Procedimiento 4.

Examinar cianobacterias

1. Examine un portaobjetos preparado de Oscillatoria, un filamento de células, y uno de Gloeocapsa,

una colonia de disposición suelta (fig. 4.3). Repase el Ejercicio 3 para conocer los pasos correctos para
usar el microscopio.

2. Enfoque con el objetivo de baja potencia.

3. Gire el objetivo de gran aumento hasta colocarlo en su lugar para ver los filamentos y las masas de
células.

4. Preparar una preparación húmeda de Oscillatoria y una de Gloeocapsa. Revise el procedimiento 3.5
en el Ejercicio 3 para preparar una preparación húmeda.

5. Observa las estructuras celulares y dibuja las formas celulares y los tamaños relativos de Oscillatoria y
Gloeocapsa en el siguiente espacio. Utilice un micrómetro ocular para medir sus dimensiones.

Procedimiento 4.3

Examine las células vivas de Elodea y los cloroplastos

1. Retire una hoja tierna de la punta de una ramita de Elodea. Elodea es una maleza de estanque común
que se usa con frecuencia en estudios de fotosíntesis, estructura celular y transmisión citoplasmática.

2. Coloque esta hoja, con la superficie superior hacia arriba, en una gota de agua en un portaobjetos de
microscopio. Las células de la superficie superior son más grandes y más fáciles de examinar. Agregue un
cubreobjetos, pero no deje que la hoja se seque. Agrega otra gota de agua si es necesario.

3. Examina la hoja con tu microscopio. Repase el ejercicio 3. Primero use un aumento bajo, luego alto,
para enfocar la capa superior de celdas (fig. 4.6). Cada una de las pequeñas unidades de forma regular
que ves son células rodeadas por paredes celulares hechas principalmente de celulosa (fig. 4.7). La
celulosa es un carbohidrato complejo hecho de moléculas de glucosa unidas de extremo a extremo. La
membrana plasmática se encuentra justo dentro de la pared celular. Dibuja lo que ves.

5. Determinar la distribución espacial de los cloroplastos dentro de una célula. Pueden ser empujados
contra los márgenes de la célula por la gran vacuola central que contiene principalmente agua y está
delimitada por una membrana vacuolar. La vacuola ocupa alrededor del 90% del volumen de una célula
madura. Sus muchas funciones incluyen el almacenamiento de moléculas orgánicas e inorgánicas, iones,
agua, enzimas y productos de desecho.

6. Buscar un núcleo; Es posible que el alcalde no sea fácilmente visible. Los núcleos suelen adherirse a la
pared celular como una esfera gris tenue del tamaño de un cloroplasto o más grande. La tinción de las
células con una gota de yodo puede realzar el núcleo. Si su preparación es particularmente buena, un
nucléolo puede verse como un punto denso en el núcleo.

7. Busque algunas células que pueden aparecer rosadas debido a los pigmentos solubles en agua
llamados antocianinas. Estos pigmentos dan a muchas flores y frutos su color rojizo brillante.
8. Calentar el portaobjetos con luz intensa durante unos 10 min y buscar movimiento de los
cloroplastos. Es posible que deba buscar muchas celdas o hacer una nueva preparación. Este
movimiento se denomina flujo citoplasmático o ciclosis. Los cloroplastos no son móviles; en cambio,
están siendo movidos por la actividad del citoplasma. Agregue agua si las células parecen estar
secándose.

9. En el siguiente espacio dibuje algunas celdas de Elodea; compare las celdas con las que se muestran
en la figura 4.6.

10. Cuando haya terminado de examinar Elodea, deseche el Elodea según lo especificado por su
instructor.

Procedimiento 4.4

Examinar paredes celulares y plasmodesmos.

1. Prepare una preparación húmeda de Elodea y examine las paredes celulares. Comience siempre su
examen con el aumento más bajo y pase con cautela a aumentos más altos. La lámina media puede
verse como una línea tenue entre las células.

2. Obtenga un portaobjetos preparado de tejido que muestre plasmodesmos. Este tejido puede ser
endospermo de caqui (Oiospyros), que tiene paredes primarias muy engrosadas. Dibuja lo que ves.

3. Localice la lámina media como una línea tenue entre las paredes celulares.

4. Localice los plasmodesmos que aparecen como líneas oscuras perpendiculares a la lámina media y
que conectan los protoplastos de las células adyacentes (fig. 4.9).

Procedimiento 4.5

Examinar la cebolla manchada

1. Cortar una cebolla roja en octavos y quitar una hoja carnosa.

2. Rompa la hoja hacia atrás y retire el trozo delgado de la epidermis interna que se formó en el
punto de ruptura (fig. 4.10), como lo demostró su instructor de laboratorio.
3. Coloque este tejido epidérmico en una gota de agua en un portaobjetos de microscopio,
agregue un cubreobjetos y examine el tejido e. Esta preparación debe tener una celda de
espesor. Siempre comience su examen con el aumento más bajo.
4. Teñir las células de cebolla colocando una pequeña gota de rojo neutro al 0,1 % en el borde del
cubreobjetos. Dibuje el rojo neutro a través de la muestra por mecha. Para absorber la solución,
sostenga el borde de una toalla de papel pequeña en el borde opuesto del cubreobjetos y
extraerá algo de líquido. Esto hará que el rojo neutro fluya sobre la cebolla y no alterará el tejido
debajo del cubreobjetos.
5. Mancha el tejido durante 5-10 min.
6. Enfoque cuidadosamente para distinguir la vacuola rodeada por el citoplasma teñido.
7. Buscar el núcleo de una célula (fig. 4.11). El núcleo e puede aparecer circular en la parte central
de la célula. En otras celdas puede aparecer aplanado.
8. Repita los pasos 1-7 y tiñe una nueva preparación de células de cebolla con otras manchas
disponibles, como azul de metileno.
9. En el siguiente espacio dibuje algunas de las células de cebolla teñidas.

Procedimiento 4.6
Examinar mitocondrias en células de cebolla
1. En un portaobjetos de vidrio limpio, mezcle dos o tres gotas de colorante Janus Green B con
una gota de sacarosa al 7%. EJERCICIO 4
2. Prepare un trozo delgado de epidermis de cebolla (como se indica en el procedimiento 4.5) y
móntelo en la solución de tinción. La preparación debe tener una celda de espesor. Para que las
mitocondrias se tiñan bien, las células de cebolla deben estar sanas y metabólicamente activas.
Agregue un cubreobjetos.
3. Busque en la periferia de las células para localizar las mitocondrias teñidas. Son pequeñas
esferas azules de aproximadamente 1 J.Lm de diámetro. El color se desvanecerá en 5 a 10
minutos, así que examine su muestra rápidamente y haga una nueva preparación si es
necesario.

Procedimiento 4.7
Examinar amiloplastos
1. Use una hoja de afeitar para hacer una sección delgada de un tubérculo de papa. Haz la
sección lo más delgada que puedas.
2. Coloque la sección en una gota de agua en un portaobjetos de microscopio y agregue un
cubreobjetos. Agregue otra gota de agua al borde si es necesario.
3. Localice los amiloplastos pequeños con forma de almeja dentro de las células. Un gran
aumento puede revelar las líneas excéntricas que distinguen las capas de almidón depositado en
los granos.
4. Tiñe la sección agregando una gota de yodo al borde del cubreobjetos. El yodo es una mancha
específica para el almidón It e (vea el Ejercicio 6, "Moléculas Biológicamente Importantes"). Si es
necesario, tire de la mancha debajo del cubreobjetos tocando una toalla de papel con el agua en
el borde opuesto del cubreobjetos.

Procedimiento 4.8
Examinar las células epiteliales humanas
1. Raspe suavemente el interior de su mejilla con el extremo ancho de un palillo de dientes
limpio.
2. Revuelva los raspados en una gota de agua en un portaobjetos de microscopio, agregue un
cubreobjetos y examine con su microscopio compuesto. Deseche los palillos de dientes usados
en un recipiente designado por su instructor.
3. Tiñe las células colocando una pequeña gota de azul de metileno en un borde del
cubreobjetos y pasándola por debajo del cubreobjetos con una toalla de papel absorbente
colocada en el lado opuesto del cubreobjetos.
4. Prepare otro portaobjetos y tiña las células con Janus Green B. Observe las mitocondrias.
5. Usa un micrómetro ocular o las dimensiones del FOV calculadas en el Ejercicio 3 para medir
las dimensiones de una célula epitelial humana.

Procedimiento 4.9
examinar ameba
1. Utilice un cuentagotas para obtener unas gotas del fondo de un cultivo de ameba. Examinar el
cultivo con un microscopio de disección puede ayudarlo a localizar algunos organismos.
2. Coloque los organismos en un portaobjetos de microscopio.
3. Agregue un cubreobjetos y use un microscopio compuesto para localizar una ameba viva. Su
instructor puede permitirle ver la ameba sin usar un cubreobjetos, pero verlos solo con un
aumento de 4x o 10x.
4. Disminuya la intensidad de la luz y observe una ameba durante unos minutos.
5. Ubique las estructuras que se muestran en la figura 4.13.
6. Examinar un portaobjetos preparado de Ameba teñida; luego observe una demostración de
Amoeba en un microscopio de campo oscuro si hay uno disponible.
7. Dibuja una ameba en el siguiente espacio.

Procedimiento 4. 10
examinar paramecio
1. Coloque un pequeño anillo de metilcelulosa en un portaobjetos de microscopio para reducir
la velocidad del paramecio.
2. Coloque una gota de un cultivo que contenga Paramecium dentro del anillo de metilcelulosa.
3. Use un palillo para mezclar la metilcelulosa con la gota de agua del cultivo de Paramecium.
4. Agregue un cubreobjetos y examine Paramecium con su microscopio compuesto. En la
superficie de Paramecium hay cilios, estructuras parecidas a pelos cortos que se usan para la
locomoción.
5. Examine un portaobjetos preparado de Paramecium teñido.
6. En el siguiente espacio, dibuje un Paramecium

Procedimiento 4. 1 1
Se le dará un portaobjetos de un organismo desconocido. Usa lo que has aprendido en el
laboratorio de hoy para identificar las células como procarióticas o eucarióticas; si son
eucariotas, identifique las células como vegetales, animales o protistas. Complete la tabla 4.2
antes de salir del laboratorio. Si se le indica que lo haga, entregue la tabla 4.2 antes de salir del
laboratorio.