UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE HONDURAS

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOLOGA

LABORATORIO DE GENTICA PARA MICROBIOLOGA

(MB-640)
EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS

PRCTICA # 1

GRUPO # 7
INTEGRANTES: Abner Obed Cortez 20081006955
Lessi Sarah Morales - 20101005925

INSTRUCTOR: Brayan Diddey Montoya

SECCIN: Lunes de 4 7 PM (1601)

CIUDAD UNIVERSITARIA, TEGUCIGALPA, FRANCISCO MORAZAN

HONDURAS
17/2/2014

OBJETIVOS
1. DESCRIBIR EL FUNDAMENTO DE LA TCNICA DE EXTRACCIN DE
CIDOS NUCLICOS.
2. IDENTIFICAR UN MTODO DE EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS
DE EUCARIOTAS.
3. CONOCER LA FUNCIN DE LA CADA UNO DE LOS REACTIVOS
UTILIZADOS.

INTRODUCCIN DEL GRUPO

A continuacin presentamos un informe realizado de nuestra prctica de laboratorio
bajo las instalaciones de la escuela de Biologa U.N.A.H. la cual es sobre extraccin de
cidos nucleicas a travs de material vegetal y el debido procedimiento esquematizado y
debidamente explicado y, demostrando los posteriores usos del mismo y con que fin se
usan los reactivos aqu mencionados.(13)

INTRODUCCIN
EXTRACCIN Y PURIFICACIN DE ADN
La extraccin y purificacin de cidos nucleicos constituye la primera etapa de la
mayora de los estudios de biologa molecular y de todas las tcnicas de
recombinacin de ADN.
A continuacin se recogen los principios de algunos de los mtodos de extraccin y
purificacin de cidos nucleicos que ms se emplean en la actualidad.
Mtodos de extraccin: El procedimiento de lisis idneo suele consistir en un
equilibrio de tcnicas y ha de ser suficientemente fuerte para romper el material
inicial complejo (un tejido, por ejemplo), pero suficientemente suave para preservar
el cido nucleico diana. Entre los procedimientos usuales de lisis figuran los
siguientes:
Rotura mecnica (trituracin, lisis hipotnica, etc.);
Tratamiento qumico (detergentes, agentes caotrpicos, reduccin con tioles, etc.);
Digestin enzimtica (Proteinasa K, etc.).
Es posible romper la membrana celular e inactivar las nucleasas intracelulares al
mismo tiempo.
Mtodos de purificacin: Los mtodos empleados para purificar los cidos
nucleicos de extractos celulares suelen ser combinaciones de dos o ms tcnicas de
las siguientes:
Extraccin/precipitacin: A menudo se efecta una extraccin con disolventes para
eliminar los contaminantes de los cidos nucleicos.
Cromatografa: Pueden emplearse diversas tcnicas cromatogrficas de separacin;
permeacin sobre gel, intercambio inico, adsorcin selectiva o unin por afinidad.
Centrifugacin: La centrifugacin selectiva constituye un mtodo de purificacin
eficaz.
Separacin por afinidad: En los ltimos aos, cada vez son ms los mtodos de
purificacin que combinan la inmovilizacin por afinidad de cidos nucleicos y la
separacin magntica.
Mtodo de extraccin y purificacin con CTAB
El protocolo del mtodo del bromuro de cetil-trimetil amonio (CTAB) fue elaborado
por Murray y Thompson en 1980 (Murray y Thompson, 1980) y publicado
posteriormente, en 1987, por Wagner y sus colaboradores (Wagner et al., 1987). El
mtodo es adecuado para extraer y purificar ADN de vegetales y alimentos
derivados de vegetales y est especialmente indicado para eliminar los polisacridos
y los compuestos polifenlicos, que, de otro modo, alteraran la pureza del ADN y,
por tanto, su calidad.
Principios del mtodo del CTAB: lisis, extraccin y precipitacin
Las clulas vegetales pueden lisarse con el detergente inico que forma un complejo
insoluble con los cidos nucleicos en medio hiposalino. De ese modo, los
polisacridos, los compuestos fenlicos y los dems contaminantes permanecen en
el sobrenadante y pueden eliminarse por lavado.

Lisis: rotura de la membrana celular y nuclear, para lo cual la muestra

homogeneizada se trata primero con el tampn de extraccin, que contiene EDTA,
Tris-HCl y CTAB. Dado que la composicin de los lpidos y del detergente es
similar, el componente de CTAB del tampn de extraccin captura los lpidos que
integran la membrana celular y nuclear. El EDTA es un componente quelante, que
se une al magnesio, entre otros metales. El magnesio es un cofactor de la
desoxirribonucleasa. Al unir el magnesio al EDTA, la actividad de la
desoxirribonucleasa presente disminuye. El Tris-HCl confiere a la solucin la
capacidad de amortiguar el pH.
Extraccin: En esta etapa, se separan los complejos formados por los cidos
Nucleicos y el CTAB de los polisacridos, los compuestos fenlicos, las protenas y
los dems lisados celulares disueltos en la solucin acuosa. Es especialmente
importante eliminar los polisacridos y los compuestos fenlicos, pues pueden
inhibir numerosas reacciones enzimticas. El cloroformo desnaturaliza las protenas
y facilita la separacin de las fases acuosa y orgnica, la fase acuosa suele constituir
la fase superior.
Precipitacin: En esta ltima etapa se separan los cidos nucleicos del detergente,
para lo cual la solucin acuosa se trata primero con una solucin de precipitacin
compuesta por una mezcla de CTAB y NaCl en concentracin elevada (NaCl >
0,8 M). Una alta concentracin salina es necesaria para que se forme un precipitado
de cidos nucleicos. Puede ser preferible emplear acetato de sodio en lugar de NaCl
por su capacidad tampn. En estas condiciones, el detergente, que es ms soluble en
alcohol que en agua, puede eliminarse por lavado, mientras que los cidos nucleicos
precipitan. El posterior tratamiento con etanol al 70 % permite una mayor
purificacin o elucin de los cidos nucleicos de la sal residual.
Cuantificacin del ADN mediante espectrofotometra
El ADN, el ARN, los oligonucletidos e incluso los mononucletidos pueden
cuantificarse directamente en soluciones acuosas, en forma diluida o sin diluir,
midiendo la absorbancia de luz ultravioleta (tambin puede hacerse en el intervalo
visible). La concentracin de cidos nucleicos suele determinarse midiendo a 260
nm y comparando con un blanco. La interferencia de contaminantes puede
determinarse calculando un cociente. Dado que las protenas absorben a 280 nm,
se emplea el cociente A260/A280 para calcular la pureza de los cidos nucleicos.
Los cocientes respectivos del ADN y el ARN puros son aproximadamente de 1,8 y
2,0. Una absorcin a 230 nm significa que la muestra est contaminada con hidratos
de carbono, pptidos, fenoles, compuestos aromticos u otras sustancias. El cociente
A260/A230 de las muestras puras es de 2,2 aproximadamente.
Cuando la cantidad disponible de cidos nucleicos es escasa, puede emplearse el
mtodo de la placa de agarosa con bromuro de etidio. Permite calcular la cantidad
de cidos nucleicos a partir de la intensidad de la fluorescencia emitida por el
bromuro de etidio irradiado con luz UV, comparndola con unos patrones de
concentracin.(1)

MATERIALES Y EQUIPOS
1. MICROTUBOS 1.5 mL
2. MICROPISTILOS
3. MICROPIPETAS
4. PUNTAS PARA MICROPIPETAS
5. MICROCENTRIFUGA
6. PLATO CALIENTE
7. MATERIAL VEGETAL

DISCUSIN
Una vez entregado el material vegetal se procede a la manipulacin y corte del mismo,
en este paso se eliminan totalmente sus nervaduras y se disminuye su tamao, estos
pasos con 2 propsitos: cortar la fuente de alimentacin de la hoja, para as evitar
interferencia de los metabolitos presentes en ella; aumentar la superficie de contacto con
el disolvente y mejorar la maceracin del proceso, una vez hecho esto se procede a
introducir los fragmentos de la hoja y luego agregar el CTAB 2%(1 mL), esto por varias
razones: el CTAB es un detergente inico, esto da como resultado la formacin de un
complejo de impurezas del material que se observar en el sobrenadante, tiene como
principio bsico el de todos los detergentes, que sus micelas actan atrayendo las
impurezas de la solucin ests por tener igual estructura qumica que ellas cabezas
hidrfilas y colas hidrfobas, que ser descartable ms adelante en el lavado. Luego de
macerar durante 15 minutos, se coloca en incubacin por 40 minutos en 64 C este paso
usndose como catalizador de la reaccin, luego de ello se procede agregar una solucin
en proporcin de 24:1 Cloroformo:Octanol (500 MicroL) para la separacin de las
fases, ya que este compuesto tiene la facilidad de volver insolubles las protenas o
inclusive desnaturalizar las mismas dentro de la reaccin, volvindolas impurezas
dentro de la solucin. Luego se transportan los microtubos a la microcentrifugadora,
centrifugamos por 15 minutos a 10, 000 RPM ya equiparada, pasado este tiempo y al
sacar los microtubos se concluye extrayendo la fase acuosa quedando el residuo del
material vegetal por debajo del tubo, transferidos estos microlitros (400-600 MicroL) de
la fase acuosa a un tubo nuevo, procederamos agregar isopropanol fro (600-800
MicroL) para precipitar el ADN y adems de ello elimina compuestos anteriores que
podran interferir dentro de nuestro extracto, luego de ello se transporta de nuevo a
centrifugar pero esta vez por 10 minutos y a 14,000 RPM, al pasar de estos minutos
descartamos el sobrenadante y teniendo mucho cuidado de no descartar el Pellet
formado, concluido ello agregamos Etanol al 70% fro (450 MicroL) para lavar el pellet
y as evitar cualquier tipo de impurezas de los anteriores lavados y posibles residuos del
sobrenadante anterior, luego se elimina y sus restos se evaporaran a TA o 60 C,
agregamos agua destilada (60-120 MicroL) y almacenamos para su posterior uso, el
cual puede ser:
1. Clonaje
2. Amplificacin: cadena de polimerasa PCR
3. Secuenciacin. (2)

CUESTIONARIO
1. Investigue los siguientes trminos:

EDTA

Sinnimos: AEDT, cido edtico, cido de tetrino.

El cido etilendiaminotetraactico es un polvo cristalino, incoloro o blanco e inodoro.
Se utiliza en anlisis qumicos, tintura de textiles, y en detergentes, jabones y champs.
Tambin se emplea en procesos industriales y en medicina para quelar metales.(12)

CTAB

Sinnimos: Bromuro de Cretimonio

Aspecto de la solucin - Transferir 2,0 g de Bromuro de Cetrimonio
a un matraz volumtrico de 100 mL, disolver y diluir a volumen en agua previamente
hervida y enfriada: la solucin es transparente e incolora.
Es un surfactante catinico. Sus usos incluyen la utilizacin como solucin tamponante
para la extraccin de ADN. Y es uno de los compuestos del antisptico tpico
Cetrimide. El catin cetiltrimetilamonio es un agente antisptico efectivo contra
bacterias y hongos. Como cualquier otro surfactante forma micelas en solucin acuosa.
El CTAB es un detergente catinico que tiene la propiedad de precipitar cidos
nucleicos y polisacridos cidos en soluciones de baja concentracin inica. Bajo estas
condiciones las protenas y los polisacridos neutros permanecen en solucin.(12)

CLOROFORMO

Es un lquido incoloro con un olor dulce y agradable. Se utiliza como disolvente y para
fabricar refrigerantes, resinas y plsticos. Ya no se usa como anestsico.
El umbral del olor es de 2.4 85 ppm, varia mucho, ya que no depende solo del olor
solamente, sino que determina tambin su exposicin potencialmente peligrosa. Es
potencialmente carcingeno y al incendiarse es produce gases txicos.(12)

OCTANOL

El Alcohol Octlico 1-Octanol es un alcohol de 8 carbones, lquido incoloro con un

penetrante olor. Es insoluble en agua y flota sobre el agua, sus vapores son ms pesados
que el aire. En lodos base agua, se usa como antiespumante. Se utiliza como
componente de diluyentes especiales, en la fabricacin de su ster actico y en otros
procesos. Sirve como disolvente de referencia para determinar el comportamiento de las
sustancias frente a los lpidos, que se deduce conociendo del coeficiente de reparto
(proporcin en la que un compuesto se distribuye entre un medio hidrfilo y un medio
Lipfilo).(8)

ETANOL

Conocido como alcohol etlico, es un alcohol que se presenta como un Lquido incoloro
e inflamable con un punto de ebullicin de 78 C. Al mezclarse con agua en cualquier
proporcin, da una mezcla azeotrpica. Su frmula qumica es CH3-CH2-OH, principal
producto de las bebidas alcohlicas como el vino (15% aproximadamente), la cerveza
(5%) licores (hasta 50%). Se usa como disolvente altamente polar, de sabor dulce por su
caracterstica cida.
Es producido por la fermentacin de plantas de azcar, maz y otros productos de grano
en Latinoamrica maz y otros productos de grano, en Latinoamrica principalmente de
caa de azcar. Para su uso comercial e industrial, siempre es desnaturalizado (es decir,
se le adicionan pequeas cantidades de substancias nocivas para evitar su mal uso como
bebida alcohlica.(9)

ISOPROPANOL

El isopropanol es un alto volumen de produccin qumica que se usa como disolvente

industrial, una componente de los productos industriales y de consumo y como
desinfectante. Existe una considerable potencial tanto para el trabajo y la exposicin de
los consumidores. Hay estimaciones de las emisiones fugitivas significativos.
Biodegradacin en acutica y terrestre hbitats, una degradacin fsica en la troposfera
se producen con rapidez, lo que indica que se isopropanol no persistir en el medio
ambiente.
La mayora de isopropanol entra en el mercado disolvente ya sea directamente o a travs
de la conversin a la acetona o una de sus derivados de acetona - isobutil metil cetona,
metil isobutil carbinol, alcohol de diacetona, o isoforona. Principales usos de solvente
de isopropanol incluyen tintas, recubrimientos, cosmticos y productos farmacuticos.
Porcentajes pequeos se utilizan para los steres y, como alcohol. Este se utiliza como
un agente de sabor, espuma inhibidor y un agente de deshielo de los parabrisas de los
automviles. Se utiliza en la produccin de acetona, acetato de isopropilo,
isopropilamina, ter de diisopropilo, xantato de isopropilo, steres de herbicidas e
isopropxido de aluminio. En contraste, Japn no utiliza isopropanol para producir
acetona. La mayora de los usos importantes para isopropanol en Japn son como
disolventes en los revestimientos de superficie y en las tintas.(12)

AGUA DESTILADA

Es aquella que como todo tipo de agua esta compuesta por dos tomos de hidrgeno y
uno de oxgeno, cuya molcula se representa qumicamente por la frmula H2O y que
mediante el proceso de destilacin se le han eliminado las impurezas e iones. Incolora,
inodora y sin sabor, solvente universal.
La destilacin se usa para purificar el agua desde hace mucho tiempo, en este proceso
los contaminantes disueltos tales como las sales disueltas se quedan en el tanque donde
el agua hierve, mientras que el vapor de agua libre de impurezas se eleva hacia fuera.
Puede no funcionar si los contaminantes son voltiles, como el alcohol disuelto, en estos
casos los contaminantes tambin hierven y se recondensan. (12)

CLON

La palabra clon (el trmino se debe a J. B. S. Haldane, 1963) procede del griego, y
significa brote, retoo o esqueje, y tambin multitud. Por clonacin se
entienden los procedimientos tcnicos (artificiales) dirigidos a conseguir de una unidad
vital (clula, organismo vivo), por multiplicacin asexual, individuos genticamente
idnticos a ella y entre s. En realidad significa hacer un ser vivo o sus partes
exactamente iguales a otro u otras (es una fotocopia, una rplica). Es una definicin en
la que se incluye la clonacin molecular, y a veces la gemelacin (los gemelos
monocigticos, univitelinos o verdaderos son clones naturales), lo que obviamente es
incorrecto pues en ella no hay transferencia de ncleo, y la paraclonacin.
A la vez que se realiza la clonacin tcnica en animales se pueden incorporar diversos
genes a las clulas germinales (transgenia), para mejora, y particularmente para que se
expresen y produzcan (en la leche, por ejemplo) las protenas correspondientes
(productos farmacuticos, etc.) o clulas y tejidos utilizables con diversos fines
(investigacin o transplantes), todos ellos de utilidad principalmente en la medicina.
Clonacin-fertilizacin
La clonacin (mejor sera denominarla transferencia de ncleos) se diferencia
claramente de la fertilizacin (fecundacin), proceso que consiste en la fusin de un
espermatozoide (con 23 cromosomas) con el vulo (con 23 cromosomas) en que ha
penetrado de manera sexuada o asexuada, fusin que ocasionar una nueva clula o
cigoto con los 46 cromosomas de los progenitores, y que se dividir por activacin
espontnea, producindose el intercambio de los cromosomas y sus genes en la fase de
divisin posterior de 2-4-6 y hasta 8 clulas o blastmeros. En cambio, la clula creada
por clonacin no es un cigoto, y consecuentemente ha de tener un nombre, as que la he
llamado nuclvulo. Debidamente estimulado en el laboratorio (elctrica, qumica
-microinyeccin de Oscilina-, fsica ionforo de calcio-, etc.), el nuclvulo tambin
puede dividirse por mitosis y dar lugar a un preembrin de dos clulas o blastmeros,
despus de varias clulas, a un conglomerado de clulas en forma de mora (la mrula) y
hacia el 5-6 da, al blastocisto. Ambos, nuclvulo y cigoto pueden desarrollarse como
embriones Preimplantatorios (preembriones), embriones propiamente dichos
(postimplntato- rios), fetos, y, finalmente, dar lugar a descendencia.(3)

ENZIMA

Una enzima es una protena con propiedades catalticas, elaborada por la clula,
susceptible de ser regulada y que adems presenta, como veremos ms adelante, un alto
grado de especificidad.
Como todo catalizador, aceleran notablemente la velocidad de una reaccin qumica y
cumple con las siguientes condiciones:
a) Son efectivas en cantidades pequeas
b) No sufren modificaciones ni cualitativas ni cuantitativas al final de la reaccin. Es
decir deben quedar qumicamente inalteradas.
c) No afectan la posicin de la reaccin que catalizan. Es decir se llega mucho ms
rpidamente al equilibrio, pero el mismo es igual al que se llegara en ausencia del
catalizador.

Pero adems de cumplir estas condiciones propias de todos los catalizadores, las
enzimas presentan una serie de caractersticas, derivadas de su naturaleza proteica que
las diferencia netamente de los catalizadores inorgnicos:
a) Son termolbiles
b) Presentan una mayor eficiencia. Entendiendo por eficiencia en este caso al numero de
moles de sustrato transformado por mol de catalizador en la unidad de tiempo.
c) Presentan alta especificidad en relacin a la naturaleza de la reaccin que catalizan y
al sustrato que utilizan.
d) Estn sujetas a una gran variedad de controles celulares. (5)

GEN

Los genes son fragmentos de ADN empaquetados en cromosomas.

Toda la informacin gentica est almacenada en cada clula de nuestro cuerpo. El
material gentico que contiene esta informacin es el ADN, comprimido y empaquetado
en unas estructuras alargadas visibles al microscopio llamadas cromosomas. Los genes
son fragmentos de la cadena de ADN con instrucciones especficas para la produccin
de diferentes protenas que controlan el desarrollo y el funcionamiento de nuestro
organismo.
Unos 30.000 genes repartidos en cada juego de 23 cromosomas.
Tenemos 46 cromosomas en el ncleo de cada clula de nuestro cuerpo. Estos 46
cromosomas son realmente dos juegos o 23 pares. Recibimos un juego de nuestra madre
y otro de nuestro padre, a travs del vulo y del espermatozoide, respectivamente. Con
la excepcin de un par, los 22 restantes son prcticamente idnticos y se han numerado
del 1 al 22, del ms largo al ms corto. El par 23, el ltimo y el nico desigual, lo
forman los cromosomas sexuales (X e Y): Se llaman as porque las mujeres tiene
Dos cromosomas X (46,XX), mientras que los hombres tienen uno de cada (46,XY).(4)
PLSMIDO
Los plsmidos son elementos genticos extra-cromosomales que pueden llevar a cabo
una replicacin autnoma. Un episoma es un plsmido que adems es capaz de
integrarse al cromosoma bacteriano.
Clasificacin de los Plsmidos:
1. Propiedades de Transferencia:
Plsmidos Conjugativos - Los plsmidos conjugativos son aquellos que son los
mediadores del proceso de la conjugacin.
Plsmidos No-conjugativos - Estos son plsmidos usualmente ms pequeos que los
plsmidos conjugativos y carecen de uno o ms de los genes necesarios para la
transferencia del DNA.
2. Efectos en el fenotipo:
a. Plsmido de Fertilidad (factor F)
b. Plsmidos Bacteriocinognicos - Estos plsmidos poseen genes que codifican para
substancias que matan a otras bacterias. Dichas substancias se llaman bacteriocinas o
colicinas.

c. Plsmidos de Resistencia (factores R) - Estos plsmidos acarrean genes de

resistencia a los antibiticos.(6)

VECTOR

Vector biolgico: agente orgnico (generalmente artrpodo) que acta como

intermediario en el transporte y transmisin de un microorganismo patgeno; la
enfermedad mediada por vector no es mas que las patologas en que se necesita de un
vector para la transmisin del patgeno, del organismo reservorio al organismo diana
(pudiendo ser ambos organismos de la misma especie). El vector no es patgeno por si
mismo, nicamente el microorganismo que transmite. Ejemplos: Paludismo,
Enfermedad de Chagas, West Nile Virus. (7)
2.

EXTRACCIN DE ADN DE TIPO CASERO

MATERIAL Y REACTIVOS
Muestra vegetal
Agua (destilada o mineral)
Sal de mesa
Bicarbonato sdico
Detergente lquido o champ
Alcohol isoamlico a 0C
Batidora
Nevera
Colador o centrfuga
Vaso
Tubo de ensayo
Varilla fina
La extraccin de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones
salinos son atrados hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolucin y
posterior extraccin de la clula.
Se empieza por lisar (romper) las clulas mediante un detergente, vacindose su
contenido molecular en una disolucin tampn en la que se disuelve el ADN. En ese
momento, el tampn contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, protenas y otras sustancias en menor proporcin.
Slo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente, para lo
cual se utiliza alcohol isoamlico, probablemente el nico reactivo de esta prctica que
no suele haber en una cocina.

REALIZACIN
1. Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un
bao de hielo triturado o 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar
agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura, 5 g de bicarbonato sdico, 5
ml de detergente lquido o champ.

2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber
en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a
impulsos de 10 segundos. As se rompern muchas clulas y otras quedarn expuestas a
la accin del detergente.
4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampn fro y
agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar despus los restos vegetales
ms grandes del caldo molecular hacindolo pasar por un colador lo ms fino posible.
Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y despus pipetear el sobrenadante.
5. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de
alcohol isoamlico enfriado a 0C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la
cara interna del recipiente, teniendo ste inclinado. El alcohol quedar flotando sobre el
tampn.
6. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separacin entre
el alcohol y el tampn. Remover la varilla hacia delante y hacia atrs y poco a poco se
irn enrollando los fragmentos de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto retirar la
varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar adherido a su
extremo con el aspecto de un copo de algodn mojado.
RESULTADOS
El producto filamentoso obtenido de la extraccin no es ADN puro ya que,
entremezclado con l, hay fragmentos de ARN. Una extraccin "profesional" se realiza
aadiendo enzimas que fragmentan las molculas de ARN e impiden que se unan al
ADN. (10)
3. DE QU DEPENDE LA EXTRACCIN DE ADN?

cido nucleico diana

organismo fuente
material inicial (tejido, hoja, semilla, material transformado, etc.)
resultados deseados (rendimiento, pureza, tiempo que requiere la purificacin)
uso posterior (PCR, clonacin, etiquetado, transferencia, RT-PCR, sntesis de
ADNc, etc.).(11)

4. QU APLICACIONES TIENE LA EXTRACCIN DE ADN?

La extraccin del ADN es una de las ms modernas de las ciencias biolgicas. Se
utiliza para diagnosticar muchas condiciones mdicas y tambin se puede utilizar
para la ingeniera gentica de plantas y animales. La extraccin de ADN tambin se
puede utilizar para reunir pruebas en una investigacin criminal.

CONCLUSIONES

Al realiza el mtodo de extraccin de cidos nucleicos, se describe su

fundamento y los posteriores usos de la misma dentro de sus distintos
campos.

Se identifica el mtodo de extraccin para Eucariotas, tanto como el de

material vegetal y animal dentro de casa, como se lleva a cabo y que lleva a
la ruptura de la clula dentro de las distintas mezclas usadas.

En el uso de distintos reactivos que se hizo, se dio a conocer el uso de ellos

dentro del mismo procedimiento y que reacciones conlleva estos y su fin
primordial en la mezcla y extraccin de componentes.

BIBLIOGRAFA
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Presencia de Organismos Genticamente Modificados en Muestras de
Alimentos, JCR European Comission.
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PARTIR DE HECES, XXII, NEIKER (Instituto Vasco de Investigacin y
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