UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

“Formando líderes para la construcción de un nuevo país en paz”

Sede Pamplona
Docente: Karen Bibiana Díez Contreras
Taller Técnicas de análisis instrumental
Código:156268 Grupos: A y B
Jueves 22 de septiembre de 2022
Estudiantes: Diego Alejandro Pastrana Cerquera
Jesús Fernely Cogua Orrego
Miguel Francisco Maldonado Gafaro

TALLER CURVAS DE CALIBRACIÓN

1. SOPORTE EN EXCEL. En algunas ocasiones las industrias requieren servicios de laboratorios de análisis, que sean externos a
la empresa. Para ello es necesario evaluar cada laboratorio. Una determinada empresa prepara una muestra que contiene 34,5 g
de ácido málico (el ácido que contienen los caramelos extra ácidos) por cada 250,0 g de muestra. Esa muestra se divide en tres
partes iguales, se envía una parte al laboratorio A, otra al laboratorio B y una tercera se guarda como “testigo” en el laboratorio
de la empresa. Los análisis realizados por cada laboratorio se presentan en la tabla siguiente:

Tabla 1.
Laboratorio A Laboratorio B
% de ácido málico % de ácido málico
DETERMINACIÓN 1 13,25 13,90
DETERMINACIÓN 2 13,35 13,99
DETERMINACIÓN 3 13,31 13,80
DETERMINACIÓN 4 13,29 13,75
DETERMINACIÓN 5 13,30 ---

a) ¿Qué resultado reportó cada laboratorio? (utilice la desviación estándar al expresar los resultados: ± s)

Respuesta:

Resultado del laboratorio A:

13,30 ± 0,036
Resultado del laboratorio B:
13,86 ± 0,11

b) ¿Cuál de los dos laboratorios reportó con mayor precisión? Justifique su respuesta soportada con cálculos

Laboratorio A, % de ácido Laboratorio B, % de ácido

málico málico
Desviación estándar 0,036 0,11

Respuesta: El laboratorio A reporto con mayor precisión en comparación con el laboratorio B, puesto que el valor de la
desviación estándar absoluta para el laboratorio A (0,036) es menor respecto al laboratorio B (0,11), esto representa una menor
dispersión de los datos obtenidos.

c) ¿Cuál de los dos laboratorios reportó con mayor exactitud? Justifique su respuesta soportada con cálculos

Respuesta: El valor verdadero del porcentaje de ácido málico en las muestras es:
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34,5 𝑔
𝑥𝑖 = ∗ 100 = 13,80
250,0 𝑔

El error relativo porcentual asociado a cada laboratorio es el siguiente:

Laboratorio A:
13,30 − 13,80
𝐸𝑟 = | | ∗ 100 = 3,6%
13,30
Laboratorio B:
13,86 − 13,80
𝐸𝑟 = | | ∗ 100 = 0,43%
13,86

De acuerdo a los valores obtenidos referentes al error relativo porcentual, se identifica que el laboratorio B fue más preciso en
comparación con el laboratorio A, porque su valor representativo del porcentaje de ácido málico en la muestra presenta una
menor diferencia en relación con el valor verdadero.

d) ¿Cuál de los dos laboratorios considera usted que reportó el resultado más confiable?

Respuesta: Considero que el laboratorio B reporto el resultado más confiable, porque establece un intervalo (13,75; 13,97) en
el cual se encuentra el valor verdadero. Pese a que sus resultados presentaron una mayor dispersión la exactitud fue mucho mejor
en comparación con el laboratorio A y aunque la exactitud depende de los erros sistemáticos que una vez detectados pueden ser
corregidos, los valores de las determinaciones en la tabla 1 para el laboratorio A, que cabe recalcar que fueron uno más que el
laboratorio B, presentan una significativa diferencia respecto al valor verdadero.

e) La prueba realizada entre laboratorios sería de repetibilidad o reproducibilidad. Explique

Respuesta: La prueba entre laboratorios es de reproducibilidad porque la medición es realizada por diferentes organizaciones,
ahora bien, si es respecto a las mediciones de cada laboratorio, entonces la prueba será posiblemente de repetibilidad.

2. SOPORTE EN PDF. ¿De qué trata la norma NTC-ISO/IEC 17025:2017 y cómo se encuentra organizada? ¿De qué manera se
identifican los requisitos de ésta

Respuesta: Esta norma hace viable que los laboratorios implementen sistemas de calidad de ensayo y calibración de los equipos
con los que asegurar que poseen las competencias correctas para crear resultados válidos y confiables. El propósito de los
laboratorios es generar resultados con un elevado nivel de validez, de esta forma se puede fiar en las labores hechas. La nueva
versión está conformada por 8 puntos y 2 anexos

• Paso 1: detalles menores y modificaciones de la redacción

• Paso 2: referencias normativas, ISO 9000
• Paso 3: se establece términos y definiciones basados en los documentos mencionados en el punto dos, como también
métodos, inter-laboratorios.
• Paso 4: los requisitos generales donde se ve la imparcialidad y la confidencialidad.
• Paso 5: los requisitos estructurales se ven reflejado la organización de un laboratorio y como deben interactuar en el
entorno.
• Paso 6: el requerimiento de los recursos se evidencia en el personal, el equipamiento las condiciones ambientales, la
trazabilidad metrológica y las compras y las subcontrataciones.
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• Paso 7: el requerimiento de los procesos en la que se revisa los contratos, métodos de muestreo, evaluación de la
incertidumbre, expresión de resultados, manipulación de los ítems de calibración y la validación de métodos.
• Paso 8: los requerimientos de gestión en donde se controlan los documentos y registros, las acciones correctivas,
auditorías internas y revisión por la dirección del proceso, por otro lado, se debe implementar un abordaje de los riesgos.
• Anexo A: información sobre la trazabilidad metrológica
• Anexo B: sistema de gestión

3. SOPORTE EN EXCEL. En la determinación de Zinc en muestras de agua potable, se utilizó la espectroscopia de absorción
atómica y se obtuvieron los datos siguientes:

¿A qué región del espectro electromagnético corresponde esta técnica?

Respuesta: Corresponde a la región visible del espectro electromagnético, que está en el intervalo de longitudes de onda de 400
a 700 nanómetros.
Patrones Zn (ng/mL) Señal Absorbancia
0,1 0,15
0,2 0,30
0,3 0,45
0,4 0,60
0,5 0,75
0,6 0,90
0,8 1,01
M1 0,50
M2 1,10

M1 y M2 corresponden a las señales obtenidas para las muestras de agua potable. Para el análisis se tomaron 10 mL de las
muestras de agua potable, y se diluyeron a un volumen final de 25 mL. Construya la curva de calibración y determine la cantidad
de Zn en las muestras. Recuerde considerar el factor de dilución.

Respuesta: Tener en cuenta que la señal de M2 la cual tiene un valor de 1,10 no está dentro de los límites de la curva de
calibración, por lo tanto, no se puede determinar la cantidad de Zinc a partir de la expresión lineal que relaciona la señal de
absorbancia con la cantidad de analito, es necesario diluir y medir nuevamente la señal.

La curva de calibración para los datos de señal de absorbancia respecto a la cantidad de analito se muestra a continuación:
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Figura 1. Curva de calibracion - señal de absorbancia vs cantidad de Zinc.

Curva de calibracion de la EAA

1,2

0,8
Señal

0,6
y = 1,2898x + 0,06
0,4
R² = 0,9739
0,2

0
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
Concentracion (ng/mL)

A partir de la figura 1 se observa claramente las desviaciones de los puntos experimentales de la linealidad, por lo tanto, los
resultados que se obtengan mediante la curva de calibración presentaran una discrepancia del valor verdadero.

Para determinar la cantidad de Zinc en la muestra M1, se tiene que la expresión matemática que relaciona la señal de absorbancia
y la cantidad de analito es:

𝑆 = 1,2898𝐶𝑍 + 0,06

Despejando 𝐶𝑍 tenemos:

𝑆 − 0,06
𝐶𝑍 =
1,2898

Remplazando el valor de S para M1 se tiene

0,50 − 0,06
𝐶𝑍 = = 0,35 𝑛𝑔/𝑚𝐿
1,2898

que la cantidad de Zinc para la muestra diluida a 25 mL con una señal de absorbancia de 0,50 es 0,35 ng/mL. Para determinar
la cantidad de Zinc en la muestra madre cuyo volumen es 10 mL se tiene que:

25 𝑚𝐿
𝐹𝐷 = = 2,5
10 𝑚𝐿

𝑛𝑔
𝐶𝑀 = (0,35 ) (2,5) = 0,875 𝑛𝑔/𝑚𝐿
𝑚𝐿
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Del resultado anterior, la cantidad de Zinc en la solución madre o la muestra de 10 mL es 0,87 ng/ mL.

4. SOPORTE EN EXCEL. En la determinación de Ca en muestras de sangre, empleando espectrometría de absorción atómica

(EAA) y un método nuevo colorimétrico, se obtuvieron los siguientes resultados:

EAA (μg/mL) COLORIMETRÍA (μg/mL)

10,9 9,2
10,1 10,5
10,6 9,7
11,2 11,5
9,7 11,6
10,0 9,3
--- 10,1
--- 11,2

Determine la precisión de cada método y discuta si la diferencia entre ellas es o no, significativa. Además, si el valor real de la
concentración de Ca en sangre es 9,98 μg/mL ¿cuál método elegiría usted para hacer el análisis?

EAA (ug/mL) COLORIMETRÍA (ug/mL)

10,9 9,2
10,1 10,5
10,6 9,7
11,2 11,5
9,7 11,6
10,0 9,3
- 10,1
- 11,2

Media 10,42 10,39

Desv. Estan. Abs. 0,58 0,97
Desv.Estan.Rel 0,055 0,093
CV 5,5 9,3

Respuesta: Respecto a la precisión de cada método se puede observar que la espectrometría de absorción atómica presenta una
menor dispersión entre sus datos en comparación con el método de colorimetría, debido a que su desviación estándar absoluta
es aproximadamente 40 % menos que la desviación estándar absoluta del otro método. Además, referente a el coeficiente de
variación se puede observar que la desviación de los datos para cada método respecto a la media o valor representativo, sigue
siendo menos para la técnica de espectrometría de absorción atómica respecto a la técnica de colorimetría.
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En cuanto a la exactitud de las dos técnicas, se sabe que el valor verdadero de la concentración de Ca en la sangre es 9,98 μg/mL,
el error relativo porcentual para cada técnica es entonces:

Error relativo porcentual de la técnica de espectrometría de absorción atómica= 4,38

Error relativo porcentual de la técnica de colorimetría: 4,08

Por lo tanto, la técnica de colorimetría es más exacta en comparación con la técnica de espectrometría de absorción atómica
según su porcentaje de error. Finalmente, la técnica que elegiríamos es la espectrometría de absorción atómica porque reporta
una mejor precisión y pese a que su exactitud no es la mejor, la diferencia entre los porcentajes de error no es significativa

5. SOPORTE EN EXCEL. En la calibración de un método instrumental para determinar una especie B en solución acuosa, se
obtuvieron los datos siguientes:

B (ppm) Número de réplicas Promedio de la Señal

0,0 15 0,021 (RSD ± 0,004)
2,0 6 0,105
6,0 6 0,315
10,0 6 0,607
14,0 6 1,025
16,0 6 1,225
18,0 6 1,405

Realice la curva de calibración y determine la sensibilidad de la técnica, el límite de detección del método y el límite de
cuantificación.

Respuesta: La curva de calibración de los datos anteriores se muestra a continuación:

Figura 2. Curva de calibracion – Promedio de la señal vs concentracion de la especie B.

Curva de calibracion
1,6
1,4
y = 0,0785x - 0,0686
1,2 R² = 0,9821
Promedio de la señal

1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0,0 5,0 10,0 15,0 20,0
-0,2
Concentracion de B (ppm)
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De la curva de calibración se extrae el valor de la sensibilidad de calibrado que es igual a la pendiente de la curva de calibrado
a la concentración objeto de estudio, por lo tanto:

𝑝𝑝𝑚
𝑆𝑒𝑛𝑠𝑖𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑 = 0,0785
𝑢𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑠𝑒ñ𝑎𝑙

El límite de detección es igual a:

3𝑠𝑏𝑙
𝐶𝑚 = = 0,153 𝑝𝑝𝑚 𝑑𝑒 𝐵
𝑚

Finalmente, el límite de cuantificación se determina como:

10(𝑠𝑏𝑙 )
𝐿𝑖𝑚𝑖𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑛𝑡𝑖𝑓𝑖𝑐𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 = = 0,509
𝑚

6. SOPORTE EN EXCEL. Determine la concentración de Ca en la cual se obtuvieron los siguientes datos al aplicar el método de
adición de estándar:
Solución Intensidad
20 mL de M 10,0
20 mL de M + 1 mL de S 13,3
20 mL de M + 2 mL de S 16,5

Donde M se refiere a la muestra y S al estándar añadido cuya concentración es 1 mg/mL. En todos los casos la solución fue
diluida a 25 mL. Construya la curva de calibración de la señal del estándar en función del volumen del estándar añadido.

Solución: La curva de calibración para el método de adiciones estándar anterior se muestra a continuación:

Figura 3. Curva de calibracion adciones estandar – Intensidad vs Volumen de sln patron.

Curva de calibracion por adiciones estandar

18,0
16,0
14,0
12,0
Intensidad

10,0 y = 3,25x + 10,017

8,0 R² = 0,9999
6,0
4,0
2,0
0,0
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5
Volumen sln patron (mL)
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Para determinar la concentración del analito (Ca) en la muestra se utiliza la siguiente ecuación:

𝑏𝐶𝑠
𝐶𝑥 =
𝑚𝑉𝑥
Ecuación 1 Concentración de analito en la muestra diluida

Remplazando los correspondientes valores en la ecuación 1 se obtiene que la concentración de analito en la muestra diluida es
de 0,154 mg/mL.

7. SOPORTE EN PDF. Una muestra de hierro (0,342 g) que contiene trazas de Cu, es analizada por espectroscopia de AA, usando
el método de adición de estándar. La muestra de hierro se disuelve con ácido y se diluye a 100 mL. Una alícuota de 25 mL de
esta solución muestra, se mezclan con 25 mL de una solución de cobre (4,50 ppm). Si el volumen total, se mantiene constante
en 50 mL. Calcule la concentración y el porcentaje de Cu en la muestra original a partir de los siguientes datos:
Absorbancia de la solución muestra = 0,22
Absorbancia de la solución muestra + el estándar de Cu añadido = 0,31

8. SOPORTE EN EXCEL. Se decidió hacer un experimento para demostrar que cuatro operadores ya tienen competencia para dar
los mismos resultados. El experimento consistió en solicitar a cada operador que midiera siete veces el mismo ítem el cual tiene
un valor teórico de 330. Los resultados fueron:
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Analista 1 Analista 2 Analista 3 Analista 4
333 332 345 335
332 331 349 334
328 335 338 338
335 326 335 329
330 325 343 328
329 326 337 329
327 330 --- 333

a) ¿Qué resultado reportó cada analista? (utilice la desviación estándar al expresar los resultados: ± s)

Analista 1 Analista 2 Analista 3 Analista 4

333 332 345 335
332 331 349 334
328 335 348 338
335 326 335 329
330 325 343 328
329 326 337 329
327 330 -- 333
Media 330,57 329,29 342,83 332,29
Desv. Estand. Abs 2,88 3,73 5,74 3,73

Resultado del analista 1:

350,57 ± 2,88
Resultado del analista 2:
329,29 ± 3,73
Resultado de analista 3:
342,83 ± 5,74
Resultado de analista 4:
332,29 ± 3,73

b) Ordene de manera ascendente los analistas en cuanto a la precisión. Justifique su respuesta.

Respuesta: El orden es el siguiente: analista 3, analista 2 – 4 y analista 1. Este acomodo se realiza teniendo en cuenta la
desviación estándar absoluta, cuanto menor sea su valor más precisión tiene el analista.

c) Ordene de manera ascendente los analistas en cuanto a la exactitud. Justifique su respuesta.

Analista 1 Analista 2 Analista 3 Analista 4

Error absoluto 0,57 0,71 12,83 2,29
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Respuesta: El orden es el siguiente: analista 3, analista 4, analista 2 y analista 1. Este acomodo se realiza teniendo en cuenta el
error absoluto, cuanto menor sea su valor más exactitud tiene el analista.

d) ¿Cuál de los cuatro analistas considera usted que reportó el resultado más confiable? Justifique su respuesta.

Respuesta: El analista 1 reporto el resultado más confiable porque a diferencia de los 3 anteriores obtuvo la mayor precisión y
exactitud en sus medidas.

e) La prueba realizada entre analistas sería de repetibilidad o reproducibilidad. Explique.

Respuesta: La prueba entre analistas es de reproducibilidad porque la medición es realizada por diferentes operadores.

9. SOPORTE MANUAL. Un frasco de ácido fosfórico (H3PO4) cuya etiqueta registra una pureza de 85 %p/p, tiene una
concentración 16,31 M.
a) ¿Cuántos mililitros de reactivo deben diluirse a 500 mL para obtener H3PO4 al 8,0 M?
b) Calcule la densidad del H3PO4 al 85 %p/p.

10. SOPORTE EN EXCEL. Se requiere determinar la concentración de K en una muestra. Previamente se decidió usar el método
de estándar interno, por lo cual se eligió Li como elemento de referencia en una concentración de 1,0 ppm.
A partir de los datos que se especifican a continuación calcular la concentración de K en la muestra:

K (ppm) 1,0 2,0 5,0 10,0 20,0 50,0 Muestra

Señal K 10,0 15,3 22,2 35,4 56,4 77,5 38
Señal Li 10 10,5 9,50 10,0 11 10,0 10,5

Realice un análisis de los datos respecto a la selección del método.

Respuesta: La curva de calibración del método de patrón interno para el caso de los anteriores datos se muestra a continuación:
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Figura 4. Curva de calibración patrón interno – Relación de señal K/Li vs Relación concentración K/Li.

Curva de calibracion
9,00
8,00 y = 0,1322x + 1,5962
7,00
Relacion señale K/Li

R² = 0,9359
6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0
Relacion concentracione K/LI

Siguiendo la misma metodología del punto 3 la concentración de K en la muestra es 15,3 ppm.