Técnicas de Laboratorio de Nutrición Animal- GAN608

María Magdalena Crosby Galván

Reporte de Laboratorio de Nutrición

Animal

Determinación de amonio en líquido

(contenido) ruminal y extractos de
ensilaje, por espectrofotometría.

Vicuña Guerrero Alma Brenda y Moreno García

Guillermo Armando
Colegio De Postgraduados Campus Montecillo
Maestría en Ciencias, Programa de Recursos Genéticos y
Productividad-Ganadería
Colegio De Postgraduados Campus Veracruz
Maestría en Ciencias En Agroecosistemas Tropicales
Introducción
En las dietas de los rumiantes, el contenido de minerales interfiere con los
nutrientes de la dieta para el correcto desarrollo del animal, la eficiencia
alimenticia, y a su vez, para el aprovechamiento productivo, sea carne o leche;
donde la proteína cruda de la dieta, es mayormente interferida por los
microorganismos ruminales, generando grandes cantidades de nitrógeno
amoniacal (N-NH3), mismo, que al atravesar la pared ruminal se convierte en urea
en el hígado. El nitrógeno amoniacal, es la principal fuente de nitrógeno para las
baterías celulolíticas en el rumen, lo que, al mantener el nivel adecuado de este
compuesto, beneficia la fermentación ruminal; la fermentación, se asocia también
a los carbohidratos suministrados, los cuales presentan variaciones del pH ruminal
y de la producción de ácidos grasos volátiles (AGVs), que también influyen en la
producción animal (Hess et al., 1999). Sin embargo, al no cuidar la formulación de
las dietas, se puede provocar una toxicidad debido al exceso de amoníaco en el
rumen, y ejercer niveles de amoniaco en la sangre los cuales rebasarán el trabajo
del hígado para lograr eliminarlo (Sobrevilla, 2018).
El objetivo de la práctica es la determinación del nitrógeno amino en liquido
ruminal de diferentes dietas.

Materiales y Métodos
A. Adquisición de muestras 
El líquido ruminal para la determinación de nitrógeno amoniacal (NH 3) se obtuvo
del sobrenadante residual una vez que se terminó la Practica 5 “Determinacion de
digestibilidad verdadera método In Vitro-Incubadora Daisy” y se obtuvieron 4 ml de
líquido ruminal (Sobrenadante); cabe resaltar que el líquido ruminal había era el
resultado de la digestibilidad de insumos y dietas para rumiantes.
Descripción de los insumos y dietas de la Practica 5:
Muestras  AV1: 
 1. Avena forrajera (AvF). 
2. Concentrado para ovino lechero al 18 % de proteína (COviL). 
3. Micro dieta del 50% Forraje + 50% Concentrado al 12 % de proteína
(MicFC). 
*cada muestra se analizó por duplicado. 
Muestras GM2: 
Se utilizaron tres tratamientos administrados a los animales de forma de una dieta
integral, a continuación se describe el porcentaje de inclusión de cada insumo que
conformaba cada tratamiento. 
1. Tratamiento 1 (T1):
Ensilado de maíz (EnsM): 93 % de inclusión.
Concentrado Bovino Lechero al 18 % de proteína (CBL): 7 % de
inclusión.
Buffer: 0 % de inclusión. 
2. Tratamiento 2 (T2):
Ensilado de maíz (EnsM): 93 % de inclusión.
Concentrado Bovino Lechero al 18 % de proteína (CBL): 6 % de
inclusión.
Buffer: 1 % de inclusión.
3. Tratamiento 3 (T3):
Ensilado de maíz (EnsM): 91.7 % de inclusión.
Concentrado Bovino Lechero al 18 % de proteína (CBL): 7 % de
inclusión.
Buffer: 1.3 % de inclusión. 
*Cada muestra se analizó por triplicado 
B. Análisis de las muestras 
Para la recolección del líquido ruminal y para la determinación del NH3 se siguió la
metodología “Determinación de Amonio líquido (contenido) ruminal y extractos de
ensilaje, por espectrofotometría” del manual del Laboratorio de Nutrición Animal”
del Postgrado en recursos genéticos y productividad-Ganadera del Colegio de
Postgraduados campus Montecillo (2020).
C. Análisis estadístico 
Los datos obtenidos fueron analizados para la regresión lineal y R 2 para estimar el
porcentaje de NH3 presente en cada muestra (Figura 1) y se calculó mediante el
programa Excel 2013.

Curva de calibración
1.2

1
f(x) = 0.0491 x − 0.00205000000000005
0.8 R² = 0.999501992362224

0.6
X

0.4

0.2

0
0 5 10 15 20 25
Y

Figura 1. Grafica de regresión lineal y R2

Resultados y Discusión
Se encontró que en la repetición de la muestra GM2 se pudo haber tenido algún
error en el pipeteo al preparar las muestras para ser analizadas por el
espectrofotómetro (Cuadro 1); el % NH 3 general de nuestro liquido ruminal
analizado fue de 44.59 (±4.24).

Cuadro 1. Nitrógeno amoniacal de las diferentes muestras.

Absorbanci
Muestra Repetición % NH3
a
1 1.7500 44.61
GM2 (T1, T2 y T3)
2 1.5250 38.88
AV1 (Forraje y concentrado) 1 1.7980 45.83
 2 1.9240 49.04
T1: Tratamiento uno; T2: Tratamiento dos; T3: Tratamiento tres; % NH 3:
Porcentaje de nitrógeno amoniacal presente en las muestras de líquido
ruminal; Absorbancia: Reflexión de la luz medida por el espectrofotómetro.

Hernández et al., (2017) encontraron que dependiendo el porcentaje de adición

de aditivos como la levadura en dietas integrales (30 % concentrado y 70 %
forraje) van a garantizar una mejor digestión de la proteína a las12 h después de
la ingesta; en nuestro experimento los datos obtenidos nos indican que a las 48 h
aún hay digestión de la proteína por parte las bacterias y que los aditivos (buffer)
pueden estar ayudando en la digestión por parte de las bacterias ruínales.
Hess et al.,(s.f.) encontraron que la relación forraje concentrado en las dietas para
rumiantes dependerá de varios factores como: el animal, calidad del forraje y
concentrado, y el porcentaje de inclusión forraje concentrado en la dieta integral;
donde el porcentaje de NH3 puede llegar a variar entre el 40.7 y 293.9 mg/lt, y que
va estar altamente correlacionado a la PC presente en el forraje. Por lo que en
nuestro experimento concuerda con este autor ya que nuestro promedio del %
NH3 es de 44.59 (±4.24) estando dentro del 40 % NH3 que ellos indican.
Vera et al., (2011) en su trabajo de tesis encontró que el porcentaje de inclusión
del concentrado no va influenciar el % NH 3 en ovinos en pastoreo, pero que si
podrá ser diferente dependiendo a la especie (ovino o bovino), siendo conveniente
el analizar las muestras por separar debido a que las dietas están formuladas para
especie diferentes y así poder encontrar diferentes niveles de % NH 3 asociados al
tipo de dieta.
Conclusión
El % NH3 encontrado estuvo dentro a lo encontrado por diferentes autores,
además que el tipo de dieta, el %PC presente en la dieta y la especie van a ser
factores que influyan en la producción de Nitrógeno amoniacal en el rumen, por lo
cual es necesario poder comparar la digestibilidad asociada a la producción de
amoniaco en el rumen para las diferentes especies.
Anexos 

Referencias 

Jordán Álvaro Sotelo Villanueva. 2010. Dinámica de pH y N-NH3 ruminales en

vacas lecheras a pastoreo otoñal con dos ofertas de pradera y
suplementadas con concentrados fibrosos o amiláceos. Universidad Austral
de Chile.
Hess, H.D., Florez, H., González, E. y Ávila, M.1999.Efecto del nivel de nitrógeno
amoniacal en el rumen sobre el consumo voluntario y la digestibilidad in situ
de forrajes tropicales.
J. R. Huizenga, A. Tangerman and H. Gips. 1994. Determination of ammonia in
biological fluids. Ann Clin Biochem. 31:529-543.
Manual of laboratory techniques. 2013. Ruminant Nutrition laboratory. University of
Nebraska-Lincoln. Animal Science.
McCullough, H. 1967. The determination of ammonia in whole blood by direct
colorimetric method. Clin. Chern. 17:297-304.
Sobrevilla, H. G. 2018. Evaluación in vitro de ureas de lenta liberación para
rumiantes. Tesis de Maestría en Ciencia Animal. Universidad Autónoma De
Nuevo León. 1-52.
Hernández M. B., M. Murillo O., G. Pámanes C. y O. Reyes E. 2017. Parámetros
de fermentación y cinética ruminal en novillos suplementados con diferentes
aditivos. Investigación y Ciencia 25:5-11.
Hess H. D., H. Florez., E. González y M. Ávila. S.F. Efecto del nivel de nitrógeno
amoniacal en el rumen sobre consumo voluntario y digestibilidad in situ de
forrajes tropicales. Pasturas Tropicales, 20:43-49.
Vera J. R., L. I. Cuitiño de V. y G. L. Persak G. 2011. Ambiente ruminal y síntesis
de proteína microbiana de ovinos y bovinos pastoreando pastura templada
de buena calidad y suplementada con distintos niveles de grano de sorgo.
https://www.colibri.udelar.edu.uy/jspui/bitstream/20.500.12008/19934/1/FV-
29239.pdf Ultima consulta 06/12/2022