Trabajo en El Lboratorio Mettler Toledo PDF

Soluciones de laboratorio
Técnicas de
medición
Trucos y consejos
Soluciones
seleccionadas
Habilidades fundamentales para el laboratorio

Guía para conseguir la calidad de las mediciones
Editorial
Estimado/a lector/a:
En esta guía, se le proporcionará información útil sobre técnicas de medición fundamentales, como el pesaje,
la medición del pH, el pipeteo, etc. Hemos hecho lo posible por omitir las tediosas elaboraciones teóricas
y centrarnos en los aspectos prácticos de la medición y el análisis.
El contenido incluye:
• Técnicas y principios de medición.
• Ventajas de varios métodos.
• Ejemplos de aplicación.
• Soluciones seleccionadas.
La experiencia nos demuestra que las balanzas e instrumentos analíticos modernos y bien desarrollados
favorecen la facilidad de uso, la seguridad operativa y la exactitud de los resultados. Sin embargo, hasta
con soluciones de última generación, los operarios necesitan conocimientos prácticos para hacer las cosas
bien y conseguir fiabilidad y coherencia.
Puede que esta recopilación de información práctica contribuya a la exactitud y la eficacia de sus tareas
de medición diarias.
METTLER TOLEDO
Exención de responsabilidades
Las aplicaciones de esta guía representan posibles ejemplos de aplicaciones seleccionados. Se han probado con todo el cuidado
posible en nuestro laboratorio con los instrumentos analíticos mencionados en esta guía. Dado que el uso y la transferencia de un ejemplo
de aplicación están fuera de nuestro control, no podemos aceptar responsabilidades por el uso o las consecuencias de las aplicaciones
que se muestran en esta guía. Los experimentos se llevaron a cabo y sus resultados se evaluaron de acuerdo con nuestros conocimientos
actuales. El resto del contenido de esta guía también se corresponde con nuestros conocimientos actuales.
Sin embargo, esta guía no le exime de comprobar personalmente la adecuación de estos ejemplos a sus propios métodos, instrumentos
y fines previstos.
Cuando se usen productos químicos, reactivos y disolventes, se deberán consultar las normas de seguridad generales, las precauciones
y las instrucciones del fabricante.
METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 3

Contenido
Contenido
1 Introducción general 7
2 Pesaje 9
3 Pipeteo 12
4 Determinación del valor del pH y de la conductividad 15
5 Determinación del contenido de humedad 19
6 Valoración 22
7 UV-VIS 25
8 Densidad: determinación de la concentración 30
9 Índice de refracción: determinación de la concentración 33
10 Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento 36
11 Análisis térmico 45
12 Conclusión 53
13 Referencias 54
14 Información de apoyo adicional 55

1 Introducción general
Introducción general
1.1 Medición hacia el éxito
Todos los laboratorios se esfuerzan para conseguir exactitud y eficacia. Sea cual sea el instrumento de
medición que se use, los objetivos de precisión y de eficacia de los flujos de trabajo son sencillos y funda-
mentales. Sin embargo, lograr la precisión a la hora de realizar mediciones en un mundo que cambia constan-
temente puede ser de todo menos sencillo. Perder de vista este objetivo general puede ser perjudicial porque
el número de errores que no se detectan puede crecer exponencialmente. Un resultado deficiente afecta no solo
a la medición en cuestión, sino también a todas las mediciones que la sigan. Y cuando la exactitud se resiente,
los resultados y los márgenes de beneficio también, pues se tienen que repetir acciones que llevan tiempo. Los
usuarios finales pueden incluso resultar heridos. Para maximizar las probabilidades de lograr la exactitud,
los operarios del laboratorio deben tener antes un conocimiento claro de las técnicas básicas de medición y
de los principios de funcionamiento del equipo que estén usando. Este conocimiento les ayudará a reconocer y
prevenir las posibles fuentes de errores. También les permitirá buscar maneras de rediseñar los flujos de trabajo y,
en última instancia, aumentar la eficiencia. En los laboratorios modernos, los instrumentos deben funcionar en
armonía para asegurar la fiabilidad de la evaluación de la calidad de las muestras y llevar a cabo procesos de
medición sin errores.
1.2 El impulso de la exactitud en la medición y la eficacia de los flujos de trabajo
Para asegurar el éxito continuo de la exactitud en la medición y la eficacia de los flujos de trabajo en cualquier
laboratorio, se deben aplicar tres elementos operativos fundamentales:
1. Formación del usuario. Una formación eficaz garantiza que las personas que usan los instrumentos día tras
día sean plenamente conscientes de la importancia de la exactitud en un proceso dado. Además, asegura
que sean capaces de localizar y subsanar posibles fuentes de errores.
2. Mantenimiento periódico. Llevar a cabo una planificación de mantenimiento adecuada de todo el equipo
del laboratorio es de vital importancia para garantizar un rendimiento fiable y un tiempo de actividad perfecto
de los instrumentos.
3. Seguridad de los procesos. Unos procesos fiables de gestión de usuarios y datos, así como la automati-
zación de los flujos de trabajo, ayudan a mantener la seguridad y la integridad de los datos.
Aunque estos aspectos son importantes, esta guía se centra en proporcionar conocimientos y consejos que
sirvan de complemento a las acciones de formación en el laboratorio. Además, ayuda a asegurar que los
operarios entienden la complejidad de los métodos de medición individuales. Esta información no solo ayuda
a reducir los errores, sino que también plantea situaciones en las que la automatización puede ayudar a
aumentar la productividad.
1.3 Principios de medición
Las técnicas básicas de medición que se abordan en esta guía son:

• Pesaje: una actividad clave en la mayoría de los laboratorios, aunque a menudo se subestima. En esta guía,
se le ayudará a entender los factores que influyen en el pesaje y cómo se pueden minimizar o evitar sus
efectos.
• Pipeteo: un recurso básico de los laboratorios de biotecnología e investigación. Aunque parezca sencillo,
las habilidades de manipulación de líquidos pueden variar considerablemente entre los operarios. Esta guía
ayudará al personal del laboratorio a reducir las fuentes de incoherencias para conseguir una exactitud mayor
a largo plazo.

• Medición del pH: se trata de un valor muy importante en muchos procesos, productos y aplicaciones.
Introducción general
Los operarios aprenderán algunos trucos y consejos sobre los medidores y los electrodos que ayudan
a alcanzar resultados de pH correctos y fiables una vez tras otra.
• Contenido de humedad: un aspecto crítico en muchos productos e industrias. De ello depende todo,
desde la calidad y las prestaciones del producto hasta su período de conservación. En esta guía, se explica
brevemente el principio de los analizadores de humedad halógenos y cómo se pueden obtener resultados
precisos y fiables en los análisis de humedad periódicos.
• Valoración: su fiabilidad se debe al curso estequiométrico y fiable de la reacción de la valoración, a los
métodos generalmente aceptados y a los instrumentos probados con exhaustividad. Esta guía ayudará a los
operarios a evaluar y desarrollar valoraciones óptimas.
• UV/VIS: la espectroscopia ultravioleta-visible se usa con frecuencia en la química analítica para la determi-
nación cuantitativa de diferentes analitos, como los iones de metales de transición, los compuestos orgánicos
altamente conjugados y las macromoléculas biológicas. En esta guía, se incluyen consejos para conseguir
resultados exactos en poco tiempo.
• Densidad e índice de refracción: proporciona información esencial del control de calidad. Ambos métodos
ofrecen resultados rápidos con facilidad, lo que supone que resulten ideales para los análisis habituales.
Sin embargo, entender los principios de medición y aplicar la excelencia operativa ayudan a conseguir resul-
tados fiables y a mantener las características del producto estables en el punto que se desea.
• Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento: todos estos parámetros
producen valores de caracterización de los materiales siguiendo la misma metodología general, a saber,
el calentamiento controlado hasta que se aprecia un acontecimiento definido o se detecta una transición de
fase. Los consejos que se presentan sobre el procedimiento y la preparación de las muestras son esenciales,
y también constituyen un requisito previo para lograr unos resultados exactos.
• Análisis térmico: abarca una variedad de técnicas que permiten caracterizar los materiales con temperaturas
controladas y tiempos programados. Los operarios aprenderán las diferentes técnicas de análisis térmico
y una metodología sistemática para desarrollar métodos.
Todas las secciones siguen una estructura similar: la propia técnica de medición, los principios que ayudan
a conseguir la exactitud, consejos sacados de experiencias reales en laboratorios y una referencia a otros
materiales de formación útiles, como guías y artículos técnicos sobre el tema.
1.4 Uso común de los métodos
En muchos laboratorios modernos, muchas determinaciones se ejecutan en paralelo. Por ejemplo, se suele
usar al mismo tiempo más de un analizador de humedad o valorador, y cada uno evalúa un único parámetro
en cada muestra. La interacción entre estos instrumentos crea una imagen general de la calidad. Los
resultados continuos de la calidad se pueden catalogar en un repositorio central, como el software LabX™
de METTLER TOLEDO, que permite una recuperación y un análisis de la tendencia sencillos.
También se pueden llevar a cabo varias determinaciones en una sola muestra o tipo de muestra. Por ejemplo,
un laboratorio puede tener un solo sistema automatizado para determinar la conductividad, el valor del pH
y la alcalinidad del agua; o puede tener varios valoradores combinados en un flujo de trabajo para averiguar
el contenido de níquel y de hipofosfito de las muestras de galvanoplastia. Y, como ya se ha mencionado,
un repositorio central de datos como LabX recopila los resultados de las determinaciones y crea una imagen
de la calidad.
Para ver las soluciones especializadas de METTLER TOLEDO consulte el capítulo 12.
8 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

2 Pesaje
Pesaje
2.1 Pesaje en el laboratorio
El pesaje es una de las tareas más habituales en el laboratorio. Normalmente, se realizan tareas de pesaje
directo o diferencial. El pesaje directo se usa para preparar muestras, estándares, soluciones tampón, reactivos
y similares. El pesaje diferencial determina la diferencia de peso antes y después del paso del procesamiento.
Los métodos de pérdida de peso constituyen una aplicación típica.
Tanto las microbalanzas como las balanzas analíticas y de precisión se han perfeccionado hasta tal punto que,
en general, pueden satisfacer cualquier necesidad del cliente. Los avances en electrónica y software han simpli-
ficado considerablemente el funcionamiento de las balanzas y permiten la integración directa de estas en los
flujos de trabajo del laboratorio.
2.2 Principio de medición
Las básculas y balanzas electrónicas aplican dos principios de medición.

1. La tecnología de restauración de fuerza magnética (MFR) se usa para aplicaciones de alta resolución. El haz
de la balanza se mantiene en equilibrio compensando el peso (masa) de la muestra mediante una fuerza
magnética.
Se ha logrado una resolución de hasta 52 millones de puntos, que alcanza una lectura de 1 microgramo
a una capacidad máxima de 52 gramos.
2. La tecnología de extensómetro (SG) se aplica para tareas de pesaje de baja resolución. La resolución típica
es de 200 000 puntos. La SG pesa cambiando la resistencia eléctrica en relación con el peso (masa) puesto
en una balanza y permite células de carga más robustas.
En ambos casos, la electrónica y el software modernos convierten la señal inicial en pesos de la unidad
deseada y en legibilidad.
2.3 Trucos y consejos para el pesaje
Aquí encontrará algunos consejos básicos sobre cómo colocar una balanza en el laboratorio para obtener
resultados de pesaje óptimos.
• Coloque la balanza analítica sobre una mesa de pesaje estable para evitar alteraciones por vibraciones.
La mesa de pesaje también debe ser lo suficientemente estable como para que la indicación de la balanza
no cambie cuando alguien se apoye en la mesa o suba a la estación de pesaje.
• Coloque la balanza directamente a la altura de las patas de la mesa
en lugar de en la sección central de una mesa larga, ya que esta
zona está expuesta a una vibración menor. +30 °C máx.
• Evite las corrientes de aire del aire acondicionado y la ventilación.

Conectividad
No coloque la balanza junto a una puerta y evite los lugares
de mucho tráfico. −5 °C mín.
• Mantenga la temperatura ambiente del laboratorio lo más constante
posible. No exponga la balanza a la luz directa del sol para evitar
que se caliente. Los cambios de temperatura influyen en el resultado
del pesaje. La deriva típica es de 1–2 ppm/°C. No sobrepase el
Figura 1. Intervalo de temperatura
intervalo de −5 a 30 °C (consulte la figura 1).
recomendado para las balanzas.
máximo 20
alo –8
terv 0
n
%
9
I
METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

40 60
+30 °C máx.
Conectividad
• Tenga en cuenta el uso de FACT y proFACT. FACT y proFACT son procedimientos de ajuste interno totalmente
Pesaje
automáticos con control de tiempo y temperatura y ayudan a evitar interferencias ambientales en los resul-
−5 °C mín.
tados de pesaje. Por lo tanto, las balanzas analíticas de METTLER TOLEDO con FACT y proFACT proporcionan
pesajes siempre correctos.
• Lo ideal sería que mantuviera la humedad del aire en el rango de 45–60 % de humedad relativa. Las balanzas
no se deberían usar en ningún caso por encima o por debajo del rango de medición del 20 al 80 % de
humedad relativa. En segundo lugar, unas pocas actualizaciones y cambios en el equipo de laboratorio
tradicional pueden marcar grandes diferencias en la exactitud y la productividad de las tareas de pesaje.
máximo 20
alo –8
terv 0
n %
I
40 60
20 80
0 HIGRO 100
%
Figura 2. Humedad recomendada del aire. Figura 3. ErgoClip con matraz en una Figura 4. Embudo SmartPrep.
balanza analítica XPR56.
• Dosifique directamente en el contenedor de tara. Coloque el contenedor de tara de forma ergonómica

para facilitar los procesos de llenado.
Los ErgoClips pueden ayudar. Los ErgoClips son contenedores de tara, disponibles para todo tipo de
recipientes y viales. Mantienen los contenedores bien posicionados para el pesaje. Los ErgoClips encajan
en todas las balanzas analíticas de la gama Excellence de METTLER TOLEDO.
• Evite los recipientes intermedios y los papeles de pesaje antiguos para evitar la pérdida de muestras.
• Considere el uso de los nuevos embudos SmartPrep de METTLER TOLEDO. SmartPrep es un embudo de diseño
ergonómico que se adapta a todos los matraces volumétricos. Hecho de plástico resistente a las manchas,
cuenta con una gran área de dosificación para evitar derrames y una superficie lisa para un lavado eficiente.
Así, SmartPrep ayuda directamente a mejorar la exactitud.
• Considere las directrices automáticas para los métodos. Soluciones como el software LabX de METTLER
TOLEDO pueden ofrecer instrucciones a lo largo de todo el proceso de pesaje mediante la indicación de cada
paso operativo en la pantalla de la balanza. Además, LabX recopila datos para su posterior evaluación,
archivado o auditoría, y evita el riesgo de cometer errores de transcripción. LabX también acelera el trabajo
de laboratorio.
• Aplique la solución de flujo de trabajo SmartSample™. SmartSample, la nueva solución basada en RFID
de METTLER TOLEDO, garantiza que los resultados se asignen sin lugar a dudas a la muestra correcta.
La opción RFID de las balanzas analíticas Excellence escribe el peso de la muestra en la etiqueta RFID
de un vaso de valoración una vez que haya finalizado el pesaje. También se puede almacenar la identifi-
cación de la muestra en la etiqueta RFID. Después, el cambiador automático de muestras lee la etiqueta y se
envían los datos al valorador. Puesto que la etiqueta RFID está unida únicamente a un vaso de precipitados,
los vasos de precipitados se pueden colocar en cualquier secuencia en un cambiador de muestras (por
ejemplo, InMotion™) y los resultados se correlacionan de forma segura con la muestra apropiada. Olvídese
de la numeración de vasos de precipitados, de la escritura de pesos de muestras en vasos de precipitados,
papeles o diarios de laboratorio y de las confusiones en las muestras.

Pesaje
Vaso de
precipitado
muestras InMotion™
Valorador Excellence
Balanza Excellence
Peso Peso
Cambiador de
Etiqueta
ID de RFID ID de
muestra muestra
Etiqueta
Opción
RFID
RFID
Figura 5. El principio del flujo de trabajo de SmartSample™.
2.4 Referencias
Proper Weighing with Laboratory Balances, Guide Book, METTLER TOLEDO, 720906, © 01/2015
Dictionary of Weighing Terms, Springer Verlag Berlin, 2009, ISBN 978-3-642-02013-1

Pipeteo 3 Pipeteo
3.1 ¿Por qué hablamos de pipeteo?
El pipeteo (un método de uso común para medir y transferir pequeños volúmenes de líquido en el rango de
microlitros y mililitros) es probablemente la actividad que se practica con más frecuencia en los laboratorios
de investigación. En los laboratorios de control de calidad también se pipetea con bastante frecuencia. Para
poder llevar a cabo esta tarea de forma rápida y precisa es un requisito previo imprescindible para realizar un
buen trabajo en el laboratorio.
Es posible obtener un alto nivel de productividad, con su correspondiente ahorro en horas de mano de obra,
al usar pipetas y puntas modernas y de gran calidad modernas.
3.2 Principios de medición
Pipetas de desplazamiento de aire

El instrumento ideal para dosificar con eficacia pequeñas cantidades de líquido es una pipeta de despla-
zamiento de aire. Estas pipetas se usan en la mayoría de los análisis de laboratorio y ofrecen numerosas
ventajas. Se usan colocando el extremo de la punta en la muestra líquida y, a continuación, soltando el botón
pulsador. Se crea un vacío parcial cuando el émbolo de la pipeta sube por el cuerpo de la pipeta, y la muestra
líquida sube hasta la punta para llenar el hueco del volumen seleccionado creado por el vacío parcial.
Pipetas de desplazamiento directo

Las pipetas de desplazamiento directo se ven con frecuencia en el laboratorio. Este tipo de pipetas usan un
sistema desechable de émbolos y capilares para crear un hueco físico del volumen seleccionado. El émbolo está
en contacto directo con la muestra. Cuando este se mueve hacia arriba, la muestra se introduce en el capilar.
Las pipetas de desplazamiento directo se recomiendan para su uso con soluciones acuosas, viscosas, densas,
volátiles y corrosivas. Los capilares y émbolos de las pipetas de desplazamiento directo son desechables para
evitar la contaminación y la transferencia de muestras.
Émbolo Eje
Eje
Vacío parcial Émbolo
Punta desechable Capilar

Muestra
Muestra
Figura 6. Pipetas de desplazamiento de aire y de desplazamiento directo.

3.3 Trucos y consejos para el pipeteo
Pipeteo
Aspiración en el ángulo correcto
El ángulo de inmersión de la punta de la pipeta debería ser lo más cercano posible a 90 grados, y no
debería desviarse más de 20 grados de la posición vertical. Si el ángulo es mayor, puede producir que
se introduzca demasiado líquido en la punta, y el resultado sería aspiraciones inexactas. Por ejemplo,
en un ángulo de 30 grados respecto a la vertical, puede aspirarse hasta un 0,7 % de líquido en exceso.
Ritmo constante de pipeteo

Use un ritmo constante en el pipeteo entre muestras. En lugar de ir deprisa o realizar operaciones rápidas,
mantenga el ritmo en cada paso del ciclo de pipeteo.
Accionamiento suave del pulsador

Mantenga una velocidad y suavidad constantes al pulsar y soltar el pulsador. Una aspiración descontrolada
puede provocar burbujas, salpicaduras, aerosoles y contaminación del eje y el émbolo de la pipeta.
Pipetas de gran volumen

Para volúmenes mayores (normalmente 1 mL o más), deténgase aproximadamente 1 segundo o más tras la
recogida de la muestra, con la punta todavía en el líquido. Esto permitirá que la muestra se aspire por completo.
Retire la punta solo cuando haya terminado la aspiración.
Prelavado de las puntas al menos dos veces

La dosificación del líquido de una pipeta deja un recubrimiento del líquido en la punta, lo que provoca que
el volumen expulsado sea ligeramente inferior de lo que debería ser. Cada vez que se usa una punta nueva,
prelávela al menos dos veces con el líquido que se va a dosificar antes del pipeteo para compensar esa
película de líquido. El prelavado también ayuda a neutralizar los efectos de la capilaridad en las pipetas
de microvolumen y, en el caso de las pipetas de macrovolumen, iguala la temperatura del aire del interior
de esta a la temperatura de la muestra.
Excepciones al prelavado
El prelavado puede afectar de forma negativa a los resultados cuando el pipeteo se realiza con soluciones
muy calientes o muy frías. No se recomienda si se pipetean soluciones muy frías, como en el caso de los
baños de hielo, o con soluciones que se encuentren por encima de los 37 °C, porque puede producir errores
de hasta el 5 %.
Deje tiempo para que la temperatura se equilibre

Las pipetas son susceptibles a la variación de la temperatura de las muestras dosificadas. Los líquidos fríos
tienden a ofrecer volúmenes excesivos, mientras que los líquidos templados pueden ofrecer volúmenes más
pequeños de lo que se esperaba. A menos que se especifique lo contrario, deje tiempo suficiente para que
la temperatura de las pipetas y los líquidos se equilibre antes de usarlos.
Efecto del calor de las manos

Cuando se ha pipeteado durante mucho tiempo, el calor de la mano puede calentar el aire del interior de la
pipeta y provocar que se expanda y se produzcan unos resultados inexactos.
• Evite sostener continuamente la pipeta en la mano entre los ciclos de pipeteo.
• Coloque siempre la pipeta de nuevo en su soporte después de realizar el pipeteo.
• Use pipetas hechas de PVDF de alto grado, un polímero de baja conductividad térmica.

Garantice un desprendimiento completo
Pipeteo
Para lograr una exactitud y una reproducibilidad óptimas entre muestras, asegúrese de dosificar hasta la última
gota de la muestra, sin que quede nada adherido en el extremo de la punta. La dosificación con el extremo de la
punta apoyado contra la pared del recipiente reduce o elimina la cantidad de muestra que queda en la punta.
Para retirar la pipeta, deslice el extremo de la punta a lo largo de la pared lateral para deshacerse de cualquier
gota que pueda quedar en el orificio de la punta. Esta técnica puede aumentar la precisión en un 1 % o más.
¿Pipetas de desplazamiento de aire o de desplazamiento directo?

Los capilares y émbolos desechables que se usan con una pipeta de desplazamiento directo son más caros en
comparación con las puntas de pipeta de desplazamiento de aire desechables. Por este motivo, se recomiendan
las pipetas de desplazamiento de aire cuando producen los mismos resultados (exactitud, precisión).
3.4 Referencias
Get Better Results, Quick Guide to Good Pipetting, METTLER TOLEDO, © 02/2014
Pipetting Tips and Tricks, METTLER TOLEDO, © 01/2013

4 Determinación del valor del pH y de la conductividad
Determinación del valor del pH y de la conductividad

4.1 El principio y la importancia de medir el pH
El valor del pH indica la cantidad y la fuerza de los ácidos o lixiviados presentes en una muestra. Las
soluciones de muestra con un pH inferior a 7 son ácidas. Si el pH es superior a 7, la solución es básica
(también llamada alcalina). En caso de que el pH sea 7,0, la solución es neutra.
Medimos el pH por muchas razones distintas:

• Para producir productos con propiedades definidas (el pH puede alterar drásticamente las propiedades
del producto final, como la apariencia o el sabor).
• Para reducir los costes de producción (el rendimiento del proceso de producción puede depender del pH).
• Para cumplir con los requisitos normativos.
• Para investigar y desarrollar.
Por definición, el valor del pH está relacionado con la concentración del ion hidronio H3O+ que se forma cuando
un ácido como el sulfúrico, nítrico, cítrico o acético se disuelve en el agua.
Para determinar el valor de pH se precisa un medidor y un sensor adecuado. En principio, el medidor es un

voltímetro. El rango de medición suele estar entre −2000 mV y +2000 mV con una resolución de 0,1 mV.
El sensor consta de dos partes: un electrodo sensible al pH y un electrodo de referencia. Por lo general, estos
dos electrodos se combinan en un solo sensor y se denomina comúnmente “electrodo de pH”. El electrodo
de pH mide un potencial eléctrico que depende de la concentración del ion de hidronio. La ecuación de Nernst
describe la correlación entre la concentración y el valor de pH medido. La parte sensible de un electrodo de pH
es la membrana de vidrio hecha de vidrios especialmente desarrollados y muy sensibles al pH.
4.2 El principio de medición y la importancia de la conductividad
En la práctica, la conductividad eléctrica se ha medido durante más de 100 años y, todavía hoy, sigue siendo
un parámetro analítico importante y muy usado. La alta fiabilidad, sensibilidad, rápida respuesta y coste
relativamente bajo del equipo hacen de la conductividad una herramienta valiosa y fácil de usar para controlar
la calidad.
La conductividad eléctrica es un parámetro de suma no específico sobre todas las especies iónicas disueltas
(sales, ácidos, bases y algunas sustancias orgánicas) en una solución. Esto significa que esta técnica no
puede diferenciar entre diversos tipos de iones. La lectura es proporcional al efecto combinado de todos los
iones de la muestra. Por lo tanto, se trata de una herramienta importante para controlar y supervisar una
amplia gama de diferentes tipos de agua (agua pura, agua potable, agua natural, agua procesada, etc.)
y otros solventes. También se usa para determinar las concentraciones de productos químicos conductivos.
En principio, una célula conductímetra consta de un par de electrodos, los llamados polos, a los que se aplica
tensión. El medidor cuantifica la corriente y calcula la conductividad (consulte la figura 7).

DC
e− e−
cátodo ánodo
Figura 7. Estructura esquemática de una célula conductímetra.
4.3 Trucos y consejos para el pH y la conductividad
4.3.1 pHmetros y conductímetros

Los fabricantes suelen ofrecer una selección de modelos que se adaptan las necesidades de los clientes.
Existen, por ejemplo, medidores pequeños para tareas sencillas periódicas o modelos más elaborados con
pantallas a color, táctiles y de alta resolución, almacenamiento de datos y muchas otras funciones.
• Si los resultados del pH y la conductividad tienen que fluir hacia los sistemas de control de procesos y empre-
sariales, se recomienda la transferencia automática de datos para evitar errores de transcripción, aumentar
la seguridad de los datos y mejorar la eficiencia. En este caso, los medidores con interfaces de conexión
adecuadas, como Ethernet, USB y RS232, y el software adecuado (p. ej., LabX) ofrecen la mejor solución.
• Para aplicaciones más básicas, un medidor más pequeño que ofrezca una conexión de impresora podría
ser el más adecuado.
• Cuando los valores de pH y conductividad también se tienen que medir en varios lugares fuera del labora-
torio, se sugiere un medidor portátil. Los medidores portátiles están protegidos contra el agua y el polvo
(por ejemplo, IP67), y pueden almacenar datos para su lectura posterior.
4.3.2 Electrodos de pH
El usuario también tiene a su disposición una gran variedad de electrodos. Se puede elegir tanto la forma
de la membrana de vidrio (redonda, plana, afilada, etc.), como el material del eje (vidrio, PEEK, polisulfona)
y el tipo de unión.
Membrana
• Las formas de membrana de electrodo más comunes para uso universal son un cilindro o una esfera.
• Se usa una membrana plana para medir el valor de pH en una superficie, p. ej., en piel o en papel.
• Se usa un electrodo de punción (con el extremo puntiagudo) para muestras sólidas o semisólidas,
como queso, carne o masa.
• Use un microelectrodo para realizar mediciones de pH en tubos de reacción u otros contenedores pequeños.
Esférica Cilíndrica Afilada Plana Micro

Para muestras a baja Tiene una membrana Para muestras sólidas Para superficies y Muestras en tubos
temperatura; resistentes extremadamente sensible y supersólidas ya que muestras del tamaño de de reacción; el eje
a la contracción. con una amplia superficie permite perforarlas gota, ya que consta de del electrodo es muy
y baja resistencia. fácilmente. un área de contacto de estrecho.
la membrana de pH muy
pequeña.
Figura 8. Distintas formas de las membranas de pH.

Ejes

• Los ejes hechos de polímeros, como PEEK y polisulfona, absorben los golpes mecánicos y convierten
los electrodos en sensores “irrompibles”. Por este motivo, se recomienda que se usen los ejes de polímeros
para aplicaciones extremas.
Tipo de uniones
Otro punto que se debe considerar es el tipo de unión. La unión funciona como puente entre el electrodo de
referencia y el sensible al pH. Gracias a la unión, el electrolito fluye hacia la muestra y garantiza la conexión
eléctrica.
• Una frita cerámica o de materiales similares, también llamada diafragma, es el tipo principal de unión.
Se aplica a una amplia variedad de muestras acuosas.
• No obstante, las fritas se pueden obstruir con componentes de muestras como partículas no disueltas o
proteínas que reaccionan con el flujo de electrolitos.
• Las uniones con manguito desplazable o de orificio abierto pueden ayudar a evitar la obstrucción. Estas
uniones se pueden limpiar con facilidad y evitan la acumulación.
4.3.3 Sensores de conductividad

La elección del sensor de conductividad correcto es un factor determinante para obtener resultados exactos
y fiables. En los siguientes párrafos, se ofrece información importante sobre el hecho de seleccionar un sensor
de conductividad. En la tabla 1, se proporciona una visión general.
Resistencia a sustancias químicas

Un requisito básico es que no se produzcan reacciones químicas entre la muestra y el sensor. Para muestras
químicamente reactivas, la mejor elección suele ser el vidrio y el platino, ya que cuentan con la mejor resis-
tencia química de entre todos los materiales usados en las células habitualmente. Para la aplicación de campo,
así como para numerosas aplicaciones de laboratorio, la estabilidad mecánica del sensor es un factor mucho
más importante. A menudo, se usa un sensor de conductividad con una estructura de epoxi y electrodos
de grafito, ya que se ha demostrado que resulta extremadamente duradero y que cuenta también con una
buena resistencia química. Para soluciones acuosas y disolventes orgánicos poco reactivos, el uso de células
de acero o titanio suele ser una buena alternativa.
Constante de célula
El siguiente punto que se debería tener en cuenta para seleccionar un sensor óptimo es la constante de
célula y el tipo de construcción. Una constante de célula apropiada se correlaciona con la conductividad de la
muestra. Cuanto menor sea la conductividad esperada de la muestra, menor debería ser la constante de célula
del sensor. En la figura 7, se muestra un conjunto de muestras y el rango de constantes de célula recomendado
que se debería usar para la medición. Para tomar una decisión entre una célula de 2 polos y una celda de
4 polos, se puede usar la siguiente regla básica: para mediciones de baja conductividad, se debería usar
una célula de 2 polos. Para mediciones de conductividad media y alta, es preferible una célula de 4 polos,
sobre todo para mediciones en un amplio rango de conductividad.

Determinación del valor del pH y de la conductividad Configuración Constante de célula Rango de medición Nombre del sensor
Eje de vidrio y 4 polos de platino 0,80 cm −1 0,01–500 mS/cm InLab® 710
Generalistas Eje de epoxi y 4 polos de grafito 0,57 cm−1 0,01–1000 mS/cm InLab® 731
InLab® 738
Eje de titanio y 2 polos de titanio 0,01 cm−1 0,0001–1000 µS/cm InLab® Trace
Agua pura y Eje de acero y 2 polos de acero 0,105 cm −1 0,001–500 µS/cm InLab® 741
Especializado
alta precisión InLab® 742

Eje de vidrio y 2 polos de platino 0,06 cm−1 0,1–500 µS/cm InLab® 720
Eje de vidrio y 2 polos de platino 1,0 cm−1 0,01–100 mS/cm InLab® 751-4mm
Micro
Eje de vidrio y 2 polos de platino 1,0 cm−1 0,01–112 mS/cm InLab® 752-6mm
Bioetanol Eje de vidrio y 2 polos de platino 0,1 cm −1 0,1–500 µS/cm InLab® 725
Tabla 1. Gama de sensores de conductividad de METTLER TOLEDO.
Normas y estándares
En ocasiones, los estándares o las normas contienen requisitos relativos al sensor de conductividad. Si una
medición de conductividad se realiza conforme a uno de estos estándares, el sensor escogido debe cumplir
perfectamente todos los requisitos descritos.
4.3.4 Gestión de sensores

ISM® – Intelligent Sensor Management – almacena la identificación del sensor y los datos de calibración en
el sensor. Por este motivo, el cambio de electrodos de uno a otro medidor resulta sencillo. Por el contrario,
si un método especifica un determinado tipo de electrodo, no se aceptará ningún otro. De esta manera,
se evitarán errores.
Para más información y ayuda con la elección de electrodos, vaya a www.electrodes.net.
4.4 Referencias
A Guide to pH Measurement, Theory and Practice of Laboratory pH Applications, METTLER TOLEDO, 51300047,
© 03/2013
A Guide to Conductivity Measurement, Theory and Practice of Conductivity Applications, METTLER TOLEDO,
30099121, © 08/2013

5 Determinación del contenido de humedad
Determinación del contenido de humedad

5.1 Humedad
La humedad afecta a la capacidad de procesamiento, al período de conservación, al uso y a la calidad

de muchos productos, como las sustancias farmacéuticas, los plásticos y los alimentos. La mayoría
de las sustancias tienen un contenido de humedad óptimo para alcanzar la máxima calidad y obtener el
mejor procesamiento posible. Además, el contenido de humedad puede influir en el precio, lo que ha llevado
a establecer reglamentos que determinan el contenido de humedad máximo admitido para determinados
productos (tal como lo definen las farmacopeas o las normativas alimentarias nacionales).
Las determinaciones de humedad se deben llevar a cabo de manera fiable y ágil para permitir intervenciones
rápidas en el proceso de fabricación. Un método de rutina para determinar la humedad es usar un anali-
zador de humedad, preferiblemente con fuente de calor halógena para obtener resultados rápidos, exactos
y uniformes. En los analizadores de humedad, la pérdida de peso se registra de forma continua y el secado
finaliza cuando se alcanza un criterio definido. El contenido de humedad se calcula automáticamente a partir
de la diferencia de peso.
El método incluye dos partes: el calentamiento de la muestra y el criterio de apagado.
Calentamiento de la muestra
El tipo y la forma de la fuente de calor (radiador) son cruciales para la velocidad y reproducibilidad de la deter-
minación de la humedad. Una lámpara halógena alcanza la salida máxima de calentamiento muy rápido en
comparación con las lámparas infrarrojas convencionales. Además, un radiador en forma de anillo garantiza
un calentamiento uniforme de toda el área del plato de muestra.
Criterio de apagado
El criterio determina el punto en el que la medición termina automáticamente y se muestra el resultado.
El analizador de humedad halógeno ofrece dos tipos distintos de criterios de apagado: control de tiempo y
pérdida de peso por tiempo. En este último caso, el proceso de secado finaliza y se muestra el resultado si la
pérdida de peso (Δg) cae por debajo de la cifra prescrita durante un tiempo determinado (Δt). En el primer caso,
el proceso de calentamiento finaliza y los resultados se evalúan una vez transcurrido el tiempo establecido.

Peso de la muestra = Pérdida de peso ∆g
media por unidad ( (
∆t
de tiempo
∆g
∆t
Criterio de apagado (1...5)
Figura 9. Criterio de apagado.
5.3 Trucos y consejos para la determinación de la humedad
Para garantizar unos resultados de medición precisos durante

el funcionamiento periódico, se debería:
• Mantener el área del plato de muestra limpia (por ejemplo, con un cepillo).
• Limpiar la suciedad del sensor de temperatura y del cristal protector
del módulo de calefacción (para más detalles, consulte las instruc-
ciones de manejo).
• Usar solo platos de muestra limpios para determinar la humedad.
El uso de platos de muestra de aluminio de un solo uso garantiza
Figura 10. Limpieza del analizador
mediciones fiables y sin la influencia de residuos de muestras o de humedad.
productos de limpieza anteriores.
• No usar platos de muestra deformados.
• Asegurar un tamaño de partículas uniforme (granulación).
• Aumentar el área de superficie de la muestra descomponiéndola (si fuera necesario). Esto garantizará
una mejor y más rápida liberación de humedad durante el secado (difusión más rápida de la humedad
a la superficie).
La muestra no se debería calentar durante las preparaciones, ya que esto causaría pérdida de humedad.
Use el volumen de muestra adecuado. El tamaño de la muestra depende de:

• El contenido de humedad de la muestra.
• El tamaño de muestra recomendado. Es de entre 3 y 5 g para la
mayoría de las muestras. Sin embargo, para muestras con una
humedad menor que el 0,5 %, es de entre 20 y 30 g.
• La homogeneidad. Las muestras no homogéneas pueden requerir
un tamaño de muestra mayor para representar todo el lote.
• La resolución y el peso mínimo de la balanza integrada.
• El tipo de muestra (líquida, pastosa, sólida, en polvo).
• Use siempre el mismo volumen de muestra para conseguir una
correcta repetibilidad.
• Distribuya la muestra de manera uniforme sobre todo el plato
(no acumule pilas). Figura 11. Llenado del plato de muestra.

Temperatura: siga una de estas recomendaciones.

• Aplique el PNT relevante para su muestra.
• Aplique la misma configuración que para una muestra similar.
• Aplique la temperatura del método de horno tradicional.
• Aplique 105 °C para muestras sensibles a la temperatura o 150 °C para otras muestras.
5.4 Referencias
Guide to Moisture Analysis, Moisture Determination with the Halogen Moisture Analyzer, METTLER TOLEDO,
© 04/2013

Valoración 6 Valoración
6.1 Valoración: una técnica de larga tradición
Una balanza, una bureta, una reacción química adecuada y un indicador son suficientes para resolver muchos
problemas analíticos cuantitativos. La técnica analítica empleada se denomina “valoración” o “análisis titrimétrico”
(titrimetría).
La valoración se ha aplicado durante siglos para determinar el contenido de una variedad de compuestos en

muchos tipos de muestras distintas. Entre los compuestos analizados se incluyen ácidos, productos cáusticos,
sales e iones metálicos. Los tipos de muestras van desde productos farmacéuticos, alimentos, bebidas, agua,
productos químicos y petroquímicos, hasta galvanoplastia y lubricantes. De hecho, es el análisis químico
cuantitativo preferido para muchas aplicaciones.
Antes de que se inventara el primer electrodo, se usaban indicadores de color para mostrar el punto final de
la valoración. Hoy en día, los valoradores automáticos, varios sensores y accesorios para la manipulación
de muestras proporcionan análisis mediante valoración rápidos, fiables y automatizados para ayudar a los
usuarios exigentes a aumentar la eficiencia y la exactitud del trabajo.
En una valoración, parte de la muestra que contiene la sustancia que se va a analizar (el analito) se disuelve en
un disolvente adecuado (a menudo, agua desionizada). Se añade un segundo compuesto químico, el reactivo,
como solución de concentración conocida de forma controlada hasta que el analito haya reaccionado de forma
cuantitativa. El contenido de analito se puede calcular a partir del consumo y la concentración del reactivo,
así como del peso de la muestra que se ha usado en el análisis.
Los valoradores automatizados siguen una secuencia de funcionamiento definida (ciclo de valoración), que
se realiza hasta que finaliza la valoración. Esta secuencia es prácticamente la misma para todos los modelos
y marcas.

Valoración
Bureta
1, 5, 10, 20 mL
Valorador automático/ 1. Adición del reactivo Vaso de valoración

Procesador 2. Reacción del reactivo Agitador
Control de valoración Evaluación 3. Adquisición de señal Dilución/Disolución
de los datos Cálculo del resultado 4. Evaluación Reacción química
Almacenamiento de datos
D B
Sensores
Principios de detección:
Potenciométrica –
fotométrica – voltamétrica –
amperométrica – turbidimé-
trica– conductimétrica
C
Figura 12. Representación esquemática de los pasos fundamentales de un método del valorador (ciclo de valoración).
6.3 Trucos y consejos para las valoraciones
En este apartado podrá encontrar algunos trucos y consejos para los cuatro segmentos principales del ciclo
de valoración: bureta, vaso de precipitado, sensor y valorador automático de la figura 12.
Bureta (A)
• Seleccione el tamaño de bureta adecuado. Lo ideal sería que la valoración se completara con un consumo
de reactivo de entre el 20 y el 80 % del volumen nominal de la bureta.
• Cuando llene la bureta por primera vez, lávela lo suficiente con el reactivo para asegurar un llenado completo.
• Evite las burbujas de aire. Esto puede requerir la desgasificación del reactivo. Si todavía quedan burbujas
de aire en el cilindro de vidrio, vacíe la bureta por completo y vuelva a llenarla.
• Limpie la bureta con periodicidad. Lávela con agua desionizada.
• Trate los retenes del émbolo con cuidado. Evite arañazos y daños para prevenir fugas.
• Guarde la bureta de la forma adecuada. Cuando no se use durante un largo período de tiempo, vacíe
la bureta y ambos tubos y lávelos con cuidado con agua desionizada.
Vaso de precipitado (B)

• Use solo vasos de precipitado limpios.
• Ajuste la velocidad del agitador para que realice una agitación vigorosa, pero que, a su vez, evite salpi-
caduras y formación de vórtices. Si la muestra es sensible al aire ambiente o la reacción de la valoración
es muy lenta, agítela con suavidad.
• Establezca el tiempo de agitación necesario. La muestra se debería disolver por completo antes de que
comience la valoración.
• Lave bien el agitador y el electrodo tras usarlo con cada muestra para evitar que se acumulen. Si es
necesario, aplique un paso de acondicionamiento (período de entre 30 y 60 segundos con el disolvente
adecuado).

Sensor (C)
Valoración
• Asegúrese de que el sensor está bien sumergido en la muestra. Cuando se usan electrodos de pH combi-
nados, la unión se debe sumergir en la muestra para obtener lecturas seguras y estables.
• Calibre y ajuste el sensor con periodicidad de acuerdo con los requisitos de los PNT o con las recomen-
daciones del fabricante. Al realizar la valoración de punto final del pH, el electrodo se debe calibrar con
cuidado, ya que influye directamente en el resultado. En el caso de las valoraciones de puntos de equiva-
lencia, la calibración es menos crítica. El resultado se calcula principalmente sobre la base de las variaciones
del potencial y no sobre la base del valor potencial absoluto.
• Puede que los sensores necesiten acondicionamiento. Esto se aplica sobre todo a los electrodos selectivos
de iones (ISE, por sus siglas en inglés) o a los electrodos de pH que se usan en disolventes no acuosos.
Valorador automático (D)

• Active la gestión de usuarios. La gestión de usuarios asegura que solo los operarios cualificados tengan
acceso al valorador. Los usuarios solo pueden ejecutar las tareas que se les han asignado.
• Construya métodos que incluyan tantos pasos de trabajo como sea posible para simplificar las tareas,
asegurar una ejecución correcta y aumentar la repetibilidad.
• Ejecute varias series de muestras de comprobación antes de establecer los PNT del método. Consulte el
Application Brochure 16, Validation of Titration Methods [Folleto sobre aplicaciones nº 16, “Validación de los
métodos de valoración”] para obtener más detalles.
• Decida qué datos tiene que captar (tabla de valores de medición, resultados, datos del equipo, etc.). Borre
los otros. Imprímalos en papel, si así se requiere. Es preferible que almacene los datos de forma electrónica
en la base de datos del laboratorio.
6.4 Referencias
Good Titration Practice Brochure, How to Achieve the Best Results, METTLER TOLEDO, 51725313A, © 04/2013
Basics of Titration, Titration Theory, METTLER TOLEDO, 51725228, © 09/2009
Validation of Titration Methods, Application Brochure 16, METTLER TOLEDO, 51724912A, © 03/2015

7 UV-VIS
UV-VIS
7.1 Espectroscopia ultravioleta-visible
La espectroscopia ultravioleta-visible es un método muy sencillo, rápido, económico y, por lo tanto, muy
popular en los laboratorios analíticos. Mide cuánta luz absorbe o transmite una sustancia química a través
de la región espectral ultravioleta-visible. En función de la cantidad de luz y de la longitud de onda que absorbe
una muestra, se puede obtener información valiosa, como la identidad, la concentración o la pureza de esta.
Un espectrofotómetro UV-VIS mide la intensidad de la luz que pasa a través de una muestra. Los compo-
nentes principales de un espectrofotómetro UV-VIS son: una fuente de luz, un portamuestras, un dispositivo
de dispersión para separar las distintas longitudes de onda de la luz (por ejemplo, un monocromador) y un
detector adecuado. Los espectrofotómetros UV-VIS Excellence de METTLER TOLEDO combinan una lámpara
de destellos de xenón de larga duración con un detector de matrices de última generación que permite realizar
análisis de espectro completo muy rápidos para obtener una repetibilidad y una exactitud elevadas.
Rejilla de reflexión
cóncava
Ranura de entrada
Cubeta
CPU
Sensor de CCD
Lámpara de descarga
de xenón
Terminal con
pantalla táctil
Figura 13. Diseño del instrumento de un espectrofotómetro de red de diodos.
La transmitancia de la muestra a distintas longitudes de onda se calcula dividiendo la intensidad luminosa de

la muestra (I) entre la intensidad luminosa de una referencia o de una pieza en blanco (I0). La transmitancia T
se indica a menudo en % T.
I
T=―
I 0
Para muchas aplicaciones, es más práctico trabajar con la absorbancia, que es el logaritmo negativo de la
transmitancia.
A = −log(T)

UV-VIS
Figura 14. Los factores que influyen en la ley Lambert-Beer.
Según la ley Lambert-Beer, la absorbancia de una muestra es directamente proporcional a la concentración

de la muestra (c), el paso de luz de la cubeta (d) y el coeficiente de absorbancia épsilon (ε):
A=ε∙c∙d
La ley Lambert-Beer resulta fundamental en muchas aplicaciones para determinar la concentración de las
soluciones. Además de para el análisis cuantitativo, la espectroscopia ultravioleta-visible también se usa
para el análisis cualitativo. A medida que cada molécula absorbe la luz en longitudes de onda específicas,
el espectro UV-VIS se puede usar para identificar una sustancia, así como su calidad.
Figura 15. Picos característicos del espectro UV-VIS de la vitamina B12 a 278, 361 y 550 nm.
Mediciones de microvolúmenes
Las mediciones de microvolúmenes son ideales y su uso está muy extendido en la industria de las ciencias
de la vida para muestras muy concentradas y de pequeño volumen. Reduciendo el paso de luz de la medición,
todavía se pueden medir concentraciones más elevadas en el intervalo de absorbancia recomendado del
espectrofotómetro. De esta manera, se eliminan los pasos de dilución tediosos y propensos a errores.
La muestra se aplica directamente sobre la plataforma de medición sin tener que usar una cubeta; además,
tan solo 1 μL de muestra es suficiente para realizar una medición.
El espectrofotómetro de microvolúmenes UV5Nano de METTLER TOLEDO se basa en la tecnología LockPath™,

que permite la medición de la solución de la muestra a dos pasos de luz definidos con precisión para garan-
tizar una exactitud elevada. El cambio del paso de luz largo de 1 mm al corto de 0,1 mm se produce automáti-
camente. Por lo tanto, con una sola medición se puede abarcar un rango de concentración amplio.

UV-VIS
Figura 16. Aplicación de la muestra a la plataforma de microvolúmenes con una pipeta de microlitros.
Ajuste de paso de luz

de LockPath™
MAN o AUTO
Dos longitudes
de ruta de 0,1 o
1 mm
Gota de
Espejo muestra
Haz de luz reflejado

Haz de luz y parcialmente
policromático absorbido después de
haber pasado dos veces
la gota de muestra
Figura 17. Dibujo esquemático de la plataforma de microvolúmenes en el espectrofotómetro UV5Nano de METTLER TOLEDO que muestra
el cambio entre el paso de luz corto y largo.

7.3 Trucos y consejos para la espectroscopia ultravioleta-visible
UV-VIS
Selección y manipulación de cubetas
• Paso de luz: según la ley Lambert-Beer, la absorbancia es directamente proporcional al paso de luz de la
cubeta y a la concentración de la muestra. La selección de un paso de luz ideal (por ejemplo, de 2 mm
hasta 5 cm) puede eliminar la necesidad realizar diluciones. La absorbancia en el rango de 0,2 a 1,5 A
genera los resultados más exactos. Para muestras muy concentradas, lo ideal es un instrumento de microvo-
lúmenes con un paso de luz muy corto (por ejemplo, 1 mm o 0,1 mm).
• Rango de transmitancia: se recomiendan células de cuarzo fundido de alta precisión (grado QS) para realizar
cualquier análisis UV-VIS. Para el rango visible (>400 nm), se usan con frecuencia cubetas de metacrilato
de polimetilo o poliestireno desechables.
• Posicionamiento: coloque la cubeta con el lado transparente en el haz de luz, y la etiqueta de esta y la
muestra señalando el blanco.
• Manipulación de la cubeta: tenga cuidado de no dejar huellas dactilares en la cubeta. Sujete las cubetas
solo por los lados esmerilados.
• Limpieza: para una limpieza interior y exterior completa, use una solución de isopropanol/agua al 60 %
y límpiela con un paño óptico de limpieza o un paño sin pelusas.
• Llenado: evite usar pipetas de vidrio de Pasteur para llenar la cubeta; podrían rayar la superficie óptica.
Las pipetas con puntas de plástico desechables son perfectas.
Selección de disolventes
• Rango de transmitancia: el disolvente debería ser transparente en toda la región aplicada.
Disolvente Agua pura Hexano EtOH MeOH Dimetilsulfóxido Acetona

Corte λ <197 199 207 210 270 331
Tabla 2. Disolventes típicos y sus valores de corte, que indican la longitud de onda mínima en la que todavía se pueden usar los disolventes.
• Concentración: ajuste la concentración de la muestra para obtener una buena absorbancia (consulte el
apartado anterior sobre la selección de la longitud de la trayectoria).
• Reacciones secundarias: tenga en cuenta las posibles reacciones secundarias entre las moléculas del
analito y las del disolvente que puedan afectar al espectro. Los disolventes polares (es decir, agua, cetonas,
alcoholes, etc.) que disuelven las muestras polares pueden influir en el entorno electrónico del cromóforo
absorbente, reduciendo así la resolución espectral.
Corrección del valor en blanco

• Fresco: la cubeta en blanco debe estar compuesta por un disolvente fresco, como el que se usó para la
muestra.
• Automatización: los cambiadores de cubetas ofrecen una forma segura y eficaz de medir automáticamente
una cubeta en blanco antes de cada muestra.
• Corrección del fondo: la corrección del fondo resta el valor de absorbancia medido, normalmente a una
longitud de onda en la que el analito no tiene absorbancia, del valor de absorbancia medido a la longitud
de onda de interés. Como ejemplo para las mediciones directas de ADN y proteínas en la gama ultravioleta,
una corrección de fondo se aplica comúnmente a 320 o 340 nm, ya que estas moléculas no absorben la
luz en este intervalo de longitudes de onda. Por lo tanto, la medición y corrección del fondo elimina cualquier
posible interferencia debida a la dispersión de la luz por la presencia de partículas, burbujas de aire o un
precipitado en la muestra.

Efectos del pH, la temperatura y el aire ambiente
UV-VIS
• pH: los efectos del pH sobre los espectros de absorbancia pueden ser muy grandes si el ácido o la base
conjugada tiene un color distinto (indicadores de pH: fenolftaleína, rojo o naranja de metilo, etc.). Si se
comprueba que el pH afecta al espectro de la muestra estudiada, se usará una solución tampón como
medida de control.
• Temperatura: la expansión del disolvente, principalmente disolventes orgánicos, puede cambiar la absor-
bancia aparente y provocar la dependencia de la temperatura. Para muestras o disolventes con alta depen-
dencia de temperatura, use un portamuestras termostático.
• Tapa: para limitar la evaporación de disolventes o la absorción de agua del aire ambiente en el caso de
muestras de hidrófilos, use la tapa que, por lo general, se suministra con la cubeta.
Mediciones de microvolúmenes
• Limpieza: las partes ópticas de la plataforma de microvolúmenes, de la ventana en la parte inferior y del
espejo en la parte superior deben estar siempre perfectamente limpias para obtener resultados exactos y
repetibles. Limpie la ventana y el espejo dos veces con agua destilada una vez que haya finalizado la serie
de medición o al principio de una secuencia de medición antes de la medición en blanco. Esto evita que la
nueva medición se contamine con los restos de una muestra antigua. Use agua destilada, isopropanol/etanol
de grado analítico o un producto de limpieza específico para cubetas (Hellmanex III), aplicado con paños
de grado óptico que no rayen (toallitas para tareas delicadas KIMWIPES, CÓDIGO 34120).
• Técnica de pipeteo: pipetee la muestra con suavidad sobre la plataforma de microvolumen para evitar la
formación de burbujas de aire. Use una cantidad suficiente de muestra para llenar el área que se encuentra
entre la plataforma superior e inferior. Para que el espejo toque la muestra, debería conseguir una bonita
forma de gota. Si es necesario, limpie la superficie con agua.
Figura 18. Al aplicar la muestra, asegúrese de que se forme una gota redonda.
7.4 Referencias
UV/VIS Spectrophotometry, Fundamentals and Applications, METTLER TOLEDO, 30256131, © 09/2015

8 Densidad: determinación de la concentración
Densidad: determinación de la concentración
8.1 Densidad
La densidad (o gravedad específica) es una propiedad característica de los materiales. Por lo tanto, se puede
aplicar para identificarlos. La densidad de los líquidos y sólidos depende de la temperatura. La densidad del
gas se ve afectada, además, por la presión.
La densidad de las soluciones depende de la concentración de los compuestos disueltos. Una vez calibradas,
las lecturas de densidad se pueden usar para evaluar la concentración de un compuesto. Esto se aplica,
por ejemplo, al azúcar (Brix), el alcohol y la sal. Sin embargo, solo se puede aplicar una correlación estricta
entre la densidad y la concentración a mezclas binarias de un compuesto en un disolvente.
8.2 Principio de medición y densímetros
Los densímetros actuales aplican el principio físico del tubo en U oscilante. La frecuencia de oscilación depende
de la masa del tubo en U o, más concretamente, del contenido del tubo en U. Por este motivo, se aplican
unos pocos milímetros de muestra con una jeringa o un cambiador de muestras automático al instrumento
del densímetro. La medición tarda entre 2 y 3 minutos, no necesita reactivos y permite volver a usar la muestra.
Bloque termoconductor Elemento Peltier

(calor y frío)
Oscilador Sensor de temperatura Tubo en U oscilante

Figura 19. Esquema de una célula de densidad.
El proceso de lavado y secado del tubo en U antes de usar la siguiente muestra se puede realizar automática-
mente. Esto añade seguridad a la velocidad de medición.
Como la densidad depende de la temperatura, los densímetros modernos cuentan con un termostato electrónico
y compensan los resultados de densidad a 20 °C o a cualquier otra temperatura.
d20 agua
= 0,9982 g/cm3
Densidad [g/cm3]
Temperatura [°C]
Figura 20. Influencia de la temperatura en la densidad del agua.

8.3 Trucos y consejos para la medición de la densidad

Muestreo
Llene correctamente la célula de medición. NO la llene de menos. Si el llenado no es suficiente, no se lava
la contaminación, que podría permanecer en la célula y dar lugar a una medición errónea. Asegúrese de que
la muestra sobresalga de la celda al menos unos 10 cm más para que se pueda extraer la contaminación y
que en la célula solo quede la muestra nueva, como se muestra en la figura 21.
Figura 21. Llenado de la célula de densidad (izquierda: inadecuado; derecha: adecuado).
Llene la célula de medición a una velocidad baja y con un flujo laminar (de 5 a 10 cm por segundo) para
garantizar que las paredes de la célula queden completamente humedecidas (sin burbujas atrapadas en ellas).
Asegúrese de que no haya aire en la jeringa. Se debe presionar el émbolo lentamente y de manera continua,
sin detenerse.
La manipulación manual de las muestras con una jeringa depende siempre del operario y, por lo tanto, cabe
la posibilidad de que se cometan errores. Los sistemas de llenado automático garantizan que la célula se llene
a una velocidad adecuada y de una forma reproducible que no depende de los operarios ni de las muestras.
Figura 22. El muestreo manual es clave para obtener resultados de medición de densidad exactos.

Burbujas de aire
Tras el llenado, compruebe que la célula no tenga burbujas. Las burbujas de aire provocan mediciones
erróneas. Incluso cantidades muy pequeñas de aire pueden causar grandes errores de densidad. Los densí-
metros DM de METTLER TOLEDO incorporan Bubble Check™ para prevenir este tipo de errores.
Diámetro de la burbuja de aire [mm] Error de medición máx. causado [g/cm3]
2 0,000838
1 0,000052
0,5 0,000003
Tabla 3. Errores de medición causados por burbujas de aire.
Limpieza
Limpie la célula de densidad lavándola. A continuación, deje que se seque al aire. Antes de lavarla, extraiga
toda la muestra de la célula y los tubos. Para cada tipo de muestra, recomendamos lavar con estos dos
disolventes.
Muestra Disolvente 1 Disolvente 2
Basado en agua Agua Acetona o etanol (puriss)
Ácidos Agua abundante Acetona o etanol (puriss)
Grasas y aceites Deconex ® Acetona o etanol (puriss)

(de 0,3 a 0,5 % en agua)
Productos Tolueno o éter de petróleo Hexano o similar si la temperatura es >30 °C.

petroquímicos A temperatura ambiente, use una mezcla de éter
de petróleo de baja ebullición o acetona
Soluciones azucaradas Agua (use suficiente agua antes de lavar con acetona Acetona (puriss)
concentradas/jarabe para evitar el riesgo de la polimerización)
Tabla 4. Disolventes de lavado recomendados.
8.4 Referencias
How to Achieve Best Results, Day-to-Day Density Measurement, METTLER TOLEDO, © 07/2012

9 Índice de refracción: determinación de la concentración
Índice de refracción: determinación de la concentración

9.1 Índice de refracción
El índice de refracción es una propiedad física característica de las muestras líquidas puras. Por lo tanto,
se puede aplicar para identificar líquidos como disolventes, aceites y similares.
En las soluciones, el índice de refracción depende de la concentración de los compuestos disueltos. Una vez
calibrado, se puede usar una lectura del índice de refracción para evaluar la concentración del compuesto,
por ejemplo, azúcar (Brix), alcohol y sal. Sin embargo, solo se puede aplicar una correlación estricta entre el
índice de refracción y la concentración a mezclas binarias de un compuesto en un disolvente.
9.2 Principio de medición y refractómetros
El índice de refracción depende de la temperatura (disminuye con el aumento de la temperatura). Por este
motivo, las mediciones del índice de refracción se realizan normalmente a una temperatura de 20 °C. El índice
de refracción también depende de la longitud de onda del haz de luz usado (aumenta con el aumento de la
longitud de onda). Los refractómetros de hoy en día usan haces de luz de 589,3 nm de longitud de onda, que
es la llamada línea D del sodio. Tradicionalmente, usamos “n” como carácter para el índice de refracción. Por lo
tanto, el índice de refracción se escribe como nD20.
Aire
θ2
do
Ángulo crítico Reflexión interna total

cta
f ra
n2
re
yo
Ra
nt e
n1
cid e
o in
θc
θ1 θ2
Ra y
θ1
Agua
Figura 23. Refracción, ángulo crítico y reflexión total de un haz de luz que pasa de un material (por ejemplo, agua) a otro (por ejemplo, aire).
En los refractómetros digitales automáticos, la luz se transmite bajo un ángulo amplio a un prisma. El prisma
está en contacto directo con la muestra. En función del índice de refracción de la muestra, la luz entrante se
transmite (= refractada) o se refleja por completo. El ángulo de reflexión total se determina mediante un sensor
de matriz de CCD, a partir del cual se evalúa el índice de refracción de la muestra.
La célula de medición de los refractómetros modernos es una unidad de estado sólido sin partes mecánicas.
El control termostático está integrado y unas pocas gotas de muestra son suficientes. Por eso, los refractó-
metros modernos son muy fáciles de usar y la medición es rápida e independiente de las vibraciones.

Índice de refracción: determinación de la concentración Bloqueo
Elemento Peltier
Muestra Prisma Lentes termostático
(calor/frío)
LED Filtro de interferencias Reflexión total
Medición de la temperatura Sensor de CCD

Figura 24. Esquema de una célula refractométrica moderna.
9.3 Trucos y consejos para la medición del índice de refracción
Muestreo
Use jeringas de plástico con punta Luer, preferentemente jeringas de tres componentes (es decir, con junta
tórica de caucho), porque permiten un control de la velocidad mucho mejor que las jeringas más económicas
de dos componentes. Añada una muestra al prisma. Agite la muestra con la punta de la jeringa para eliminar
los cojines de aire entre el prisma y la muestra.
Es especialmente importante que las muestras pegajosas se agiten con cuidado y que se eviten los cojines
de aire.
Figura 25. Basta con unas pocas gotas de muestra en el prisma del refractómetro.

Limpieza de un refractómetro
Índice de refracción: determinación de la concentración

Se recomienda usar una jeringa para extraer la muestra (y los disolventes) de la célula del refractómetro. Esta
“jeringa de residuos” se puede volver a usar todas las veces que se quiera (le recomendamos que marque
esta jeringa para que no se mezcle con otras, tal vez con una cinta negra o de color). Si se usa una jeringa,
se ahorran toallitas de limpieza suaves y se reducen los residuos.
Limpie con un disolvente adecuado varias veces. El disolvente debe poder disolver la muestra con rapidez.
En resumen:
1. Añada el disolvente.
2. Agite con la “jeringa de residuos”.
3. Extraiga todo el líquido con la “jeringa de residuos”.
A menudo, el uso de un segundo disolvente que permite un secado rápido (p. ej., la acetona) conlleva el riesgo
de contaminación.
Seque el prisma (la célula) con un pañuelo suave. Espere 10 segundos antes de añadir la siguiente muestra.
El procedimiento de limpieza se puede automatizar para simplificar la operación y garantizar una limpieza
adecuada. Esto se aplica principalmente cuando se usan cambiadores de muestras (por ejemplo, FillPal™,
SC1 y SC30 de METTLER TOLEDO).
9.4 Referencias
How to Achieve Best Results, Day-to-Day Refractive Index Measurement, METTLER TOLEDO, © 07/2012

The MP90 Excellence is the high-end model of the MP Excellence
instrument line. It includes all MP70 features plus a higher temperature
range of up to 400 °C. 6 capillaries can be measured at the same time.
Up to 60 methods and up to 100 reference substances can be stored.
The MP90 is designed for varied and high sample throughput and high
10 Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento
Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento automation demands.
10.1 Punto de fusión

2.3 Automatic Melting Point Determination: The Measurement Principle
La determinación del puntoThe de fusión esofuno

determination de los
melting
point is usually performed
métodos más antiguos de identificación y análisis, in
glass capillaries with an internal
sobre todo para sustancias orgánicas. El punto de
diameter of approx. 1 mm and a
fusión es fácil de determinar y, comoofse
wall thickness 0.1–trata de
0.2 mm.
una propiedad numérica,The sefinely
puede tabular
ground sample y is
clasificar
placed
in the capillary tube to a filling
de forma conveniente. Dado que el punto de fusión
level of 2–3 mm and heated in an
depende en gran medidaappropriate
de la pureza,furnace.también
The meltingse
puede usar para evaluar process
la calidad de las
is visually sustancias.
inspected. This
Moistening
Punto de Sintering
Punto de Collapse
Punto de Meniscus
Punto de Clear de
Punto
method isarequired
Las sustancias puras se funden in many local
una temperatura Point
humectación Point
sinterización Point A A
colapso Point B B
menisco Point C C
claridad
pharmacopeias.
muy definida, mientras que las sustancias impuras y Figura 26. Determinación manual del punto de fusión.
contaminadas suelen presentar un intervalo
The Japanese de fusión
Industrial Standard 'JIS K 0064' from 1992 shows a comprehensive illustration of different
mayor. La temperatura a stages
la queof sethe funde
melting todo
processel ofmaterial de una sustancia
a solid crystalline substance inside contaminada
a capillary. Wesuele sertheinferior
focus on distinct stages
'Collapse point', 'Meniscus point' and 'Clear point‘ and label them A, B and C.
a la de una sustancia pura.
Este comportamiento se conoce
The Collapsecomo pointdescenso
«A» shows the delsubstance
punto de fusión.
mostly solid and a small amount of molten material. At the
meniscus point «B» most of the substance is molten but some solid material is still present. At point C, the clear
10.1.1 El principio de point, the substance
medición del punto is completely
de fusiónmolten. Obviously the temperature increases between points A and C.
La determinación del punto de fusión se realiza normalmente en capilares de vidrio con un diámetro interior
At the melting point not only the aggregate state changes; quite a lot of other physical characteristics also
de aprox. 1 mm y un grosorchangedesignificantly.
pared de entreAmongst0,1 y 0,2 mm.
these La muestravalues,
are the thermodynamic finamente
specific molida se coloca
heat capacity, enthalpy,en
andel tubo
capilar hasta un nivel de rheological
llenado de entre
properties 2 y 3 mm
such y se
as volume calientaLast
or viscosity. en but
un not
horno
least,apropiado. El proceso
the optical properties de fusión
birefringence
se inspecciona visualmente.
6 METTLER TOLEDO Automated Melting & Dropping Point Analysis
Los materiales cristalinos en polvo son opacos en el estado cristalino y transparentes en el estado líquido.
Esta clara diferencia en las propiedades ópticas se puede medir para determinar el punto de fusión registrando
el porcentaje de intensidad luminosa que atraviesa la sustancia en el capilar (es decir, la transmitancia) en
relación con la temperatura medida del horno. En los instrumentos de punto de fusión MP50, MP70 y MP90
de METTLER
reflection andTOLEDO se usa un LED
light transmission rojo como
change. fuentetode
Compared luz physical
other de transmisión
values que brilla a través
the change in lightde orificios
transmission
dentro del horno
can easily en la zona
be determined andinferior del capilar.
can therefore Una cámara
be used de vídeo
for melting graba la luz transmitida.
point detection.
Capillary
Capilar con
with sample
muestra
Fuente de luz
Reflection
de reflexión
light source
Ventana
Window
Furnace
Horno
Transmission
Fuente de luz
de transmisión
light source
Camera
Sistema de cámaras
system
Figura 27. Determinación manual del punto de fusión.
Powdered crystalline materials are opaque in the crystalline state and transparent in the liquid state. This
distinct difference in optical properties can be measured in order to determine the melting point by recording
the percentage of light intensity shining through the substance in the capillary, the transmittance, in relation to
the measured furnace temperature. In the METTLER TOLEDO melting point instruments MP50, MP70 and MP90,
a red LED is used as the transmission light source which shines through holes inside the furnace in the lower
region of the capillary. The transmitted light is recorded by a video camera.
As required by pharmacopeias, METTLER TOLEDO melting point instruments provide visual inspection of the
10.1.2 Trucos y consejos para la medición del punto de fusión de las muestras 
Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento

• Velocidad de calentamiento: normalmente 1 °C/min. Para obtener muestras con la máxima exactitud y sin
descomponerlas, aplique 0,2 °C/min. Con sustancias que se descomponen, recomendamos 5 °C/min, y para
realizar mediciones de exploración, 10 °C/min.
• Temperatura inicial: debería ajustarse entre 3 y 5 minutos antes del punto de fusión esperado (de 3 a 5 veces
la velocidad de calentamiento).
• Temperatura final: una curva de medición correcta requiere una temperatura final que se encuentre aproxi-
madamente 5 °C por encima del evento esperado. En caso contrario, con el parámetro de método “Parar en
evento” se finaliza automáticamente el programa de temperaturas en cuanto todas las muestras se hayan
fundido por completo.
• Las muestras coloreadas o en descomposición (azobenceno, dicromato de potasio y yoduro de cadmio) o las
que muestran una tendencia a incluir burbujas de aire en la masa fundida (urea) pueden requerir la reducción
del valor umbral B (punto de menisco) o el uso del valor C (punto de claridad) como criterio de evaluación,
ya que el aumento de la transmisión no será tan alto durante la fusión.
• Muestras que se descomponen o se subliman (como el azúcar o la cafeína, respectivamente): selle el capilar
con llama. Los componentes volátiles producen una sobrepresión dentro del capilar cerrado que inhibe una
mayor descomposición o sublimación.
• Una preparación incorrecta de la muestra puede provocar curvas de transmisión que no superen el valor
umbral del 40 % del punto B. Se recomienda reducir el valor umbral o usar el punto C para la evaluación.
El punto C es independiente del nivel del valor umbral (solo en MP70/90). En sustancias cristalinas puras,
los valores de temperatura respectivos de los puntos B y C suelen ser muy cercanos. Es decir, existe
una diferencia de temperatura de 0,2 °C o menos. Esta diferencia se encuentra dentro de la incertidumbre
de medición y, por lo tanto, los respectivos valores de temperatura pueden considerarse iguales. Aviso:
El punto C se puede corregir termodinámicamente.
• Se recomienda el uso de capilares de punto de fusión fabricados con gran precisión que garanticen resul-
tados muy exactos y repetibles, por ejemplo, capilares de METTLER TOLEDO. Si se usan otros capilares,
los instrumentos se deberían calibrar y, en caso de que sea necesario, ajustar con estos capilares.
10.2 Punto de goteo
Los productos sintéticos, pero también los productos naturales, que son materias primas importantes para
diversos segmentos de la industria, no muestran un punto de fusión definido. Entre estos se incluyen ungüentos,
resinas sintéticas y naturales, grasas comestibles, grasas, ceras, ésteres de ácidos grasos, polímeros, asfaltos
y alquitranes. Estos materiales se ablandan de manera gradual a medida que la temperatura aumenta y se
funden en un intervalo de temperatura relativamente grande. En general, la comprobación del punto de goteo
o de reblandecimiento es uno de los pocos métodos fácilmente alcanzables disponibles para caracterizar de
forma térmica dichos materiales. Para garantizar resultados comparables, se precisan unas condiciones y
equipos de comprobación estandarizados, así como una preparación de las muestras adecuada.
10.2.1 El principio de medición del punto de goteo

En principio, el punto de goteo es la temperatura a la que se precipita la primera gota de la sustancia fundida
de un recipiente estandarizado con un orificio definido bajo condiciones de test controladas en un horno. Los
métodos manuales requieren la inspección visual del proceso del punto de goteo, lo cual resulta tedioso, ya
que se requiere la atención de un operario durante un período largo para observar continuamente el proceso de
comprobación. El punto de goteo en sí mismo es un evento que ocurre de forma repentina, ya que la gravedad
acelera el goteo del líquido cuando se escapa del crisol. Una vez que esto sucede, el operario tiene que anotar
con rapidez la temperatura. En resumen, la comprobación manual del punto de goteo es un proceso lento y
propenso a errores que se ve afectado en gran medida por el sesgo del operario.

accuracy and precision are obtained and, thanks to its flexibility, more application fields can be covered. The
majority of instruments on the market provide either observation with manual operation or automation without
Point Det
visual observation such as the FP83HT predecessor of the DP Excellence line. The image analysis technology
was published as patent EP 2565633 from the European Patent Office in 2013.
Si un dispositivo que registra y evalúa automáticamente el evento del punto de goteo sustituye la observación
deslizamiento The layout of the furnace and the video image analysis respectively allow two samples to be measured simul-
humana, la calidad del resultado mejora enormemente. En los instrumentos Excellence de punto de goteo
taneously. The FP83HT predecessor and many other instruments in the market do not offer this. The sample
de METTLER TOLEDO, una luz LED blanca equilibrada se ilumina en el conjunto de comprobación, que está
throughput and thus the efficiency are doubled and, if two identical samples are analyzed, a double determina-
formado por el crisol y el soporte dentro del horno. Una cámara de vídeo graba la reflexión. Toda la compro-
& Softening
tion with an averaged result is obtained. This saves time and costs and improves measurement reliability.
bación del punto de goteo se graba en vídeo y se usa el análisis de imágenes para detectar la primera gota
que se escapa de la copa de muestra cuando pasa a través de un rectángulo blanco virtual situado debajo
del orificio del crisol. Al detectar esto, la temperatura del horno se mide y registra con una resolución de 0,1 °C.
5.4 Automated Dropping Point Measurement by Video Based Image Analysis
Dropping
Crisol point de
de punto (DP)
goteo (DP),
y fusión por
cup,orificio
con with a 2.8 mm
de 2,8 mm,
orifice,
que containing
contiene la muestra
of Dropping
sample
en in the oven
el horno
DP
DP
Cámara de vídeo
Video camera
opacidad
• •Análisis
Online, de imagen digital
video-based digitalon-line,
image
basada
analysisenused
vídeo, conDP70
in the el DP70
• •Área de evaluación:
Evaluation rectángulo
area: rectangle in top
Fundamentals
en la of
half mitad superior de la imagen
picture
• •La detección
Detection se produce
occurs cuando
when drop has
lapassed
gota ha pasadothea rectangle
through través
LED light
Fuente desource
luz LED del rectángulo
any time after completion. As two samples can be tested in one run the DP Excellence system provides high test
ntals of Dropping & Softening Point Determination
Generally,
efficiency. Thethe dropping
picture point
shows is the temperature
a screenshot
del punto de of
at which
a liquefied the first
lubricant drop dropping
grease of the molten substance
at 276 °C. precipitates from
Puntos de fusión, goteo, ebullición,
Figura 28. Determinación automática goteo.

a standardized vessel with a defined orifice under controlled test conditions in a furnace. Manual methods obvi-
ously require the visual inspection of the dropping point process, which is a tedious process as the attention
El punto de reblandecimiento se determina de forma muy similar con los mismos instrumentos.
5.5of an operator
Automated is required for Point
Softening a quiteMeasurement
a long time tobycontinuously
Video Basedwatching the test process. The drop point is a
Image Analysis
suddenly occurring event, as the liquefied drop is accelerated by gravity as it escapes the cup. Once this hap-
Crisol de punto de
pens thepoint
Softening operator
reblandecimiento (SP), needs to quickly note the temperature. In summary, manual dropping point testing is a time-
(SP)
cup with 6.35 mm
consuming, error-prone process that is strongly influenced by operator bias.
con orificio de 6,35 mm,
orifice
que containing
contiene la muestra
sample
en in the oven
el horno
If human observation is replaced with a device that records and evaluates the dropping point event automati-
SP
SP
cally, the quality of the result would be greatly improved. In the Dropping Point Excellence instruments from
METTLER TOLEDO, a white balanced LED light is shone on the test assembly, which consists of the cup and
holder inside the furnace. The reflection is recorded
Cámara byvídeo
de a video camera. The entire drop point test is video-
Video camera
recorded and image analysis is used to detect the first drop that escapes the sample cup when it passes through
a virtual white rectangle located underneath the cup orifice. While detecting this, •
the furnace
Análisis temperature
de imagen is mea-
digital on-line,
sured and recorded at a resolution of 0.1 °C. basada en vídeo, con el DP70
• Online, video-based digital image
19
19 mm
• Área de evaluación:
analysis used in the área
DP70
mm
• rectangular que incluye

Evaluation area: la línea
rectangular area
This unique detection principle has proven to be very sensitive and reliable. Because de the entire process
escalonamiento
including stepping line
is video
• • La
recorded, the drop point test can be observed live during the test on the instrument's detección
terminal
Detection se produce
and
occurs cuando
repeated
when steppingat
la línea de escalonamiento
line reaches defined distance alcanza
una distancia definida
LED light
Fuente de source
luz LED
METTLER TOLEDO Automated Melting and Dropping/Softening Point Determination 23
Figura 29. Determinación automática del punto de reblandecimiento.
The softening point test is used to test substances that only soften or partially melt with increasing temperature.
Substances such as resins, rosins or bitumen/asphalt, pitch and tars are typical examples. Softening point tests
require a dedicated sample cup with a 6.35 mm orifice in the bottom, which is wider than that of a dropping
point cup. In order to enforce the precipitation of the softened sample from the cup when heated, the sample is
weighted with a ball of standardized dimensions made of stainless steel (for resins) or lead (for bitumen). Once
the sample softens and extends down far enough to reach a 19 mm distance from the cup orifice, the furnace
temperature is recorded as the softening point temperature of the sample.
The METTLER TOLEDO DP Excellence instruments enable automatic detection of the softening point temperature
using video-based image analysis. In the video, the leading edge of the softened sample is marked with a step-
10.2.2 Trucos y consejos para la medición del punto de goteo y reblandecimiento de las muestras

Preparación de muestras eficiente y fiable
La base de unos resultados comparables y fiables en los análisis de los
puntos de reblandecimiento y de goteo es una preparación repetible de la
muestra. Con la herramienta de preparación de muestras DP Excellence
este paso crucial está perfectamente cubierto. Entre las ventajas se pueden
mencionar:
• Preparación de muestras eficiente, ya que se pueden preparar cuatro
crisoles a la vez.
• Minimización de errores de manipulación. Se maximiza la seguridad Figura 30. Herramienta de preparación
de la muestra.
operativa.
• Prevención de la contaminación del exterior de la copa de muestras para una mejor fiabilidad de los resultados.
La herramienta de preparación de muestras de METTLER TOLEDO fue patentada en 2013 (EP2564927, Oficina
Europea de Patentes). Aumenta los instrumentos DP Excellence a un sistema completo que facilita y asegura el
flujo de trabajo analítico completo en el análisis del punto de goteo y reblandecimiento.
Portamuestras y crisoles conformes con los estándares

Para la determinación de los puntos de goteo y de reblandecimiento, se usan crisoles estandarizados de
punto de goteo y de reblandecimiento. En METTLER TOLEDO, ofrecemos crisoles de aluminio o latón chapado
en cromo.
La configuración experimental necesaria para una comprobación automática de punto de goteo y reblande-
cimiento consta del crisol que contiene la muestra, cerrado con una tapa, y un vaso de recogida debajo para
recoger la muestra licuada.
Tapas de
crisoles
Vaso de recogida
Soporte
Crisoles
Figura 31. A, B y C: portadores de muestras y crisoles.
Muestras sólidas
En el caso de muestras en polvo, el embudo en forma de disco se monta
en la parte superior de la unidad de preparación de muestras, que guía
el polvo hacia la copa de muestra situada debajo. El diámetro del orificio
del embudo se corresponde exactamente con la abertura de crisol subya-
cente. Una pequeña porción de la muestra molida se llena a través del
embudo alineado en el crisol. El extremo redondeado de la varilla de
presión se usa para comprimir la muestra en el crisol.
Este procedimiento se repite hasta que el crisol esté completamente lleno

de muestra. La parte plana de la varilla de presión se usa para comprimir Figura 32. Llenado de la primera porción
la muestra con el fin de nivelarla con la superficie del disco de apoyo. de una muestra vendida.
A continuación, se gira el orificio del disco de apoyo hasta el siguiente
crisol y se repite el procedimiento de llenado.

Lubricantes y grasas
La preparación de las muestras de grasa lubricante sigue las especificaciones originales descritas en el
estándar ASTM D556, que también se usa en los estándares ASTM D2265 e IP 396.
Betún y brea
Tras la fusión, la muestra se vierte en los crisoles con la herramienta de preparación de muestras. A conti-
nuación, se enfría a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos. El exceso de muestra se retira del
crisol con un cuchillo caliente.
En este caso, la herramienta de preparación de muestras ayuda considerablemente a llenar los crisoles de
punto de goteo. Gracias al disco de apoyo, se evita la contaminación de la superficie exterior. La eliminación
del exceso de muestra del crisol es una tarea muy fácil y repetible debido a que la superficie del disco de apoyo
está nivelada con el borde del crisol de punto de reblandecimiento.
Resinas y colofonias
Las resinas y las colofonias se preparan en principio del mismo modo que el betún. Al fundir las muestras, evite
la ebullición y las burbujas de aire. Evite el sobrellenado excesivo y elimine el exceso con un cuchillo caliente.
Ceras
En principio, las muestras de cera se preparan como otras muestras fundidas. Una vez más, se usa la herra-
mienta de preparación de muestras. Vierta cuidadosamente la muestra de cera fundida en el crisol y evite la
inclusión de burbujas de aire.
10.3 Punto de ebullición
El punto de ebullición de un compuesto químico es la temperatura a la que se produce una transición de fase

de líquido a gas en condiciones normales. Se trata de una propiedad específica de la sustancia que puede
proporcionar información útil sobre la identidad y pureza de esta y, a menudo, se usa para seleccionar una
temperatura óptima de procesamiento, por ejemplo, para determinar una condición de almacenamiento ideal.
Se requiere el conocimiento de esta propiedad para las fichas técnicas de datos de seguridad de materiales
(MSDS).
10.3.1 El principio de medición del punto de ebullición

Para determinar el punto de ebullición, se pipetean aproximadamente 100 µL de muestra en un tubo de vidrio.
A continuación, se inserta un capilar de punto de ebullición más pequeño en el tubo lleno para evitar el sobre-
calentamiento del líquido, lo que induciría un retardo en la ebullición y daría lugar a lecturas inexactas. Segui-
damente, la muestra se inserta en el instrumento y se inicia el método.
La temperatura aumenta y se forman burbujas de gas dentro del líquido que escapan a la superficie. Estas
burbujas ascendentes reflejan la luz de la fuente de luz incorporada y se detectan por separado. Se mide la
frecuencia de estas y se usa como base para la determinación del punto de ebullición.
Puesto que la temperatura de ebullición depende de la presión, se debe realizar un cálculo para obtener el punto
de ebullición a presión normal. La mayoría de las determinaciones se realizan a presión ambiente. Esta se mide
con un barómetro calibrado integrado. La compensación de la presión al nivel del mar se calcula automática-
mente y se aplica a los resultados.

78,4 °C
Figura 33. Duplicado, determinación simultánea del punto de ebullición.
10.3.2 Trucos y consejos para la medición del punto de ebullición de las muestras
• Introduzca el capilar interior para punto de ebullición más pequeño en el capilar exterior para punto de
ebullición para evitar el sobrecalentamiento. Para cada medición hay que insertar un nuevo capilar interior
para punto de ebullición.
• Velocidad de calentamiento: normalmente 1 °C/min.
• Temperatura inicial: debería ajustarse entre 3 y 5 minutos antes del punto de ebullición esperado (de 3 a
5 veces la velocidad de calentamiento).
madamente 5 °C por encima del evento esperado. En caso contrario, con el parámetro de método “Parar en
evento” se finaliza automáticamente el programa de temperaturas en cuanto ambas muestras alcanzan el
punto de ebullición.
• Muestras coloreadas: para las muestras de color oscuro, ajuste el brillo manual a una intensidad que permita
la mejor detección del punto de ebullición.
10.4 Punto de opacidad
El punto de opacidad de una solución corresponde a la temperatura por encima de la cual la muestra se

enturbia. Por lo general, es el que más se usa para realizar verificaciones de control de calidad para garantizar
un nivel de producción y rendimiento técnico elevado. A menudo, los protocolos de punto de opacidad piden
una dilución del 1 % en peso de la sustancia de interés, generalmente un tensoactivo, una emulsión o una
dispersión, en agua. La solubilidad en agua de esta sustancia tiende a variar inversamente con la temperatura:
cuanto mayor es la temperatura, menor es la solubilidad, y el punto de opacidad es la temperatura a la cual la
solución alcanza la saturación y se vuelve turbia.
10.4.1 El principio de medición del punto de opacidad

Por lo general, la determinación del punto de opacidad se realiza con una dilución del 1 % en peso de la
sustancia de interés en el agua. Se pipetean aproximadamente 100 μL de muestra en un tubo de vidrio y se
inserta en el instrumento. A continuación, se puede iniciar el método.

La solución de interés es transparente al comienzo del experimento y, cuando se alcanza el punto de opacidad,
se vuelve turbia. Esta turbidez se controla a través de la detección de luz transmitida: cuanto mayor es la
temperatura por encima del punto de opacidad, más turbia es la solución y, por lo tanto, menos luz se
transmite a través de esta. La detección automática de la disminución de la intensidad de la luz transmitida
por la cámara de vídeo es la clave para obtener resultados de punto de opacidad repetibles y fiables.
60,0 °C 63,5 °C
Figura 34. Determinación automática del punto de opacidad.

A 60,0 °C, la solución es clara. A 63,5 °C, se volvió turbia y
se detectó el punto de opacidad.
10.4.2 Trucos y consejos para la medición del punto de opacidad de las muestras
• Temperatura inicial: debería ajustarse entre 3 y 5 minutos antes del punto de opacidad esperado
(de 3 a 5 veces la velocidad de calentamiento).
madamente 5 °C por encima del evento esperado. En caso contrario, con el parámetro de método “Parar
en evento” se finaliza automáticamente el programa de temperaturas en cuanto ambas muestras alcanzan
el punto de opacidad.
10.5 Punto de fusión por deslizamiento
El punto de fusión por deslizamiento se usa a menudo para caracterizar grasas, aceites y ceras, o cualquier
otro sólido que no tenga un punto de fusión definido o claro. En función de la composición de la muestra y su
correspondiente punto de fusión por deslizamiento, esta se puede usar en una variedad de aplicaciones, desde
bajas a altas temperaturas: desde helados hasta cosméticos. El punto de fusión por deslizamiento ayuda a
caracterizar los productos y respalda el comercio internacional, lo que hace que la estandarización y la confor-
midad sean fundamentales.
10.5.1 El principio de medición del punto de fusión por deslizamiento

La determinación del punto de fusión por deslizamiento implica lo siguiente: un tubo capilar para punto de
fusión por deslizamiento interno que contiene una columna de grasa (aproximadamente 10 mm de longitud)
cristalizada bajo condiciones controladas se sumerge en agua, que luego se calienta a una velocidad
específica. La temperatura a la que se observa que la columna de grasa comienza a elevarse en el tubo capilar
interno, debido a una combinación del empuje de Arquímedes y la superficie exterior fundida de la columna,
se registra como el punto de fusión por deslizamiento.

El punto de fusión por deslizamiento de la sustancia se evalúa mediante un análisis de imágenes digitales.

Cuando la columna de sustancia comienza a desplazarse hacia arriba, el algoritmo de procesamiento
de imagen determina el punto de fusión por deslizamiento de forma totalmente automática.
45,0 °C 47,6 °C
Figura 35. Determinación automática del punto de fusión por deslizamiento.

A 45 °C, la columna de muestra todavía no se ha movido. A 47,6 °C, la sustancia
ha alcanzado su punto de fusión por desplazamiento.
10.5.2 Trucos y consejos para la medición del punto de fusión por desplazamiento de las muestras
• Temperatura inicial: debería ajustarse entre 3 y 5 minutos antes del punto de fusión por desplazamiento
esperado (de 3 a 5 veces la velocidad de calentamiento).
• Temperatura final: una medición correcta requiere una temperatura final que se encuentre aproximadamente
5 °C por encima del evento esperado.
• Para determinar el punto de fusión por deslizamiento de forma fiable, el diámetro del capilar exterior
debe ser al menos el doble del diámetro del capilar interior: tanto el capilar exterior como el interior
de METTLER TOLEDO cumplen este requisito.

Figura 36. Preparación de la muestra para determinar el punto de ebullición (2), opacidad (1) y fusión por deslizamiento (3). Inserte la punta
de la pipeta que contiene la solución de interés en el capilar externo para punto de ebullición de modo que toque la pared interior de este
y permita que la solución se deslice lentamente hacia el fondo del capilar. Si está preparando una muestra de punto de ebullición, inserte
el capilar interno para punto de ebullición tras haberla añadido. Si está preparando una muestra de punto de fusión por deslizamiento,
inserte el capilar interno para punto de fusión por deslizamiento que contiene 10 mm de muestra tras haber añadido la solución.
10.6 Referencias
Automated Melting & Dropping Point Analysis, A Comprehensive Textbook, METTLER TOLEDO, 30097042,
© 09/2014

11 Análisis térmico
Análisis térmico
11.1 Una breve explicación de técnicas importantes de análisis térmico
DSC: calorimetría diferencial de barrido

En la DSC, el flujo de calor que entra y sale tanto de la muestra como del material de referencia se mide
en función de la temperatura a medida que la muestra se calienta, se enfría o se mantiene isotérmicamente
a temperatura constante. La señal de medición es la energía que la muestra absorbe o libera en milivatios.
La DSC le permite:
• Detectar efectos endotérmicos y exotérmicos.
• Determinar las áreas de los picos (entalpía de transición y reacción).
• Determinar las temperaturas que caracterizan un pico u otros efectos.
• Medir la capacidad de calor específica.
DTA: análisis térmico diferencial

En el DTA, la diferencia de temperatura entre la muestra y una sustancia de referencia inerte se mide en función
de la temperatura. La señal de DTA se expresa en °C o K. Anteriormente, solo se mostraba la tensión del
termopar en mV o μV.
SDTA: DTA único

Este término fue patentado por METTLER TOLEDO y es una variación del DTA clásico, que es particularmente
útil cuando se usa al mismo tiempo que el análisis termogravimétrico. La señal de medición representa la
diferencia de temperatura entre la muestra y una muestra en blanco previamente medida y almacenada.
El DTA (y el SDTA) le permite:

• Detectar efectos endotérmicos y exotérmicos.
• Determinar las temperaturas que caracterizan los efectos térmicos.
êxo Comparación de tres técnicas
DSC Integral −412,23 mJ

Límite izquierdo 170,50 °C
Límite derecho 236,66 °C
0,5
Límite línea base izquierda 170,50 °C
Wg^−1
Límite línea base derecha 236,66 °C
Velocidad de calentamiento 10,00 °Cmin^−1
TGA Tipo de línea base line
Paso −1,8457 %
um −0,1262 mg
TMA
Inicio 211,71 °C 5
2000
mg
Paso −96,2221 %
1000 −6,5803 mg
Residuo 1,7537 %
0,1199 mg
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 °C
Figura 37. Las tres técnicas que se ha usado para medir la poliamida 6 muestran distintos efectos térmicos. DSC: punto de
fusión de la parte cristalina; TGA: paso de secado y descomposición; TMA: reblandecimiento bajo carga.

TGA: análisis termogravimétrico
Análisis térmico
El TGA mide el peso y, por lo tanto, la masa de una muestra en función de la temperatura. Anteriormente
se usaba la abreviación TG. Hoy en día, se prefiere TGA para evitar confusiones con Tg, la temperatura de
transición vítrea.
El TGA le permite:
• Detectar cambios en la masa de la muestra (ganancia o pérdida).
• Determinar cambios graduales de masa, generalmente como porcentaje de la masa inicial de la muestra.
• Determinar las temperaturas que caracterizan un paso en la curva de pérdida o ganancia de masa.
EGA: análisis de gases desprendidos

EGA es el nombre de una familia de técnicas mediante las cuales se mide la naturaleza o la cantidad de
productos gaseosos volátiles que han evolucionado a partir de una muestra en función de la temperatura.
Las técnicas de análisis más importantes son la espectrometría de masas y la espectrometría infrarroja. El EGA
se usa más a menudo en combinación con el TGA porque los compuestos volátiles se eliminan en cada efecto
del TGA (pérdida de masa).
TMA: análisis termomecánico

El TMA mide la deformación y los cambios dimensionales de una muestra en función de la temperatura.
En el TMA, la muestra se somete a una fuerza constante, a una fuerza creciente o a una fuerza modulada,
mientras que en la dilatometría los cambios dimensionales se miden con la menor carga posible.
En función del modo de medición, el TMA le permite:

• Detectar efectos térmicos (hinchamiento o contracción, reblandecimiento, cambio en el coeficiente
de dilatación).
• Determinar las temperaturas que caracterizan un efecto térmico.
• Determinar las alturas de las fases de deformación.
• Medir coeficientes de dilatación.
DMA: análisis dinamo-mecánico

En el DMA, la muestra se somete a un esfuerzo mecánico sinusoidal y se determinan la amplitud de la fuerza,
la amplitud del desplazamiento (deformación) y el cambio de fase.
El análisis dinamo-mecánico le permite detectar los efectos térmicos basados en los cambios en el módulo
o el comportamiento de amortiguación. Los resultados más importantes son:
• Las temperaturas que caracterizan un efecto térmico.
• El ángulo de pérdida (el cambio de fase).
• El factor de pérdida mecánica (la tangente del cambio de fase).
• El módulo elástico o sus componentes, los módulos de almacenamiento y de pérdida.
• El módulo de cizalladura o sus componentes, los módulos de almacenamiento y de pérdida.
TOA: análisis termoóptico

Por TOA se entiende la observación visual o la medición de la transmisión óptica de una muestra, por ejemplo,
en un termomicroscopio. Las aplicaciones típicas son la investigación de procesos de cristalización y fusión,
así como transiciones polimórficas.
TCL: termoquimioluminiscencia
La TCL es una técnica que permite observar y medir la emisión débil de luz que acompaña a determinadas
reacciones químicas.

11.2 Visión general de las aplicaciones
Análisis térmico
En la tabla 5, se resume qué propiedades de materiales o aplicaciones se pueden analizar mediante qué
técnica de análisis térmico.
Propiedad o aplicación DSC DTA TGA TMA DMA TOA TCL EGA
Capacidad calorífica específica ••• •
Cambios de entalpía, entalpía de conversión ••• •
Entalpía de fusión, cristalinidad ••• •
Punto de fusión, comportamiento de fusión ••• • • •••
(fracción líquida)
Pureza de sustancias cristalinas no poliméricas ••• ••• •
Patrón de cristalización, sobre enfriamiento ••• • •••
Evaporación, sublimación, desorción ••• • ••• ••• •••
Transiciones sólido-sólido, polimorfismo ••• ••• • •••
Transición vítrea, reblandecimiento amorfo ••• • ••• ••• •
Descomposición térmica, pirólisis, despolimerización • • ••• • • •••
y degradación
Estabilidad de la temperatura • • ••• • • •••
Reacciones químicas, p. ej., polimerización ••• • • •
Estudio de la cinética de las reacciones y de la cinética ••• • ••• •
aplicada (predicciones)
Degradación oxidativa, estabilidad de oxidación ••• ••• ••• • •••
Análisis de composición ••• ••• •••
Comparación de diferentes lotes y productos de la ••• • ••• • • ••• • •••
competencia
Coeficiente de expansión lineal •••
Módulo elástico • •••
Módulo de cizalladura •••
Amortiguación mecánica •••
Comportamiento viscoelástico • •••
••• 5.
Tabla significa “muy adecuada”,
Visión general • significa
de las aplicaciones “menos las
que muestran adecuada”
técnicas termoanalíticas que se pueden usar para estudiar determinadas
propiedades o realizar ciertas aplicaciones.
••• significa “muy adecuada”
• significa “menos adecuada”
11.3 Desarrollo de métodos: la tarea de análisis
El desarrollo de métodos comienza con la definición precisa de la información que se espera obtener
del análisis de una muestra. Normalmente, estas son las preguntas:
• ¿A qué temperatura se produce la transición vítrea?
• ¿Exhibe la muestra algún tipo de polimorfismo?
• ¿Cuál es la pureza de mi producto?
• ¿Cuál es el contenido de humedad de mi muestra?
En función de la tarea de análisis y de la información requerida, primero tiene que decidir qué técnica
de medición usar, por ejemplo, como se describe en la tabla 5.

11.4 Procedimiento de desarrollo de métodos
Análisis térmico
El desarrollo y la validación de métodos tiene una gran importancia en los sistemas de control de calidad
actuales. El punto de partida suele ser un método de prueba que se optimiza y valida en distintos pasos
iterativos. El resultado final es un método validado que se usa para los procedimientos normalizados de
trabajo (PNT).
El desarrollo y la validación de un procedimiento de medición lleva mucho tiempo y es costoso. Esto significa
que es fundamental comenzar con un buen método de prueba desde el principio. La figura 38 que se muestra
a continuación presenta una visión general de este proceso y ayuda a sistematizar el desarrollo de métodos
termoanalíticos.
En los manuales de aplicaciones de análisis térmico de METTLER TOLEDO se explican más detalles sobre el
desarrollo de métodos, las aplicaciones y las técnicas de medición de análisis térmico.
Selección de la técnica de medición:

DSC
TMA (tensión, compresión, flexión en 3 puntos)
DLTMA (tensión, compresión, flexión en 3 puntos)
TGA
DMA (cizalladura, tensión, compresión, flexión)
TOA (análisis termoóptico)
Preparación de la muestra
Selección del crisol
Selección del
programa de temperaturas
Selección de la atmósfera
Tras la medición
Evaluación
Validación
Método validado
Figura 38. Procedimiento para el desarrollo de un método termoanalítico.

11.5 Precisión, exactitud y veracidad
Análisis térmico
• Para una descripción detallada de la exactitud, la repetibilidad, los errores de medición y la validación de los
métodos, así como de otras cuestiones relacionadas con la calidad de los datos, consulte nuestro manual
“Validation in Thermal Analysis” [Validación en el análisis térmico] [www.mt.com/ta-handbooks]. En este
manual, se ofrece una descripción detallada de la terminología que se usa y se analizan muchos ejemplos
de la DSC y los análisis TGA, TMA y DMA.
• En [UC 29/1], se encuentra un resumen más corto titulado “Precision, accuracy, trueness” [Precisión, exactitud
y veracidad].
Exactitud: proximidad entre el

resultado de una comprobación
y el valor de referencia aceptado.
Precisión Veracidad: grado de concordancia

(desviación estándar) entre una media obtenida a partir de
un gran número de resultados de
comprobación y un valor de referencia
aceptado, es decir, el valor “real”.
Precisión: la difusión de los

datos en torno a una media.
Valor real Medio

Veracidad
Exactitud del valor x
Figura 39. Relación entre exactitud, veracidad y precisión.
11.6 Incertidumbre de la medición
La incertidumbre total de la medición se compone de todos los posibles errores que intervienen en las distintas
fases del análisis. Por ejemplo, los factores de influencia que se muestran en el diagrama de causa y efecto
(o espina de pescado) desempeñan un papel en la medición de la entalpía de fusión por DSC.
Preparación
Instrumento
de la muestra
Pesaje
Calibración
(masa de muestra)
Corte de
la muestra
Contacto térmico
con crisol
Entalpía
de fusión
Gas Límites de integración

Velocidad de
calentamiento
Tipo de línea base
Flujo
Método Evaluación
Figura 40. Diagrama de espina de pescado de un ejemplo de DSC.

En la tabla que se muestra a continuación se presentan estimaciones de las contribuciones individuales
Análisis térmico
de la incertidumbre en este ejemplo:
Fuente Incertidumbre de la medición

Masa de la muestra de comprobación ±20 µg (p.ej. reproducibilidad de la balanza; si la masa es de unos 10 mg, corresponde
a ±0,2 %)
Colocación de la sustancia en el crisol Insignificante
Contacto térmico con el crisol ±0,5 % (estimada)
Velocidad de calentamiento Insignificante
Gas y flujo de gas Insignificante si el instrumento se ha ajustado en las mismas condiciones que la medición
Ajuste ±1,5 % (incertidumbre del material de calibración)
Límites de integración y tipo de línea ±3 % (estadísticas de evaluaciones repetidas)
base
Tabla 6. Influencia estimada de factores de incertidumbre seleccionados.
Las contribuciones se pueden sumar de acuerdo con las reglas de propagación de la incertidumbre para
obtener un valor para la incertidumbre combinada:
± (0,2 %)2 + (0,5 %)2 + (1,5 %)2 + (3 %)2 = ±3,4 % (pc = 68 %)
• En [UC 30/1], podrá encontrar una descripción más detallada de la incertidumbre de medición.
• Para mediciones de TGA, resulta importante tener en cuenta el peso mínimo de la muestra de acuerdo con el
USP cuando se miden masas de muestra o residuos muy pequeños. En [UC 41/14], se ofrece una descripción
completa de la influencia del peso mínimo de una balanza específica para el TGA.
11.7 Validación de métodos
Existen tres maneras de obtener métodos analíticos validados; los detalles se resumen en la siguiente tabla.
Para una descripción detallada de la validación de métodos, consulte nuestro manual “Validation in Thermal
Analysis” [Validación en el análisis térmico].
Validación de métodos analíticos Estudios entre laboratorios Estándares internacionales

• El usuario diseña el método desde • Todos los laboratorios participantes • Un método publicado se puede usar tal
el principio y se comprueba para las comprueban un método analítico y como se describe. La exactitud y la
variables relevantes (por ejemplo, específico con diversas muestras. precisión que se esperan se indican en
operario, preparación de la muestra, Los resultados se envían a una entidad la documentación estándar.
instrumento, entorno, precisión y organizadora central que evalúa los • Esta es la manera más fácil de obtener
repetibilidad). Puede que se requiera datos y emite recomendaciones sobre un método validado.
realizar varias iteraciones para optimizar la exactitud que se espera del método. • Es posible que el método no cumpla
los parámetros del método. • Se puede obtener una gran cantidad plenamente los requisitos o que no
• El método es exactamente el que requiere de datos con relativa rapidez. incluya comprobaciones concretas.
el usuario. • También se puede comprobar la • Se encuentran disponibles muchos
• La validación del método puede llevar reproducibilidad (repetibilidad entre estándares internacionales, por ejemplo,
mucho tiempo. distintos laboratorios). la ISO, la ASTM, etc. Consulte el capítulo
20 del manual “El análisis térmico en la
práctica” para obtener una lista completa
de los estándares relevantes para el
análisis térmico.
Tabla 7. Las tres formas de obtener métodos analíticos validados.

11.8 Muestras
Análisis térmico
En este capítulo, se describen ejemplos de cuestiones específicas relacionadas con las muestras. Comen-
zaremos analizando algunos requisitos generales para la preparación de muestras que se aplican a la DSC,
el TGA, el TMA y el DMA. A continuación, nos centraremos en los requisitos de las muestras para instrumentos
individuales. Por último, terminaremos con los contenedores de muestras y los portamuestras, es decir, con los
crisoles para la DSC y el TGA, y los conjuntos de sujeción para el TMA y el DMA.
11.8.1 Requisitos generales para las muestras

Algunos de los requisitos para la muestra y la preparación de muestras son comunes para la DSC, el TGA,
el TMA y el DMA:
Antes de la medición Tras la medición
La muestra debería ser representativa Pese la muestra antes y después de

del material a granel [UC 29/1]. la medición para comprobar si hay
Durante la medición pérdida de volátiles o descomposición
La muestra no se debería alterar (“TGA fuera de línea”).
térmica ni mecánicamente.
Use la atmósfera adecuada: Comprobación visual de la muestra:
La composición de la muestra • Gas inerte: nitrógeno, helio, argón, etc. • Muestra fundida: ¿fusión visible
debería permanecer inalterada • Gas de reacción: aire, oxígeno, etc. en curva?
(humedad, impurezas, oxidación). • Buena interacción entre gas y muestra. • Muestra descolorida: ¿es visible
• Sin intercambio de gases con la la descomposición?
La muestra no debería reaccionar muestra. • Burbujas de gas: ¿debido a la
durante la preparación. • Interacción limitada: atmósfera descomposición?
autogenerada. • Deformación del fondo del crisol:
¿expansión o explosión?
Tenga en cuenta posibles gradientes
de temperatura en la muestra. Vuelva a evaluar los resultados y
prepare una posible segunda medición
Asegúrese de que exista un buen con diferentes parámetros.
contacto térmico entre la muestra y el
portamuestras.
La muestra no se debe mover durante

la medición porque esto causará
anomalías.
Para obtener más información, consulte esta bibliografía: [UC 3/1] [UC 29/1].
• Para comprobar el gradiente de temperatura en la muestra medida, coloque un trozo de indio encima y debajo
de la muestra y mida la diferencia de temperatura por medio de los dos inicios (DSC, TGA, TMA y DMA).
• Para evitar que la humedad entre en la muestra durante el tiempo de espera en la mesa del robot, use el
accesorio de perforación de la tapa (DSC y TGA) [UC 20/17].
11.8.2 Muestreo
Durante el proceso de muestreo se deben tener en cuenta varios puntos importantes. Algunos son:
• ¿Qué lotes de producción se deberían examinar?
• ¿En qué punto o puntos de un lote de producción o desde qué parte o partes de un lote de producción
se deberían examinar las muestras?
• ¿Son el punto de muestreo y el tamaño de la muestra representativos del lote de producción con respecto
a la posible falta de homogeneidad? ¿La muestra seleccionada nos permite sacar conclusiones sobre la
muestra de volumen?
• ¿Cómo de grande debería ser el tamaño de la muestra con respecto al volumen y el número de elementos?
• ¿Con qué frecuencia se debería determinar una propiedad de material y cuántas muestras se deberían medir?

• ¿Se toman las muestras en diferentes puntos y se mezclan de nuevo para formar una muestra compuesta
Análisis térmico
(o muestra global) o se procesan por separado como muestras de comprobación?
• ¿Las muestras siempre son representativas del material a granel del que se tomaron?
En el diagrama, se muestra un ejemplo de un procedimiento de muestreo típico [UC 29/1]:
Lote
Muestra
primaria
Muestra
compuesta
Muestra
secundaria
Muestra de
laboratorio
Triturado
Muestra de o reducción
comprobación
Porción de
comprobación
11.9 Referencias
Thermal Analysis in Practice, METTLER TOLEDO, 51725244, © 12/2009

12 Conclusión
Conclusión
El personal de laboratorio trabaja a diario con diferentes instrumentos y equipos relacionados. Puede que
cada instrumento funcione de manera muy distinta. Por lo tanto, muchos operarios han llegado a apreciar
el concepto de interfaz unificada y fácil de entender que hemos introducido en METTLER TOLEDO para ofrecer
un funcionamiento fácil y directo del instrumento.
Las balanzas e instrumentos analíticos, así como otras soluciones de METTLER TOLEDO, le permiten realizar
tareas de medición y análisis con confianza, además de obtener resultados correctos y precisos. No obstante,
creemos que siempre resulta útil entender los principios básicos de medición en los que se basa la instrumen-
tación. Esta comprensión puede ayudarle a desarrollar PNT mejores que ahorren más tiempo y a garantizar
la exactitud en diversas condiciones del mundo real.
Los expertos de METTLER TOLEDO han tenido el placer de presentar los trucos y consejos que se incluyen
en esta guía. Esperamos que este consejo de buenas prácticas le ayude a sacar el máximo provecho de sus
instrumentos y equipos. Para nosotros es importante que alcance su objetivo de resultados analíticos precisos
y fiables, así como que sea capaz de fabricar productos de calidad que satisfagan a sus clientes.

Referencias 13 Referencias
A continuación, se incluyen las referencias que se han usado en la elaboración de esta guía.
1. Proper Weighing with Laboratory Balances, Guide Book, METTLER TOLEDO, 720906, © 01/2015
2. Dictionary of Weighing Terms, Springer-Verlag Berlin, 2009, ISBN 978-3-642-02013-1
3. Get Better Results, Quick Guide to Good Pipetting, METTLER TOLEDO, © 02/2014
4. Pipetting Tips and Tricks, METTLER TOLEDO, © 01/2013
5. A Guide to pH Measurement, Theory and Practice of Laboratory pH Applications, METTLER TOLEDO,
51300047, © 03/2013
6. Guide to Moisture Analysis, Moisture Determination with the Halogen Moisture Analyzer, METTLER TOLEDO,
© 04/2013
7. Good Titration Practice Brochure, How to Achieve the Best Results, METTLER TOLEDO, 51725313A,
© 04/2013
8. Basics of Titration, Titration Theory, METTLER TOLEDO, 51725228, © 09/2009
9. Validation of Titration Methods, Application Brochure 16, METTLER TOLEDO 51724912A, © 03/2015
10. How to Achieve Best Results, Day-to-Day Density Measurement, METTLER TOLEDO, © 07/2012
11. How to Achieve Best Results, Day-to-Day Refractive Index Measurement, METTLER TOLEDO, © 07/2012
12. Automated Melting & Dropping Point Analysis, A Comprehensive Textbook, METTLER TOLEDO, 30097042,
© 09/2014
13. Thermal Analysis in Practice, Application Handbook, METTLER TOLEDO, 51725244, © 12/2009
Algunas otras referencias que pueden ser de interés:

1. Fundamentals of Mass Determination, Springer-Verlag Berlin, 2012, ISBN 978-3-642-11936-1
2. Titration Fundamentals, METTLER TOLEDO, 134 pages, 51725311, © 09/2010
3. Titration Automation Guide, Opportunities and Benefits, METTLER TOLEDO, 19 pages, © 11/2014
4. Validation in Thermal Analysis, Collected Application Handbook, METTLER TOLEDO, 232 pages, 51725141,
© 12/2008
5. Analytical Excellence to Improve Customer Processes, Laboratory Catalog 2014/15, METTLER TOLEDO,
238 pages, 11795953, © 02/2014

14 Información de apoyo adicional
Información de apoyo adicional

14.1 Cursos on-line
Impartimos cursos on-line sobre diversos temas. Puede participar en cursos on-line archivados en el momento
y lugar que más le convengan. Los cursos on-line en directo tienen la ventaja añadida de ofrecer la posibilidad
de plantear preguntas y comentar los puntos de interés con expertos de METTLER TOLEDO y otros participantes.
www.mt.com/webinars
14.2 Asistencia integral para las aplicaciones
Base de datos de aplicaciones

Nuestras bases de datos de aplicaciones con posibilidad de búsqueda contienen varios cientos de aplicaciones
de diferentes segmentos industriales. Las aplicaciones son métodos probados con resultados, parámetros de
método detallados y evaluaciones finales.
UserComs
UserComs son publicaciones periódicas que se distribuyen a los clientes y a otras personas interesadas en el
feedback sobre aplicaciones prácticas, consejos de expertos, información técnica y las noticias más recientes
sobre productos.
La información está pensada para que los clientes conozcan nuevos métodos para solucionar los problemas
analíticos a los que se enfrentan en sus propios laboratorios. Si dispone de una aplicación interesante que desee
dar a conocer a otros usuarios, escríbanos; estaremos encantados de publicarla en la revista UserCom.
Aplicaciones de valoración www.mt.com/titration_applications

Revista UserCom sobre valoraciones www.mt.com/anachem-usercom
Aplicaciones de análisis térmico www.mt.com/ta-applications
Revista UserCom sobre análisis térmico www.mt.com/ta-usercoms
Aplicaciones del analizador de humedad www.mt.com/moisture
14.3 Biblioteca de expertos
La biblioteca constituye un único portal que atesora todos

los recursos informativos que necesita, como bibliografía,
cursos on-line, información de productos, etc.
www.mt.com/Library

Good Measuring Practices
Cómo mejorar los resultados de medición
El primero de los cinco pasos del programa Good Measuring Practices (buenas
prácticas de medición) consiste en la evaluación de las necesidades de medición
de sus procesos y de los riesgos asociados.
Con toda esta información, este programa proporciona recomendaciones directas

para seleccionar, instalar, calibrar y usar dispositivos y equipos de laboratorio.
• Mantenimiento de la exactitud y la precisión de los resultados.
• Conformidad con normativas y auditorías seguras.
• Aumento de la productividad y reducción de costes.
• Cualificación y formación profesionales.
Good Weighing Practice™ 5

1
Mejoras garantizadas en los resultados de pesaje gracias
Routine
Operation Evaluation
a GWP®. Good
Measuring
4
Practices 2
Good Pipetting Practice™
Calibration /
Qualification Selection
Técnicas de pipeteo mejoradas: riesgos mínimos gracias 3

Installation /
a GPP™.
Training
Good Titration Practice™

Valoración segura en acción: resultados fiables gracias a GTP®.
Good Electrochemistry Practice™

Mediciones del pH fiables gracias a GEP™.
Good Density and Refractometry Practice™

Resultados de densidad y refractometría seguros gracias a GDRP™.
Good Melting and Dropping Point Practice™

Índices térmicos de confianza: optimizados con GMDP™.
Good Thermal Analysis Practice™

Resultados de análisis térmicos rápidos y seguros con la ayuda de GTAP™.
Good UV/VIS Practice™

Espectroscopia exacta y fiable garantizada por GUVP™.
Obtenga más información sobre el programa Good Measuring Practices.

www.mt.com/gp
www.mt.com
Para más información
METTLER TOLEDO Group

Laboratory Weighing
Información de contacto local: www.mt.com/contacts
Sujeto a modificaciones técnicas

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Group MarCom RITM646459 MC/JK

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Soluciones de laboratorio

Habilidades fundamentales para el laboratorio

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 3

4 Determinación del valor del pH y de la conductividad 15

5 Determinación del contenido de humedad 19

8 Densidad: determinación de la concentración 30

9 Índice de refracción: determinación de la concentración 33

10 Puntos de fusión, goteo, ebullición, opacidad y fusión por deslizamiento 36

14 Información de apoyo adicional 55

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 5

1.2 El impulso de la exactitud en la medición y la eficacia de los flujos de trabajo

1.3 Principios de medición

Las técnicas básicas de medición que se abordan en esta guía son:

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 7

1.4 Uso común de los métodos

8 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

2.2 Principio de medición

Las básculas y balanzas electrónicas aplican dos principios de medición.

2.3 Trucos y consejos para el pesaje

• Evite las corrientes de aire del aire acondicionado y la ventilación.

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

• Dosifique directamente en el contenedor de tara. Coloque el contenedor de tara de forma ergonómica

10 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 11

3.1 ¿Por qué hablamos de pipeteo?

3.2 Principios de medición

Pipetas de desplazamiento de aire

Pipetas de desplazamiento directo

Punta desechable Capilar

Figura 6. Pipetas de desplazamiento de aire y de desplazamiento directo.

12 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

Ritmo constante de pipeteo

Accionamiento suave del pulsador

Pipetas de gran volumen

Prelavado de las puntas al menos dos veces

Deje tiempo para que la temperatura se equilibre

Efecto del calor de las manos

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 13

¿Pipetas de desplazamiento de aire o de desplazamiento directo?

14 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

Determinación del valor del pH y de la conductividad

Medimos el pH por muchas razones distintas:

Para determinar el valor de pH se precisa un medidor y un sensor adecuado. En principio, el medidor es un

4.2 El principio de medición y la importancia de la conductividad

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 15

Figura 7. Estructura esquemática de una célula conductímetra.

4.3 Trucos y consejos para el pH y la conductividad

4.3.1 pHmetros y conductímetros

Esférica Cilíndrica Aﬁlada Plana Micro

Figura 8. Distintas formas de las membranas de pH.

16 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

Determinación del valor del pH y de la conductividad

4.3.3 Sensores de conductividad

Resistencia a sustancias químicas

METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición 17

alta precisión InLab® 742

Tabla 1. Gama de sensores de conductividad de METTLER TOLEDO.

4.3.4 Gestión de sensores

Para más información y ayuda con la elección de electrodos, vaya a www.electrodes.net.

18 METTLER TOLEDO Técnicas básicas de medición

Determinación del contenido de humedad

La humedad afecta a la capacidad de procesamiento, al período de conservación, al uso y a la calidad

5.2 Principio de medición