospecha infección para ver si hay bacterias presentes que puedan estar causando la
infección. (López, 2019)

Durante el proceso de cultivo, los patógenos, si están presentes, son aislados, separados de
cualquier otro microorganismo presente, e identificados mediante pruebas bioquímicas,
enzimáticas o moleculares. Una vez que se han identificado, se puede determinar si se
requieren pruebas de susceptibilidad. Las pruebas de susceptibilidad no se realizan en todos
los patógenos; hay algunos que responden a los tratamientos estándar establecidos. (López,
2019)

Las pruebas de sensibilidad se realizan con cada tipo de bacteria que puede ser clínicamente
significativo en la muestra y cuya susceptibilidad al tratamiento puede no conocerse. Cada
patógeno se analiza individualmente para determinar la capacidad de los antimicrobianos
para inhibir su crecimiento. (López, 2019)

Esto se puede medir directamente juntando el patógeno y el antibiótico en un entorno en


crecimiento para observar el efecto del antibiótico en el crecimiento de la bacteria. (López,
2019)

LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS GENERALMENTE SE INFORMAN


COMO:

 Sensible: Es probable, pero no está garantizado que inhiba al microorganismo o


patógeno. Puede ser una opción apropiada para el tratamiento. (López, 2019)

 Intermedio: Puede ser efectivo a una dosis más alta o una dosificación más
frecuente o efectivo solo en sitios corporales específicos en donde el antibiótico
penetra para proporcionar concentraciones adecuadas. (López, 2019)

 Resistente: No es efectivo para inhibir el crecimiento del organismo; puede no ser


una opción apropiada para el tratamiento. (López, 2019)

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Un patógeno puede ser resistente a todos los antimicrobianos utilizados normalmente para
el tratamiento de este tipo de infección. En este caso, el médico puede prescribir una
combinación de antibióticos que actúen conjuntamente para inhibir la bacteria cuando
ninguno de ellos es efectivo por sí solo. Sin embargo, estos tipos de tratamientos pueden ser
más caros, y en algunas ocasiones deben administrarse por vía intravenosa durante largos
períodos de tiempo. Algunas infecciones debidas a bacterias resistentes pueden llegar a ser
muy difíciles de tratar y resolver. (Lab Test Online, 2019)

Antes de comenzar cualquier tratamiento con un antimicrobiano, se debe de recolectar una


muestra de cultivo y pruebas de sensibilidad, a menos que la prueba se use para controlar la
efectividad del tratamiento. (López, 2019)

MÉTODOS PARA REALIZAR UN ANTIBIOGRAMA

El antibiograma históricamente determinaba las sensibilidades con la técnica de Kirby-


Bauer que utilizaba discos impregnados de antibiótico y según el halo que se formaba a su
alrededor se determinaba si la bacteria era sensible, intermedia o resistente a dicho
antibiótico. (Urología basada en la evidencia, 2020)

Múltiples métodos distintos se han desarrollado posteriormente. (Urología basada en la


evidencia, 2020)

ANTIBIOGRAMA DISCO-PLACA O MANUAL

Es uno de los métodos que se recomienda para la determinación de la sensibilidad


bacteriana a los antimicrobianos. El antibiograma disco-placa consiste en depositar, en la
superficie de agar de una placa de Petri previamente inoculada con el microorganismo,
discos de papel secante impregnados con los diferentes antibióticos. Tan pronto el disco
impregnado de antibiótico se pone en contacto con la superficie húmeda del agar, el filtro
absorbe agua y el antibiótico difunde al agar. El antibiótico difunde radialmente a través del
espesor del agar a partir del disco formándose un gradiente de concentración. Transcurridas

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18-24 horas de incubación los discos aparecen rodeados por una zona de inhibición.
(Picazo, 2000)

Sin embargo, los métodos disco-placa no permiten una lectura directa del valor de la
concentración mínima inhibitoria (CMI). Esta determinación se realiza con cientos de
bacterias para minimizar errores. Se mide el diámetro de la zona de inhibición. Para
determinar la CMI de una cepa se procede a medir el diámetro de la zona de inhibición.
Existen, por tanto, unos diámetros de inhibición, expresados en mm, estandarizados para
cada antimicrobiano. La lectura de los halos de inhibición debe interpretarse como sensible
(S), intermedia (I) o resistente (R) según las categorías establecidas por el NCCLS. (Picazo,
2000)

Como realizar la prueba de revisión en un antibiograma disco-placa:

Una vez que se han aislado colonias de un organismo que ha sido identificado como
patógeno potencial, es necesario proceder de la siguiente manera para realizar la prueba de
susceptibilidad. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

1. Seleccionar las colonias.


2. Preparar una suspensión del inóculo.
3. Estandarizar la suspensión del inóculo.
4. Inocular la placa.
5. Colocar discos de antimicrobiano.
6. Incubar la placa.

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7. Medir las zonas de inhibición.
8. Interpretar los resultados. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

Seleccionar colonias: Uno de los pasos más importantes en el proceso de la prueba es la


preparación del inóculo. Esto involucra la selección de colonias apropiadas para la prueba.
Primero, se debe de seleccionar varias colonias del organismo que esté analizando. Si
selecciona entre 3–5 colonias, en vez de solo una, las probabilidades de detectar resistencia
son mayores. Nota: Utilizando una herramienta de inoculación (o un hisopo de algodón) se
debe de recoger de la placa sólo colonias bien aisladas para evitar pruebas de cultivo mixto.
(Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

¿Cómo preparar y estandarizar la suspensión del inoculo?: La turbidez de la


suspensión debe ser estandarizada al estándar 0,5 de McFarland. Los estándares de turbidez
de McFarland se usan como referencia en suspensiones bacteriológicas para saber que el
número de bacterias por mililitro, o más bien en UFC (Unidades Formadoras de Colonias).
(Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

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Preparación de la inoculación de la placa: Se debe de retirar el contenedor de discos del
congelador o refrigerador. Antes de abrir el contenedor, se debe permitir que los discos se
equilibren a la temperatura ambiente durante una a dos horas para minimizar la
condensación y reducir la posibilidad de que la humedad afecte la concentración de los
agentes antimicrobianos. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

Permitir que la placa de Agar Mueller-Hinton (MHA) se caliente a la temperatura ambiente


para que cualquier exceso de humedad se absorba dentro del medio. Este proceso se puede
acelerar poniendo las placas entreabiertas en el incubador por 10–15 minutos. Agitar la
suspensión del organismo para asegurarse que está bien mezclada. Luego, sumergir un
hisopo de algodón estéril en la suspensión. Remover el exceso de líquido del hisopo
presionándolo contra la pared del tubo. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

Una buena inoculación de la placa: Empezando en la parte superior de la placa MHA se


debe inocular la superficie con el hisopo. Cubrir toda la placa frotando de ida y vuelta de un
borde al otro. Rotar la placa aproximadamente 60º y repetir el procedimiento de frotado.
Rotar otra vez la placa 60º y frotar toda la placa por tercera vez. Esto garantizará que el
inóculo sea distribuido homogéneamente. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

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Discos para antibiograma: Los discos, para antibiograma son producidos por casas
comerciales bajo un riguroso protocolo de control internacional. Cada disco contiene una
concentración predeterminada que permite una correlación más o menos precisa con la
concentración mínima inhibitoria que dicho antibiótico alcanza "in vivo" según los
resultados de resistencia o susceptibilidad. Solo deben utilizarse discos con nombre
genérico. (BERNAL, 1891)

¿Cómo aplicar los discos de antimicrobianos?: Colocar los discos con los agentes
antimicrobianos dentro de los 15 minutos siguientes a la inoculación de la placa MHA. Los
discos pueden ser colocados uno a uno o con un dispensador de discos multicanal.
Típicamente, se pueden aplicar hasta 12 discos en una placa de 150 mm de diámetro o hasta
5 discos en una placa de 100 mm. Se debe de presionar cada disco firmemente para
asegurar el contacto completo con la superficie del agar. No se olvide de este paso o los
discos pueden terminar en la tapa de la placa después de la incubación. (Cavalieri, Rankin,
& Harbeck, 2005)

Puntos que hay que recordar sobre los discos de antimicrobianos:

 No usar discos después de su fecha de caducidad.


 No almacenar discos en un congelador libre de escarcha.
 Usar productos aprobados por la FDA.
 No reubicar un disco una vez que éste ha tocado la superficie del agar. (Cavalieri,
Rankin, & Harbeck, 2005)

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¿Cómo incubar la placa?: Incubar a 35°C por 16–18 horas. (Cavalieri, Rankin, &
Harbeck, 2005)

¿Cómo Medir las Zonas de Inhibición – Luz Reflejada?: Después de retirar la placa de
la incubadora:

 Se debe de examinar detenidamente la placa para verificar que el crecimiento sea


uniforme de tal modo que pueda identificar zonas sin crecimiento bacteriano.
(Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

Para medir las zonas de inhibición desde la parte posterior de la placa usando luz
reflejada:

 Sostener la placa unos pocos centímetros sobre una superficie de color negro que no
refleje la luz.
 Medir redondeando al milímetro más cercano con una regla o un calibrador.
 La luz reflejada es usada para Enterobacteriaceae, como E. coli, otros bacilos gram
negativos, estafilococos y enterococos.
 La luz reflejada también es usada cuando se miden zonas de inhibición en agar
Mueller-Hinton sangre. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

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Interpretación de los resultados:

El diámetro de las zonas obtenido depende del medio utilizado, debido a la variación del
contenido de cationes y depende de la calidad del medio de Mueller-Hinton que ofrecen las
casas productoras. (BERNAL, 1891)

Por ejemplo, si el diámetro medio de la cepa control es de 19 mm la interpretación debe ser


< 12 mm para cepas resistentes, 13-16 mm para cepas indeterminadas y > 17mm para
cepas susceptibles, estas interpretaciones estándar son tentativas. (BERNAL, 1891)

Los rangos de interpretación son los siguientes según el CLSI:

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Fuentes de error en el antibiograma por disco Frecuentemente algunos errores de tipo
técnico pueden comprometer la seguridad y confiabilidad del antibiograma por discos
invalidando el procedimiento. La siguiente lista incluye algunos de los errores más
frecuentes que el laboratorio de Bacteriología Clínica debe evitar:

 Utilización de un medio diferente al de Mueller-Hinton.


 Preparación incorrecta del estándar de turbidez.
 Almacenamiento incorrecto de los discos.
 Inadecuada estandarización de la concentración del inóculo.
 Omisión de eliminar el exceso de cultivo contenido en el aplicador antes de inocular
el medio sólido.
 Demora excesiva en la aplicación de los discos después de haber hecho la
inoculación en el medio sólido.
 Demora excesiva en la incubación del medio después de haber sido puestos los
discos.
 Incubación a temperatura diferente de 35 °C

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 Lectura prematura de los resultados antes de un periodo de incubación de 16-18
horas.
 Lectura incorrecta en la medición de los bordes de la zona de inhibición por
incorrecta iluminación. (BERNAL, 1891)

Informe de los resultados: El informe del resultado debe ser enviado al médico lo más
pronto posible. Dicho informe debe ser sencillo, claro y preciso. Debe incluir, nombre del
paciente, muestra estudiada, microorganismo aislado y el listado de antibióticos a los cuales
ha sido sensible. Para algunos médicos también es importante el listado de antibióticos a los
cuales el microorganismo es resistente, por tanto, dicha lista debe también incluirse. En
algunas ocasiones los médicos tratantes solicitan un antibiótico específico; este resultado
debe incluirse. (BERNAL, 1891)

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ANTIBIOGRAMA AUTOMATIZADO MICROSCAN

La microbiología moderna exige el uso de la tecnología más apropiada para garantizar


resultados válidos y optimizar recursos de las instituciones de salud. (Ortega, 2014)

¿Qué es MicroScan?

Es un sistema total para el laboratorio de microbiología, el cual permite realizar las pruebas
para identificación y susceptibilidad de microorganismos de interés clínico de una manera
rápida, sencilla, confiable y estandarizada. (Ortega, 2014)

Panel MicroScan

 Placa de microtitulación con 96 pozos


 28 pruebas bioquímicas deshidratadas para identificación
 La identificación está basada en la detección de cambios de pH, utilización de
sustratos y crecimiento de presencia de un antibiótico, después de 16-42 horas de
incubación a 37°C
 Paneles convencionales (16-24 horas): ID, MIC, COMBO; para Gram Positivo y
Gram Negativo
 Paneles rápidos (2-4 horas): ID, MIC, COMBO; para Gram Positivo y Gram
Negativo. Tecnología fluorescente. (Ortega, 2014)

Sistema Renok y Prompt

Sistema RENOK es un dispensador especial para realizar la inoculación de las suspensiones


bacterianas al panel (este panel se compone de identificación y sensibilidad por MIC), en
un solo paso, este sistema no requiere mantenimiento ni calibración. Imagina una pipeta
multicanal. (Ortega, 2014)

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La configuración del sistema de inoculación PROMPT utiliza una varilla única para crear
un inóculo estandarizado sin ajustes de turbidez que requieren de mucho tiempo. Las
suspensiones bacterianas se mantienen estables hasta 4 horas. (Ortega, 2014)

 Preparación del inoculo:

Tomar de 3-5 colonias y suspenderlas en el líquido de inoculación (Prompt).

 Rehidratación del panel:

Dispensar 110 ul de la suspensión bacteriana en cada pozo de la placa (Renok).

 Agregar una gota de aceite mineral en los pozos subrayados


 Incubar 16-24 horas a 37°C. (Ortega, 2014)

PASOS

1. Preparación del inoculo

a) Tomar inoculador, quitar seguro.


b) Tomar con el inoculador una colonia aislada.
c) Destapar dilatador del inóculo.
d) Introducir inoculador dentro del dilutor.
e) Mezclar suavemente por inversión 5 veces.
f) Dejar en reposo 1 minuto. (Ortega, 2014)

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2. Dispensar inóculo

a) Destapar la cubeta del inóculo.


b) Verter el contenido del frasco dilutor en la cubeta, sin burbujas, linealmente
y luego tapar la cubeta.
c) Presionar orejas laterales del dispensador.
d) Colocar sobre la cubeta del inóculo.
e) Encajar y soltar orejas. (Ortega, 2014)

3. Sembrar en MicroScan

a) Presionar palanca de succión.


b) Tomar sembrador por parte superior sin tocar los botones.
c) El sembrador quedará pegado a la tapa.

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d) Colocar sembrador/tapa cubeta encima del MicroScan.
e) Presionar el botón superior de dispensar.
f) Llevar el dispensador y tapa cubeta a la cubeta.
g) Oprimir las dos orejas y soltar la tapa. (Ortega, 2014)
4. Incubar

a) Colocar una gota de aceite a todo pozo señalado con una rayita.
b) Dejar en el extremo de la mesa y descartar todos los residuos generados.
c) Colocar los monitores a 37°C por 24 horas.
d) A las 24 horas leer los resultados. (Ortega, 2014)

MÉTODO DE EPSILON TEST (E-TEST)


La prueba E o método PDM de epsilómetro ha sido usado exitosamente para analizar
anaerobios y otros organismos aeróbicos. El término epsilómetro se refiere a una tira fina,
de 5 x 50 mm, inerte y no porosa con un gradiente continuo exponencial de agente
antimicrobiano inmovilizado en un lado y una escala de interpretación impresa en el otro

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lado. El gradiente de agente antimicrobiano cubre un amplio rango de concentración, que
corresponde aproximadamente diluciones dobles. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

El principio de este método es una expansión de la técnica de difusión en disco. En el


método E-test se puede, mediante lectura directa, determinar la concentración inhibitoria
mínima (CMI). El protocolo para preparar el inóculo es el mismo que para la difusión en
disco. (Picazo, 2000)

Siguiendo el método de difusión, una vez inoculado la placa de agar con el


microorganismo, se coloca la tira de E-test sobre su superficie, produciéndose de forma
inmediata una difusión del antibiótico desde el soporte hasta el agar, creándose de este
modo a lo largo de la tira un gradiente exponencial de las concentraciones del
antimicrobiano. Tras la incubación de las placas, se puede observar una zona de inhibición
elipsoidal y simétrica. Después de la incubación la CMI será el valor obtenido en el punto
en el que el extremo de inhibición intersecciona con la tira. (Picazo, 2000)

En contra de lo que ocurre en la difusión en disco donde la orientación del disco no


importa, si colocamos la tira al revés no se observa elipse de inhibición ya que el gradiente
de concentraciones se sitúa solo sobre una de las caras de la tira. (Picazo, 2000)

Cuando es aplicado a una placa de agar inoculada, el gradiente antimicrobiano de la tira es


liberado inmediatamente en el agar, creando un gradiente continuo y exponencial de
concentraciones de agente antimicrobiano debajo del eje lineal del material de soporte.
(Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

Después de la incubación, se observa una elipse de inhibición de crecimiento. La


intersección entre el borde de la zona de inhibición y la tira de soporte se produce en la
concentración del antimicrobiano que ya no es capaz de inhibir el crecimiento. El punto de
intersección da la “concentración inhibitoria” (CI) en µg/mL— una medida directa de la
susceptibilidad del microorganismo al agente antimicrobiano probado. Las CIMs se leen
directamente sobre la escala en la tira de soporte. (Cavalieri, Rankin, & Harbeck, 2005)

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Dispensación de las tiras: Tanto si se utiliza el aplicador de las tiras como las pinzas, nos
debemos asegurar que la escala de CMI está orientada hacia arriba y que la concentración
máxima está cercana al extremo de la placa de Petri. Asegurarse que la tira contacta
completamente con la superficie del agar. Si es necesario, eliminar las gotas de aire que
puedan encontrarse por debajo de la tira presionándola ligeramente con las pinzas. Es
importante no mover las tiras una vez que han sido colocadas en la superficie del agar ya
que el antibiótico empieza a difundir rápidamente. Cuando se utiliza una placa de Petri de
100 mm depositar solo una tira por placa y poner la tira en el centro de la placa, mientras
que cuando se utiliza una placa de 150 mm no se deben colocar más de 6 tiras. (Picazo,
2000)

¿En qué casos se realiza esta técnica?

 Pacientes con infecciones severas.


 Sepsis y/o endocarditis bacteriana en la que se necesita evaluar la concentración a
utilizar.
 Cuando la medida de los halos de inhibición no está estandarizada para el
microorganismo aislado.

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 Para determinar la susceptibilidad del Streptococcus pneumoniae a la penicilina.
 Para bacterias de crecimiento lento que hace inaplicable el método por difusión.
 Para confirmar patrones de resistencia a los antibióticos estudiados por difusión.
(Santiago, 2002)

Lectura de los resultados: Después del período de incubación, leer la CMI en el


punto de intersección entre el extremo de inhibición de la elipse y la tira de E-test.
Cuando el crecimiento tiene lugar a lo largo de toda la tira y no se observa
formación de la elipse de inhibición, la CMI se informará como superior al valor
máximo de la escala de lectura y, por el contrario, cuando la elipse de inhibición
se encuentre por debajo de la tira debe ser informado como inferior al valor
mínimo de la escala de lectura. Con ciertas combinaciones de bacterias-
antibióticos, el extremo de la elipse de inhibición puede ser difuso. (Picazo, 2000)

Las culturas usualmente requieren de 24-48 horas antes de que los resultados estén
disponibles. Una vez que se completa el cultivo y se obtiene una muestra pura del
microorganismo, la prueba de susceptibilidad puede tardar mínimo otras 24-48 horas
dependiendo del método utilizado. Las culturas para los hongos y micobacterias como la
que causa la tuberculosis tardan mucho más tiempo, hasta de 6 a 8 semanas ya que su
crecimiento es más lento. (López, 2019)

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Algunas infecciones debidas a bacterias resistentes han demostrado ser muy difíciles de
tratar debido a las resistencias a los antibióticos. Las pruebas realizadas en los
antibiogramas no son útiles para virus ya que estos no son susceptibles al efecto de los
antibióticos. (López, 2019)

Como ya se ha indicado, el estudio de la sensibilidad a antimicrobianos de las diferentes


bacterias aisladas en muestras biológicas tiene interés individual y epidemiológico. La
realización rutinaria del antibiograma proporciona los patrones de resistencias locales y
regionales que deben actualizarse periódicamente, ya que éstos pueden cambiar
sustancialmente en cortos períodos. (Cercenado & Saavedra-Lozano, 2009)

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FOTOS TOMADAS EN LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

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CONCLUSIONES

El antibiograma está indicado cuando se aísla una bacteria responsable de un proceso


infeccioso y no puede predecirse su sensibilidad, especialmente si se sabe que este tipo de
bacteria puede presentar resistencia a los antimicrobianos más habituales. Estas pruebas de
sensibilidad también son útiles en estudios epidemiológicos ya que el resultado del
antibiograma puede ser considerado como el primer marcador epidemiológico de que se
dispone.

El estudio de la sensibilidad de los microorganismos a los antimicrobianos es una de las


funciones más importantes de los laboratorios de microbiología clínica. Su realización se
desarrolla mediante las pruebas de sensibilidad o antibiograma, cuyo principal objetivo es
evaluar en el laboratorio la respuesta de un microorganismo a uno o varios antimicrobianos,
traduciendo, en una primera aproximación, su resultado como factor predictivo de la
eficacia clínica. El antibiograma define la actividad in vitro de un antibiótico frente a un
microorganismo determinado y refleja su capacidad para inhibir el crecimiento de una
bacteria o población bacteriana. Su resultado, la farmacología del antimicrobiano, en
particular en el lugar de la infección, y los aspectos clínicos del paciente y de su infección,
sustentan la elección de los antimicrobianos en el tratamiento de las enfermedades
infecciosas. Asimismo, ofrece, en su conjunto, elementos objetivos de actuación en los
tratamientos empíricos.

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REFERENCIAS

BERNAL, M. (1891). StuDocu. Obtenido de StuDocu:


https://www.studocu.com/de-at/document/universidad-marista-de-guadalajara/
comprension-lectora/1891-texto-del-manuscrito-completo-cuadros-y-figuras-
insertos-7206-1-10-2013-0814/8185742
Cavalieri, S. J., Rankin, I. D., & Harbeck, R. J. (2005). Manual de pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana. Obtenido de Manual de pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana: https://www.paho.org/hq/dmdocuments/2005/susceptibilidad-
antimicrobiana-manual-pruebas-2005.pdf
Cercenado, E., & Saavedra-Lozano, J. (Agosto de 2009). Elsevier. Obtenido de Elsevier:
https://www.elsevier.es/es-revista-anales-pediatria-continuada-51-articulo-el-
antibiograma-interpretacion-del-antibiograma-S1696281809719274
Lab Test Online. (03 de Noviembre de 2019). Obtenido de Lab Test Online:
https://labtestsonline.es/tests/antibiograma
Lemos, M. (Abril de 2020). TUA SAÚDE. Obtenido de TUA SAÚDE:
https://www.tuasaude.com/es/antibiograma/
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