Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales

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Análisis fitoquímico de la planta medicinal Romero (Rosmarinus oficinales)

Rojas Capacho-Maria Paulaa , Rodríguez Triana-Gabrielab y Daza Gutierrez-Helen Lorenac
a
mairojas@udca.edu.co, Química Farmacéutica, Grupo A
b
grodriguezt@udca.edu.co, Química Farmacéutica, Grupo A
c
heldaza@udca.edu.co, Química Farmacéutica, Grupo A

Palabras Clave RESUMEN

Metabolitos secundarios Esta serie de prácticas se realizan con el fin de aplicar las técnicas de extracción y reconocimiento de los diferentes
Extracción Soxhlet metabolitos secundarios a partir de una planta determinada, en este caso el romero. Para empezar, se realiza una
Cromatografía extracción solido liquido por método de soxhlet, para obtener el aceite esencial de dicha planta, seguido de esto realiza
Fitoquímica cromatografía en placa delgada para determinar de esta manera algunos de los metabolitos secundarios presentes en el
Romero extracto, la placa se puso bajo luz UV, para de este modo evidenciar más fácilmente la elución, luego de esto se
determina el Rf de cada componente sembrado en la placa. Finalmente, con el extracto restante se procede a realizar
pruebas de reconocimiento con los diferentes patrones de cada metabolito, obteniendo así que el romero tiene entre sus
componentes antraquinonas y flavonoides.
Keywords ABSTRACT
Secondary metabolites These practices are carried out in order to apply the techniques of extraction and recognition of the different secondary
Soxhlet extraction metabolites from a particular plant, in this case rosemary. To begin with, a liquid solid extraction is carried out by
Chromatography method of soxhlet, to obtain the essential oil of said plant, followed by thin plate chromatography to determine in this
Phytochemistry way some of the secondary metabolites present in the extract, the plate was placed under UV light, so as to more easily
Romero evidence the elution, then the Rf of each component seeded in the plate is determined. Finally, with the remaining
extract, recognition tests are carried out with the different patterns of each metabolite, thus obtaining that rosemary has
among its components anthraquinones and flavonoids.

a las plantas de enfermedades y que atraen a los polinizadores,

1. Introducción
La fitoquímica es considerada como la disciplina científica que
tiene como fin la obtención de los compuestos elaborados por las
plantas a través de la extracción, aislamiento, purificación y
elucidación de la estructura química (Leonora Sánchez, 2019).
Del mismo modo se encarga de la caracterización de la actividad
biológica de diversas sustancias producidas por los vegetales que
benefician o perjudican la salud humana, a las plantas, animales
y microorganismos. Esta especialidad de la química se usa
principalmente para hacer referencia a los compuestos bioactivos
de las plantas; actualmente con frecuencia al estudiarlas
químicamente se encuentran nuevas estructuras que son útiles en
la producción de nuevos medicamentos.
entre otras funciones (Leonora Sánchez, 2019). Estos
metabolitos se caracterizan por tener olor, sabor, color y
actividad biológica y son especialmente abundantes en
organismos que carecen de un sistema inmunológico. De esta
forma, las plantas son una fuente importante de compuestos
como alcaloides, ceras, antocianinas, flavonoides, quinonas,
lignanos, acetofenonas, terpenos, esteroides y otros (Leonora
Sánchez, 2019).
También es importante conocer las rutas biosintéticas del
metabolismo primario, que llevan a la formación de metabolitos
secundarios y las rutas biosintéticas de los metabolitos
secundarios que conducen a una amplia variedad de compuestos,
característicos de diversas familias. ANEXO 1

Las plantas cuentan con diferentes compuestos denominados Ahora bien, la panta medicinal a la que se le realizo el debido
metabolitos primarios y secundarios. Los metabolitos primarios reconocimiento taxonómico y morfológico fue al romero su
son imprescindibles para las funciones vitales de la planta como nombre científico es Rosmarinus oficinales L (Emmanuel
crecer, desarrollarse y reproducirse entre ellos se encuentran las Flores-Villa, 2020).
proteínas, carbohidratos, lípidos, ácidos nucleicos y las
vitaminas (Leonora Sánchez, 2019). Por otro lado, los Reino Plantae
Phylum Magnoliophyta
metabolitos secundarios son los compuestos de las plantas que la
Clase Magnoliopsida
gente usa con fines diferentes a la alimentación, se creía que Orden Lamiales
estos metabolitos eran productos de desecho porque no Familia Lamiaceae
participan de manera directa en los procesos indispensables para Genero Rosmarinus
la supervivencia del ser vivo. Actualmente se sabe que protegen Epíteto especifico oficinales
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El diclorometano funcionó como fase móvil ya que presenta una

Tabla 1. Taxonomía del Romero
polaridad intermedia debido a los efectos inductivos de ambas
moléculas de cloro que provocan una disminución de la densidad
electrónica en el átomo de carbono, lo que conlleva a que casi
cualquier tipo de muestra que tenga una polaridad intermedia pueda
eludir en la placa.

Altura (cm) Rf
Placa
Comp Comp
1 1.41 0,35
2 1.10 0,28
Ilustración 1. Morfología del Romero 3 1.21 0,30
Para el reconocimiento de los diferentes metabolitos secundarios se 4 0.31 0,08
llevaron a cabo diferentes técnicas como la Cromatografía de capa 5 1.12 0,28
delgada y los cuales tenían potencial a ser principios activos en la
6 1.19 0,30
planta medicinal un análisis fitoquímico preliminar.
7 0.98 0,25
2. Resultados y discusión
Tabla 3. Datos de Cromatografia de capa delgada de extracto de
2.1. Métodos de extracción: romero.
Mediante la tabla 3 podemos observar que el factor de retención (RF)
La extracción del romero se inició cortando unas ramas de la planta depende de la polaridad del compuesto, donde los solutos más polares
inicial y dejando varios días secando en un papel periódico; debido a quedarán más retenidos puesto que se adsorben más firmemente a los
que en el laboratorio se fragmentó en trozos pequeños y se realizó una centros activos de la fase estacionaria, mientras que los no polares se
extracción por Soxhlet. Estos fueron los resultados: eluirán con mayor facilidad, y del mismo modo depende de la
naturaleza del disolvente donde entre más polar sea la fase móvil, más
Peso de la muestra recién fragmentada 4,7385 g fácilmente arrastra los componentes.
Peso del extracto de romero 0,4793 g
Las pruebas de reconocimiento se realizaron con diferentes reactivos
Porcentaje de extracto de romero 10,11% para determinar metabolitos secundarios en la planta, como lo
podemos observar en el ANEXO 2. Luego de realizar el respectivo
Tabla 2. Resultados de la extracción de Romero. análisis mediante luz UV se pudo observar cuales eran los metabolitos
que están presentes en el extracto.
La composición química del romero puede variar dependiendo
diferentes factores como el lugar donde fue recolectada y el grado de
desarrollo de la planta. Según estudios realizados las hojas de romero
contienen un 1,0-2,5% aceite esencial que está constituido por
monoterpenos como 1,8-cineol, alfa-pineno, alcanfor, alfa-terpineol,
canfeno, borneol, acetato de bornilo, limoneno, linalol, mirceno,
verbenona.También contiene principios amargos, constituidos por
diterpenos (picrosalvina, carnosol, isorosmanol, rosmadial,
rosmaridifenol, rosmariquinona) y triterpenos (ácidos oleanólico y
ursólico, y sus 3-acetil-ésteres).Asimismo, en su composición se
encuentran flavonoides (cirsimarina, diosmina, hesperidina,
homoplantiginina, fegopolina, nepetina y nepitrina) y polifenoles Ilustración 2. Cromatografía de capa delgada expuesta a luz
(ácido rosmarínico, ácido clorogénico, ácido cafeico y ácidos ultravioleta a 254 nm.
fenólicos derivados del ácido cinámico) (Emmanuel Flores-Villa,
2020). Metabolito
No. Placa Reactivo utilizado Detección
secundario
2.2 Perfil cromatográfico y análisis fitoquímico preliminar en
capa delgada CCD 7 NH4OH Si
Flavonoides
1 AlCl3 Si
Para la realización de las pruebas de coloración en cromatografía en
2 FeCl3 No
capa delgada (CCD) fue necesario realizar la preparación de una fase Fenoles
móvil (diclorometano) y una fase estacionaria (gel silica). Se sembró 3 Vainillina HCl No
la muestra en cada placa y se dejó eluir hasta que el solvente haya 4 Quinonas Bornträger No
llegado un poco antes de terminar la placa, se dejó secar y se procedió
5 Vainillina H2SO4 No
a observar en luz UV y medir Rf en cada placa. Esteroles
6 ZnCl2 No

2
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Tabla 4. Resultados de metabolitos secundarios presentes en el
extracto.
La muestra sembrada (extracto de romero) contiene flavonoides
observado por la luz UV (Ilustración 2), no se pueden reconocer
exactamente cuales, sin embargo, se puede tratar de la diosmina,
hispidulina, apigenina, luteolina , entre otros. (Estructuras ANEXO
3). Cada uno de estos flavonoides de la planta medicinal contiene una
actividad biológica como antiinflamatoria, antioxidante,
antimicrobiana y antiproliferativa (Colombia, 2016).
Por otro lado, cabe aclarar que en la tabla 4 podemos evidenciar que
no se reconocieron fenoles en la técnica utilizada, ya conociendo
teóricamente que la muestra contenía de estos metabolitos
secundarios. Esto puede verse causado por el disolvente utilizado, ya
que los disolventes utilizados en estas extracciones son un factor
importante porque pueden afectar la eficiencia de la extracción de los
componentes bioactivos y sus posteriores beneficios en la salud (Ngo,
Scarlett,Bowyer, Ngo & Voung, 2017) o por errores sistemáticos
llevados a cabo en el laboratorio.
bismuto y potasio reactivo Dragendorff el cual genera una
precipitación color naranja o marrón ( Bruneton 2001) dicho lo
anterior en el ANEXO 4 se puede evidenciar que no existe ningún
tipo de precipitación de color naranja o marrón en la muestra
problema, a comparación del patrón, dándonos como negativo para la
prueba de alcaloides. Por otro lado, el yoduro potásico reacciona con
el cloruro mercúrico generando un precipitado rojo, que en presencia
de iones yoduro forma anión incoloro que reacciona con los
alcaloides produciendo un precipitado de color pardo para el caso del
reactivo de Mayer, del mismo modo que con el reactivó anterior
(ANEXO 5) no se presentó ningún precipitado logrando establecer
que tampoco se encuentran alcaloides en el extracto de romero.
En conclusión, a lo dicho anteriormente ningunas de las dos
reacciones (Reacción 1 y Reacción 2 ) se llevó a cabo en el proceso
de identificación de metabolitos secundarios en el romero.

1.3 Análisis Fitoquímico Preliminar.

En el reconocimiento químico de metabolitos secundarios se realizan

pruebas con diferentes patrones para asi determinar con mayor
precisión cada uno de los componentes del Romero. Para lo anterior
se debe conocer el peso del extracto:

Peso del extracto seco del romero 0,5181 g

Tabla 5. resultado de la extracción de Romero.

Reacción 1. Reacción general con Draggendorff para determinación
Metabolito de alcaloides.
Prueba Positivo (+) Negativo (-)
secundario
Dragendorff -
Alcaloides
Mayer -
Antraquinonas
Bornträger-
y +
Kraus
Naftoquinonas
Lieberman
Esteroides -
Burchard
Cloruro
Taninos -
férrico 10%
Flavonoides Shinoda -

Tabla 6. pruebas para determinar metabolitos secundarios en tubo

de ensayo
Alcaloides
Para el análisis de alcaloides se realizaron las pruebas Dragendorff y
Mayer en donde se obtuvieron resultados negativos para este
metabolito en la planta de romero, como se observa en el ANEXO 4
y 5.
La determinación de la presencia de alcaloides se basa en la capacidad
que tienen los alcaloides de precipitarse por diferencia de densidad al
combinarse con metales y metaloides debido a que forman sales
dobles insolubles, en presencia de reactivos como;
tetrayodomercuriato potásico o reactivo de Mayer y el yoduro de
Reacción 2 Reacción general con Mayer para determinación de
alcaloides.
Esteroides
En la prueba negativa de esteroides con el reactivo Lieberman
Burchard se evidencia que el color dado por el patrón y la muestra
problema no es el mismo, es decir que no hay presencia de Esteroides
en el extracto de romero. Ya que el patrón arroja una coloración
naranja y la muestra problema como rojo oscuro (ANEXO 6),
logrando evidenciar que no se realizó la reacción 3.
3
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Reacción 3 Reacción general con Liebermann Burchard para
determinación de Esteroides
Antraquinona y Naftoquinonas
Para esta prueba se realizó el patrón mediante el reactivo de
Bornträger-Kraus, el cual es de color rosa a rojo o amarillo intensos,
como se puede evidenciar en el (ANEXO 7) en este caso se trata de
una prueba positiva, ya que la muestra y el patrón son totalmente
iguales, lo que quiere decir que reaccionaron de la misma manera con
el reactivo.
Reacción 4. Reacción general para determinación de Antraquinonas
y Naftoquinonas
Taninos
Para el reconocimiento de taninos se realizo la prueba con el patrón
de ácido tánico 1%, al comparar con la muestra se evidencia una
prueba negativa, ya que esta toma una coloración amarilla y el patrón
es azul, como se puede evidenciar en el (ANEXO 8).
Reacción 5. Reacciones generales para determinación de Taninos
Flavonoides
Para esta determinación se utilizó como reactivo de control positivo
magnesio en polvo y HCl concentrado, este debía tomar una
coloración rojiza, violeta o naranja si se encontraban flavonoides,
como se puede evidenciar en el (ANEXO 9), en este caso la muestra
no presenta ninguna coloración, por lo que se puede decir que es una
prueba negativa, pero relacionando esto con la cromatografía
realizada anteriormente encontramos que se obtiene la elución de
dicho compuesto, debido a esto se establece que es un resultado
dudoso, pues un método fue negativo y el otro positivo.
Reacción 6. reacción general para determinación de Flavonoides
3. Conclusiones
▪ Se realizó la extracción por Soxhlet, teniendo como porcentaje final
del extracto de romero un 10%.
▪ La fase móvil que se empleo fue el diclorometano ya que era la más
apropiada para nuestro tipo de muestra. Las polaridades entre las 2
fases (estacionaria y móvil) y la muestra fueron adecuadas para
lograr que la muestra corriera unos milímetros hacia arriba,
haciendo posible las pruebas con los diferentes reactivos para la
identificación de metabolitos secundarios.
▪ Los metabolitos encontrados en el extracto por medio de la
cromatografía de capa delgada y empleando la luz UV de romero
fueron los flavonoides.
▪ En las pruebas de análisis fitoquímico preliminar, se obtuvieron
resultados negativos de Alcaloides y Esteroides, afirmando que no
existe ninguna concentración de estos metabolitos en el Romero.
▪ Según lo evidenciado en literatura el romero contiene flavonoides
como principal metabólico secundario, lo que indicaría que el
análisis de cromatografía es el más apropiado para la determinación
de duchos compuestos.
4. Anexos
Anexo 1. Biosíntesis de metabolitos secundarios
4
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Metabolito Prueba
procedimiento
secundario quimica
Colocar en una camara de
cromatografía 4 mL NH4OH.
Introducir la placa sin que toque el
NH3
reactivo tapar y dejar exponer a los
Flavonoides vapores por 5 min. Observar la
placa en la luz UV.
Asperjar la placa de cromatografía
AlCl3 1% en
con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
etanol
Observar en la luz UV
Asperjar la placa de cromatografía
Cloruro con el reactivo. Observar, si
ferrico 1% presenta manchas de color azul o
oscuras es positivo
Fenoles
Asperjar la placa de cromatografía Anexo 4. Prueba Dragendorff para reconocimiento de alcaloides.
Vainillina con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
HCl Observar la aparición de manchas
coloreadas.
Bornträger Asperjar la placa de cromatografía
Quinonas (KOH 10% con el reactivo. Observar con la
metanol) luz UV.
Asperjar la placa de cromatografía
con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
Alcaloides Dragendorff
Observar la aparición de manchas
coloreadas.
Asperjar la placa de cromatografía
Liebermann- con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
Burchard Observar la aparición de manchas
coloreadas y en la luz UV.
Asperjar la placa de cromatografía
Vainillina-
Esteroles con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
acido
Observar la aparición de manchas
sulfurico
coloreadas.
Asperjar la placa de cromatografía Anexo 5. Reactivo de Mayer para reconocimiento de alcaloides
Cloruro de
con el reactivo. Calentar a 110 ºC.
zinc
Observar en la luz UV.

Anexo 2. Tabla de pruebas de coloración.

Anexo 6. Reactivo de Lieberman Burchard para reconocimiento de

Esteroides

Anexo 3. Estructuras de tipos de flavonoides.

5
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• Leonora Sánchez, F. &. (2019). Fitoquímica. Obtenido de

https://www.zaragoza.unam.mx/wp-
content/2022/Publicaciones/libros/cbiologia/Fitoquimica.pdf
• LUENGO, T. L. (2008). El romero. Planta aromática con efectos
antioxidantes. Obtenido de https://www.elsevier.es/es-revista-offarm-
4-articulo-el-romero-planta-aromatica-con-13124840
• Romero, W. L. (2015). ANÁLISIS FITOQUÍMICO PRELIMINAR.
Obtenido de
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/50026/Tra
bajo%20de%20grado%20Clethra%20fimbriata%20final%20cr.pdf?se
quence=1
• Rueda, J. R. (2014-2015). Efectos de los compuestos activos y
funcionales del romero (Rosmarinus officinalis) en el control del peso
corporal y del metabolismo energético. Obtenido de
https://dspace.uib.es/xmlui/bitstream/handle/11201/1673/TFG_GBIQ
_JRSolizRueda.pdf?sequence=1
• Bruneton, J.,Villar, A., Carreto, E & Rebuelta, M. (2001).
Farmacognosia, fitoquímica plantas medicinales. 2ª Ed. Acribia.S.A.
Zaragoza, España.
Anexo 7. reactivo de Bornträger-Kraus para reconocimiento de
Antraquinonas y Naftoquinonas

Anexo 8. ácido tánico 1% para el reconocimiento de taninos

Anexo 9. Magnesio y HCl concentrado para el reconocimiento de

Flavonoides

5. Bibliografía

• Colombia, N. (2016). Romero Rosmarinus officinalis . Obtenido de

https://colombia.inaturalist.org/taxa/82921-Rosmarinus-officinalis
• Emmanuel Flores-Villa, A. S.-G.-F.-C. (17 de 01 de 2020). Romero
(Rosmarinus officinalis L.): su origen, importancia y generalidades de
sus metabolitos secundarios. Obtenido de
https://doi.org/10.22201/fesz.23958723e.2020.0.266