Universidad Autónoma de Coahuila

Facultad de Ciencias Químicas

Reporte No. 2: “Determinación del Log D

de una droga”.

Dr. Luis Enrique Cobos Puc.

Nombre del estudiante: Jossue Emmanuel

Morales López.
Matrícula: 17013557

Fecha: 7 de febrero de 2023.

Introducción

Las membranas biológicas definen la extensión de la célula y mantiene diferencias

esenciales, entre el contenido de dichas membranas y su entorno. Estas
membranas son un filtro altamente selectivo, controla la entrada de nutrientes,
fármacos, algún tipo de xenobiotico y la salida de los productos residuales, además
de la diferencia en concentraciones de iones entre el interior y exterior de la célula
[1].

El paso de una droga a través de las membranas biológicas y la distribución en el

organismo, son dos factores determinantes en la capacidad de un fármaco para
alcanzar la Diana biológica con la cual va interaccionar para producir un efecto
biológico determinado [2].

Para Log D (D es el coeficiente de distribución), generalmente entre n-octanol y un

buffer acuoso, es utilizado para describir la lipofilicidad de una sustancia ionizable.
Entonces, el Log D de una sustancia ionizable se define como el cociente de las
concentraciones de las especies ionizada y no ionizada de un compuesto entre un
solvente orgánico y un medio acuoso a un determinado pH, el Log D describe el Log
P de un compuesto ionizable a un determinado pH [3].

En 1959, Brodie, Hogben, Schanker, Shore y Tocco desarrollaron una teoría del pH-
reparto, misma con la que pretendían explicar los procesos de absorción pasiva de
los fármacos y demás xenobioticos. De acuerdo a dicha teoría, las membranas
biológicas actuarían como barreras de tipo lipoideo y los procesos de penetracion a
través de las mismas se regirían por tres reglas básicas:
1. Se absorberían solo las formas no ionizadas al pH del medio, ya que solo
estas son lipófilas. Los iones no se absorberían.
2. La velocidad de absorción de las formas no ionizadas serían proporcional a
su coeficiente de reparto in vitro. El disolvente reproduciría la lipofilia de la
membrana (por ejemplificarlo).
3. Los ácidos se absorberían en el estómago donde estarían no ionizados en
su mayor parte y bases en el intestino, ácidos fuertes de pKa 3 o inferior y
bases fuertes pKa 8 o superior no se absorberían porque estarían totalmente
en el tracto digestivo [4].

Brodie explico para la absorción gástrica podría expresarse del siguiente modo:
Los fármacos ácidos (salicilato de sodio pKa= 2.79, se asume como ácido para uso
de esta práctica) presenta una tendencia a migrar hacia el plasma por absorción, a
ambos lados de la membrana, se establece entre las formas no ionizadas, la
migración del fármaco del lumen gástrico al plasma continuará hasta que a la larga
se absorberá por órganos y tejidos (farmacocinetica) [5].

El sistema coloidal entre aceite/agua, se conoce como coloide liofóbicos, los cuales
son dispersiones de un material que no posee afinidad para el medio dispersante o
“solvente” [6].

El salicilato de sodio es la sal de sodio del ácido salicílico. También conocido por
ser un fármaco antiinflamatorio no esteroides (AINE). El salicilato de sodio acetila
irreversiblemente las ciclooxigenasas I y II, inhibiendo así la síntesis de
prostaglandinas y la inflamación y dolor asociados. También puede activar la
proteína quinada activada por mitogeno, induciendo la apoptosis en las células
cancerosas [7].

Hipótesis.

Debido al pka del salicilato de sodio igual a 2.79, siendo cercano a 3 tendrá una
mejor absorción y la misma será dependiente del pH.

Material y método.

Materiales Cantidad
Pipeta volumétrica 10mL 1
Probeta de 50mL 1
Embudo de separación 8
60mL
Anillos para soporte 8
Soporte universal 8
Espectrofotometro UV- 1
visible
Cubetas de cuarzo 3
ultravioleta
Pipeta con agua destilada 1
Vaso de precipitado 8
p/lavados 50mL
Jeringas de succión 2
Agua destilada Cantidad necesaria
 Solución salicilato de 20mL
sodio en agua 0.20
mol/litro
Solución ácido cítrico 160 mL
0.10 mol/litro
Solución fosfató ácido 100mL
disodico 0.20 mol/litro
Papel secante 1 rollo
Potenciometro 1
Pipeta 1mL 1
Tubos de 10mL 10
Pipetas de 5mL 1

Metodología.
Parte 1:
1. Volúmenes requerido de solución A y B para elaborar amortiguadores Mc-
Ilvaine dentro de un intervalo de pH que va de 3.2-4.6 (para 50mL de
solución).

2. Primera parte del procedimiento consiste en la elaboración de la curva de

calibración para determinar colorimetricamente las concentraciones de
salicilato en las diferentes fases acuosas.

Parte 2: transferirá 1mL de soluciones estándar a cada tubo de 10mL con 4mL del
reactivo para desarrollar color y mezclar muy bien. Colocar la muestra en la celda
de cuarzo y leer a 540 nm, ajustando a 0 con un blanco de agua.

3. Preparar 40mL de una solución de salicilato de sodio a una concentración de

0.2M.
 4. Preparar 30mL de los amortiguadores de McIlvaine dentro de un intervalo de
pH que vaya de 3.2 a 4.6, en incrementos de 0.2 siguiendo lo señalado en la
tabla mostrada en la parte 1.
5. Colocar 2mL de la solución de salicilato de sodio 0.2M en un tubo de 15mL y
18 mL de cada amortiguador McIlavaine.
6. Colocar 20mL de cada solución en embudos separadores de 125mL, luego
adicione exactamente 20mL de n-octanol.
7. Agitar vigorosamente los embudos, luego deje reposar por 45 minutos hasta
que las fases se separen completamente.
8. Tomar la fase acuosa, colóquela en un matraz de 50mL y determinar el pH
con un potenció Metro.
9. De fase acuosa, obtenida usando distintos amortiguadores, tomar 1mL y
añadir 4mL del reactivo de color y leer a 540nm.
10. Tomar 1mL de la solución restante de salicilato de sodio 0.2 mol/litro, agregar
4mL de reactivo de color y leer en espectrofotometro (absorbancia inicial).
11. Calcular por diferencia la concentración total de salicilato en la fase oleosa
(Co) y obtener el coeficiente de partición aparente o Log P.
12. Calcular la recta de menor ajuste y r2.

Resultados.

Curva de calibración.

Concentración mg/mL Absorbancia

0 (blanco) 0.000
0.2 0.391
0.4 1.046
0.8 1.752
1.6 2.968
3.2 3.000

Datos del equipo 4 sin la

lectura de la solución de 0.2
M de salicilato de sodio.
 Curva de calibración salicilato
de sodio
4
3.5
3
2.5 Y= 0.938x + 0.5569
ABS

2 R2= 0.7808
1.5
1
0.5
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
CONCENTRACIÓN MG/ML

Abs Linear (Abs)

Curva de calibración datos equipo 3.

Concentración mg/mL Abs
3.2 3
1.6 1.477
0.8 0.707
0.4 0.164
0.2 0.072
0 0

0.2M (inicial) 3.000

CURVA CALIBRACIÓN SALICILATO DE

SODIO
Abs Linear (Abs)

3.5
3
2.5
Y= 0.9689x – 0.0978
Absorbancia

2
1.5 R2= 0.996
1
0.5
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
-0.5
[ ] mg/mL
Absorbancias de acuerdo a pH.

Obtención de concentraciones de salicilato de sodio en absorbancia inicial utilizando

ecuación de la recta.
Y= mx + b
X= (Y- (-0.0978))/ 0.9689

Salicilato de sodio 0.2M abs 3.316

X= (3.000 -(-0.0978)) / 0.9689
X= 3.197 mg/mL

Concentraciones de las absorbancias a distinto pH en fase acuosa, cálculo realizado

bajo la misma ecuación:

pH pH real Absorbancia Concentración

en fase acuosa
mg/mL
3.2 3.21 0.058 X= (0.058 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1608
3.4 3.37 0.049 X= (0.049 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1515
3.6 3.51 0.039 X= (0.039 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1411
3.8 3.6 0.038 X= (0.038 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1401
 4.0 3.85 0.036 X= (0.036 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1380
4.2 4.08 0.027 X= (0.027 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1288
4.4 4.22 0.037 X= (0.037 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1391
4.6 4.43 0.020 X= (0.020 – (-
0.0978)) / 0.9689
X= 0.1215

Cálculo por diferencia de concentración total de salicilato de sodio envase oleosa:

Concentración inicial de salicilato de sodio = 3.197 mg/mL

Co inicial – Ca en mg/mL de salicilato de sodio.

pH teórico de Concentración fase Concentración fase

amortiguador acuosa mg/mL oleosa mg/mL
3.2 0.1608 3.0362
3.4 0.1515 3.0455
3.6 0.1411 3.055
3.8 0.1401 3.0569
4.0 0.1380 3.059
4.2 0.1288 3.0682
4.4 0.1391 3.0579
4.6 0.1215 3.0755

Cálculo de Log P y Log D

Log P= (Co fase oleosa) / (Co fase acuosa)

Los D= Log P – Log (1 + 10(pka – pH))

- pH 3.2
P= 3.0362 (mg/mL) / 0.1608 (mg/mL) = Log (18.88)
Log P= 1.27
pH real 3.21 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(pka – pH))
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 3.21))
 Log D= 1.13

- pH 3.4
P= 3.0455 (mg/mL) / 0.1515 (mg/mL)= Log (20.10)
Log P= 1.30
pH real 3.37 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 3.37))
Log D= 1.19

- pH 3.6
P= 3.055 (mg/mL) / 0.1411 (mg/mL) = Log (21.65)
Log P= 1.33
pH real 3.51 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 3.51))
Log D= 1.25

- pH 3.8
P= 3.0569 (mg/mL) / 0.1401 (mg/mL)= Log (21.81)
Log P= 1.33
pH real 3.6 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log(1 + 10(2.79 – 3.6))
Log D= 1.26

- pH 4.0
P= 3.059 (mg/mL) / 0.1380 (mg/mL)= log (22.16)
Log P= 1.34
pH real 3.85 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 3.85))
Log D= 1.30

- pH 4.2
P= 3.0682 (mg/mL) / 0.1288 (mg/mL)= Log (23.82)
Log P= 1.37
pH real 4.08 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 4.08))
Log D= 1.34

- pH 4.4
P= 3.0579 (mg/mL) / 0.1391 (mg/mL)= Log (21.98)
Log P= 1.34
pH real 4.22 y pKa 2.79
 Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 4.22))
Log D= 1.32

- pH 4.6
P= 3.0755 (mg/mL) / 0.1215 (mg/mL)= Log (25.31)
Log P= 1.40
pH real 4.43 y pKa 2.79
Log D= Log P – Log (1 + 10(2.79 – 4.43))
Log D= 1.39

Observaciones
La práctica del equipo 4 tuvo errores de ejecución debido a que no se uso salicilato
de sodio, ni se midió la absorbancia de la solución 0.2M. Utilizando valores del
equipo 3 para realizar los cálculos, el valor de Log D fue en aumento.

Discusión.
Para fines prácticos de interpretar el resultado obtenido, se entiende como
coeficiente de distribución, como una propiedad termodinámica medida bajo
condiciones de equilibrio físico-químico específicas, permite describir
cuantitativamente las propiedades lipofilicas e hidrofilicas de una sustancia en
particular [8], el coeficiente de reparto para salicilato de sodio es de -1.43 [9], valores
que en cálculos realizados para este reporte se vieron muy por encima en cada
valor de Log D.
El valor de pKa para salicilato de sodio es de 2.79, catalogándolo en ácido débil, y
según la literatura se establece que la absorción de un ácido débil es dependiente
del pH [10], el pH es un factor crítico para todos aquellos medicamentos y sus dichas
formas farmacéuticas, además de la actividad del principio activo [11].
El valor obtenido en esta práctica es erróneo, puede deberse a que no se agregó
salicilato de sodio, y las concentraciones mostradas en los cálculos pueden deberse
por la presencia de compuestos como n-octanol o algún amortiguador.

Conclusión.
El valor de aumento en pH para el salicilato de sodio ayuda a la absorción del
fármaco dependiendo de la zona diana a la que se destina, los valores de los
cálculos fueron muy elevados, acción dependiente de la omisión de agregar
salicilato de sodio a los tubos Lara la curva y la absorción de la solución 0.2M de
salicilato de sodio.
Referencias

1. Arrazola, A. (1994). Biología de la membrana celular. Universidad pública de

Navarra, Pamplona. Departamento de bioquímica. Revista de Nefrología, Vol
4, Núm 4, pp 418-426.
2. Marín, J; Valencia, N; Rincón, J. (2011). Unidad 8: Determinación
experimental del coeficiente de reparto de barbitúricos. Universidad Nacional
de Colombia, p 3.
3. Influencia de la lipofilicidad en la biodisponibilidad de los fármacos.
Recuperado el 5 de febrero de 2023 de:
https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/237303/mod_folder/cont
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4. Shepard, A.; Reuning, R. Aarons, J. (1985). Estimación del área bajo la curva
para los medicamentos sujetos al ciclo enterohepatico. Journal of
pharmacokinetics and Biopharmaceutics, 13: pp 589-608.
5. Ocampo, P. (2013). Teoría del pH-reparto, pp 2-5.
6. Salager, J. Teorías relativas a la estabilidad de coloides liofobicos (DLVO y
Von Smoluchovski). Laboratorio de formulación, interfases, reología y
procesos. Universidad de Los Andes, 2007, p 1.
7. Centro Nacional de Información Biotecnológica. Resumen de compuestos de
PubChem para CID 16760658, salicilato de sodio. Recuperado el 5 de
febrero de 2023 de: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Sodium-
salicylate
8. Berrozpe, D. (2013). Tratado general de Biofarmacia y farmacocinetica II.
Síntesis.
9. Roth, C. (2017). Ficha de datos de seguridad para Salicilato de sodio. P 7.
10. Absorción de fármacos. (S. F.). PP 8-17.
11. Vazquez, S.; González, L.; Davila, M.; Crespo, C. (2018). Determinacion del
pH como criterio de calidad en la elaboración de fórmulas magistrales.
Revista farmacia hospitalaria.