CULTIVO IN VITRO DE CELULAS Y TEJIDOS EN VEGETALES Y SEMILLAS

STEVIA RABAUDIANA, MENTHA SPICATA, PHASEOLUS VULGARIS, VICIA

FABA,PISUM SATIVUM, ZEA MAYS

INTRODUCCIÓN vidrio en un ambiente compuesto.

Esta forma de estudiar las plantas
El cultivo in vitro consiste en tomar
tiene dos características
una porción de una planta (ej. el
fundamentales: la asepsia (abandono
ápice, una hoja o segmento de ella,
de gérmenes, etc), y la inspección de
segmento de tallo, meristemo,
los factores que afectan el desarrollo.
embrión, nudo, semilla, antera, etc.) y
El progreso alcanzado por las
colocarla en un medio nutritivo estéril
ciencias biológicas ha autorizado en
(usualmente gelificado, semisólido)
los últimos años el artículo detallado
donde se regenerará una o muchas
de las plantas total a nivel citológico
plantas.
como molecular, y en situación de
El cultivo in vitro de vegetales se laboratorio es posible en este
fundamenta en el retraimiento de momento representar todos los
órganos, tejidos o células vegetales y factores que puedan incurrir en el
en el arreglo del contexto necesarias desarrollo y progreso de las plantas.
para la producción de respuestas Este principio general se aplica
fisiológicas o morfogénicas a partir de asimismo al cultivo in vitro de plantas.
estos explantes (Höxtermann, 1997).
La totipotencia es la capacidad de
El cultivo de células y tejidos in vitro
una célula de generar un individuo
(CCTV) involucra diferentes técnicas
completamente idéntico a la célula
a partir de desigual material vegetal
madre, la cual tiene la misma
tales como cloroplastos, células,
información genética y la misma
tejidos, órganos e incluso plantas
función, es decir, indica que
completas.
cualquier célula vegetal contiene una
El énfasis cultivo in vitro de plantas, copia íntegra del material genético de
significa estudiar plantas la planta a la que pertenece sin
intrínsecamente de un frasco de importar su función o posición en ella,
y por lo tanto tiene el potencial para denominadas clones. El explante más
regenerar una nueva planta completa. usado para los procesos de difusión
El CCTV es una forma de in vitro son las yemas vegetativas de
reproducción asexual, la cual se las plantas. Los frascos que
puede realizar gracias al mecanismo contienen las plantas se ubican en
de división mitótico de las células estanterías con luminaria artificial
vegetales. La división celular mitótica intrínsecamente de la cámara de
implica una replicación de los desarrollo, en que se fija la
cromosomas de las células hijas, por temperatura en valores que oscilan
lo que poseen un genotipo idéntico al entre los 21 y 23°C, conjuntamente
de la célula madre.[ CITATION Cul \l de inspeccionar la cuantía de horas
3082 ] de luz. Por su parte, el medio de labor
se compone de una mezcla de sales
El cultivo se incuba bajo condiciones
minerales, vitaminas reguladores de
de luz, temperatura y humedad
crecimiento, azúcar, agua y agar. La
controladas, que junto con las
composición del medio depende de la
fisicoquímicas y nutricionales
especie vegetal y de la etapa del
conducen el desarrollo del explante
proceso de micropropagación.
hacia la formación de una masa
celular amorfa denominada callo, o DESARROLLO
hacia la diferenciación en un tejido MEDIOS DE CULTIVO
organizado que producirá órganos o
El medio de cultivo puede ser solido o
embriones.[ CITATION Cul \l 3082 ]
liquido (agente gelificante) como el
La micropropagación o difusión agar que es un polisacárido de algas
clonal, es una de las aplicaciones rojas y se vuelve gelatinosa al
crecidamente generalizadas del disolverlo en agua y calentado
cultivo in vitro, a través de la este medio de cultivo tiene que estar
micropropagación, a partir de un trozo esterilizado
(explante) de un vegetal madre, se
CONDICIONES DE TRABAJO
obtiene una clase uniforme, con
plantas genéticamente idénticas,
Hay que trabajar en condiciones
estériles en cabinas de flujo laminar
MATERIALES DE PARTIDA
Se puede utilizar semillas o plantas,
órganos.
 Explantos, tejidos células y
protoplasmas
OBJETIVOS
 Evaluar diferentes medios de
cultivo in vitro en el desarrollo
de embrión
 Establecer el medio de cultivo
las semillas Limpiar las manos con
alcohol puro para evitar o disminuir el
exceso de contaminación, limpiar la
superficie de trabajo encender el
mechero de gas flamear el
instrumental a utilizar pinzas y bisturí,
esterilizar los embriones con agua
esperar 5 min y seguir esterilizando
con el alcohol hasta concluir con
todos los embriones , luego depositar
los embriones en el medio de cultivo.
RESULTADOS
En un frasco se pudo observar que se

adecuado para el desarrollo in contamino con hongos

vitro de embriones Se ha informado que existen más de

MATERIALES 8,000 especies de hongos que

 Medio de cultivo
 Material vegetal (hierba buena,
estevia, semillas)
 Alcohol para las manos
 Pinzas y bisturí
 Mechero de gas y alcohol
PROCEDIMIENTO
El estudio se realizó en el laboratorio
de PROFAC de la universidad mayor
de san simon donde se Remojaro las
semillas un dia antes , con un bisturí
sacar el embrión de las semillas de
poroto haba arveja y maíz esterilizar
producen enfermedades en las
plantas[ CITATION Agr05 \l 3082 ], los
cuales se relacionan con los tejidos
externos e internos de las misma .La
infección por Fusarium sp. Se va
expandiendo lentamente y las partes
lesionadas se hunden y arrugan,
tomando formas de anillos
concéntricos, a medida que el tejido
se va secando.[ CITATION Alt10 \l
3082 ] De las lesiones emerge el
micelio del hong. Por otro lado,
Penicillium, considerado un hongo de
postcosecha, produce micotoxinas
que dañan los frutos, flores y semillas mayoría de los tratamientos
de las plantas Los contaminantes utilizados.
pueden introducirse con el explante,
durante la manipulación en el
laboratorio o por bacterias
endofíticas[ CITATION Cas11 \l
3082 ]. Estos patógenos endófitos y
epifíticos pueden interferir con el
desarrollo del cultivo de tejidos y
competir por los nutrientes, por lo que
las contaminaciones microbianas en
la base del explante o alrededor de
el, constituyen una gran problemática
en el cultivo in vitro,. Por otro lado, se
ha informado que estos dos géneros a) explante de segmento nodal,
b)Inducción de callo, c)multibrotación.
fúngicos se detectan frecuentemente
en el cultivo de tejidos vegetales. CONCLUSIONES
[ CITATION Cha111 \l 3082 ]
Se encontró que las células
DISCUSIÓN desdiferenciadas presentan una
gráfica típica sigmoide con las fases
La alineación de callo, se indujo a
de acomodo, exponencial y
partir de explantes detallo con un solo
expiración de la celular, resultandoun
nudo, el estudio de conjunto
tiempo de duplicación celular (tdc) de
procedimiento se llevó a extremo por
6.64 días y una velocidad específica
triplicado. En las observaciones
de crecimiento.
realizadas en las primeras triunvirato
semanas (21 días) de período, los Los cultivos in vitro de Phaseolus
explantes presentaron formación de Vulgaris dividir de explantes de brote
células desdiferenciadas (callo), así con las mismas contexto de
como brotes múltiples, la en la incubación.
Continuar con la división del material
in vitro para la purificación y
aislamiento de la curcina.

BIBLIOGRAFÍA
x

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