CASO 1

De acuerdo con el cromatograma proporcionado, indique:

A. Tiempos de retención de los dos picos

Pico tr
A 8 minutos
S 1 minuto

B. Tiempo muerto del análisis cromatográfico

tm
S 1 minuto

C. Ancho de los dos picos en la base

Pico w
A 9-7= 2min
S 1,5-0,5= 1min
 D. Ancho de los dos picos en la semi altura

Pico w 1/ 2
A 1min
S 0,5min

E. ¿Corresponde determinar el factor de capacidad del compuesto S? ¿Cuál es el

valor?

No es necesario, dado que el valor será de 0, esto debido a que el compuesto S

corresponde al tiempo muerto (especie no retenida).

' t r−t m 1 min−1 min 0 min

k= = = =0 min
tm 1 min 1 min

CASO 2

A. Considerando el cromatograma proporcionado, determínense los valores de Vr, k´ y

w para los compuestos 1 y 2. Calcúlese R y α. Finalmente, estímese la eficacia para el
componente 1 y 2; suponiendo una velocidad de flujo constante de 0,85 mL/tiempo-1

Volumen de retención (Vr)

Vr=F∗Tr

−1
Vr 1=0.85 mL/tiemp o ∗17.8 min=15.13 mL

Vr 2=0.85 mL/tiemp o−1∗25.8 min=21.93 mL

Factor de capacidad (K’)

t r−t m
K ´=
tm

17.8−1.8
K ´ 1= =8.89
1.8

25.8−1.8
K ´ 2= =13.33
1.8

Ancho de banda (W)

W 1=19.8−15.8=4

W 2=28.1−23.3=4.8

Resolución (R)

t r 2−−t r 1
R=
1/2(W 2+W 1)

25.8−17.8
R= =1.82
1/2(4.8∓ 4)

Tiempo de retención ajustado

t ´ r =t r−t m

t ´ r 1=17.8−1.8=16

t ´ r 2=25.8−1.8=24

Retención relativa (α)

t´r2
α=
t´r1

24
α= =1.5
16

Eficacia(N)

( )
2
tr
N=16
W
 ( )
2
17.8
N 1=16 =316.84
4

N 2=16 ( )
25.8 2
4.8
=462.25

B. Calcúlese para esta misma figura, el factor de separación para la banda 3

comparando con la banda 2, y la resolución entre los dos picos más retenidos del
cromatograma. Considerar longitud de columna: 15 cm.

Factor de separación

t´r3
α=
t´r2

28
α= =1.17
24

Ancho de banda

W 3=32.3−26.8=5.5

Resolución

t r 3−−t r 2
R=
1/2(W 3+W 2)

29.8−25.8
R= =0.78
1/ 2(5.5 ∓ 4.8)

Eficacia

( )
2
tr
N=16
W

( )
2
29.8
N 3=16 =469.71
5.5
Altura del plato

L
H=
N

15 cm
H= =0.0319
469.71
 CASO 3

De acuerdo con el siguiente cromatograma:

A. Hallar los factores de capacidad de los compuestos eluidos cronológicamente.

Datos:

Atracina Simacina Carbarilo Isoproturón Linurón Permetrina

tm tr1 tr2 tr3 tr4 tr5 tr6

0.5 min 1.3 min 1.8 min 3.2 min 5.8 min 9 min 12.5 min

Factor de capacidad (K’)

t r−t m
K ´=
tm

1.3−0.5
K ´ 1= =1.6
0.5

1.8−0.5
K ´ 2= =2.6
0.5

3.2−0.5
K ´ 3= =5.4
0.5
 5.8−0.5
K ´ 4= =10.6
0.5

9−0.5
K ´ 5= =17
0.5

12.5−0.5
K ´ P6= =24
0.5
B. Considerando el análisis por LC reversa, hallar la retención relativa de los dos
compuestos más polares; y luego de los dos compuestos más retenidos.

Compuestos más polares: Atracina y Simacina

 Tiempo de retención ajustado

t ´ r =t r−t m

t ´ r 1=1.3−0.5=0.8

t ´ r 2=1.8−0.5=1.3

Retención relativa
t´r2
α=
t´r1

1.3
α= =1.625
0.8

Compuestos más retenidos: Linurón y Permetrina

 Tiempo de retención ajustado

t ´ r =t r−t m

t ´ r 5=9−0.5=8.5

t ´ r 6=12.5−0.5=12
Retención relativa

t´r6
α=
t´r5

12
α= =1. 412
8 .5
CASO 4
Un cromatograma para la separación de hidrocarburos permite evidenciar bandas
simétricas, en donde destaca el m-xileno con un tr de 6,5 min, y un W½ de 1,13 min.
¿Cuántos platos teóricos existen? Hallar en milímetros la altura de un plato teórico si la
longitud de la columna es de 100 cm.

DATOS:

tr= 6.5 min

W1/2= 1.13 min

L=100 cm

Numero de platos teóricos

( )
2
tr
N=5.55
W 1/ 2

( )
2
6.5
N=5.55 =183.638
1.13
Altura del plato

L
H=
N

1000 mm
H= =5.446 mm
183.638

CASO 5
De acuerdo con el cromatograma obtenido en el análisis de un grupo de compuestos se
requiere determinar:
A. Resolución entre los compuestos 4 y 5

B. Calcular la eficacia de la columna de acuerdo con estos dos compuestos, así como
para el primer compuesto.

C. ¿Qué diferencia encuentra de acuerdo con los resultados obtenidos?

D. ¿Cuál es el factor de retención para el compuesto 1?

Debido a que el primer compuesto es el que eluye o extrae, este es considerado como tiempo
muerto y no es necesario sacar factor de retención debido a que podemos ver que efectuando la
operación será igual a 0.

CASO 6

Inyección Flujo (mL/min) Tr(min) Area del pico W (min)

1 0.25 11.72 8932 1.36
2 0.50 9.55 6793 1.21
3 0.75 6.38 6656 0.98
4 1 2.69 5242 0.56
5 1.45 0.70 5847 0.17

Durante los ensayos cromatográficos para optimización de condiciones analíticas, se obtuvieron

los respectivos cromatogramas con los datos de la tabla previa para la determinación de acetato
de etilo habiendo utilizado diferentes flujos de fase móvil, y una columna cromatográfica de
25,5 cm.

Conforme a estos antecedentes:

A. Determine el flujo óptimo para el análisis del compuesto.

Numero de platos teóricos
 ( )
2
tr
N=16
W

( )
2
11.72
N 1=16 =1188.22
1.36

( )
2
9.55
N 2=16 =996.68
1.21

N 3=16 ( ) 6.38 2
0.98
=678.12

N 4=16 (
0.56 )
2
2.69
=369.19

( )
2
0.70
N 5=16 =271.28
0.17

Altura del plato

L
H=
N

25.5 cm
H 1= =0.02146
1188.22

25.5 cm
H 2= =0.02559
996.68

25.5 cm
H 3= =0. 037604
678.12

25.5 cm
H 4= =0.0 6907
369.19

25.5 cm
H 5= =0.09399
271.28

Para que exista un mayor flujo, el tiempo de retención tiene que ser bajo en este caso sería el
flujo 0.25 ml /min de la inyección 1.
 B. ¿Cuáles son los valores de los parámetros cromatográficos requeridos y
obtenidos?
Los valores reportados mediante a los cálculos realizados demuestran que a medida
que el número de platos aumenta y por consiguiente su altura sea inferior la eficacia
será mayor.

CASO 7
¿De acuerdo con los siguientes datos determine qué columna es más eficiente? ¿Por qué?
Explique cuál es el parámetro cromatográfico utilizado para su decisión

Columna Compuesto Tr(min) W (min)

1 A 10.55 1.21
B 11.02 1.79
2 A 9.38 0.76
B 8.49 0.56

EFICACIA COLUMNA 1

( )
2
tr
N=16
W

N 1 A=16 (
10.55 2
1. 21 )
=1216.338

N 1 B=16 ( 11.02 2
1.79 )
=606.425

 PROMEDIO COLUMNA 1

~
x=
∑X
N
 ~ 1216.338+606.425
x= =911.381
2

EFICACIA COLUMNA 2

N 2 A=16 ( )
9.38 2
0.76
=2437.241

( )
2
8.49
N 2 A=16 =3677.556
0. 56

 PROMEDIO COLUMNA 2

~
x=
∑X
N
~ 2437.241+3677.556
x= =3057.399
2

La columna 2 es la más eficiente debido a su tiempo de retención el cual es menor en

los dos compuestos junto a su ancho de banda también lo cual indica que en la
columna 2 están los compuestos que se han retenido por un tiempo menor a diferencia
de los compuestos de la columna 1 y basándonos en el número de platos la columna
dos resulto ser más eficiente que la 1.

CASO 8
De acuerdo con los picos obtenidos en la superposición de cromatogramas de la figura adjunta:

A. Calcule el factor de asimetría para cada uno de los picos.

B. Indique el tipo de asimetría que se evidencia en cada una de las tres bandas.

Inyección 1 – Fronting o distorción frontal

Inyección 2 – Fronting o distorción frontal
Inyección 3 – Pico Gaussiano