CONCENTRACIÓN Y CURVA DE CALIBRACIÓN: LEY DE BEER

ESTUDIANTES

MIGUEL ANGEL GALLEGO CARVAJAL

NATHALIA FORERO SARMIENTO

SAYRA SMITCH SANCHEZ PEÑA

PROFESOR

ALEJANDRO SERNA GONZALES

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y ALIMENTARIAS

INGENIERÍA DE ALIMENTOS - SEMESTRE 2022-1

Medellín, Mayo 2022

OBJETIVOS

 Desarrollar conocimientos acerca de la relación entre la cantidad de radiación

absorbida por soluciones y la concentración de la sustancia absorbente en dichas
soluciones.

 Destacar la importancia de una curva de calibración.

 Seleccionar la longitud de onda más apropiada para analizar la sustancia absorbente

(nitrato de cromo) empleando la ley de Beer.

 Calcular la concentración de cromo en una muestra problema.

DATOS

Tabla 1. Datos de absorbancia.

Datos de absorbancia para soluciones de Nitrato de Cromo (III) a

diferentes concentraciones y longitudes de onda
C (M) λ = 390 λ = 410 λ = 430 λ = 480 λ = 580
0,01 0,150 0,182 0,168 0,066 0,159
0,02 0,281 0,342 0,299 0,109 0,293
0,03 0,433 0,519 0,445 0,150 0,441
0,04 0,511 0,629 0,533 0,161 0,544
Muestra 6 0,435 0,522 0,451 0,138 0,450

Tabla 2. Señales de Absorbancia para la solución de Nitrato de Cromo

Datos de absorbancia para soluciones de Nitrato de Cromo (III) a

diferentes concentraciones y longitudes de onda
C (M) λ = 390 λ = 410 λ = 430 λ = 480 λ = 580
0,01 71,0 65,0 67,9 85,8 69,3
0,02 52,4 44,7 50,2 78,2 50,9
0,03 36,9 29,5 35,9 70,5 36,2
0,04 30,8 22,8 29,3 68,8 28,6
Muestra 6 36,7 28,5 35,4 71,1 35,0

Tabla 3. Datos para graficar curva de Ringbom.

(100-%T), λ = (100-%T), λ = (100-%T), λ = (100-%T), λ = (100-%T), λ =

C (M) Log (M) 390 410 430 480 580
0,01 -2 29,0 35,0 32,1 14,2 30,7
0,02 -1,69897 47,6 55,3 49,8 21,8 49,1
-
1,5228787
0,03 5 63,1 70,5 64,1 29,5 63,8
-
1,3979400
0,04 1 69,2 77,2 70,7 31,2 71,4

Tabla 4. Variables útiles para graficar la curva de Ringbom.

Log (M)

(100-%T)

Tabla 5. Variables útiles para calcular curva de calibrado.

Usando la siguiente ecuación calculamos los siguientes datos: A=2-log 10 %T
I. Graficas Absorbancia vs Concentración para cada una de las cinco longitudes de onda
seleccionadas.
1. Grafica 1. A vs Concentración ʎ_1
 Absorbancia Vs Concentración, λ = 390
0,001
Absorbancia

0,001 f(x) = 12.35 x + 0.035

R² = 0.985099738744877

0,000
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

2. Grafica 2. A vs Concentración ʎ_2

Absorbancia Vs Concentración, λ = 410

0,001
Absorbancia

f(x) = 15.18 x + 0.0385

0,001 R² = 0.991584763412913

0,000
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

3. Grafica 3. A vs Concentración ʎ_3

 Absorbancia Vs Concentración, λ = 430
0,001
Absorbancia

0,001 f(x) = 12.41 x + 0.0509999999999999

R² = 0.990625572876298

0,000
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

4. Grafica 4. A vs Concentración ʎ_4

Absorbancia Vs Concentración, λ = 480

0,000

f(x) = 3.26 x + 0.04

R² = 0.947370297735782
Absorbancia

0,000

0,000
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

5. Grafica 5. A vs Concentración ʎ_5

 Absorbancia Vs Concentración, λ = 580
0,001
Absorbancia

0,001 f(x) = 13.03 x + 0.0335

R² = 0.995143295068563

0,000
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

II. Graficas %T vs Concentración para cada una de las cinco longitudes de onda
seleccionadas.
6. Grafica 6. %T vs Concentración ʎ_1

%Transmitancia Vs Concentración, λ = 390

80
70
f(x) = − 1361 x + 81.8
60 R² = 0.95756132991111
50
40
%T

30
20
10
00
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)
7. Grafica 7. %T vs Concentración ʎ_2

%Transmitancia Vs Concentración, λ = 410

70

60 f(x) = − 1418 x + 75.95

R² = 0.955503811134977
50

40
%T

30

20

10

00
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

8. Grafica 8. %T vs Concentración ʎ_3

%Transmitancia Vs Concentración, λ = 430

80
70
60 f(x) = − 1301 x + 78.35
R² = 0.963865596464803
50
40
%T

30
20
10
00
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

9. Grafica 9. %T vs Concentración ʎ_4

 %Transmitancia Vs Concentración, λ = 480
100
90
80 f(x) = − 587 x + 90.5
R² = 0.942230547314018
70
60
50
%T

40
30
20
10
00
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)

10. Grafica 10. %T vs Concentración ʎ_5

%Transmitancia Vs Concentración, λ = 580

80
70
60 f(x) = − 1368 x + 80.45
R² = 0.969197783417059
50
40
%T

30
20
10
00
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045
Concentración (M)
III. Graficas (100-%T) vs Log(C) para cada una de las cinco longitudes de onda
seleccionadas.
11. Grafica 11. (100-%T vs Log(C) ʎ_1

Log (M) vs (100-%T), λ = 390

80
70
60
50
Log (M)

40
30
20
10
00
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3
(100-%T)

12. Grafica 12. (100-%T vs Log(C) ʎ_2

Log (M) vs (100-%T), λ = 410

90
80
70
60
50
Log (M)

40
30
20
10
00
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3
(100-%T)

13. Grafica 13. (100-%T vs Log(C) ʎ_3

 Log (M) vs (100-%T), λ = 430
80
70
60
50
Log (M)

40
30
20
10
00
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3
(100-%T)

14. Grafica 14. (100-%T vs Log(C) ʎ_4

Log (M) vs (100-%T), λ = 480

35

30

25

20
Log (M)

15

10

05

00
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3
(100-%T)

15. Grafica 15. (100-%T vs Log(C) ʎ_5

 Log (M) vs (100-%T), λ = 580
80
70
60
50
Log (M)

40
30
20
10
00
-2.1 -2 -1.9 -1.8 -1.7 -1.6 -1.5 -1.4 -1.3
(100-%T)

CALCULOS
Teniendo en cuenta la curva de calibración de Beer, se observa en el Grafico 2. A vs
Concentración ʎ_2, al tomarla longitud de onda donde se obtuvo mayor pendiente, se pudo
encontrar la ecuación que nos demuestra el comportamiento de la absorbancia respecto a la
concentración del nitrato de cromo.

y=15,18x-0,0385

Donde el valor de “y” corresponde a la absorbancia y “x” a la concentración de la solución,

entonces.

Absorbancia = 15,18 concentración - 0,0385

Concentración= Absorbancia-0,0385
15,18

Experimentalmente se obtuvo para la muestra #6 a un ʎ de 410 nm, una absorbancia de

0,522. Reemplazando.

Concentración = 0,522-0,0385
15,18

Concentración = 0,0319 M

ANÁLISIS.

Al observarse en Grafico 2. A vs Concentración ʎ_2, se obtuvo una recta de mayor

pendiente para una longitud de onda de 410 nm, lo que era de esperarse, pues a esta
longitud de onda se presentó la máxima absorbancia en el espectro de absorbancia
obtenido para el nitrato de cromo en la práctica anterior. Al hacer la curva de calibración
se debe emplear esta longitud de onda de máxima absorbancia, es ahí donde se obtiene
mayor sensibilidad y precisión debido a que el espectro se forma a partir de ondas de
banda ancha. De esta gráfica y a través de la ecuación obtenida por regresión lineal se
obtuvieron los parámetros que permitieron encontrar el valor de concentración de la
muestra problema # 6 fue de 0,0319M, comprobando así la ley de Beer-Lambert.

El valor de concentración hallando se encuentra dentro del rango de concentraciones que

comprende la curva de calibración; de no ser así debería aplicarse el método de adición
estándar si es menor que el rango o una dilución si es mayor. El grafico de Ringbom (100-
%T VS logaritmo de la concentración), permite determinar cuáles son los rangos de
concentración óptimos. Para este caso se obtuvieron curvas sigmoidales con una posición
central lineal, que corresponde al intervalo lineal; en las concentraciones que se encuentran
fuera de este intervalo no es posible hacer una detección con precisión y exactitud,
presentándose un error fotométrico y allí no es aplicable la ley de Beer.
CONCLUSIONES
La ley de Beer relaciona la absorción de la luz con las propiedades del material atravesado,
correspondiendo la absorbancia y la concentración; por esto es determinante la elección de
la longitud de onda óptima, ya que de esta depende que la relación entre estos parámetros
sea más evidente.
Las curvas de calibración constituyen una herramienta útil para la identificación de
sustancias a partir de su espectro de absorción, así como las curvas de Ringbom permiten
evaluar la sensibilidad del método utilizado.
REFERENCIAS.
Guzmán C. Amally. Manual de análisis instrumental. Medellín, Colombia. Universidad de
Antioquia.
Dosal M., Villanueva M. Curvas de calibración en los métodos analíticos. 2008.
Anónimo. Colorimetría, ley de Lambert-Beer. Consultado el 17 d marzo del 2022.