Centro de Bachillerato Tecnológico industrial y de servicios No.

203
“Gral. Ignacio Beteta Quintana”

04 - Cromatografía

Módulo III: Utiliza técnicas de separación y purificación con base a procesos

estandarizados.

Raúl Torres Cadena

Abril 2021
Cromatografía
Cromatografía de capa fina Cromatografía en columna
Técnica analítica que
sirve para separar una Fondo del
solvente
mezcla de sustancias
Solvente
Solvente orgánico
orgánico
químicas en sus
componentes Producto C

individuales, para su Reactivo A

Reactivo B
estudio de cada uno de
ellos.
Origen

𝐴+𝐵 →𝐶 Punto de
muestra de
Columna de vidrio empacada
con silica en un compuesto
la reacción
orgánico y la mezcla de
reacción.
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basic-principles-and-techniques/xfbb6cb8fc2bd00c8:in-in-methods-of-purification-of-organic-compounds/a/principles-of-chromatography
Principios de la cromatografía
Eluyente
Término Definición
Analito
Fase móvil. Es cuando el solvente se mueve a través de la
Columna
columna.
Fase estacionaria
Fase móvil Fase Sustancia que permanece fija dentro de la
Tapón de estacionaria. columna.
algodón
Eluyente. Fluido entrando a la columna.
Efluente. Fluido saliente de la columna.
Elución. Proceso de lavado de un compuesto a través
de la columna utilizando un disolvente.
Efluente
Analito. Mezcla que se quiere separar.

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Principio de la separación de componentes

Las afinidades a los compuestos (fuerza de adhesión) hacia la

fase estacionaria y móvil dan como resultado la separación de los
componentes.
La afinidad está dictada por la adsorción y solubilidad.

• Cuanto mayor sea la adsorción a la fase estacionaria, más

lentamente se moverá la molécula a través de la columna.
• Cuando mayor sea la solubilidad en la fase móvil, más rápido
se moverá la molécula a través de la columna.

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Principio de la separación de componentes
A+B

Analito + hexano A es de naturaleza polar

Columna
B es de naturaleza no polar
Fase estacionaria - silica
Fase móvil - Hexano
Tapón de
algodón

¿?

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Tipos de cromatografía
Técnicas Fase estacionaria Fase móvil Base de la separación

Cromatografía en papel Sólido (Celulosa) Líquido Polaridad de las moléculas

Cromatografía en capa fina Solido (Sílice o alúmina) Líquido Polaridad de las moléculas

Cromatografía en columna Solido (Sílice o alúmina) Líquido Polaridad de las moléculas

Sólido (perlas
Cromatografía de exclusión Líquido Tamaño de molécula
microporosas de sílice)
Cromatografía por Sólido (Resina catiónica o
Líquido Carga iónica de las moléculas
intercambio iónico aniónica)
Afinidad de unión de la molécula de analito
Cromatografía por afinidad Sólido Líquido
a la molécula inmovilizada.

Cromatografía de gases Soporte líquido o sólido Gas inerte Punto de ebullición de las moléculas.
Cromatografía en capa fina (CCF)
Se realiza en un material recubierto por una capa de sílice que actúa
como fase estacionaria y el solvente como fase móvil.
Vidrio de reloj

Vaso de precipitado Placa cromatográfica

Punto de mezcla
Línea de lápiz

Solvente
A. Introducing Chromatography: Thin Layer Chromatography - Chemistry LibreTexts. (n.d.). Retrieved April 19, 2021, from
https://chem.libretexts.org/Bookshelves/Analytical_Chemistry/Supplemental_Modules_(Analytical_Chemistry)/Instrumental_Analysis/Chromatography/V._Chromatography/A._Introducing_Chromatography%3A_Thin_Layer_C
hromatography
Cromatografía en capa fina (CCF)

Fondo del
• El componente que viaja solvente
menos es el componente
más polar, ya que se une al

5 cm
sílice con mayor fuerza.

3cm
• El que recorre la distancia

2 cm
1 cm
máxima es el menos polar. Origen
Punto de
muestra de la
reacción
Factor de retención (Rf)
Existe un parámetro
cuantitativo que se llama factor
Fondo del
de retención (Rf). solvente

𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

5 cm
𝑅𝑓 =
𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒

3cm
2 cm
1 cm
Origen
Punto de
muestra de la
reacción
Cromatografía de capa fina
Cromatografía en columna
Añadir el solvente
(Fase móvil)
Agregar el analito
a la columna Continua la adición Continua la adición de
de solvente solvente
Los componentes
del analito
empiezan a
separarse

Columna empacada
con silica gel.
(Fase estacionaria) Los diferentes compuestos
se colectan en recipientes
por separado.
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Cromatografía en columna
¿Si quisiéramos colectar el
compuesto de color azul?
Podemos cambiar de disolvente a uno más
polar y tendría los siguientes efectos:
• El solvente polar competirá por el espacio
en el gel de sílice con el compuesto azul.
• Habrá una mayor atracción entre las
moléculas de disolvente polar y las
moléculas de azul polar.

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Cromatografía en columna
Cromatografía de gases
Técnicas analíticas de separación para analizar sustancias en fase
gas. En esta técnica, los componentes de disuelven en un solvente y
se vaporizan.

Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Crouch, S. R. Principles of Instrumental Analysis. Sixth Edition, Thomson Brooks/Cole, USA, 2007.
Cromatografía de gases
La molécula con menor punto de ebullición sale primero de la
columna, mientras que la de mayor punto de ebullición sale al final.

Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Crouch, S. R. Principles of Instrumental Analysis. Sixth Edition, Thomson Brooks/Cole, USA, 2007.
Cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC)
Es una forma mejorada de la cromatografía en columna. En lugar que
el disolvente gotee utilizando la gravedad, es forzado a pasar bajo
presiones de hasta 400 atm, haciéndolo mucho más rápido.
Cromatografía en papel
En la cromatografía en papel, la fase estacionaria es papel absorbente
y la fase móvil es un disolvente líquido o mezcla de disolventes.

Papel
filtro

Punto de mezcla
Línea de lápiz

Solvente