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SESIÓN 15:

Muerte Celular Programada

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 La Muerte por apoptosis es un proceso limpio y ordenado, caracterizado por:

 1) el encogimiento general del volumen de la célula y su núcleo,
 2) pérdida de adhesión a las células contiguas.
 3) formación de vesículas en la superficie celular.
 4) Disección de la cromatina en pequeños fragmentos y…
 5) englobamiento rápido del “cadáver” por fagocitosis.

 ¿PORQUÉ EL CUERPO TIENE CELULAS INDESEABLES Y DÓNDE SE ENCUENTRAN LAS

CÉLULAS QUE ESTÁN MARCADAS PARA SU ELIMINACIÓN?
 La respuesta sintética es la sgte:
 En casi cualquier parte donde se busque, se ha estimado que en el cuerpo humano
cada día mueren 1010 a 10 11 células por apoptosis.
 Por ejm: La apoptosis participa en la eliminación de células que sufrieron daño
genómico irreparable.
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 Durante el desarrollo embrionario las neuronas crecen a partir del SNC para
inervar órganos que se encuentran en la periferia del cuerpo.
 Por lo general; crecen muchas más neuronas de las necesarias para la inervación
normal.
 Las neuronas que llegan a su destino reciben una señal del tejido blanco que les
permite sobrevivir.
 Las neuronas que no encuentran el camino hacia el tejido blanco no reciben la
señal de supervivencia y al final se eliminan por apoptosis.
 La apoptosis es importante para mantener la Homeostasis en los organismos
multicelulares y que la falta de la regulación de la apoptosis puede ocasionar
daños graves al organismo.
 LAS CASPASAS: Son un grupo distintivo de proteínas de cisteína (proteasas con
un residuo de cisteína en su sitio catalítico) que se activan en una etapa
temprana de la apoptosis y desencadenan la mayor parte o todos los cabios
observados durante la muerte celular.
 Las Caspasas realizan esta tarea mediante la división de un grupo selecto de proteínas
esenciales:
 Entre los blancos de las caspasas figuran los sgtes:
 A) Más de una docena de proteínas cinasas incluída la Cinasa de Adhesión Focal (FAK),
PKB, PKC y Raf1. Por Ejm: Se presupone que la inactivación de FAK interrumpe la
adhesión celular, con lo que se desprende la célula apoptótica de sus vecinas.
 B) Láminas: que constituyen el recubrimiento interno de la Envoltura nuclear. LA
separación de las láminas conduce al desamble de la lámina nuclear y encogimiento del
núcleo.
 C) Proteínas del Citoesqueleto; como las de los filamentos intermedios, la división y
desactivación consecuente de estas proteínas produce cambios en la forma celular.
 D) Una Endonucleasa llamada DNA-asa; activada por caspasa (CAD) que se activa
después que la caspasa divide una proteína inhibidora. Una vez activada, la CAD se
traslada del citoplasma al núcleo, donde ataca el DNA y lo parte en fragmentos.
 La Apoptosis; puede iniciarse por estímulos internos, como anormalidades en el
DNA, y externos: Como determinadas Citocinas (proteínas secretadas por células
del sistema inmunitario).
 Por ejm: Las células epiteliales de la próstata sufren de apoptosis cuando se
les priva de la hormona sexual masculina testosterona, ésta es la razón por la
que el cáncer prostático que se diseminó a otros tejidos a menudo se trata
con fármacos que interfieren con la producción de testosterona.
 Los estudios indican que los estímulos externos activan la apoptosis mediante una
Vía de señalización llamada VIA EXTRÍNSECA que se distingue de la utilizada por
los estímulos internos denominados VIA INTRÍNSECA.
 El estímulo para la apoptosis lo porta una proteína mensajera extracelular
llamada TNF (factor de necrosis tumoral), que recibe este nombre por su
capacidad para destruir células tumorales.
 El TNF; se produce en ciertas células del sistema de sistema inmunitario coo
respuesta a factores adversos, como:
 A) Exposición a radiación ionizante.
 B) Temperatura elevada.
 C) Infecciones víricas.
 D) Sustancias tóxicas como las empleadas en la quimioterapia contra el
cáncer.
 Al igual que otros tipos de Primeros Mensajeros, el TNF, induce su reacción
mediante la unión con un receptor transmembrana (TNFR1).
 La evidencia disponible sugiere que el receptor para TNF, se encuentra en
la membrana plasmática como un Trímero ya ensamblado.
 El dominio citoplásmico de cada subunidad del receptor para TNF contiene
un segmento de unos 70 aminoácidos llamado: #DOMINIO DE MUERTE# que
media las interacciones entre proteínas.
 La unión de TNF al receptor trimérico produce un cambio en la conformación
del dominio de muerte del receptor que conduce al reclutamiento de varias
proteínas.
 Las últimas proteínas en unirse al complejo que se ensambla en la superficie
interna de la membrana plasmática son 2 moléculas de PROCASPASA 8.
 Estas proteínas se llaman “Procaspasas” porque cada uno es precursora de
una caspasa; contienen una porción adicional que debe eliminarse mediante
procesamiento proteolítico para activar la enzima.
 La síntesis de las Caspasas como Proenzimas protege a la célula del daño
proteolítico accidental.
 Cuando dos o más Procascapasas se mantienen muy próximas con otras; son
capaces de dividir sus carreras polipectídicas entre sí y convertir a la
molécula en una caspasa activa.
 La enzima madura final (Caspasa 8) posee 4 cadenas polipectídicas derivadas
de 2 precursores Procaspasas.
 La Caspasa 8; se describe como una caspasa iniciadora porque comienza la
apoptosis mediante la división en dirección 3 o como caspasas ejecutoras;
porque realizan la autodestrucción controlada de la célula.
 LA VIA INTRINSECA DE LA APOPTOSIS
 Los estímulos internos, como:
 1) El daño genético irreparable.
 2) las concentraciones demasiado elevadas de Ca en el citosol.
 3) Infección viral.
 4) el estrés oxidativo grave (esto es, la producción de grandes cantidades de
radicales libres destructivos).
 5) la falta de señales de supervivencia (ausencia de Factores de crecimiento),
desencadena la apoptosis por vía intrínseca).
 La activación de la vía intrínseca está regulada por miembros de la familia Bcl-2
de proteínas, que se caracterizan por la presencia de 1 o más dominios BH.
 Los Miembros de la Familia Bcl2 pueden subdividirse en 3 grupos:
 1) Miembros que fomentan la Apoptosis (p.ej:Bax y Bak).
 2) Miembros Antiapoptóticos que protegen a las células de la apoptosis (p.ej: Bcl-
x1, Bcl-w y Bcl-2)
 3) Proteínas sólo BH3; llamadas así xq sólo comparten un pequeño dominio
BH3, con otros miembros de la familia Bcl-2, que fomentan la apoptosis por
un mecanismo indirecto.
 De acuerdo con la idea prevaleciente las Proteínas sólo BH3 (p.ej: Bid, Bad,
PUMA y Bim) pueden ejercer su efecto antiapóptico de dos formas distintas,
según las proteasas implicadas.
 En algunos casos parecen promover la apoptosis por Inhibición de los
miembros Bcl-2 antiapoptóticos.
 Mientras que en otros casos parecen promover la apoptosis mediante la
activación de los miembros apoptóticos de Bcl-2.
 En cualquier caso, las proteínas sólo BH3 son las determinantes probables de
que una célula siga una vía de superviviencia o muerte.
 En una célula saludable, las proteínas sólo BH3 están ausentes o muy
inhibidas, y las proteínas Proapoptóticas de Bcl-2 pueden restringuirse a los
miembros Proapoptóticos.
 Sólo en presencia de ciertos tipos de estrés es que se expresan o activan las
proteínas sólo BH3, lo que desplaza el equilibrio de la apoptosis.
 En estas circunstancias (estrés) se rebasan los efectos restrictivos de las
proteínas Bcl-2 antiapoptóticas y ciertos integrantes Proapoptóticas de la familia
Bcl-2 como Bax, quedan libre para trasladarse del citosol a la membrana
mitocondrial externa.
 Se cree que las moléculas Bax (y/o Bak) experimentan un cambio en la
conformación que las hace insertarse en la membrana mitocondrial externa y
ensamblarse en un conducto de unidades múltiples recubierto por proteína.
 Una vez formado, este conducto aumenta en forma drástica la permeabilidad de
la membrana mitocondrial externa y fomenta la liberación de ciertas proteínas
mitocondriales, en particular el CITOCROMO C (que reside en el espacio
intermembrana).
 La permeabilidad de la Memb. Mitocondrial puede acelerarse mediante un
aumento en el concentración de Ca citosólico después de la liberación del ión
desde el R.E.
 Casi todas las moléculas del citocromo c presentes en todas las mitocondrias de
una célula pueden liberarse de una célula apoptótica en un período de sólo 5
minutos.
 La liberación de proteínas mitocondriales Proapoptóticas como el citocromo c,
parece ser el ”PUNTO SIN RETORNO” ó sea un fenómeno que destina a la
célula de manera irreversible de la apoptosis.
 Una vez en el citosol, el citocromo c; forma parte de un Complejo
Multiproteico llamado APOPTOSOMA que también incluye varias moléculas de
PROCASPASA 9.
 Se piensa que las moléculas de Procaspasa 9 se activan con la simple unión del
Complejo Multiproteico y no requieren División Proteolítica.
 Al igual que la Caspasa 8, que se activa por la vía mediada por el receptor, la
CASPASA 9, es una caspasa iniciadora que activa las caspasas ejecutoras en
dirección 3, lo cual causa: APOPTOSIS.
 Al final: Las vías Externa (mediada por receptor) e Interna (mediada por
mitondrias) convergen mediante la activación de las mismas caspasas ejecutoras
que dividen los mismos blancos celulares.
 Cuando las células ejecutan el Programa de Apoptosis, pierden el contacto con
sus vecinas y empiezan a encogerse.
 Al final, la célula se desintegran en un cuerpo apoptótico condensado y rodeado
por una membrana.
 Este programa apoptótico completo puede ejecutarse en menos de 1 hora.
 Los cuerpos apoptóticos se reconocen por la presencia de FOSFATIDILSERINA
(es un fosfolípido que sólo puede encontrarse en la hoja interna de la
membrana plasmática).
 Durante la apoptosis, una “REVOLTASA” de fosfolípidos mueve a las
moléculas de fosfatidilserina a la hoja externa de la membrana plasmática,
donde los macrófagos especializados la reconocen como una señal de
fagocitar.
 Por lo tanto, la muerte celular por apoptosis ocurre sin verter el contenido
celular al ambiente extracelular.
 Esto es importante porque la liberación de detritos celulares causaría
inflamación, la cual puede provocar daño hístico de consideración.
 Tal y como existen señales que destinan la célula a la autodestrucción, también
hay señales opuestas que mantienen la supervivencia celular.
 De hecho, la interacción del TNF con un receptor para TNF transmite a menudo 2
señales distintas hacia el interior celular; una estimula la apoptosis y la otra
promueve la supervivencia celular.
 Como resultado, la mayoría de las células que tienen receptores para TNF no
sufre apoptosis cuando se tratan con TNF.
 Este fue una hallazgo decepcionante porque al principio se pensó que el TNF
podía usarse como agente para destruir células tumorales.
 La supervivencia celular casi siempre está mediada por la activación de un
factor de transcripción clave llamado NF-kB, que media la expresión de genes
que codifican las proteínas para la supervivencia celular.
 Parecería que el destino de una célula (ya sea la supervivencia o la muerte),
depende del equilibrio entre las señales que fomentan y las que impiden la
apoptosis.
LOS DOS CAMINOS DE LA MUERTE CELULAR
DIFERENCIAS MORFOLOGICAS ENTRE APOPTOSIS Y
NECROSIS