UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

DIRECCION DE INVESTIGACIÓN Y DESARROLLO

PRESENTACIÓN DE PROYECTOS I+D

investigacion@uta.edu.ec
 

I. TÍTULO DEL PROYECTO

Marcadores genéticos asociados a la predisposición del alcoholismo en la Provincia

de Tungurahua

II. INFORMACIÓN GENERAL

Coordinador Principal del Proyecto

Nombres y Apellidos Marisel De Lucca Osorio
Correo electró nico institucional – UTA ma.delucca@uta.edu.ec
Título que posee PhD. Ciencias Bioló gicas
Teléfono 0996513422
Unidad de Investigació n. Carrera de Laboratorio
Facultad y/o Departamento de trabajo
Clínico. Facultad de Ciencias de la Salud

Coordinador Subrogante del Proyecto

Nombres y Apellidos Carmen Barba
Correo electró nico institucional – UTA cv.barba@uta.edu.ec
Título que posee Magister en Ciencias Bioló gicas
Teléfono 0992621341
Carrera de Medicina. Facultad de Ciencias de la
Facultad y/o Departamento de trabajo
Salud

III. OTRAS INSTITUCIONES PARTICIPANTES (COLABORADORES INTERNOS

Y/O EXTERNOS)

Contacto Institución Correo electrónico

institucional
1 MSc. Fernanda Flores Carrera de Sicología. UTA uf.flores@uta.edu.ec

3 MSc. Rocío Ponce Carrera de Sicología. UTA adr.ponce@uta.edu.ec

Dra. Gladys Morales Carrera de Medicina. UTA. piaglamorales@hotmail.com
4 Hospital Provincial
Docente Ambato
5 Md. Sergio Pilaloa Ministerio Salud Pú blica sergiopilaloa1@hotmail.com
PhD. Eduardo Tejera Universidad de Las eduardo.tejera@udla.edu.ec
6
Américas.

IV. ÁREA TEMÁTICA DE INVESTIGACIÓN (PLAN UTA 2013 – 2017)

Á REA DE CIENCIAS DE LA SALUD

CONOCIMIENTO
LÍNEA DE EPIDEMIOLOGÍA Y SALUD PÚ BLICA
INVESTIGACIÓ N
V. TIEMPO DE DURACIÓN DEL PROYECTO

30 Meses

VI. TIPO DE INVESTIGACIÓN

Bá sica
Aplicada X
Experimental

VII. MONTO SOLICITADO DIDE – UTA

40.000,00 Dó lares

VIII. DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO

Segú n datos de la OMS (Informe Mundial de Situació n sobre Alcohol y Salud 2014): Cada
añ o se producen 3,3 millones de muertes en el mundo debido al consumo de alcohol (5,9%
del total de defunciones). El uso nocivo de alcohol está relacionado con má s de 200
enfermedades y trastornos, representando el 5,1% de la carga mundial de morbilidad y
lesiones. Asimismo, provoca defunciones y discapacidades a una edad temprana,
explicando un 25% de las defunciones en personas entre 20‐39 añ os.

Existe una relació n causal entre el consumo nocivo de alcohol y una serie de trastornos
mentales y comportamentales, ademá s de las enfermedades no transmisibles,
traumatismos, enfermedades infecciosas (tuberculosis, VIH/sida). Má s allá de las
consecuencias sanitarias, el consumo nocivo de alcohol provoca pérdidas sociales y
econó micas importantes, tanto para las personas como para la sociedad en su conjunto
(1).

Segú n datos publicados por la Secretaría Técnica de Prevenció n de Drogas del Ecuador
(CONSEP) (15), en todos los estudios realizados se detectó que la droga que se consume
principalmente es el alcohol y en segundo lugar el cigarrillo, en el IV Estudio nacional
sobre uso de drogas en població n de 12 a 65 añ os (2014), se encontró una prevalencia de
consumo para la provincia de Tungurahua del 36,50% de la població n comparado al
promedio nacional de 26,67%, otro dato preocupante son los obtenidos de la Encuesta
nacional sobre uso de drogas en estudiantes universitarios realizada en 2015, se detectó
que un 61,91% de estudiantes son consumidores frente a un promedio nacional de
54,42% ocupando el tercer lugar a nivel nacional. Asimismo, en la IV Encuesta nacional
sobre uso de drogas en estudiantes de 12 a 17 añ os (2012), detectó que el 18,12% de esta
població n ha consumido alcohol. Segú n estadísticas del Hospital Provincial Regional
Docente Ambato (comunicació n personal) para el añ o 2015 se presentaron un total de 500
pacientes con alcoholismo entre las edades de 15 a 79 añ os y en el añ o en curso hasta el
mes de mayo hubo 130 casos. Tomando en cuenta todos estos datos podemos claramente
establecer que el alcoholismo representa un grave problema de salud pú blica en la
provincia de Tungurahua, así como en el Ecuador.

El alcoholismo es una enfermedad de herencia multifactorial y amplia heterogenicidad,

donde hay mú ltiples genes involucrados y donde el ambiente juega un rol importante en el
desarrollo del desorden.

Se sabe que existe una relació n entre el factor genético y la dependencia al alcohol, por lo
cual, es necesario identificar las variables genéticas que puedan estar involucradas para de
esta así poder realizar el aná lisis de riesgo genético, lo que es una herramienta ú til para el
manejo del paciente y de esta manera proponer tratamientos personalizados.

Con este proyecto se pretende determinar los polimorfismos presentes en tres genes:
ADH1B, ALDH2 y DRD2/ANKK1, relacionados con el aumento o disminució n de la
susceptibilidad a padecer de alcoholismo (8, 9, 10, 11, 12, 13, 14), con la finalidad de
establecer la predisposició n genética que tiene la població n de la provincia de Tungurahua
y así poder colaborar en la prevenció n de esta grave dolencia. Los resultados de este
proyecto podrían considerarse como un estudio piloto el cual podría extenderse al resto
del Ecuador, tomando en cuenta la variabilidad genética de las diferentes poblaciones de
este país.

IX. JUSTIFICACIÓN

El consumo de alcohol es habitual en nuestras sociedades y un grave problema en todo el

mundo, pero ¿por qué hay algunas personas que desarrollan alcoholismo y otras no?
¿Habrá en la població n a estudiar algú n factor genético comú n que predisponga al
alcoholismo?

El consumo excesivo de alcohol es un problema de salud pú blica de alcance mundial ya

que pone en peligro tanto el desarrollo individual como social de una persona. Como se
describe en el apartado anterior el Ecuador no escapa de esta problemá tica.

Entre los factores que influyen en el consumo de alcohol se encuentran los factores
ambientales, los sicoló gicos y genéticos. La identificació n de genes involucrados en los
procesos de adicció n al alcohol es indispensable para el establecimiento del riesgo
genético en nuestra població n. Los estudios genéticos poblacionales nos permiten mejorar
la predicció n de los trastornos mediante la identificació n y la comprensió n de có mo los
genes y las enfermedades pueden estar asociadas. Estas investigaciones pueden analizar
como los genes hacen que una persona tenga má s o menos predisposició n de desarrollar
un trastorno. Es importante la aplicació n de reactivos psicoló gicos específicos para
determinar indicadores, en dos instancias una previa y otra posterior al estudio, y de esa
manera se convertiría en una herramienta para dilucidar dicho problema, proponer
tratamientos personalizados basados en la composició n genética del paciente y rasgos de
personalidad propios del alcohó lico estableciendo una relació n con los factores
medioambientales involucrados.

Con el desarrollo del presente proyecto los principales beneficiados es la sociedad en

general, si se logran detectar marcadores genéticos asociados al riesgo de padecer de
alcoholismo y se establece su frecuencia en la població n estudiada, se podrían realizar
campañ as de psicoeducació n y conductas asertivas para concientizar a la població n del
riesgo inherente a este há bito, donde podremos diferenciar entre quienes lo consumen y
no se hacen adictos y aquellos que no logran dejar el há bito. Esto permitiría establecer
índices de resiliencia en el contexto social.

X. FUNDAMENTACIÓN CIENTÍFICO TÉCNICA

La adicció n al alcohol es un desorden siquiá trico heterogéneo en cuanto a la etiología y el

fenotipo, mú ltiples estudios realizados con gemelos han permitido sugerir que del 48% al
66% de la variabilidad en la dependencia al alcohol es debida a componentes heredados
(2, 3, 4, 5, 6). En el metabolismo del alcohol las principales enzimas que intervienen son la
Alcohol Deshidrogenasa 1B (ADH1B) y la Aldehído deshidrogenasa H2 (ALDH2), las cuales
oxidan el etanol a acetaldehído y luego a acetato, respectivamente. Asimismo,
polimorfismos en el sistema dopaminérgico, específicamente la familia de receptores D2,
se saben que juegan un rol en la habilidad de experimentar placer y recompensa, la
respuesta de recompensa se produce entre otras, por la repetida exposició n a drogas como
la cocaína, anfetaminas, heroína, alcohol y nicotina, siendo este uno de los mecanismos
involucrados en la adicció n a las mismas (7). Polimorfismos en estas 3 enzimas pueden
afectar la tasa de metabolizació n del etanol, modulando el consumo de bebidas
alcohó licas.

XI. OBJETIVOS DEL PROYECTO

Objetivo General Resultado del Objetivo General

Determinar las variantes presentes en los
genes DRD2/ANKK1, ADH1B y ALDH2 en la
població n ecuatoriana de la provincia de
Tungurahua con alcoholismo y su posible
relació n con el aumento o disminució n del
riesgo de padecer esta patología.
En este proyecto se pretende detectar
polimorfismos presentes en tres genes:
ADH1B, ALDH2 y DRD2/ANKK1,
relacionados con el aumento o disminució n
de la susceptibilidad al alcoholismo con la
finalidad de establecer la predisposició n
genética que tiene la població n de la
provincia de Tungurahua a padecer este
trastorno y así poder colaborar en la
prevenció n de esta grave dolencia.

Objetivos Específicos Resultado de cada Objetivo Valor (%)

Específico
1 Identificar en la població n Població n tanto casos como 10%
general de Tungurahua quienes controles que cumple con criterios
tienen diagnó stico de de inclusió n del proyecto.
alcoholismo.
2 Evaluar el polimorfismo Porcentajes de alelos del 20%
rs1800497 presente entre los polimorfismo rs1800497 presente
genes DRD2/ANKK1 asociado entre los genes DRD2/ANKK1
al aumento del riesgo de asociado al aumento del riesgo de
padecer alcoholismo, tanto en padecer alcoholismo, tanto en
població n alcohó lica como en població n alcohó lica como en
controles. controles.
3 Evaluar el polimorfismo Porcentajes de alelos del 20%
rs1229984 presente en el gen polimorfismo rs1229984 presente
ADH1B asociado a la en el gen ADH1B asociado a la
disminució n del riesgo de disminució n del riesgo de padecer
padecer alcoholismo, tanto en alcoholismo, tanto en població n
població n alcohó lica como en alcohó lica como en controles.
controles.
4 Evaluar el polimorfismo rs671 Porcentajes de alelos del 20%
presente en el gen ALDH2 polimorfismo rs671 presente en el
asociado a la disminució n del gen ALDH2 asociado a la
riesgo de padecer alcoholismo, disminució n del riesgo de padecer
tanto en població n alcohó lica alcoholismo, tanto en població n
como en controles. alcohó lica como en controles.
5 Establecer la relació n entre los Esto permitirá elaborar una base de 15%
polimorfismos estudiados y la datos y crear un manual de
predisposició n a padecer de protocolos. Artículo científico, el
alcoholismo en la població n cual englobará los resultados del
 analizada. proyecto, para revisió n por una
revista indexada y su posterior
posible publicació n en la misma.
6 Obtener los datos estadísticos Alimentació n de la base de datos 15%
de la població n de estudio que para contextualizar el problema del
sea proclive a padecer esta alcoholismo y la composició n
patología basado en la genética en la Provincia de
determinació n genética y Tungurahua. La misma que
psicoló gica de los individuos permitirá el conocimiento
epidemioló gico e incidencia del
mismo y plantear proyectos de
prevenció n a nivel de los
ministerios correspondientes.

XII. ACTIVIDADES DEL PROYECTO - METODOLOGÍA

Objetivo específico 1 (Indicar actividades y subactividades. Solo dos niveles)

Nivel Actividad Resultado de la Descripció n de la

Actividad/Subactividad metodología de la
actividad/subactividad
1.1 Seleccionar la Obtener la població n que Creació n de una base de
població n del tenga padres originarios datos en EXCEL de la
estudio mediante de Tungurahua y que no població n que se ha elegido
criterios de inclusió n presenten ninguna por instituciones
y exclusió n patología psiquiá trica participantes
1.1.1 Creació n de Base de Base de datos con los Transcripció n de datos a una
datos para resultados de los test hoja de EXCEL
establecer los iniciales
criterios de inclusió n
y exclusió n
1.2 Aplicació n de Obtenció n de la muestra Entrevistar a la població n
entrevista acorde con los objetivos seleccionada de manera
estructurada para el de la investigació n. individual y estructurada.
proyecto
1.3 Aplicació n del Test Obtenció n de Leer los parámetros del
Escala de intensidad componentes de reactivo EIDA y registrar los
de la dependencia dependencia alcohó lica resultados en la hoja
alcohó lica EIDA respectiva
Analizar las respuestas
obtenidas
1.4 Aplicació n del Test Determinar rasgos de Establecer las indicaciones
de Millon de estilos personalidad antisocial y previas a los participantes y
de Personalidad criterios diagnó sticos leer las preguntas para
clínicos obtenció n de respuestas
espontá neas.
Impresió n de los resultados –
perfiles.
Inclusió n de resultados en la
hoja de Excel.
1.5 Aplicació n del Determinar nivel de Proporcionar indicaciones de
Cuestionario de depresió n en adultos sinceridad sobre las
Depresió n de Beck respuestas y escala de Likert
para depresió n Analizar los puntajes de las
 respuestas.
1.6 Aplicació n del Determinar síntomas Proporcionar indicaciones de
Inventario de somá ticos de ansiedad la espontaneidad de
Ansiedad de Beck respuestas.
Analizar los puntajes de la
escala.
1.7 Aplicació n de Escala Medir la impulsividad y Preguntar individualmente
de Impulsividad de riesgo de violencia los ítems de la prueba y
Plutchik registrar las respuestas.
Incluir los resultados en la
Hoja de Excel.

Objetivo específico 2 (Indicar actividades y subactividades. Solo dos niveles)

Nivel Actividad Resultado de la Descripció n de la

Actividad/Subactividad metodología de la
actividad/subactividad
2.1 Extracció n y Obtenció n de ADN Extracció n de ADN genó mico
purificació n de ADN mediante técnicas de
genó mico purificació n utilizando
columnas de sílica
2.1.1 Cuantificació n de Cantidad en nanogramos Técnica de
ADN genó mico de ADN extraído Espectrofotometría
utilizando longitudes de 260,
230 y 280nm
2.2 PCR del fragmento Amplificació n del Técnica de amplificació n en
de interés fragmento de interés cadena de la polimerasa o
conteniendo el conteniendo el PCR
polimorfismo polimorfismo rs1800497
rs1800497 presente presente entre los genes
entre los genes DRD2/ANKK1
DRD2/ANKK1
2.2.1 Electroforesis de Verificar presencia de Electroforesis en geles de
agarosa fragmento fragmento de interés agarosa al 1,5%
conteniendo el amplificado.
polimorfismo
rs1800497
2.3 Aná lisis de Digestió n del fragmento Digestió n con endonucleasa
restricció n con amplificado con TaqI
endonucleasa Taq I endonucleasa Taq I para
detectar polimorfismo
rs1800497 presente
entre los genes
DRD2/ANKK1
2.3.1 Electroforesis de Separació n Electroforesis en geles de
agarosa de los electroforética de agarosa al 2%.
fragmentos fragmento de interés
obtenidos tras la obtenidos tras la
digestió n con TaqI digestió n
2.3.2 Visualizació n de Determinar el tamañ o de Fotodocumentació n de
fragmentos los fragmentos obtenidos resultados en equipo
obtenidos y aná lisis en la digestió n y Chemidoc
del aná lisis de obtenció n del genotipo
 restricció n con TaqI
Objetivo específico 3 (Indicar actividades y subactividades. Solo dos niveles)

Nivel Actividad Resultado de la Descripció n de la

Actividad/Subactividad metodología de la
actividad/subactividad
3.1 PCR del fragmento Amplificació n del Técnica de amplificació n en
de interés fragmento de interés cadena de la polimerasa o
conteniendo el
conteniendo el PCR.
polimorfismo polimorfismo rs1229984
rs1229984 presente presente en el gen
en el gen ADH1B ADH1B
3.1.1 Electroforesis deVerificar presencia de Electroforesis en geles de
agarosa fragmento fragmento de interés agarosa al 1,5%.
conteniendo el
amplificado
polimorfismo
rs1229984
3.2 Aná lisis de Digestió n del fragmento Digestió n con endonucleasa
restricció n con amplificado con MslI
endonucleasa MslI endonucleasa MslI para
detectar polimorfismo
rs1229984 presente en el
gen ADH1B
3.2.1 Electroforesis de Separació n Electroforesis en geles de
agarosa de los electroforética de agarosa al 2%.
fragmentos fragmento de interés
obtenidos tras la obtenidos tras la
digestió n con MslI digestió n
3.2.2 Visualizació n de Determinar el tamañ o de Fotodocumentació n de
fragmentos los fragmentos obtenidos resultados en equipo
obtenidos y aná lisis en la digestió n y Chemidoc
del aná lisis de obtenció n del genotipo
restricció n con MslI
Objetivo específico 4 (Indicar actividades y subactividades (de ser necesario). Solo
dos niveles)

Nivel Actividad Resultado de la Descripció n de la

Actividad/Subactividad metodología de la
actividad/subactividad
4.1 PCR del fragmento Amplificació n del Técnica de amplificació n en
de interés fragmento de interés cadena de la polimerasa o
conteniendo el conteniendo el PCR.
polimorfismo rs671 polimorfismo rs671
presente en el gen presente en el gen
ALDH2 ALDH2
4.1.1 Electroforesis de Verificar presencia de Electroforesis en geles de
agarosa fragmento fragmento de interés agarosa al 1,5%.
conteniendo el amplificado
polimorfismo rs671
4.2 Aná lisis de Digestió n del fragmento Digestió n con endonucleasa
restricció n con amplificado con TscAI
endonucleasa TscAI endonucleasa TscAI para
detectar polimorfismo
 rs671 presente en el gen
ALDH2
4.2.1 Electroforesis de Separació n Electroforesis en geles de
agarosa de los electroforética de agarosa al 2%.
fragmentos fragmento de interés
obtenidos tras la obtenidos tras la
digestió n con TscAI digestió n
4.2.2 Visualizació n de Determinar el tamañ o de Fotodocumentació n de
fragmentos los fragmentos obtenidos resultados en equipo
obtenidos y aná lisis en la digestió n y Chemidoc
del aná lisis de obtenció n del genotipo
restricció n con TscAI

Objetivo específico 5 (Indicar actividades y subactividades. Solo dos niveles)

Nivel Actividad Resultado de la Descripció n de la

Actividad/Subactividad metodología de la
actividad/subactividad
5.1 Establecer la Asociació n de los Creació n de una base de
relació n entre los resultados obtenidos en datos en EXCEL para asociar
polimorfismos el estudio genético con el genotipo con el fenotipo
estudiados y la los datos del fenotipo de
predisposició n a cada uno de los casos
padecer de
alcoholismo en la
població n analizada.
5.1.1 Creació n de Base de Base de datos con los Transcripció n de datos a una
datos para resultados hoja de EXCEL
establecer la relació n experimentales y
genotipo-fenotipo fenotipos de los casos

XIII. DISEÑO EXPERIMENTAL Y ANÁLISIS DE RESULTADOS

El presente es un estudio casos-controles de dos añ os de duració n, descriptivo de

asociació n entre marcadores genéticos y variables clínicas del alcoholismo.

VARIABLES CLÍNICAS:
 Trastornos antisociales.
 Tolerantes a niveles altos de alcohol.
VARIABLES GENÉTICAS:
 Estudio del polimorfismo rs1800497 presente en el gen del Receptor
dopaminérgico D2.
 Estudio del polimorfismo rs1229984 presente en el gen de la Alcohol
Deshidrogenasa 1B (ADH1B).
 Estudio de polimorfismo rs671 presente en el gen de la Aldehído Deshidrogenasa
H2 (ALDH2).
 Estudio de otros polimorfismos de interés asociados a la predisposició n a sufrir de
alcoholismo.

Para el diagnó stico psiquiá trico se utilizará n los criterios establecidos CIE10 de
dependencia al alcohol. Asimismo, se aplicará n a todos los participantes los siguientes
test: 1) Test de Escala de intensidad de la dependencia alcohó lica (EIDA): mide 6
componentes relacionados con el Síndrome de dependencia del alcohol, es auto-aplicada;
2) Test de Millon de Estilos de Personalidad: cuestionario de 175 ítems con respuestas
verdadero/falso, su objetivo es determinar los rasgos de personalidad de los individuos;
3) Cuestionario de depresió n de Beck para depresió n: instrumento auto-aplicado de 21
ítems que mide la severidad de la depresió n en adultos y adolescentes mayores de 13
añ os; 4) Inventario de Ansiedad de Beck: consiste de 21 items, valora los síntomas
somá ticos de ansiedad, tanto en desó rdenes de ansiedad como en cuadros depresivos; y 5)
Escala de impulsividad de Plutchik: instrumento auto aplicado de 15 ítems para la
medició n de la impulsividad y el riesgo de violencia. Estos test será n aplicados durante
entrevistas realizadas por el médico siquiatra y/o sicó logos participantes en el proyecto,
obtenidas de forma sistematizada segú n lo descrito en el apartado de procedimientos. Los
controles será n sujetos sin problemas con el alcohol o que nunca hayan bebido, a quienes
se les aplicará n los mismos cuestionarios aplicados a los casos.

El nú mero de muestras analizadas garantizará que los resultados sean estadísticamente

significativos. Utilizaremos un intervalo de confianza del 95% y la significació n de p
<0,05%.

El estudio caso-control incluirá todos los individuos que cumplan con los criterios CIE10
de síndrome de dependencia al alcohol y los criterios de inclusió n, provenientes de la
provincia de Tungurahua.
SELECCIÓ N DE CONTROLES: será n sujetos sin problemas con el alcohol o que nunca hayan
bebido, la selecció n será apareada con los casos, en cuanto a edades y género. Los
controles será n tomados en los mismos centros donde se seleccionen los casos de estudio.
CRITERIOS DE INCLUSIÓ N: pacientes entre 18 y 79 añ os de edad de ambos sexos, con
criterios establecidos CIE10 de síndrome de dependencia al alcohol, cuyos padres sean
originarios de la provincia de Tungurahua. Se reclutaran de forma correlativa los
pacientes que acudan a la consulta de siquiatría del Hospital Provincial Regional Docente
Ambato. En el resto de los centros se concertará n citas para tomar los datos y las
muestras.
CRITERIOS DE EXCLUSION: Diagnó stico psiquiá trico o sicoló gico en tratamiento
farmacoló gico que le impida resolver los test adecuadamente. Diagnó stico psiquiá trico
mú ltiple, incapacidad para la realizació n de las pruebas psicométricas, enfermedad
orgá nica grave que no pertenezca a la patología alcohó lica, enfermedad genética conocida,
enfermedad cró nica con tratamiento y no relacionada con el alcohol.
CONSIDERACIONES ETICAS: Los casos y controles será n informados de la naturaleza del
estudio siendo invitados a participar voluntariamente. La solicitud de participació n se
hará por escrito y en el mismo documento los investigadores se comprometerá n a
preservar en todo momento la identidad de los participantes, así como a utilizar las
muestras sanguíneas y toda la informació n que se recoja con los fines ú nicamente
propuestos. Para su inclusió n se les solicitará la firma en el correspondiente documento de
consentimiento informado.

Para recopilar los datos se utilizará una hoja de EXCEL. Todos los aná lisis estadísticos se
realizará n utilizando el software SPSS 22.0 de estadística.
Utilizaremos:
-Tablas de contingencia: chi2 o test exacto de Fisher.
-Modelos de regresió n logística.
-ANOVA y ANCOVA (aná lisis de varianza y de co-varianza, este ú ltimo permite ajustar
variables confundidoras).

Limitaciones: Es un estudio descriptivo de asociació n entre rasgos clínicos y posibles

marcadores genéticos, por lo cual, trataremos de que la muestra sea lo má s homogénea
posible, controlando las variables clínicas mediante el empleo de diferentes test
(especificados anteriormente). Debido a la alta heterogeneidad del alcoholismo, se
considerará en un estudio posterior, los diferentes pesos de causalidad de los diferentes
alelos y su asociació n.

XIV. BENEFICIARIOS DEL PROYECTO

Los principales beneficiados con el desarrollo del presente proyecto es la sociedad en

general, si se logran detectar marcadores genéticos asociados al riesgo de padecer de
alcoholismo y se establece su frecuencia en la població n estudiada, se podrían realizar
campañ as preventivas para concientizar a la població n del riesgo inherente a este há bito,
donde podremos diferenciar entre quienes lo consumen y no se hacen adictos y aquellos
que no logran dejar el há bito.

Los estudios genéticos poblacionales tienen como finalidad mejorar la predicció n de los
trastornos mediante la identificació n y la comprensió n de có mo los genes y las
enfermedades pueden estar asociadas. Estas investigaciones pueden analizar como los
genes hacen que una persona tenga má s o menos predisposició n de desarrollar un
trastorno. Esto puede conducir al desarrollo de tratamientos, “personalizados”, basados en
la composició n genética de paciente.

Otros beneficiarios:
El sistema de salud de la provincia al contar con datos epidemioló gicos sobre la frecuencia
de estos marcadores y su asociació n con el mayor riesgo de padecer alcoholismo.

La Universidad con el establecimiento de líneas de investigació n orientadas a resolver

problemas de la sociedad. Estas líneas permitirá n la capacitació n de docentes y
estudiantes, tanto en investigació n como en la elaboració n, desarrollo de proyectos de
investigació n y publicació n de resultados, aumentando el nivel educativo de la institució n,
permitiendo la publicació n de los resultados con el consiguiente reconocimiento a nivel
regional, nacional e internacional.

XV. FACILIDADES DE TRABAJO

Cantidad Equipo Disponibilidad

2 Termocicladores SI
1 Campana de PCR SI
1 Cá mara de electroforesis SI
pequeñ a
1 Cá mara de electroforesis SI
mediana
1 Cá mara de electroforesis grande SI en Facultad de Alimentos
2 Fuente de poder SI
1 Microcentrífuga SI
1 Equipo de fotodocumentació n SI
1 Vortex NO
1 Kit de Pipetas NO
1 Nanodrop (Espectrofotó metro) SI
1 Termomixer SI
20 Kits de PCR (100 reacciones) NO
2 Agarosa (500gr) NO
5 TAE 50% (1Lt) NO
2 Kits de extracció n de ADN (500 NO
 muestras)
9 Enzimas de restricció n NO
200 Servicio de secuenciació n NO
12 Servicio de síntesis de primers NO
1 Laboratorio de Biología SI
Molecular
2 Tallimetros NO
2 Balanzas NO

XVI. ASPECTOS BIOETICOS Y SOCIALES (De ser necesario)

Los casos y controles será n informados de la naturaleza del estudio siendo invitados a
participar voluntariamente. La solicitud de participació n se hará por escrito y en el mismo
documento los investigadores se comprometerá n a preservar en todo momento la
identidad de los participantes, así como a utilizar las muestras sanguíneas y toda la
informació n que se recoja con los fines ú nicamente propuestos. Para su inclusió n se les
solicitará la firma en el correspondiente documento de consentimiento informado
aprobado por un comité de bioética aprobado por el Ministerio de Salud Pú blica del
Ecuador.

Riesgos: la extracció n sanguínea podría causar de forma eventual (como cualquier otra
toma de muestra de sangre para un simple aná lisis hematoló gico), una pequeñ a molestia
en el lugar del pinchazo: ligerísimo sangrado o morado. Estos riesgos será n minimizados
al tomarse la muestra por personal calificado con experiencia, médico o laboratorista
clínico, utilizando material nuevo y estéril. La informació n contenida en la historia clínica
es confidencial y no podrá ser entregada a personas ajenas al proyecto.

Derechos y opciones de los participantes del estudio: el paciente puede decidir no

participar, só lo debe comunicar su decisió n al investigador principal o a la persona que le
explica el consentimiento. Asimismo, puede retirarse del estudio en cualquier momento
que lo desee, sin que ello afecte a los beneficios de los que goza.
El estudio es gratuito, los participantes no percibirá n ninguna compensació n econó mica o
de otro tipo por las muestras donadas y éstas no tendrá n valor comercial.

Seguridad y Confidencialidad de los datos: se mantendrá la privacidad aplicando las

medidas necesarias para que nadie conozca la identidad de los participantes, ni tenga
acceso a sus datos personales:
1) La informació n personal obtenida se identificará con un có digo que reemplazará el
nombre del participante y se guardará en un lugar seguro donde solo el investigador y los
co-investigadores del proyecto tendrá n acceso.
2) Las muestras tomadas será n utilizadas para esta investigació n y luego será n guardadas
en un lugar protegido para futuras investigaciones removiendo cualquier informació n que
pueda identificar al participante.
3) El nombre de los participantes no será mencionado en los reportes o publicaciones.
4) El Comité de Bioética de la USFQ podrá tener acceso a los datos en caso de que
surgieran problemas en cuanto a la seguridad y confidencialidad de la informació n o de la
ética en el estudio.

Beneficios para los participantes: Se realizará n y entregará n resultados de las pruebas:

AST, ALT y GGT que miden funcionalidad hepá tica, con lo cual se puede estimar si existe
dañ o hepá tico, así como, los resultados de los test sicoló gicos aplicados.

Su consentimiento a participar tendrá la finalidad de ayudar en el estudio de esta

patología, la satisfacció n de ayudar a otros contribuyendo al conocimiento médico, lo cual
puede permitir en un futuro desarrollar terapias personalizadas. En todo caso, los
beneficios que se generen de esta investigació n se revertirá n en la salud de la població n,
aunque no de forma individual.

XVII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1) http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs349/es/. Alcohol. Nota descriptiva

N°349. Enero de 2015.
2) http://www.inec.gob.ec/inec/index.php
3) Prescott, C. A. y Kendler, K.S. (1995). Genetic and Environmental Influences on Alcohol
and Tobacco Dependence among Women. NIAAA Res Monogr; 30: 59–87.
4) Kendler, K. S., Heath, A. C., Neale, M. C., Kessler, R. C. y Eaves, L. J. (1992). A population‐
based twin study of alcoholism in women. JAMA, 268, 1877–1882.
5) Heath, A. C. y Martin, N. G. (1994). Genetic influences on alcohol consumption patterns
and problem drinking: Results from the Australian NH&MRC twin panel follow‐up survey.
Ann N Y AcadSci, 708, 72–85.
6) Heath, A. C., Whitfield, J. B., Madden, P.A., Bucholz, K. K., Dinwiddie, S. H. Slutske W. S., et
al. (2001). Towards a molecular epidemiology of alcohol dependence: Analysing the
interplay of genetic and environmental risk factors. The Brithish Journal of Psychiatry BJ
Psych, 40, s33–s40.
7) Españ a‐Serrano, L., Guerra, M‐P. N., Montero‐Pedrazuela, A., Pérez‐Santamarina, E.,
Vidal R., García‐Consuegra, I., Valdizá n, E. M., Pazos, A., Palomo T., Jiménez‐Arriero, M.Á .,
Guadañ o‐Ferraz, A. y Hoenicka, J. (2016). The Addiction‐Related Protein ANKK1 is
Differentially Expressed During the Cell Cycle in Neural Precursors. Cerebral Cortex,
26(11), 4299-14. doi: 10.1093/cercor/bhw129
8) Ponce, G., Hoenicka, J., Jiménez‐Arriero, M. A., Rodríguez‐Jiménez, R., Aragü és, M.,
Martín‐Suñ é, N., Huertas, E. y Palomo T. (2008). DRD2 and ANKK1 genotype in alcohol‐
dependent patients with psychopathic traits: Association and interaction study. Br J
Psychiatry, Aug, 193(2):121‐5. doi: 10.1192/bjp.bp.107.041582.
9) Yu, C. y McClellan, J. (2016). Genetics of Substance Use Disorders. Child Adolesc
Psychiatr Clin N Am. Jul, 25(3):377‐85. doi: 10.1016/j.chc.2016.02.002. Epub 2016 Apr 9.
10) Wall, T. L., Luczak, S. E. y Hiller‐Sturmhö fel, S. (2016). Biology, Genetics, and
Environment: Underlying Factors Influencing Alcohol Metabolism. Alcohol Res. 38(1):59‐
68.
11) Yokoyama, A., Kamada, Y., Imazeki, H., Hayashi, E., Murata, S., Kinoshita, K., Yokoyama,
T. y Kitagawa, Y. (2016). Effects of ADH1B and ALDH2 Genetic Polymorphisms on Alcohol
Elimination Rates and Salivary Acetaldehyde Levels in Intoxicated Japanese Alcoholic Men.
Alcohol Clin Exp Res. Jun, 40(6):1241‐50. doi: 10.1111/acer.13073. Epub 2016 Apr 18.
12) Galinsky, K., J., Guarav, B., et al. (2016). Fast Principal‐Component Analysis Reveals
Convergent Evolution of ADH1B in Europe and East Asia. The American Journal of Human
Genetics, 98, (3), 456 – 472.
13) Vasconcelos, A., C., C., G., Neto, E., S., R., Pinto, G., R., Yoshioka, F., K., N., Motta, F., J., N.,
Vasconcelos, D., F., P., y Canalle, R. (2015), Association Study of the SLC6A3 VNTR (DAT)
and DRD2/ANKK1 Taq1A Polymorphisms with Alcohol Dependence in a Population from
Northeastern Brazil. Alcohol Clin Exp Res, 39, 205–211.
14) Ma, Y., Yuan, W., Jiang, X., Wen‐Yan, C. y Ming, D., Li. (2015). Updated Findings of the
Association and Functional Studies of DRD2/ANKK1: Variants with Addictions. Mol
Neurobiol .51,281. doi:10.1007/s12035‐014‐8826‐2
15) http://www.prevenciondrogas.gob.ec/
XVIII. CRONOGRAMA

MESES
ACTIVIDADES
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Creació n de Base de datos con los
criterios de inclusió n y exclusió n X X X X

Aplicació n de Reactivos
psicoló gicos específicos y análisis X X X X X X X X
inicial de resultados.
Seleccionar la població n del
estudio mediante criterios de X X X X X X
inclusió n y exclusió n

Extracció n, purificació n y
cuantificació n de ADN genó mico X X X X X X X X X

PCR de los diferentes fragmentos

de interés X X X X X X X X

Electroforesis en agarosa
conteniendo los diferentes X X X X X X X X
polimorfismos

Aná lisis de restricció n para la

identificació n del genotipo X X X X X X X X

Electroforesis de agarosa de los

fragmentos obtenidos tras las
distintas digestiones con enzimas X X X X X X X X
de restricció n

Visualizació n y aná lisis de los

fragmentos obtenidos tras las X X X X X X X X
digestiones

Establecer la relació n entre los

polimorfismos estudiados y la
predisposició n a padecer de
alcoholismo en la població n
analizada.
Creació n de Base de datos para
establecer la relació n genotipo-
fenotipo

Aná lisis final de resultados de los

reactivos psicoló gicos

MESES
ACTIVIDADES
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
Extracció n, purificació n y X X X X X X
 cuantificació n de ADN genó mico

PCR de los diferentes fragmentos

de interés X X X X X X X X

Electroforesis en agarosa
conteniendo los diferentes X X X X X X X X
polimorfismos

Aná lisis de restricció n para la

identificació n del genotipo X X X X X X X X

Electroforesis de agarosa de los

fragmentos obtenidos tras las
distintas digestiones con enzimas X X X X X X X X
de restricció n

Visualizació n y aná lisis de los

fragmentos obtenidos tras las X X X X X X X X
digestiones

Establecer la relació n entre los

polimorfismos estudiados y la
predisposició n a padecer de X X X X X X
alcoholismo en la població n
analizada.
Creació n de Base de datos para
establecer la relació n genotipo- X X X X X X X X
fenotipo

Aná lisis final de resultados de los

X X X X X X X X
reactivos psicoló gicos

XIX. PRESUPUESTO

Rubros Año 1
Año 2 Año 1 Año 2
Año 1 Año2 (Institución
(Institución (Contraparte (Contraparte
(DIDE) (DIDE) Coejecutora
Coejecutora) UTA) UTA)
)
Salarios 0 0 0 0 0 0
Difusión
0 0 0 0 0 0
Científica
Movilización y
Viáticos en el 0 0 0 0 0 0
País
Viáticos en el
0 0 0 0 0 0
Exterior
Pasajes
Aéreos en el 0 0 0 0 0 0
País
Pasajes
Aéreos 0 0 0 0 0 0
Exterior
Capacitación 0 0 0 0 0 0
en el País
Capacitación
0 0 0 0 0 0
en el Exterior
Servicios 0 0 0 0 0 0
Libros 0 0 0 0 0 0
Software 0 0 0 0 0 0
Equipos 0 0 0 0 0 0
Reactivos 0 0 0 0 0 0

PARA USO DIDE - RESUMEN DEL PRESUPUESTO

INSTITUCIÓN AÑO 1 AÑO2 TOTAL
DIDE
INSTITUCION
COEJECUTORA
CONTRAPARTE UTA

MATRIZ DE MARCO LÓGICO

Objetivos Sub Resultado Resultado de Resultado de los

Actividades
específicos actividad Sub Actividad Actividades Objetivos Específicos
Sub. A. 1 Res. Sub. A. 1
Resultado
Actividad 1 Sub. A. 2 Res. Sub. A. 2
Actividad 1
Objetivo Sub. A. 3 Res. Sub. A. 3 Resultado Objetivo
Específico 1 Resultado Específico 1
Actividad 2
Actividad 2
Resultado
Actividad 3
Actividad 3
Sub. A. 1 Res. Sub. A. 1
Resultado
Actividad 1 Sub. A. 2 Res. Sub. A. 2
Actividad 1
Objetivo Sub. A. 3 Res. Sub. A. 3 Resultado Objetivo
Específico 2 Resultado Específico 2
Actividad 2
Actividad 2
Resultado
Actividad 3
Actividad 3
Resultado
Actividad 1
Actividad 1
Objetivo Resultado Resultado Objetivo
Actividad 2
Específico 3 Actividad 2 Específico 2
Resultado
Actividad 3
Actividad 3
La matriz se generará automá ticamente, después del ingreso de los objetivos específicos
con sus actividades y sub actividades (opcionales).

XX. REVISIÓN COORDINADOR UODIDE

Lugar, Fecha
---------------------------------------------
NOMBRE Y FIRMA COORDINADOR UODIDE

XXI. DECLARACION FINAL

Declaració n Final.- El grupo de investigadores, representado por el Coordinador del

Proyecto y Coordinador Subrogante de Investigació n, de forma libre y voluntaria declaran
lo siguiente:

 Que el proyecto descrito en este documento es una obra original, cuyos autores
forman parte del grupo de investigadores y por lo tanto asumimos la completa
responsabilidad legal en el caso de que un tercero alegue la titularidad de los
derechos intelectuales del proyecto, exonerado a la Direcció n de Investigació n y
Desarrollo, DIDE, de cualquier acció n legal que se derive por esta causa.

 Que el presente proyecto no causa perjuicio alguno al ambiente y no transgrede

norma ética alguna, y que en el caso de que la investigació n requiera de permisos
previo a su ejecució n, el Coordinador del Proyecto remitirá una copia certificada
del mismo a la DIDE.

 De otorgarse financiamiento por la DIDE para la ejecució n del proyecto, aceptamos

que los bienes adquiridos con estos fondos permanecerá n bajo la responsabilidad
del grupo de investigació n y de la Facultad postulante durante la ejecució n del
proyecto, pero la DIDE se reserva el derecho de determinar el destino final de los
mismos, una vez finalizado el proyecto.

 Aceptamos que si el proyecto se accede a financiamiento de la DIDE y como parte

de los resultados del mismo se genera algú n producto o procedimiento susceptible
de obtener derechos de propiedad intelectual, de los cuales se deriven beneficios,
éstos será n compartidos por la DIDE, la Facultad postulante, la(s) instituciones que
compartieron la investigació n y el grupo de investigadores, en los términos
definidos en el respectivo convenio específico.

Lugar, Fecha

-------------------------------------- -----------------------------------------
NOMBRE Y FIRMA NOMBRE Y FIRMA
COORDINADOR PRINCIPAL COORDINADOR SUBROGANTE
Número de CI o pasaporte Número de CI o pasaporte