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TP 3 - Buffers Biologicos - 2019
TP 3 - Buffers Biologicos - 2019
TRABAJO PRÁCTICO 3
OM
BUFFERS BIOLÓGICOS
OBJETIVOS .C
DD
• A partir de la ecuación de Henderson-Hasselbach, calcular la concentración de
(H+), (Aceptor de H+) o (Dador de H+).
corporal.
• Analizar cómo funcionan los buffers biológicos más importantes del organismo.
AH + H2O A- + H3O+
OM
favoreciendo la formación del ácido, lo cual consumirá los protones añadidos. Si en cambio se
agrega una base, se producirá inicialmente una disminución de la [H+] y esto favorecerá la
disociación del ácido (el equilibrio se desplazará hacia la derecha) que repondrá los H+ gastados.
La eficacia del amortiguador o tampón depende de las [A-] y [AH], del pH del medio y es
máxima cuando este valor es próximo al pKa.
BUFFERS BIOLÓGICOS
.C
DD
El metabolismo celular genera permanentemente agua, calor y metabolitos ácidos. Estos
últimos comprenden:
1.- ácidos volátiles: el dióxido de carbono (CO2) es un importante producto final de la oxidación
LA
de glúcidos, lípidos y aminoácidos. Se lo considera "ácido" en virtud de que reacciona con el agua
para formar ácido carbónico (H2CO3), el cual, por ser un ácido débil, se disocia en bicarbonato
(HCO3-) y H+.
CO2 + H2O H2CO3
FI
2.- ácidos fijos: ácido sulfúrico (H2SO4) y ácido fosfórico (H3PO4) provenientes principalmente de
las proteínas de cuyo metabolismo procede alrededor del 65% del total; fundamentalmente de la
oxidación de los aminoácidos azufrados para dar H2SO4 y de las fosfoproteínas para dar H3PO4.
Este último también es producto del metabolismo de los ácidos nucleicos y de los fosfolípidos.
Estos ácidos deben ser neutralizados y posteriormente eliminados por los riñones. Por ejemplo,
las dietas de leche y carne generan unos 70 meq de H+ por día y los riñones tienen que excretar a
diario una cantidad semejante para mantener el pH sanguíneo.
OM
y renal como excretores de ácidos por el otro.
.C proteinatos
2. – intracelulares: hemoglobina (HbO2 / HbH)
DD
El sistema HCO3-/ H2CO3constituye el sistema regulador fisiológico más importante del
plasma. El ácido carbónico con dos protones ionizables de constantes pKa1=3,89 y pKa2=10,22,
tendría una capacidad amortiguadora pequeña en los seres humanos si no fuera porque se
deshidrata a CO2 que puede ser espirado. Esta reacción está catalizada por la enzima anhidrasa
LA
carbónica (AC).
AC
CO2 + H2O H2CO3 HCO3-+ H+
FI
OM
Formación de NaCO3H por los riñones, que amortigua la producción ácida diaria e impide la
acumulación del H+ en el organismo.
.C
La particularidad de este sistema buffer radica en que la concentración de cada uno de sus
componentes puede regularse: el CO2 es regulado por el sistema respiratorio y el bicarbonato, por
DD
los riñones. Esta característica hace que el sistema HCO3-/CO2 sea de gran importancia biológica.
más ácido que los líquidos extracelulares acercándose al pKa del sistema. En el sistema fosfato el
par conjugado efectivo para mantener el pH fisiológico es:
Las proteínas pueden funcionar como uno de los sistemas buffers más importantes de la
sangre y los tejidos y su capacidad amortiguadora procede de los grupos disociables que poseen
los aminoácidos que las forman. Sin embargo, el pKa de los grupos carboxilos de los aminoácidos
es de alrededor de 2 y el pKa de los grupos amino es de alrededor de 9,5, lo cual se aleja del pH
de la mayoría de los líquidos biológicos.
OM
.C
DD
LA
ALTERACIONES ACIDO-BASE
Muchas patologías están asociadas con alteraciones del equilibrio ácido-base. Teniendo
en cuenta al sistema bicarbonato/CO2 como principal sistema amortiguador del pH, el estudio del
FI
estado ácido-base se basa en el análisis de los componentes de este sistema. Según los valores
de pH del plasma y el componente del sistema buffer originalmente afectado, las alteraciones
ácido-base se clasifican clásicamente en los siguientes grupos: acidosis respiratoria, acidosis
OM
Acidosis y alcalosis: estados patológicos que pueden llegar a la acidemia o alcalemia
respectivamente.
.C
En el siguiente cuadro se muestran los parámetros que caracterizan una alteración ácido-
base y las respuestas compensatorias de los sistemas renal y respiratorio para corregir el
desbalance.
DD
LA
FI
pCO2 o una disminución en la concentración de HCO3- o por ambas alteraciones al mismo tiempo.
De la misma manera, una alcalemia, puede ser producida por una disminución en los niveles de
pCO2 o por un aumento en la concentración de HCO3- o por ambas alteraciones al mismo tiempo.
Para mantener la homeostasis, el cuerpo humano genera respuestas dirigidas a mantener el pH.
De esta manera, y a modo de ejemplo, en una acidosis metabólica la respuesta sería la
disminución de la pCO2, mediante la hiperventilación. Además, muchas veces los trastornos
ácido-base, no son únicos. Los pacientes pueden llegar a tener alteraciones asociadas, pudiendo
coexistir dos o más trastornos a la vez.
Entendiendo la ecuación, queda claro que, ante una disminución en los niveles de la base,
que en este caso sería HCO3-, la respuesta del organismo “para mantener el cociente” y así
mantener el pH, genera una disminución en los niveles del ácido, que en este caso sería la pCO2.
OM
Acidosis metabólica
La acidosis metabólica se puede detectar por una disminución del bicarbonato plasmático.
Las causas de la pérdida de bicarbonato pueden ser:
1.- Una mayor producción de ácidos orgánicos que exceda la velocidad de eliminación. El
.C
bicarbonato se pierde cuando se combina con los H+. Por ejemplo, la producción de cuerpos
cetónicos en la cetoacidosis diabética y la producción de ácido láctico en la acidosis láctica.
2.- Una reducción en la excreción de H+ como se observa en algunas alteraciones renales.
DD
3.- Una excesiva pérdida de bicarbonato debido a una mayor excreción renal (disminución de la
reabsorción renal) o a una pérdida del fluido duodenal (diarrea).
Cuando se produce alguna de estas alteraciones, la relación bicarbonato/CO2 disminuye.
El descenso del pH estimula la hiperventilación como un mecanismo compensatorio a nivel
LA
respiratorio que resulta en una mayor eliminación de CO 2. Los riñones responden aumentando la
excreción de protones en forma de amonio y preservando la base con un aumento de la
reabsorción de bicarbonato.
FI
Funcionamiento del sistema amortiguador bicarbonato-ácido carbónico ante una sobrecarga de H+.
La reacción se desvía hacia la izquierda, con gran producción de CO 2 y consumo de HCO3-.
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amonio y la reabsorción de bicarbonato.
Alcalosis metabólica
La alcalosis se produce cuando se agrega un exceso de base al sistema o se pierden
fluidos ácidos (vómitos gastrointestinales). Ante un déficit de sodio o de potasio, la reabsorción de
.C
bicarbonato y la excreción de protones están aumentadas lo que también puede conducir a una
alcalosis. En la alcalosis metabólica el paciente hipoventila. Si el aumento del pH es importante,
DD
aumenta la actividad neuromuscular y se produce tetania. La causa es una disminución de la
concentración de calcio libre debido a un aumento de la unión del calcio a proteínas u otros
aniones.
Alcalosis respiratoria
LA
Resumen de los cambios ocurridos en los distintos casos de alcalosis y acidosis y respuesta que se
genera como mecanismo compensatorio.
OM
Saber diagnosticar las alteraciones del estado ácido-base y reconocer su importancia para
la terapéutica, contribuye a instaurar el tratamiento adecuado.
Por otro lado, los trastornos ácido-base expresan una patología subyacente. Nunca estas
alteraciones son patologías primarias. Por lo tanto, un correcto análisis de estos trastornos,
muchas veces acerca al diagnóstico de alguna patología primaria o de la severidad de ésta. Un
.C
ejemplo claro es la acidosis metabólica de la insuficiencia renal: El diagnóstico de insuficiencia
renal aguda se realiza mediante los niveles séricos de creatinina y diuresis. La acidosis
DD
metabólica generada por la insuficiencia renal no sirve para el diagnóstico, pero si para evaluar la
severidad de la patología y la necesidad de realizar hemodiálisis aguda.
LA
FI
1) Considerando que el ácido acético CH3-COOH tiene un pKa = 4,76 y que el dihidrógeno
fosfato H2PO4-tiene un pKa = 6,86, responda las siguientes preguntas.
a) ¿Cuál de los dos es el ácido más fuerte?
b) Si se dispone de soluciones de acético y de dihidrógeno fosfato de igual concentración,
¿cuál tendrá mayor pH?
c) Si se dispone de soluciones de ácido acético y de dihidrógeno fosfato de igual pH, ¿cuál
de ellas tiene mayor concentración?
OM
d) ¿Qué especie química predomina en una solución de ácido acético de pH = 3? ¿Y a pH =
5,5 y a pH = 9?
e) ¿Qué pH tendrá una solución de ácido acético en la que hay igual concentración de anión
acetato y de acético?
f) ¿Qué especie química predomina en una solución de dihidrógeno fosfato de pH = 3? ¿Y a
.C
pH = 5,5 y a pH = 9?
g) ¿Una solución de ácido acético puede ser un buffer de utilidad para regular el pH en el
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rango fisiológico? ¿Y una solución de dihidrógeno fosfato? Justifique.
2) Teniendo en cuenta que el NH4+ tiene un pKa 9,5, marque la opción correcta.
a) En el equilibrio hay igual concentración de ácido que de base conjugada.
b) Una solución de NH4+ podría funcionar como solución buffer a pH 6,5 si la concentración
LA
3) Se titula un ácido débil cuya Ka = 1,8 x 10-4. Indique en cuál de los siguientes valores de pH
la concentración del ácido es igual a la concentración de la base conjugada.
a) mayor que 7
b) 1,8
c) 3,7
d) 3,17
4) Indique cuál de los siguientes pares ácido/base conjugados elegiría para preparar una
solución amortiguadora de pH 7.
a) C3H4N2H+ / C3H4N2 Ka = 8,33 x 10-8
b) H3PO4 / H2PO4- Ka = 7,59 x 10-3
c) CH3COOH / CH3COO- Ka = 1,82 x 10-5
d) HCO3- / CO32- Ka = 6,30 x 10-11
5) La urea es el producto final del metabolismo de las proteínas en seres humanos. Con una
excreción diaria de 20 a 35 gramos, es la sustancia que los riñones eliminan en mayor
cantidad. Las concentraciones de urea y creatinina en orina de 24 h se determinan para
evaluar la función renal. Se desea calcular la eliminación urinaria diaria de urea (PM 60
g/mol) en una muestra de un paciente. El volumen de orina recolectado (24 hs) fue de 1250
ml y la concentración de urea arrojó un valor de 0,42 M. ¿Cuántos g urea eliminó el paciente
en 24 hs? (Rta: 31,5g)
OM
6) Se prepara una solución conteniendo KCl (PM 149 g/mol) y glucosa (PM 180 g/mol), la cual
contiene en total 0,9 osmoles de soluto en 2,25 l de solución.
a) ¿Cuál es la Osmolaridad de la solución resultante?
b) Si en el volumen total de solución hay 0,2 osmoles de KCl, ¿qué cantidad (grs) de sal
.C
recibe un paciente cuando se le suministra 1 litro de esa solución?
c) ¿y cuando recibe el volumen total (2,25 l) de la solución preparada?
DD
d) ¿cuántos gramos de glucosa hay en 2,25 l de solución?
(Rta: a) 0,4 Osm; b) 6,62 g; c) 15 g; d)126 g)
líquido, 88 meq de Na+ y 44 meq de K+. El Na+ se administra como NaCl y es provisto como
solución 3,4 N. El K+ se administra como KCl y es provisto como solución 1 M. Calcular el
volumen de las soluciones comerciales de NaCl y KCl que se le deben suministrar al
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8) Respecto de las alteraciones del equilibrio ácido base en el ser humano y sus mecanismos
compensatorios, complete el siguiente esquema, considerando el tipo de alteración
correspondiente (metabólica o respiratoria), valores de pH (alto o bajo) y pCO2 (alta o baja).
De un ejemplo de cuadro clínico en cada caso.
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9) Los valores normales de los parámetros que se determinan en la evaluación del estado ácido
base de un individuo son:
pH 7,35 - 7,45
pCO2 32 - 39 mmHg
HCO3-23 - 27 mM
CO2 = 1,2 mM
.C
Un paciente con acidosis metabólica presenta valores de pH = 7,03 y [CO 2] = 1,10 mM. Se
DD
desea saber:
a) La concentración de protones en sangre (Rta: 9,3x10-8 M)
b) La concentración de HCO3- en sangre (Rta: 9,4 mM)
c) ¿Cuánto de la concentración normal de HCO3- se ha consumido? (Rta: 14,6 N)
LA
10) Un niño de 4 años llega a la guardia de un hospital presentando mareos, debilidad y vómitos
reiterados como consecuencia de una intoxicación alimentaria.
Los datos de laboratorio indican: pCO2 = 45 mmHg
FI
HCO3-= 40 mM
Na+ = 140 meq/l
Glucemia = 3,3 mM
El tratamiento consiste en el tratamiento con antibióticos y rehidratación oral con solución
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g) ¿Es posible tratar al paciente con solución de L-glucosa, en lugar de administrarle D-
glucosa? Justifique.
11) Teniendo en cuenta que sólo las formas no disociadas de los electrolitos débiles difunden a
través de las membranas, compare el grado de absorción de la aspirina (ácido acetil
.C
salicílico, pKa 3,5) administrada por vía oral (comprimidos) y por vía anal (supositorios)
considerando que en el estómago el pH es 1,5 mientras que en el intestino el medio tiene un
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pH = 7,4.
12) Se dispone de un antiinflamatorio que es electrolito débil (pKa = 9,5). Se busca preparar la
mejor formulación farmacéutica para esa droga de manera de obtener una rápida absorción.
Discuta la conveniencia de preparar comprimidos, teniendo en cuenta que el pH del jugo
LA
gástrico es 1,5.
13) Un paciente con acidosis metabólica presenta los siguientes parámetros sanguíneos: pH
FI
d) 2,5 mM
14) Los parámetros que definen el estado ácido/base de un paciente con diarrea indican: pCO 2 =
42 mmHg y [HCO3-] = 18 meq/Litro. Indique el valor de pH sanguíneo que espera encontrar.
Datos: [CO2] (en mM) = 0,03 pCO2 (en mmHg); pKa 6,1
a) 7,62
b) 5,73
c) 6,47
d) 7,26
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.C
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LA
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