CITOQUININAS

Thomas Fichet Lagos

Dr. Ing. Agrónomo
Facultad de Ciencias Agronómicas
Universidad de Chile
tfichet@uchile.cl
 CITOQUININAS
- G. Haberlant (1913): Fisiólogo Austriaco, descubre una
sustancia que promovía la división celular.

- Miller y Lethan (1963): Aíslan la Zeatina en granos de maíz.

- La biosíntesis está asociada con regiones con actividad

meristemática (meristemos apicales y cambium).

- Actualmente se emplean especialmente en la tecnología de

cultivo in vitro y se está potenciado su uso para mejorar
cuaja y crecimiento de fruto en frutales y hortalizas, retardo
de la senescencia, mejorar fotosíntesis, mejorar producción,
etc.
 Retardan
envejecimiento
Promueven de hoja
división celular

Incrementan
producción
Activan
fotosíntesis

Activan
Citoquininas crecimiento
lateral de yemas
 CK (citoquininas)
a) Estimulación de la pérdida de agua por transpiración.
b) Retraso de la senescencia de las hojas.
c) Activación del crecimiento de las yemas laterales.
d) Eliminación de la dormición que presentan las yemas y
semillas de algunas especies.
e) Inducción de la partenocarpia en algunos frutos.
f) Estimulación de la formación de tubérculo en papa.
g) Reducen la formación de raíces.
h) Pueden sustituir requerimientos luminosos en procesos
fisiológicos como la síntesis de pigmentos o el desarrollo de los
cloroplastos.
i) Regulan la expresión diferencial de genes involucrados en:
división celular, fotosíntesis, resistencia a enfermedades,
metabolismo de nutrientes y transición floral.
 Formas activas de citoquininas en planta (1;2;3) y
derivados de fenilurea (4;5) con actividad citoquininica
CH2OH CH3
HN CH2 CH2 C HN CH2 CH2 C
CH3
adenina

CH3 N
N N
N
1 2
N N
N H N H
S
4 N
HN CH2 NH CO NH
N
N
N
3
5
N NH CO NH N
N H

1) Trans-Zeatina (tZ) Cl
2) Isopenteniladenina
3) Benciladenina o 6 BAP En azul la base nitrogenada cíclica de
4) Tidiazurón dos anillos: adenina o 6-aminopurina
5) Forclorfenurón
 Adenina

tZ sería la que
presentaría
mayor actividad

Sakakibara, 2006
 Adenina

En
álamo, algas y
arabidopsis

Sakakibara, 2006
Rutas metabólicas
de síntesis de CK:
MEP (metileritritol
fosfato) en los
plastos y MVA
(mevalonato) en el
citoplasma.

Sakakibara, 2006
Nucleótidos de Citoquininas: Estructura Básica

Takei, 2003
 Estructuras de CK con cadena lateral isoprenoide
(isoprenoídicas): bases libres (a, b), ribósidos (c) y ribótidos (d)

(c) (d)

(a) (b)

Schmülling, 2004
 IPT isopenteniltransferasa
CYP735A Citocromo P450 monooxigenasa
LOG monofosfato fosforibohidrolasa

RESUMIENDO
Síntesis de CK bases libres
desde ATP o ADP vía ribotidos
y posterior ribosidos

Kieber y Schaller, 2014

Principales tipos de CK en arabidopsis y arroz

Osugi y Sakakibara, 2015

 Principales tipos de CK en arabidopsis y arroz

Arabidopsis Arroz

Osugi y Sakakibara, 2015

Oxidación de citoquininas activas por citoquinina oxidasa
CKX en forma irreversible

iP Adenina 3-metil-2-butenal
(forma activa)

Taiz y Zeiger, 2002

 CITOQUININAS
(CK)

síntesis

Osugi y Sakakibara,
formas activas
2015

oxidación conjugación reversible

 CITOQUININAS
(CK)

Biosíntesis
y
catabolismo

Señalización
hormonal
(signaling)

Werner y Schmülling, 2009

Nongipur
et al., 2012
 Expresión localizada de gen ipt de Agrobacterium en yemas
axilares de tabaco y efectos en brotación
(A) Fenotipo silvestre
Secciones apicales (B) y basales (C) de plantas
transformadas

A B +CK
C +CK

-CK

Guivarc’h et al., 2002

 Interacción entre auxinas (IAA) y CK en el proceso de
ramificación lateral en función de PsIPT, PsCKX y PsPIN1 en
plantas con brote apical intacto o decapitada

Brote apical intacto Después de la decapitación Crecimiento de la yema

Shimizu-Sato et al., 2009

Efecto de la aplicación de IAA (+), en la zona decapitada del
brote de planta de arveja, sobre la expresión de genes PsIPT
(CK) y PsPIN1 (auxinas) en yemas laterales

Aumenta
Se frena
transporte de
síntesis de CK
auxinas
Tanaka et al., 2006
 Patrones de
expresión de genes
vinculados con
Auxinas y CK, y
niveles de t-ZR en el
nudo bajo el aérea de
decapitación de
Pharbitis nil

Kitazawa et al., 2008

 El efecto del despunte (eliminación fuente de auxinas) sobre el
transporte de auxinas desde el ápice y su relación con CK y SL
sobre brotación de yemas laterales inhibidas.
Auxinas
CKX
Citoquininas
MAX3,4 AXR1/AFB IPT

Estrigolactona

MAX2 PAT en tallo PAT en yema

PAT = Movimiento basipeto de IAA

 El efecto del despunte (eliminación fuente de auxinas) sobre el
transporte de auxinas desde el ápice y su relación con CK y SL
sobre brotación de yemas laterales inhibidas.
X
Auxinas
X
CKX
Citoquininas
X
MAX3,4 X
AXR1/AFB IPT

X
Estrigolactona

X
MAX2 X
PAT en tallo PAT en yema

PAT = Movimiento basipeto de IAA

RESUMIENDO: La brotacion de una yema se relaciona
con auxinas, citoquininas y estrigolactonas

IAA

IAA =Auxina

CK = Citoquinina

SL = Estrigolactona

…y la luz juega algún

papel en esta brotación
CK y se relaciona con
estas Fitohormonas?
SL
 La yema brota por dos señales:
1)Medioambiente presencia de luz
2)Perdida de dominancia (eliminación del brote, fuente de IAA)

Transducción de la señal Percepción de la señal

lumínica al nudo Lumínica por la yema

División y expansión
IAA celular
CK
CK
CRECIMIENTO
DE LA
Exportación de auxinas Síntesis de auxinas YEMA

Atracción de azucares

Señal estrigolactonas
 La yema brota por dos señales:
1)Medioambiente presencia de luz
2)Perdida de dominancia (eliminación del brote, fuente de IAA)

Transducción de la señal Percepción de la señal

lumínica al nudo Lumínica por la yema

División y expansión
IAA celular

X
CK X
CK

X
CRECIMIENTO
DE LA
Exportación de auxinas Síntesis de auxinas YEMA

Atracción de azucares

Señal estrigolactonas
 INHIBICIÓN PROMOCIÓN
BROTACION BROTACION

IAA + SL / CK IAA + SL / CK

IAA + SL / CK IAA + SL / CK

PROMOCIÓN INHIBICIÓN
RAMIFICACION RAMIFICACION
Efecto de la aplicación foliar de KNO3 (16 mM) sobre la
expresión del gen MhIPT3 y de las concentraciones de
las diferentes CK en hojas de manzano. Z = zeatina; ZR =
ribosido de zeatina; iP = isopentenyladenina e iPA = isopentenyladenosina

Tratamiento mRNA (10 3 ) Z + ZR iP + iPA

Control 4.07 a 52,01 a 7,18 a
KNO 3 6,97 b 84,44 b 65, 88 b

iPMP iPA iP

ZMP ZR Zeatina

Peng et al., 2008

Efecto de la aplicación al suelo 16 mM de KNO3, NH4Cl o KCl
sobre la expresión del gen MhIPT3 en raíces de manzano.
1800
1600 KN O3
M hIPT3 mRNA (10 3 )

1400 N H4Cl
1200 KCL
1000
800
600
400
200
0
0 0,5 2 3,5
Horas después de los tratamientos

Peng et al., 2008

Efecto de la aplicación al suelo 16 mM de KNO3, NH4Cl o KCl
sobre los contenidos de isopentenyladenina (iP) e
isopentenyladenosina (iPA) en raíces de manzano.
90
80 KN O3

70 N H4Cl
iP + iPA (ng /g PF)

60 KCL

50
40
30
20
10
0
0 0,5 2 3,5
Horas después de los tratamientos
Peng et al., 2008
Efecto de la aplicación al suelo 16 mM de KNO3, NH4Cl o KCl
sobre los contenidos de zeatina (Z) y ribosido de zeatina (ZR)
en raíces de manzano.
70
KN O3
60
N H4Cl
Z + ZR (ng /g PF)

50
KCL
40
30
20
10
0
0 0,5 2 3,5
Horas después de los tratamientos

Peng et al., 2008

 En Resumen…
IPT3 es regulado por la entrada de nitrato
pero no por amonio (Miyawaki et al., 2004;
Takei et al., 2004), activando la síntesis de
citoquininas.
Relación entre la entrada
de nitrógeno y la síntesis
de CK en raíz/brote. tZ iPT3
tZR iP-nuc
iPR
e s a s im il ación de N
Gen como iPT3
s g e n e s
- y otro
NO3

OJA
H
Adaptado de
Jameson, 2017

Flujo o ruta
metabólica
Xilema Floema Regulación
positiva

NO3- NO3-;(NH4-)

CYP735A iPT3/iPT5
tZR tZ-nuc iP-nuc
RAÍZ

La mayor entrada de
nitrato induce un aumento
Distribución macronutrientes
en la entrada de agua y
con ello mayor transporte
de nutrientes y citoquininas
Transpiración
RESPUESTA A CK HOJA
Metabolismo fitohormonal RESPUESTA A NITRATO
Síntesis de proteínas
Apertura estomática
Síntesis de aminoácidos
Síntesis de citoquininas
Respuesta morfológica

precursoras (tZR). tZ

Precursores tZR
de CK
NO3-

FLOEMA XILEMA

RAÍZ H2 O
tZR
Precursores NO3-
de CK RESPUESTA A NITRATO
Síntesis de aminoácidos
Síntesis de citoquininas
Transporte de agua
RESPUESTA A CK
Toma de macronutrientes NO3-
Síntesis de proteínas
Respuestas morfológicas

Adaptado de Sakakibara SO42-

NO3-
et al., 2006 NH4+ PO43-
 Nivel de ramificaciones laterales en plantas con niveles
adecuados (control) y plantas con niveles deficientes (ipt y arr) de
citoquininas, con alta (9 mM) o baja (1,8 mM) fertilización de NO3-
4,5
b
Número de ramificaciones lateralese

3,5

3 a
2,5 a
a a
2 a
1,5

0,5

0
Bajo N Alto N Bajo N Alto N Bajo N Alto N
Control ipt arr

Adaptado de Müller et al., 2015

 No
despuntado

Despuntado Sólo
+ NAA despuntado
Efecto de la eliminación del
ápice, sobre los contenidos
de clorofila en hojas
basales en Cucumis
sativus.

D+
La eliminación de la
Clorofila (mg 100 mg-1)
ND NAA Despt
fuente apical de auxinas,
retrasa la senescencia de
las hojas basales.

Días post-tratamiento
Bangerth, 2015
 No
despuntado

Despuntado Sólo
+ NAA despuntado

Efecto de la eliminación del

ápice, sobre los contenidos
de citoquininas en hojas
basales de Cucumis sativus.

Qué pasaría con los ND D+ Despt

Z/ZR (ng 100 mg-1) NAA
niveles de citoquininas, si
se aumenta la fertilización
nitrogenada vía NO3?

Bangerth, 2015
Días post-tratamiento
 Bangerth, 2015

Despuntado Sólo
Efecto de la eliminación del + NAA despuntado
ápice, sobre los contenidos
de citoquininas en hojas
basales de Cucumis sativus
fertilizado con NO3. NO3 NO3

La aplicación de NO3 induce un aumento de un 75% del

nivel endógeno de CK en hojas de plantas despuntadas..
ND D+ D+
Z/ZR (ng 100 mg-1)

Despt ND Despt
NAA NAA

Días post-tratamiento Días post-tratamiento

 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila.
CK y auxina regulan la organogénesis
en el cultivo de tejido

+ CK

+ auxin + auxin
and CK

Tobacco leaf discs are placed

into sterile culture dishes on
medium containing various TIME
hormones

Images courtesy of Richard Amasino.

 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila.
 Concentración de diferentes 14C-azucares en frutos de
melón, 10 días después de que la hoja fue expuesta a
14CO . Frutos tratados en antesis con 40 mg/L de BA.
2
Concentración 14C

500
(DPMx10-3g-1PF)

Tratado en antesis
40 mg/L de BA
Testigo
250

0
Rafinosa

Glucosa
Sacarosa

Fructosa
Almidón
 Efectos de aplicación de CPPU sobre tamaño de frutos
de Lagenaria leucantha (cucurbitácea asiática).

Perímetro del fruto (cm)

CPPU

CPPU

Polinizado
Poliniz.

No polinizado No Polin.

Días después de antesis (DAA) Días después de antesis (DAA)

Li et al., 2003
Efectos de aplicación de CPPU en crecimiento de frutos partenocárpicos
por inducción de división celular en Lagenaria leucantha.

Las CK, al favorecer división

celular, mejoran tamaño de
fruto final a cosecha

CPPU
Polin.

No Pol.

Li et al., 2003
Días después de antesis
Efecto de la aplicación de 10 mg/L de CPPU, 20 días
después de antesis (DAT) en el crecimiento de frutos
de kiwi desde el día 0 hasta el días 125 (cosecha).

Ainalidou et al., 2016

 Retraso en la maduración

Efecto de la aplicación
de 10 mg/L de CPPU,
20 días después de
antesis en diferentes
variables a cosecha y
almacenaje de frutos
de kiwi

Aumento de la firmeza

Ainalidou et al., 2016

 Efecto de la aplicación de
GA3 y de CPPU (una
Control
citoquinina de síntesis)
sobre el crecimiento de
bayas y pedúnculos de
uva “Sultanina”.
GA3

CPPU

Retamales et al., 1995

GA3 + CPPU
 Efecto de diversos
fitorreguladores aplicados en
floración y cuaje sobre tamaño y
forma de frutos en peral var.
Abate Fetel, a cosecha.

Altura descartando efecto Altura N° de semillas promedio

Tratamientos Altura cm. Diámetro cm. Desviación de cuello g° % de Partenocarpia
carga y n° de frutos diámetro por frutos
AVG 11,0 a 11 a 6,12 a 1,82 a 9,47 a 1,05 ab 43,3 ab
Test. Seco 11,7 ab 11,6 a 6,23 ab 1,88 a 9,78 a 1,27 ab 35 a
Test. Húmedo 11,7 ab 11,7 a 6,44 ab 1,81 a 9,37 a 1,57 b 36,7 a
GA 4+7 + GA 3 12,6 bc 12,4 ab 5,93 a 2,07 b 13,78 ab 0,48 a 80 c
GA 3 12,9 c 12,9 b 6,16 ab 2,1 b 11,98 ab 0,50 a 71,7 bc
BA + GA 4+7 13,0 c 13 b 6,42 ab 1,95 ab 16,15 b 0,82 ab 60 abc
BA 13,1 c 13,1 b 6,69 b 1,97 ab 15,96 b 1,42 b 40 ab
GA 4+7 13,3 c 13,3 b 6,47 ab 2,07 b 12,37 ab 0,83 ab 55 abc

Santana, Saavedra y Fichet, 2009

Evaluación del efecto de BA y GA3 sobre la retención de fruta
en mandarinos var. Fortuna
Peumo (Sexta región), 2004

Se realizó una aplicación foliar a una concentración de 25 mg/L de BA y

de 18 mg/L de GA3, a caída de pétalos.
 Efecto de los distintos tratamientos sobre la eficiencia
productiva en mandarinos var. Fortuna. Aplicación a caída
de pétalos.
4,5
4 b
Eficiencia productiva
(n°frutos·cmֿ ² ASTT)

3,5
3
2,5
2 ab

1,5 a
a
1 a
0,5
0
NAA AB T GA3 GA3+CKs

Tratamientos

Esguep y Fichet, 2005

 Efecto de los distintos tratamientos sobre la eficiencia
productiva en mandarinos var. Fortuna. Frutos comerciales
y de desacarte. Aplicación a caída de pétalos.
Frutos com erciales Frutos descarte

3
Eficiencia productiva
(n°frutos·cmֿ ² ASTT)

2,5 b

2
ab b
1,5
ab
1 a
a
ab
0,5
a a a
0
NAA AB T GA3 GA3+CKs

Tratamientos
Se puede aumentar el cuaje y por ende número Esguep y
de frutos a cosecha, pero el resultado dependerá Fichet, 2005
de la capacidad de la “fábrica”
 Efecto de la aplicación de CPPU en ovarios de tomate no
polinizado (UP) y polinizado (P), sobre los contenidos de:
A) IAA y B) GA1+3 (ng/g-1PF)
A) B)

Contenido de GA1+3 (ng g-1 PF)

Contenido de IAA (ng g-1 PF)

Días después de antesis Días después de antesis

Ding et al., 2013

 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila.
Dinámica de abscisión de frutos de
manzano en corimbo, tratados y no
tratados con BA (200 mg/L, diámetro de
13 mm, 15 días después de caída de
pétalo = DAPF). Frutos de color obscuro
tienen mayor persistencia frente a la
abscisión (C=central; L=lateral).

Botton y Ramina, 2010

 BA

A) Dinámica de abscisión de
frutos de manzano tratados y no
Control tratados con BA (200 mg/L,
Aplicación diámetro de 13 mm, 15 días
después de caída de pétalo =
DAPF).

B) Diámetro promedio de frutos

de manzano tratados con BA
(columna grises) y no tratados
(columnas blancas). Asterisco
indica diferencia significativa
entre tratamientos para esa
fecha de evaluación (P<0,05).

Botton y Ramina, 2010

 H2 C COO-
C
H2 C NH CO CH 2 COO-
CH 3 S Ado M ACC
COO COO
ACC N-maloniltransferasa
CH NH 3+ CH NH 3+
ATP PPi + Pi
H2 C COO- O2 H H
CH 2 CH 2
C C C
S-adenosilmetionina CH 2 ACC sintasa ACC oxidasa
CH 2
sintetasa H2 C NH 3+ H H
S +S Ado

CH 3 CH 3
M ETI ONI NA SAM ACC ETI LENO

Ruta de síntesis de etileno

Síntesis de etileno, expresión de
MdACO1 y MdACS5B en frutos de
manzano tratados con BA (línea
discontinua) y control (línea continua).
Barras representan la desviación
estándar.

Botton y Ramina, 2010

 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila.
Incremento de ramificación
lateral en álamo con
aplicación de BA

Yema tratada con

BA

Cline et al., 2006

 Grosor
normal

Grosor
normal 20 mg/L CPPU
 Luz

Porcentaje de yemas brotadas

10 mM BA oscuridad

Oscuridad

Horas post tratamientos en la yema

Efecto de la luz o de citoquininas (BA) sobre la brotación de yemas de rosa

Roman et al., 2016

Ramificación lateral en cerezos var. Skeena/Mazzard. A) árbol
no tratados y B) árbol tratado con 5.000mg/L de Promalina.

Elfving y Visser, 2007

50 mg/L CPPU
 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila.
Peso fresco y niveles de citoquininas en plantas de Dendrobium
en condiciones inductivas o no inductivas
Peso fresco

Medio inductivo
Medio no inductivo

Condiciones inductivas
Condiciones no inductivas

De Melo Ferreira et al., 2006

Proceso de inducción floral en vid, FMI Flower meristem identity
FT Flowering locus
Factor negativo 1
regulación floral
dependiente de CK y GA
GA Gibberellic acid
en uva cv. Sugarone. SAM Shoot apical meristem
TFL1 Factor
Terminal flower
positivo 1
regulación floral
UCM Uncommitted meristem

GA ̸ CK

Crane et al., 2012

GA ̸ CK
 Aplicación de CK en el desarrollo in vitro de gaviña de uva
var. Sultanina
Crane et al., 2012

+ BA

- BA
Pulpa

Elongación celular

Maduración
División celular Dulzor Color Ablandamiento Aromas

Materia seca

crecimiento Maduración
Crec.

Crec.

Crec.

Crec.

no mad

no mad

auxinas
citoquininas
Embrion

giberelinas
ABA
División
Materia seca etileno
celular

crecimiento
Adaptado de Mc Atee et al., 2013
 Expresión de dos genes IPT (relacionados con síntesis de CK) de
Expresión de dos IPT de tomate, en diferentes estadios desde yema
tomate, en diferentes estadios desde yema floral hasta fruto maduro
floral (Bud) hasta fruto maduro (Red)
(rojo).
Zizkova et al., 2015
Pertinente
mejorar
calidad de flor
Expresión relativa del gen

yema flor verde rosado rojo

fruto
Primera aplicación
1º apl 2ª apl
2,5 mg/L 2,5 mg/L
5 mg/L 5 mg/L
7,5 mg/L 7,5 mg/L

Ensayo CPPU en
paltos Hass

Segunda aplicación
 Número de flores por inflorescencia (4 paniculas
por árbol y 4 árbol por tratamiento)

mg/L CPPU Nº de flores por panícula

0+0 302 a
2,5+2,5 293 a
5+5 216 a
7,5+7,5 284 a
* Letras iguales, por columna, indican que no hay diferencias significativas
entre tratamientos según la prueba de Tukey al 0,05
 Porcentaje de frutos retenidos por cada 100 flores
hasta cosecha (15 septiembre)

mg/L CPPU 15 diciembre 6 enero 3 marzo 15 septiembre

0+0 0,52 a 0,46 a 0,34 a 0,16 a
2,5+2,5 0,76 a 0,43 a 0,22 a 0,18 a
5+5 1,93 ab 1,52 b 0,97 b 0,80 b
7,5+7,5 2,48 b 1,90 b 1,17 b 0,87 b
* Letras diferentes, por columna, indican que hay diferencias significativas entre
tratamientos según prueba de Tukey al 0,05
 Distribución de calibres a cosecha en porcentajes,
en paltos tratados con CPPU

mg/L precalibre 70 60 50 40 36 32
CPPU
0+0 26,1 b 6,6 a 18,8 ab 18,7 a 27,5 b 2,3 a 0,0 a
2,5+2,5 13,1 a 25,2 b 14,7 a 27,1 a 11,0 ab 0,9 a 8,0 b
5+5 11,0 a 16,2 ab 23,2 ab 20,9 a 27,7 b 1,2 a 0,0 a
7,5+7,5 19,7 ab 24,4 b 31,5 b 17,9 a 4,9 a 0,2 a 1,6 ab

* Letras diferentes, por columna, indican que hay diferencias significativas entre tratamientos
según prueba de Tukey al 0,05
 Carga fruta y eficiencia productiva, a acosecha, en
paltos tratados con diferentes concentraciones de
CPPU

Carga frutal Eficiencia productiva (kg

mg/L CPPU
(Nº frutos.cm2 ASTT) de fruta.cm2 ASTT)
0+0 0,35 a 0,07 a
2,5+2,5 0,42 a 0,08 a
5+5 0,58 ab 0,11 ab
7,5+7,5 1,21 b 0,20 b
* Letras diferentes, por columna, indican que hay diferencias significativas entre tratamientos
según prueba de Tukey al 0,05
mg/L CPPU Nºfrutos/plantas Kg/planta
0+0 35 6,8
2,5+2,5 34 6,5
5+5 51 9,7
7,5+7,5 102 17,8
Contenido de aceite en pulpa, a cosecha, en paltos
var. Hass tratados con diferentes concentraciones
de CPPU

mg/L CPPU % de aceite

0+0 9,5 a
2,5+2,5 10,2 a
5+5 9,9 a
7,5+7,5 8,1 a
* Letras iguales, por columna, indican que no hay diferencias significativas
entre tratamientos según la prueba de Tukey al 0,05
 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila (antisenescentes).
Cambio en la concentración de CK y ABA en hojas
de álamo según su edad

Dani et al., 2016

 Plantas de tabaco de
20 semanas (floración).
+CK Izquierda: Planta con
mayor síntesis de
citoquininas.
Derecha: Planta con
nivel bajo de
citoquininas.
-CK

Gan y Amasino, 1995

Efecto de la aplicación de BA sobre productividad y otras variables en plantas de
trigo sometidas a estrés hídrico

Peso grano Índice de cosecha

Gupta et al., 2012

Contenido clorofila Daño en membrana

Contenido de clorofila en hojas separadas, después de
6 días en oscuridad con o sin aplicación de 1 μM de
benciladenina (CK)
140 6 días en
oscuridad
120
Clorofila total (nMol/mg PF)

100
6 días en
80 oscuridad

60

40

20

0
Inicial más CK sin CK
Tratamientos

Adaptado de Zwack et al., 2013

Regada 1200 ml/día
Estrés hídrico 400 ml/día

Efecto del estrés hídrico

moderado en plantas de algodón
normales (WT) y plantas de
algodón sobre expresando el
Regada
gen IPT (IPT5), sobre los niveles
Estrés hídrico
de clorofila a y b; peso fresco del
brote y fotosíntesis.
El estrés se inicio después de 3
semanas

Kuppu et al., 2013

 Plantas
después de
90 días bajo
estrés
hídrico (1/3
del riego
regular

Plantas
después de
120 días
bajo estrés
hídrico (1/3
del riego
regular

Regada 1200 ml/día

Estrés hídrico 400 ml/día Kuppu et al., 2013
Relación entre clorofila total y fotosíntesis neta en plantas
de arroz bajo estrés salino y tratadas con 0,1 nM de CPPU

Gashaw et al., 2014

Peso de grano de arroz en plantas bajo estrés salino y
tratadas con 0,1 nM de CPPU

Gashaw et al., 2014

 CK y su relación con la senescencia

1.- Mantienen la integridad de las membrana previniendo la

oxidación de ácidos grasos insaturados, disminuyendo o
inhibiendo la formación de radicales libres como (O2-) y (OH-).
2.- Incrementan la tolerancia a la sequia.
3.- Aumentan los contenidos de clorofila y mantienen la tasa
fotosintética.
4.- Incrementan la presencia de enzimas antioxidantes como:
superóxido dismutasa y peroxidasas.
5.- Incremento en los niveles de prolina en estrés salino.
 Relación entre algunas HV, niveles de azucares y
senescencia en hojas

Bajo nivel
Etileno
de azúcar

CK

SENESCENCIA Invertasas
IAA

Alto nivel
SAG de azúcar
ABA
SAG = Genes Asociados a Senescencia
JA

Adaptado de Wojciechowska et al., 2018

 Usos agrícolas CK

- Cultivo in vitro.
- Crecimiento y forma de frutos.
- Raleo de frutitos en pomáceas vía etileno.
- Favorecer brotación lateral.
- Mejorar estructuras florales, cuaja y desarrollo de
frutitos.
- Evitar degradación de clorofila (antisenescentes).
- Mejorar enraizamiento???
¿REALMENTE LAS CITOQUININAS
HACEN CRECER LAS RAICES?
 Werner et al., 2001

Crecimiento de raíces en plantas de tabaco con niveles

reducidos de citoquininas por sobre-expresión de CK-oxidasas
Transformación de tomate con gen ipt, el cual provoca una sobreproducción
de CK, demuestra papel de CK en la inducción de desarrollo de yemas y
reducción de crecimiento lateral de raíces

Luo et al., 2005

Comparación en la aplicación de citoquininas activas cZ
(cis-Zeatina) y tZ (tras-Zeatina) en el crecimiento de
raíces en arabidopsis (A) y arroz (B)

Kuddo et al., 2012

Aplicaciones de diferentes
concentraciones de BA sobre
el crecimiento de raíz
principal y laterales en
Arabidospsis

Chang et al., 2013

Curvas de concentración respuesta a TDZ o Etefón en plantas de Kalanchoe
30 días después de iniciado los tratamientos (Jaiswal y Sawhney 2005).
Perelli et al., 2010
 Niveles de zeatina (ng/g PF) en diferentes órganos de vid
var. Cabernet Sauvignon, sometidas a estrés hídrico (PRD)

ESTRÉS
(ABA, salino, hídrico, frio) Control Estrés
IPT 21,3a 11,2b
CKX

Citoquininas Control Estrés

10,9a 8,7b

+ raíces

ESTRÉS
Auxinas Control Estrés
8,1a 4,0b
Etileno
Adaptado de Stoll et al., 2000
 Se utilizaron plantas de dos años de edad de uva var. Red
Globe, injertadas sobre: Freedom, Harmony y Ramsey.
Se realizaron tres aplicaciones vía riego de CPPU o TDZ, cada 7
días aproximadamente, empezando con la primera aplicación el
28 de diciembre del 2009 y finalizando con la última el 11 de
enero del 2010. Concentraciones de: 0;2,5; 5; 10; 15 y 20 mg.L-1
Efecto de la aplicación vía riego de CPPU sobre área de raíces
(cm2) en plantas de uva var. Red Globe sobre los portainjertos
Freedom, Harmony y Ramsey.

Portainjerto CPPU (mg/L)

0 2,5 5 10 15 20

Freedom 465,87 b* 467,83 b 435,03 ab 444,10 ab 426,47 ab 335,83 a

Harmony 426,77 b 425,17 b 408,30 ab 417,13 ab 402,90 ab 328,87 a
Ramsey 455,87 b 445,88 ab 444,10 ab 447,03 ab 429,47 ab 397,17 a
*Valores con letras diferentes, difieren significativamente en sentido horizontal entre las
concentraciones, según prueba de Tukey (p-value > 0,05).

Fichet, 2015
Desarrollo radical en Red Globe sobre Freedom tratada con
diferentes concentraciones CPPU vía riego.

0 mg/L 5 mg/L 15 mg/L 20 mg/L

Fichet, 2015
Efecto de la aplicación vía riego de TDZ sobre área de raíces
(cm2) en plantas de uva var. Red Globe sobre los portainjertos
Freedom, Harmony y Ramsey.
Portainjerto TDZ (mg/L)
0 2,5 5 10 15 20

Freedom 456,30 c* 370,67 ab 384,97 b 359,97 ab 356,53 ab 314,57 a

Harmony 436,22 c 443,17 c 333,97 ab 335,43 ab 305,80 a 326,83 ab
Ramsey 439,90 c 385,76 ab 398,51 b 379,07 ab 328,79 a 369,93 ab

*Valores con letras diferentes, difieren significativamente en sentido horizontal entre las
concentraciones, según prueba de Tukey (p-value > 0,05).

Fichet, 2015
 Efecto de la aplicación vía riego de CPPU sobre peso (g);
fresco de raíces (PFR) y seco de raíces (PSR) en plantas de
uva var. Red Globe sobre portainjertos: Freedom, Harmony y
Ramsey.
Portainjerto Citoquinina CPPU (mg/L)
0 2,5 5 10 15 20

Freedom PFR 14,20 c* 13,63 b 13,31 ab 12,40 ab 12,79 ab 9,31 a

PSR 5,90 c 4,87 b 4,20 ab 4,27 ab 4,16 ab 3,19 a

Harmony PFR 12,93 c 10,27 b 10,39 b 9,76 ab 9,70 ab 7,91 a

PSR 5,33 c 3,73 b 3,43 ab 3,37 ab 2,83 ab 2,53 a

Ramsey PFR 17,97 b 18,32 c 18,01 bc 16,01 ab 15,13 ab 10,87a

PSR 6,44 bc 7,66 c 5,61 ab 5,77 ab 5,23 ab 2,99 a
*Valores con letras diferentes, difieren significativamente en sentido horizontal entre las
concentraciones, según prueba de Tukey (p-value > 0,05). Fichet, 2015
Efecto de la aplicación vía riego de TDZ sobre peso (g); fresco
de raíces (PFR) y seco de raíces (PSR) en plantas de uva var.
Red Globe sobre portainjertos: Freedom, Harmony y Ramsey.
Portainjerto Citoquinina TDZ (mg/L)
0 2,5 5 10 15 20

Freedom PFR 12,91 c* 10,22 bc 8,23 ab 7,64 ab 8,66 ab 6,33 a

PSR 5,34 c 3,51 bc 3,06 ab 2,87 ab 3,00 ab 2,71 a

Harmony PFR 10,80 b 9,18 ab 6,83 ab 7,07 ab 6,91 ab 5,82 a

PSR 3,53 b 3,57 b 2,60 ab 2,69 ab 2,53 ab 2,20 a

Ramsey PFR 16,83 b 14,03 b 12,52 ab 12,41 ab 10,10 ab 9,83 a

PSR 4,92 b 4,80 b 4,20 ab 4,27 ab 3,17 ab 3,03 a
Ambas citoquininas de síntesis (CPPU y TDZ), aplicadas vía
*Valores con letras diferentes, difieren significativamente en sentido horizontal entre las
riego y a según
concentraciones, partir dededeterminada
prueba concentración, ejercen un
Tukey (p-value > 0,05).
Fichet, 2015
efecto inhibitorio sobre el crecimiento y desarrollo de la parte
radical.
Salazar, D. y Malgrejo, P. 2005 Viticultura, Mundi-Prensa, 325 p.
 Para que las raíces
ramifiquen, requieren
necesariamente del
movimiento de auxinas
(transporte)

PIN = transportador
de salida de auxina

periciclo inicio crecimiento

protoxilema raíz lateral raíz lateral

Perelli et al., 2010

 IAA

Núcleo
IAA

Movimiento IAA

: PIN
IAA
IAA : ácido indol acético

IAA : Síntesis de PIN

inducida por IAA
Núcleo
CK : Movimiento de IAA

CK : citoquinina
IAA

IAA IAA
Fichet, 2015
 ¿Qué ven en la fotografía?

Acelerador
Freno (auxinas)
(citoquininas)
 En qué parte de la
raíz, se inhibe
crecimiento por
citoquininas??

MINIMO NIVEL DE AUXINAS

Por lo tanto citoquininas afectan
negativamente a las auxinas de 2 formas
en la Zona de Transición (TZ):
a) Bloqueo del transporte
b) Degradación

Di Mambro et al., 2017

Niveles de auxinas
Efecto de la aplicación al suelo de auxinas solas o con
citoquininas sobre el número de raíces laterales en plantas
de Arabidopsis (flechas blancas). MS plantas control. * indica
diferencias significativa.

Nº raíces laterales

Bielach et al., 2012

 Otr
las o mi
veg horm to de
fito etal ona
rre es
gu y lo s
l ad
ore s
s
 … y si aplico
citoquininas al
suelo, sólo
afecto
crecimiento de
raíces?
 Desarrollo radical de cebadas con menor contenido de
citoquinas en raíces (4; 109; 16 y 72)

Control 4 109 16 72

Claramente las plantas con menos

citoquininas tienen mayor desarrollo radical

Schmülling et al., 2018

Pero, al tener mayor masa radical por menor contenido de
citoquininas, se favorece o se inhibe la absorción de
elementos minerales????
 Contenidos de P y S en brotes de cebadas con menor
contenido de citoquininas en raíces (4; 109; 16 y 72)
Concentración de P (mg g-1 PS)

Concentración de S (mg g-1 PS)

S
P enido
ido ont
ten
del c
el con ent
o
od Aum
ment
Au

Control 4 109 16 72 Control 4 109 16 72

Schmülling et al., 2018

Contenidos de Fe y Zn en brotes de cebadas con menor
contenido de citoquininas en raíces (4; 109; 16 y 72)
Concentración de Fe (µg g-1 PS)

Concentración de Zn (µg g-1 PS)

e n
oF ido
Z
t enid t en
on con
del c del
o
ment ment
o
Au Au

0
Control 4 109 16 72 Control 4 109 16 72

¿y si fertilizo con citoquininas Schmülling et al., 2018

que pasa con el Fe?
 Planta normal Planta con
y con nivel carencia de Fe
normal de Fe por falla de
IRT1 Vert et al., 2009

Seguela
et al., 2008

Expresión de IRT1 (ferrous iron transporter) y FRO2 (ferric-chelate reductase) en

raíces de arabidospsis con o sin aplicación de Benciladenina (6-BA) al suelo
 Mecanismo que implica el efecto de la aplicación exógena de citoquininas
al suelo sobre el bloqueo de la absorción de Fe II (FRO2 y IRT1)
Célula. Membrana Apoplasto Rizósfera

Hierro
insoluble

Solubilización
y chelatación
del Fe

Reducción
de férrico a
ferroso

Entrada de
Adaptado de Fe+2
Brumbarova et al., 2015
 Mecanismo que implica el efecto de la aplicación exógena de citoquininas
al suelo sobre el bloqueo de la absorción de Fe II (FRO2 y IRT1)
Célula. Membrana Apoplasto Rizósfera

Hierro
insoluble

Solubilización
y chelatación
del Fe

Reducción

X citoquininas
de férrico a
ferroso

Adaptado de
Brumbarova et al., 2015
X X Entrada de
Fe+2
 Relación entre diferentes hormonas vegetales y
su relación con la entrada de hierro

Etileno BR

Auxinas
ABA
NO

CK

JA

GA

Adaptado de Brumbarova et al., 2015

Promueven la entrada de Fe+2

Inhiben la entrada de Fe+2

 Consideraciones finales sobre citoquininas

• Las plantas pueden regular los niveles de citoquininas

activas (bases libres), principalmente a través de biosíntesis,
conjugación y degradación.

• Las citoquininas cumplen un papel fundamental en diversos

procesos en plantas, especialmente promoviendo la división
celular, síntesis de aa y crecimiento en parte aérea
(ramificación). Retrasan senescencia e inhiben crecimiento
de raíces según concentración.

• Su utilización estaba prácticamente restringida a cultivo in

vitro y a raleo. Hoy existen nuevas posibilidades de uso para
mejorar inducción y diferenciación floral, aumentar cuaja,
mejorar tamaño de frutos y posiblemente, mejorar tolerancia
a diversos tipos de estrés.