GUIA DE ESTUDIO DE EMBRIOLOGIA

¿concepto de embriología?
Ciencia que estudia la formación de un nuevo ser humano
¿en qué área?
En la genética donde se encargará el estudio y desarrollo del embrión
desde la fecundación hasta el nacimiento
¿desde donde comienza el origen del ser humano?
Comienza en la unión entre las células germinales que es
ovocito+espermatozoide
¿a este proceso se le llama?
Fecundación
¿Qué dará origen?
Al cigoto

¿Cuántos cromosomas tienen después de la unión de los gametos?

46 cromo
¿la división celular desde donde continuara y donde terminara?
Comenzará en la 3 semana y culminará en la semana 8
¿En se semana se dará inicia la semana fetal?
En la semana 8
¿Qué se da en la etapa fetal?
Formación de todos los órganos y sistemas (primordios)
¿En que etapa termina la semana 8?
En el nacimiento del bebe
¿La embriología humana se divide?
En dos clínica y humana
¿Qué estudia la humana?
El desarrollo y fetal y prenatal desde los conceptos generales
¿Qué estudia la clínica?
El desarrollo prenatal y fetal desde las implicaciones clínicas y áreas
medicas
¿la embriología se sub divide en?
Experimental, comparada, molecular o química
¿experimental que estudia?
Investigar el desarrollo y procesos anormales, normales y experimental
¿comparada que estudia?
Diversas similitudes y correlación morfológica
¿molecular o química que estudia?
El desarrollo del embrión a través de procesos químicos y molecular
¿Qué es el adn?
Molécula de la vida
¿Qué codifica?
Información genética
¿Qué controla el adn?
Controla la transmisión de información, como el lugar y actuación de la
misma, coordina una red de interacciones celular y tisular, controla su
duplicación y reparación y autorregulación.
¿Una molécula de adn esta constituida por?
Uniones covalentes, un azúcar (desoxirribosa) y una molécula de
fosfato
¿cada cadena esta unido por?
4 bases nitrogenadas adenina (A), guanina (G), citocina (C), tinina (T)
¿la unión entre ellas?
Puentes de hidrogeno
¿la molécula de ácido ribonucleico es?
ARN
¿la tinina es sustituida en el ARN por?
Uracilo (U)

¿todas las actividades son reguladas por?

Un código genético
¿Dónde se localiza el adn?
En el cromosoma mayormente

¿Cómo se denomina a los cambios del adn que pueden ser

ocasionados por teragenos?
Malformaciones cogenicas
¿Qué es leucina?
Síntesis de proteína
¿Qué es la alanina?
Síntesis de proteica
¿Qué es metanina?
Aumento muscular
¿Qué paso en 1869?
Miescher aísla el por primera vez el adn
¿Qué paso en 1944?
Avery demostró que contiene información genética y no proteínas
¿Qué paso en 1953?
Waltson y chick se propone la estructura de la doble hélice del adn
¿Qué paso en 1956?
Son identificados 23 pares de cromosomas en la célula de cuerpo
¿Qué paso en 1957?
Kormbeing describió la adn polimerasa 1
¿Quiénes descubrieron la restauración del adn?
Marmur y dotty
¿Qué paso en 1962?
Watson y Crick reciben el premio nobel por el descubrimiento del adn
¿Qué paso en 1962?
Alber propuso la primera evidencia de la existencia de las nucleasas
de restricción
¿Qué paso en 1966?
Se descifra el código genético completo del adn
¿Qué paso en 1967?
Geller descubrió enzimas de unión del adn
¿Qué paso en 1970?
Aparece la ingeniería genética molecular
¿Qué paso en 1972 a 1973?
Desarrollan técnicas de clonaje del adn en los laboratorios de boyer
¿Qué pasa en 1970?
Tiene lugar los primeros experimentos de la ingeniería genética
¿Qué paso en 1975?
Desarrollan métodos más rápidos de secuencia del adn por sanger y
Borrell
¿Qué paso en 1984?
Creación de las primeras plantas transgénicas (jitomate)
¿Qué paso en 1995?
Se completa las primeras secuencias completas de genomas de
organismos
¿Qué va a pasar el 2000 para adelante?
El proyecto genoma humano estará completo
¿Qué el adn recombinante?
El adn recombinante es una molécula artificial derivada de la unión de
dos fragmentos de adn de especies
¿tu propio concepto?
Aquella molécula de adn que utiliza enzimas para unir secuencias dos
secuencias heterólogas

¿Cuál es concepto de doctora islas del adn recombinante?

El adn recombinante es una nueva molécula genética resultado de la
unión de dos fragmentos de ácido desoxirribonucleico de dos especies
diferentes con la finalidad de mejorar las funciones células y de
supervivencia
¿Qué es la tecnología del adn recombinante?
Técnicas que permiten aislar un gen de un organismo
¿ejemplos?
Virus, bacterias, vegetales, fúngicos
¿Qué permite la tecnología del adn recombinante?
Aislar cualquier región del adn, averiguar su secuencia de nucleótidos
¿Cuáles son los procesos para originar el adn recombínate?
 Reconocer la secuencia de intereses
 Realizar un corte de la secuencia con intereses con encimas
 Incorporar la secuencia de intereses a un vector
 Introducir el vector a una célula hospedadora
 Propagación del cultivo o multiplicación
 Selección y obtención del producto
¿Qué dice el primer paso?
Reconocer la secuencia de intereses
¿por ejemplo?
el gen que codifica para la insulina, resistencia hacia el frio, resistencia
a una plaga
¿Qué dice el paso 2?
Se corta los fragmentos del vector
¿atreves de?
Enzimas de restricción

¿Qué dice el paso 3?

 Incorporar la secuencia de vector
¿ejemplos?
Plásmidos, cosmidos, bacterias, virus
¿Qué enzimas participan en el adn recombinante?
Endonucleasas, adn ligasa, adn polimerasa 1, transcriptasa inversa,
polinucleótida quinasa, transferasa terminal, exonucleasa 2,
exonucleasa de bacterias, fostasa alcalina

ENZIMAS FUNCION
ADN LIGASA Función unir y ligar dos moléculas o
fragmentos
DNA PLIMERASA Ocupan los espacios de adn dúplex
mediante adición escalonada de
nucleótidos en el extremo “3”
TRANSCRPNASA INVERSA Hacer una copia de adn a través de una
molécula de RNA
ENDONUCLESAS DE RESTRICCION Función rompen por secuencias el adn
especificas
POLINUCLETIDO QUINASA Añadir un grupo fosfato al grupo OH del
extremo “5” de un polinucleótido como
señalización o marcaje o para permitir la
ligación
TRANSFERENCIA TERMINAL Añaden colas homopolimericas al grupo
OH del extremo “3” de una hebra de adn
EXONUCLEASA 2 Eliminan residuos nucleótidos del extremo
“3” de una hebra de and
EXONUCLEASA DE Eliminar nucleótidos del extremo “5”
BACTERIOGRAFO
FOSFATA ALCALINA Eliminar fosfatos terminales de extremos 5
o 3 de ambos

¿Qué dice el paso 4?

Señalen el vector con el fragmento del adn a una molécula de
hospedadora
¿por ejemplos?
Célula animal, célula vegetal, bacterias
¿Qué dice el paso 5?
Propagación del cultivo o multiplicación donde llevaran el vector de
interés
¿Cómo hago la selección?
 Fluorescencia
 Marcadores
¿paso 5 y 6?
Se dejará que las células seleccionadas demultipliquen para obtenga
de energía modificadas

MANEJO DE MUESTRAS BIOLOGICOS PARA EL

DIANOSTICO MOLECULAS
¿Qué el diagnóstico molecular?
Es el estudio clínico, donde se realizará análisis de ácido
desorribonucleico, ácido ribonucleico como metabolitos y
macromoléculas
¿Cuál es objetivo del diagnóstico molecular?
 Detección de ciertos genotípicos
 Mutaciones
 Análisis de mutaciones
 Cambios bioquímicos asociados a alteraciones de la salud
 Detección de problemas de infecciones
 Estudios de folimurfismos
 Prevención y proponer nuevas terapéuticos para afecciones
detectadas
¿Cuáles son las materias de análisis moleculares?
  Ácido desorribonucleico
 Ácido ribonucleico
¿Cuáles fueron las primeras pruebas moleculares?
Enfermedades infecciosas que fueron hepatitis B y C y el virus de
papiloma humano
¿Cuáles son los tipos de muestras biológicas?
Orina, sangre, heces, vómitos y esputos, exudados
¿concepto de muestra biológica?
Depósito de información sobre las características genéticas del
individuo
¿Qué dice el marco normativo?
En toda institución de salud en donde se recibe investigación para la
salud
¿El marco normativo se divide en dos?
 Comisión ética
 Comisión de bioseguridad
¿El marco normativo con que constitución se asocia?
El articulo 99
¿Qué dice el articulo 99?
Reglamento de la ley general de la salud en materia de investigación
¿Qué dice el articulo 110?
Es atribución de la comisión de bioseguridad, emitir la opinión técnica
de los aspectos de bioseguridad de las investigaciones propuestas,
mediante las revisión de las instalaciones a fin garantizar el resguardo
de la integridad, física y biológica del personal

¿Cuáles son los datos importantes a la obtención de una muestra

biológicas?
  Para el diagnóstico molecular y
 Confines de investigación
¿Qué se le debe decir al paciente al obtener las muestras?
Se debe informar al paciente durante las consecuencias y los riesgos
de dicha atención a su organismo
¿Qué dice el proctólogo NOM-012-SSA3-2012?
Establece criterios de para la ejecución de proyectos de investigación
para la salud en seres vivos

Marco teorico Justification e

Antecedentes
Titulo de problems hipotesis

Material y Disenos de Aspectos Aspectos de Referencia

metodos estudios fisicicos bioseguridad

¿Qué se debe investigación principal de bioseguridad es?

 Debe de determinar el laboratorio y los procedimientos
 Determinar los riesgos reales y potenciales y darlos a conocer al
personal
 Determinar el nivel de contención física, seleccionar practicas
microbiológicos diseñar procedimientos
 Vigilar que el personal cumpla con los requisitos de profilaxis,
vacunación o previas serológicas
¿Cuáles son los aspectos de bioseguridad?
 Supervisar el manejo de muestra bioseguridad
 Haciendo el transporte de material infeccioso sea realizado
acorde a protocolos apropiados a la normatividad
 Informar sobre accidentes
¿A que ley general esta asociada en los aspectos de bioseguridad?
Ley general de salud, titulo IV en materia de bioseguridad
¿Cuáles todo el proceso que abarca bioseguridad?
Toma de muestra, transporte interno e externo, manejo y análisis,
material de equipo y movilidad, desechos
¿Cuáles son los aspectos de toma de muestra?
 Informar al paciente
 Técnica
 Posibles complicaciones
 Que material se utilizara
 Muestras ya sea sanguíneo o aspirado
¿Cuáles son los aspectos de traslado de muestra?
Interna: dentro de la unidad de salud
Externa: traslado a otros laboratorios (laboratorios estatales o
nacionales)
¿Cómo se origina el transporte y el ensamblaje?
Se va a originar en desechos donde se meterá en bolsas rojas y
amarilla o bote rígido o basura municipal
¿Qué significa RPBI?
Residuos peligrosos biológico infecciosos
¿Cuáles son los aspectos de manejo de análisis?
 Se ocupan máquinas de análisis específicos
 Determinan si hay un derrame de la muestra de qué manera se
limpiaría
¿Cuáles son agentes biológicos?
Muestras biológicas, cultivos celulares, microorganismos inocuos,
productos inmunizaciones, equipos de laboratorios

¿Qué contiene las muestras biológicas?

Exudados, sangre, LCR, orina, heces
¿Qué contiene los cultivos celulares?
Animales de experimentación
¿Qué contienen microorganismos inocuos?
Organismos genéticamente modificados
¿Qué contiene productos biológicos, inmunizados, equipos de
laboratorios?
RPBI
¿Con que fines se tratara el RPBI?
Con fines de investigación mas estricto cuando se trata de menores o
incapacitados, ya que se requiere la autorización de las
representaciones legales
¿Qué responsabilidad como personal de salud?
 Informar al personal en relación a la utilización de la muestra de
ejecución, donde continua un tracto sucesivo, un largo proceso
 El conocimiento responsable Asia la investigación por parte de
sujeto y garantiza a esta satisfacción del derecho a requerir
información cambio o existencia de nuevos datos y decisión
sobre la muestra ya sea como tinte
¿Por qué la extracción de ácidos nucleicos es fundamental?
Para procesos de biología molécula ya ADN recombínate
¿Cuál es objetivo de la extracción de ácidos nucleicos?
Obtenerlos purificados a partir de diversas fuentes para después un
análisis específico sobre PCR
¿Qué puede identificar la extracción de acido nucleicos?
 Determinar presencia de genes mediante marcadores para ver
organismo genéticamente modificados
 Presencia de mutaciones asociadas con enfermedades
genéticas
 Identificaciones una presencia de ADN o ARN en
microorganismos y virus donde se presencia
¿Concepto de extracción?
Obtención de componentes desde un compartimiento celular
¿En dónde se obtendrá ese compartimento celular?
En lisis, intervención de nucleasas, y clasificación y separación de
restos de células
¿Concepto de purificación?
Separación de ácidos nucleicos
¿En dónde se obtendrá la purificación?
De macromoléculas, de otros ácidos nucleicos, y otros compuestos
intracelulares
¿Cuál es su objetivo?
Obtención integrada de nucleicos desde una mezcla compleja
¿Ejemplos de una mezcla compleja?
Leucido, sveno, LCR, folículos capilares, plasma, liquido sinovial,
raspado bocal, esputo, semen
¿Cuáles son las enzimas que modifican los ácidos nucleicos?
 Endonucleasas de restricción I, II ,III
 Nucleasas
 Desoxibonucleasas
 Ribonucleasa
 Exonucleasas

Nucleasas Pertenecen al grupo cuya

Endonucleasas de restricción
función y actividades
enzimáticas permiten que la
célula rompa uniones
covalentes fosfodiéster en las
cadenas de ADN y del ARN
Variedad de nucleasas
presentes en direferentes
 células y especiales
principalmente bacterianas;
dentro de sus funciones fungen
herramientas para la dirección
del ADN ya que reconocen y
luego cortan pequeñas
secuencias específicas de
moléculas de ADN
Desoxirribonucleasas Son enzimas nucleasas cuya
función es realizar cortes en
uniones fosfodiéster en el ADN
Ribonucleasas Enzimas nucleasas encargadas
de las nucleasas que corten de
ARN, degradando cadenas
dobles o sencillas
Exonucleasas Estas enzimas realizan su
función en los extremos de los
ácidos nucleicos iniciando con
su rompimiento, en alguno de
los extremos 5 o 3
Endonucleasas No requieren extremos
presentes por lo tanto puedes
hidrolizar o romper moléculas
circúlales de ADN o ARN

DNA LIGASA  Función unir fragmentos de

DNA recién sintetizados
para formar una cadena
continua
 Poe ejemplo: dos
fragmentos de DNA tienen
extremos complementarios,
la DNA ligasa los une para
formar una molécula sin
interrupciones
  Usando ATP como fuente
de energía, y catalizando
una reacción en la reacción
en la que el grupo fosfato
del extremo 5 se une al
grupo hidroxilo del extremo
3 de la otra cadena
 Produciendo un esqueleto
de azúcar de fosfato intacto
FOSFATASAS  Actuando provocando la
hidrolisis (ruptura de los
grupos fosfatos terminales
de una cadena de DNA
 Genera moléculas de los
ácidos nucleicos
 Remueven grupos tanto de
extremos 5 como de los 3
generados por la acción
previa de las nucleasas
POLIMERASA DNA  Su función es catalizar la
síntesis de las nuevas
cadenas del DNA, usando
como molde o templado
una de las cadenas
originales, siendo por lo
tanto una de las enzimas
clave para la replicando del
DNA
CINASAS DNA  Catalizan la función
contraria a las fosfatasas,
es decir la fosforilación o
adición, de un grupo de
fosfato, en un extremo del
DNA
 En uso importante de este
tipo de enzimas es para
marcar el extremo 5 de una
 de DNA, mediante la
incorporación del isopo
reactivo de fosfato 32 en el
extremo, como parte del
grupo fosfato que se
incorpora
HELICASAS  Son capases de desenlazar
y separar dos hebras
sencillas que constituyen
una cadena de DNA
 Rompen los puentes de
hidrogenadas, haciendo
posible que otras enzimas
pueden copiar la secuencia
de ADN
TOPOISOMERASAS  Actúan sobre lo topología
de ADN ya sea
enredándolo para permitir
su compactación o
desenredándolo para el
control de la síntesis de las
proteínas y para facilitar la
replicación del mismo
 Tipo I y II
 La topoisomerasas tipo II:
modifican el número de
giros de una molécula de
DNA su per enrollando para
que requieren cortar la
doble hélice
 Las topoisomerasas tipo I:
cortan una de las dos
cadenas de ADN
bicatenario, relajan la
cadena y vuelve a unir de
la cadena
¿Qué es la electroforesis?
La electroforesis es una técnica de separación de moléculas, de
acuerdo a su tamaño y reactividad (westemeier 2005) y puede ser
utilizada en la separación de ADN
¿Qué técnica de electroforesis es mas utilizada?
Gen
¿Qué técnicas de electroforesis de gel son utilizadas más?
 Poliacrilamina
 Agarosa
¿Qué es en gel de agarosa?
 Este material se extrae en general las algas marinas y es
frecuente usada en biología molecular para separación de
moléculas, especialmente ADN por electroforesis (rochas y
lahaye, 1989
 Lentitud o rapidez de las moléculas
 La movilidad de la molécula en el gel esta influenciada por su
tamaño, las moléculas mas grandes migran mas lentamente
debido a que tienen mas resistencia al inferior del gel, mientras
que las moléculas pequeñas se desplazan mas rápidamente
(sambrook y resull, 2001
¿Cuáles son las características?
El ADN posee una carga negativamente debido a la persona de
grupos fosfato en su estructura, característica en bajo la influencia
de un campo eléctrico migran en dirección ya sea en carga positiva

¿Por qué se denomina electroforesis en gel?

Por que involucra el gel+la carga eléctrica
¿Qué significa Buffer?
Solución salina
¿Cuáles son las características de Buffer?
 Buffer TAE Tris-acetale-EDTA
 TAE es un tampón ampliamente utilizando para aplicaciones de
electroforesis en gel de agarosa que requieren una alta
resolución y separación de ADN bicatenario de alto molecular
 Ideal para recuperación de DNA y manipulaciones en gel
 Baja fuerza iónica
 Mejor resolución de grandes fragmentos de ADN > 12kb
 Mantiene la carga del ADN constante y sin alteraciones-
uniformidad
¿Cuáles son las funciones de Buffer?
 Regulaciones y mantenimiento del pH evita la degradación del
ADN
 Mantener el ADN lo mas integrado posible
 Evita el pH se vuelve muy acido o muy básico
¿otros ejemplos de conceptos de electroforesis?
 Técnica laboratorial utilizada para la separación de moléculas de
ácidos nucleicos u otras moléculas, tanto su tamaños y carga
eléctrica para mover moléculas a través de una placa de gel
polimérico natural o sintético
 Constiste en la migración proporcional de las moléculas a través
de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular
o tamaño: en un movimiento generado por el campo
 Basada en la diferencia capacidad migratoria en campo eléctrico
según su peso molecular y carga eléctrica
¿Qué es Blootting?
Transferencia de ácidos nucleicos o proteínas desde un gel hacia
una membrana conservando su posición.
¿En qué consiste la técnica Blootting?
Transfería, proteínas como ADN y ARN, sobre un portador. Las
proteínas ADN, o ARN Se visualizarán mediante la tinción se
colorantes, visualización autoradiografias de moléculas marcadas
radioactivas o marcaje especifico de algunas proteínas o ácidos
nucleicos
¿Quién fue Edwin southerh?
 Biólogo británico
 Profesor de bioquímica en la universidad de Oxford
 Transferencia de souther
¿En qué consiste la técnica de southern blot?
Técnica de análisis técnico donde usa la electroforesis para
detección de deleciones grandes en el ADN, algunas veces pasan
por alto cuando usan métodos con reacción en cadena de la
polimerasa (RCP) para el análisis genético
PASOS
¿Cuáles son los pasos de sounther blot?
 Extracción de adn
 Escisión de adn
 Electroforesis
 Transferencia
 Hibridación
 Visualización
¿en qué consiste en el paso uno de sounther blot?
Se realizará la obtención de ADN cromosómico de células
¿se puede extraer cualquier tejido humano?
Si
¿Cuáles son las fuentes de ADN?
Tejido hemático, secreciones, (semen) folículos capilar, saliva

¿Qué se con el ADN extraído?

Se hará una comparación con muestras diferentes de referencia,
con personas conocidas
¿En que consiste el paso dos de sounther blot?
En corte y fragmentación
¿Quién va hacer la fragmentación del ADN?
Es dada por las enzimas de restricción
¿Qué va hacer este mecanismo de fracturación?
Va hacer un corte o rotura de dos enlaces fosfodiéster en la doble
hebra de dos extremos de ADN
¿Se puede ser utilizado cuantas veces quieras en el laboratorio?
Si
¿En que consiste el paso tres de sounther blot?
La velocidad de migración del adn que se ve reducida en la matriz
del gel de agarosa, donde las moléculas de menor tamaño se
mueven más rápido que las mayor tamaño
¿Cuál es el resultado del paso tres?
Una separación que continua con los fragmentos de adn de
acuerdo con su tamaño, así como los fragmentos de menor tamaño
avanza la mayor distancia con referencia al origen o punto de
aplicación de la muestra
¿En que consiste el paso cuarto sounther blot?
Se analizará el ADN y es transferido hacia una membrana de
nitrocelulosa membranas de nallon
¿Esto se refiere?
Hace una replica del gel en papel de nitrocelulosa, al que el ADN se
adhiere firmemente y se agrega una sonda radiactiva, que se
hibrida al ADN en papel cuando encuentre una cadena
complementaria
¿Que contendrá la copia cuando se incuba?
La copia se incuba en una disolución que contiene una sonda
radiactiva de locus único
¿Después que se incuba que se hace?
Se lavará el exceso de sonda no unido, de modo que la
radiactividad que quede en la membrana de nailon sea asociada al
ADN del locus diana
¿Qué es una sonda?
fragmento de ácido nucleico con una secuencia de nucleótidos
conocida, tipicada y caracterizada como propia de un agente
infeccioso determinada
¿Qué debe tener la sonda?
Debe de tener unode los nucleicos marcado
¿Este marcador se llamará?
Fosforo 32 (32)
¿Qué pasara con los fragmentos no híbridos?
Se eliminarán con una serie de lavados
¿En qué consiste el paso seis sounther blot?
La membrana ya lavada del autoretrato, junto a la película de royos
x de una caja que las aislé de la luz
¿Qué revelara la película?
Registrara las posiciones donde hay desintegración radiactiva