UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Facultad de Ciencias Biológicas

Escuela microbiología y parasitología
Curso: MICROBIOLOGÌA AMBIENTAL

Microorganismos de ambientes xenobióticos.

Mecanismos de resistencia a xenobióticos.
Operones Mer.

Dr. Tito Libio Sánchez Rojas

Docente de la EAPMP
 Transportadores ABC
● Los transportadores ABC son una gran familia de proteínas involucradas en el
transporte de una amplia variedad de compuestos.

● Los transportadores ABC son un subconjunto de proteínas transportadoras

del tipo hidrolasas, requieren de ATP y GTP (Marchler-Bauer et al., 2016).

● Cambian su conformación en los procesos de transporte de moléculas o

iones, pero no se fosforilan.

● Los transportadores ABC están formados por dos dominios funcionales: el

(TMD) y el dominio interno citoplasmático, más estable. Proteína “cassette”
unida al ATP (ABC).

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 Transportadores ABC
(b)

● Figura. (a) y (b)Transportadores ABC con sus dos dominios transmembrana TMD funcionales: un dominio transmembrana-
muy diverso entre las diferentes bombas y un dominio citoplásmico más conservado “cassette” de unión del ATP (ABC), en
donde reside la actividad ATPasa. ) El otro dominio funcional es el Dominio de Unión a Nucleótido (NBD), al cual se une el
ATP aportando energía para el cambio conformacional, que en última instancia provoca el transporte. Todos los
transportadores ABC tienen como mínimo dos dominios transmembrana TMD y dos NBDs (Marchler-Bauer et al., 2016). 3
 Proteínas de estrés
● Actualmente, se sabe que ciertos microorganismos adquieren gran potencial de adaptación hacia los
metales, esto debido a sus diversos mecanismos de resistencia, como quelación de metales por
fitoquelatinas y la activación del sistema antioxidante redox (AORS) para reducir especies reactivas de
oxígeno (ROS).

● La quelación de iones metálicos vía glutatión (GSH) y metalotioneína (MT) es un mecanismo que utilizan
los microorganismos para bloquear a los metales (Hosiner et al., 2014; Llivisaca et al., 2011).

● En estudios realizados en la familia de los transportadores ABC de S. pombe, se identificó al

transportador ABC2, proteína que media el transporte de FQs.

● En el caso de las metalotioneínas (MT) como la Cup1 en Saccharomyces cerevisiae, responde de forma
específica a altos niveles de cobre (Moore & Simpson, 1992).

● En presencia del ión cobre, se activan factores de transcripción, como el Ace2, activan al gen Cup1 que
codifica para las metalotioneínas, para luego transportarlos a la vacuola (Moore & Simpson, 1992).

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 Operón Mer

Resumen
La resistencia bacteriana a los compuestos de mercurio inorgánicos y orgánicos (HgR) es uno de los fenotipos
más ampliamente observados en las eubacterias.

Los loci que confieren los genes de resistencia a HgR en bacterias Gram-positivas o Gram-negativas típicamente
tienen como mínimo una enzima mercúrico reductasa (MerA) que reduce el Hg+2 iónico a vapor de Hg (0) volátil,
relativamente inerte, monoatómico y una proteína unida a la membrana ( MerT) para la absorción de Hg (II)
dispuesto en un operón bajo el control de MerR.

Muchos loci de HgR codifican una enzima adicional, MerB, que degrada los organomercuriales por protonólisis, y
proteínas aparentemente implicadas en el transporte.

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 Operón Mer

• Los genes que confieren resistencia a HgR se encuentran en cromosomas, plásmidos y

transposones y sus arreglos de operones pueden ser bastante diversos, y con frecuencia
implican duplicaciones de los genes estructurales mencionados anteriormente (Osborn A.M.,
1997).

• Pero existen organismos capaces de resistir la toxicidad del mercurio y degradar algunas
formas químicas de este metal y contribuyen en los procesos normales del ciclo global del
mercurio en el ambiente.

• La resistencia al mercurio de este tipo de bacterias se encuentra relacionada por los genes del
“operón Mer ” localizados en los plásmidos de las bacterias.
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Operones Mer

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Transposones y
plásmidos

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 Mapa del plásmido p5343_UC57 de Xantomonas sp.
 La parte p5343 (representada en azul) codifica proteínas
de dominio de hélice-giro-hélice (HTH) ión mercúrico
reductasa (MerA).
 Proteína de absorción de iones mercúricos (MerF),
 Proteína hipotética (Hyp2),
 Proteína periplásmica de transporte mercúrico (MerP),
 Proteína transporte mercúrico (MerT)
 Regulador de genes de resistencia al mercurio (MerR),
 Proteína de movilización A (MobA),
 Proteína de movilización C (MobC),
 Proteína hipotética (Hyp3),
 Proteína de replicación del plásmido (RepA),
 Proteína hipotética (Hyp1) y toxina RelE y antitoxina
(RelE)
 La parte pUC57 (representada en gris) codifica la
secuencia promotora del gen de resistencia a ampicilina
(promotor AmpR), marcador de resistencia a ampicilina
(AmpR), origen de replicación (Origin).
 Promotor Lac, marcador de selección LEU2 y elementos
que aseguran mantenimiento de plásmidos (CEN / 10
ARS).
 Representación esquemática del mecanismo regulador del gen merA inducido por mercurio mediante un
regulador transcripcional putativo, Slr0701 en la cyanobacteria Synechocystis sp. PCC6803

Representación esquemática del mecanismo regulador del

gen merA inducido por mercurio mediante un regulador
transcripcional putativo, Slr0701 en Synechocystis sp.
PCC6803.

(a) Los genes Slr0701 y Slr1849 están ubicados muy

separados entre sí, en el genoma de Synechocystis
sp . Slr0701 se expresa constitutivamente y regula su
propia expresión génica. Slr0701 se transcribe a partir
de un promotor débil.

(b) Cuando las células cianobacterianas interactúan con

iones Hg 2+ inorgánico, el complejo Slr0701‐Hg 2+ se
une al elemento regulador Cis ubicado aguas arriba
de su propio ORF, así como al slr1849 con mayor
afinidad y conduce a una expresión inducida.

Por tanto, Hg 2+ enlazado Slr0701 activa la expresión

dependiente del mercurio de Slr1849.
Slr1849 es una reductasa de mercurio inorgánico que
convierte el Hg 2+ en Hg0, el mercurio volátil se envía
fuera de la célula.
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Secuencia y análisis de un operón de resistencia al mercurio codificado en
plásmido de Mycobacterium marinum, se identifica MerH, un nuevo transportador
de iones mercúrios

Operón mer de M. marinum y genes circundantes.

Las flechas rellenas de gris representan genes circundantes que es poco probable que
participen directamente en la resistencia al Hg.
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13
Resistencia bacteriana a los átomos mercurio en los ecosistemas

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Operón Mer, sistema biológico que desintoxica las formas orgánicas e inorgánicas de
mercurio

Diagrama que muestra el

mecanismo de las proteínas
codificadas por el operón mer .

Esta reducción depende de

NADPH y requiere células
metabólicamente activas.

La actividad de las proteínas

codificadas por mer actúan
para reducir las especies
mercuriales inorgánicas y
orgánicas.

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 • Nutrientes del cultivo • Toxico para las malas
hierbas

FERTILIZANTES HIERBICIDAS

FUNGICIDAS INSECTICIDAS

• Toxico para los hongos • Toxico para los insectos

 AIRE AGUA SUELO BIOTA SEDIMENTO

Fotolisis Fotólisis
Fotolisis Metabolismo Hidrólisis

Hidrólisis Hidrólisis
Oxidación/
Ozonificación Bioacumulación
Reducción
Oxidación/ Oxidación/
Reducción Reducción

Oxidrilizacion Biodegradación Biodegradación

Biodegradación Biodegradación
TOXICIDAD EN EL SUELO y AGUA
• Nitritos tóxicos en el suelo por exceso de fertilizantes nitrogenados sintéticos (Urea, Nitrato de Amonio)
• Toxicidad del agua por presencia de nitritos

EUTROFIZACION DE CUERPOS DE AGUA

• Acumulación de filtraciones nitrogenadas impulsa el desarrollo acelerado de algas

EXCESIVO DESARR0LLO VEGETATIVO

• Demasiado follaje, agotamiento del suelo por extracción acelerada de nutrientes
• Poca fructificación, baja productividad: frutos y granos

DESTRUCCION DE ANTIOXIDANTES ORGANICOS EN FRUTOS Y SEMILLAS

• Aceleración delos procesos de descomposición microbiana
CONTAMINACION DE CUERPOS DE AGUA
• Bioacumulacion en plantas y animales
• Enfermedades por consumo de alimentos contaminados

CONTAMINACION DE LA BIODIVERSIDAD
• Peces contaminados afectados en hígado y branquias con Glifosato,

CONTAMINACION DE LAS PASTURAS Y GANADO

• Bioacumulacion

CONTAMINACION DE LA POBLACION
• Intoxicación por aspersión de Glifosato
CONTAMINACION DE COSECHAS
• Frutos
• Hojas

DESTRUCCION DE FAUNA BENEFICA

• Insectos depredadores de plagas
• Batracios depredadores de plagas

DESTRUCCION DE FAUNA REPRODUCTIVA

• Especies Polinizadoras
• Especies Dispersoras de semillas

CONTAMINACION DE CUERPOS DE AGUA

• Ríos
• Lagunas

CONTAMINACION DE FLORA Y FAUNA SILVESTRE

• Cadena alimentaria animal
• Plantas alimenticias

CONTAMINACION DE POBLACION HUMANA

Consumo de plantas, animales, hongos contaminados
DESTRUCCION DE LOS HONGOS DEL SUELO DESCOMPONEDORES DE
MATERIA ORGANICA

• No hay formación de humus, solo se forma la turba.

CONTAMINACION DE LOS CUERPOS DE AGUA

• Muerte de la micro biota acuática (Plancton)
• Muerte de la fauna acuática: Peces, caracoles, reptiles
• Agua no apta para el consumo humano y animal

CONTAMINACION DE COSECHAS
• Bio acumulación en alimentos
• Enfermedades tóxicas
 300 Toneladas anuales de Plaguicidas se aplican en los
cultivos de coca

INSECTICIDAS FERTILIZANTES

FUNGICIDAS HERBICIDAS
 ACTINOBACTERIAS

Procariotes diferentes: Microorganismos den ambientes xenobióticos

 GÉNERO STREPTOMYCES
(i) Son extremadamente abundantes e importantes para el suelo, implicados en el ciclo del
carbono (enzimas extracelulares). Streptomyces coelicolor A3(2), es el principal modelo.

(ii) Son la fuente natural más abundante de antibióticos (80%), antitumorales,

antiparisitarios y otros metabolitos secundarios bioactivos.
Bacterias y hongos utilizados en la degradación de pesticidas

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Evaluación de la influencia de la glucosa como inductor en la degradación del colorante textil navy
blue por un consorcio de levaduras (Tesis: Isabel Condori Román, 2020)

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 Microorganismos ambientales con capacidad para degradar compuestos
xenobióticos e hidrocarburos
Metabolismo aerobio
1. Pseudomona putida mt-2 (m-Xileno).
2. Pseudomona putida DOT-T1 (Tolueno).
3. Pseudomana sp. (Etilbeceno)
4. Sphingomonas yanoikuyaei B1 (m-Xileno).
5. Bacillus hexacarborum (Tolueno y m-Xileno).
6. Nocardia sp. ENV 425 (MTEB).
7. Pseudomoa putida CAM (MTBE).
8. Methylobacterium mesophilicum (MTBE).
9. Arthorobacter ilicis (MTBE).
10. Rodococus sp. (MTBE).
11. Acinetobacter calcoaceticus (Clorobenceno).
12. Pseudomona sp. (Fenol).
13. Pseudomona sp. (TNT).
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