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DIAGNÓSTICO COPROLÓGICO
Enfermedades parasitarias

▪ Habitantes de los trópicos sufren de

“enfermedades tropicales” y cosmopolitas
▪ Parasitosis asintomáticas, con síntomas
ligeros, muchos síntomas, agudos o crónicos
▪ Clínico no tiene porqué saber los síntomas,
pero debe conocer las técnicas, sensibilidad,
especificidad y precisión de la técnica a
aplicar para detectar un parásito.
TINCIÓN NO PERMANENTE
VS
TINCIÓN PERMANENTE
Métodos coprológicos directos
Ventajas
▪ “Gold standard”
▪ Alta especificidad
▪ Sencillo y rápido

Inconvenientes
▪ Requiere experiencia para reconocer
parásitos de pseudoparásitos y evitar falsos
positivos y negativos
▪ Baja sensibilidad
Métodos coprológicos directos
▪ Preparaciones no teñidas (agua)
▪ Tinciones no permanentes:
 Permite ver célula viva vs bajo contraste
 MIF
 Lugol
▪ Tinciones permanentes
 Mayor contraste y permite ver estructuras vs
célula no viva
 Hematoxilina férrica
 Tinción tricrómica de Gomori
 Fluorescencia o inmunofluorescencia
Agua, solución salina
 Lugol

▪ I2 5g
▪ KI 10g
▪ H2O(d) 85ml
Hematoxilina férrica

▪ Cristales de hematoxilina 1g
▪ Alcohol 95%
▪ Sulfato ferroso de amonio 1g
▪ Sulfato férrico de amonio 1g
▪ Ácido clorhídrico 3%
Tinción tricrómica
▪ Cromotropo 2R 0.6g
▪ Verde ligero SF 0.3g
▪ Ácido fosfotungténico 0.7g
▪ Ac. Acético glacial 1 ml
▪ Agua destilada 100 ml
▪ Alcohol al 70% con yodo
▪ Alcohol al 70% (2)
▪ Alcohol al 50%
▪ Alcohol al 90%
▪ Alcohol al 100%
▪ Xilol
Ziehl-Neelsen modificada
(tinción ácido resistente)
▪ Carbol-fucsina
▪ Formol
▪ HCL-etanol
▪ Glicerina
▪ Verde malaquita (o azul de metileno)
▪ HCl-Metanol
Cryptosporidium Cyclospora Isospora
con inmunofluorescencia con autofluorescencia con autofluorescencia
 Plasmodium con naranja de
acridina

Polisacáridos de
quitina y almidón

Isospora con
calcofluor
MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN
Métodos de concentración

Flotación Sedimentación
▪ Ventaja: ▪ Ventajas:
 Sencillo y rápido de hacer  Baja probabilidad de
errores técnicos.
 Amplio rango de
▪ Desventaja: recuperación de
 Escasa cantidad de formas organismos.
parasitarias en las ▪ Desventajas:
muestras.
 Larga ejecución.
 Difícil detección en los
preparados directos en  Por centrifugación
fresco. distorsiona las formas más
delicadas. No así por
espontánea

*En ambos las muestras se filtran, como primer paso

Sedimentación

▪ Adecuado para huevos ▪ Sedimentación

pesados espontánea (copa)
 Trematodos ▪ Técnicas difásicas
 Larvas  Formol-éter
 Ascaris  Aceto acetato-éter
▪ No adecuado para  Acetato de etilo
 Quistes…giardias  MIF-éter
 Ancylostomas  Fenol-alcohol-
formalina/éter
 Residuos fecales absorben el
éter y se hacen menos
pesados y parásitos disueltos
en el sedimento
Formol-éter
Flotación

▪ Las formas parasitarias flotan porque la

solución tiene una densidad mayor a la de los
quistes, ooquistes y huevos.
▪ Los parásitos se concentran en la superficie
▪ La concentración de la solución no debe
provocar distorsión de las formas parasitarias
 Solución saturada de NaCl (Willis-Molloy)
 Solución saturada de azúcar (Sheather)
 Sulfato de Zinc al 33% (Faust)
Willis-Molloy (NaCl)
▪ Útil para:
 Huevos de nematodos
 Uncinarias
 Ascaris
 Trichuris
▪ No es recomendado para:
 Trematodos
 La mayoría de los cestodos *Leer antes de 15 minutos
 Casi todos los quistes de protozoarios
Faust (ZnSo4)

▪ Recomendada para: ▪ No recomendada para:

▪ Quiste de protozoarios ▪ Huevos de
▪ Huevos de nematodos esquistosomas
en menor grado ▪ Huevos de la mayoría
▪ Pequeñas tenias de los trematodos
▪ Huevos de Clonorchis y ▪ Huevos de áscaris
Opistorchis en menor infértil
grado
Faust (ZnSo4)

▪ 1) Mezclar bien una porción de materia fecal para

preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
Faust (ZnSo4)

▪ 1) Mezclar bien una porción de materia fecal para

preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
2) Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en
cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un
embudo pequeño.
Faust (ZnSo4)

1) Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar

una superficie en 10 partes de agua destilada.
2) Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en
cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un
embudo pequeño.
3) Centrifugar el filtrado a 2500 r.p.m. por 1min.
Faust (ZnSo4)

1) Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar

una superficie en 10 partes de agua destilada.
2) Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en
cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con un
embudo pequeño.
3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.
4) Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua
hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente.
Re suspender el sedimento. Repetir 2 veces.
Faust (ZnSo4)

6) Decantar nuevamente el líquido sobrenadante

remplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato
de Zn al 33%. Mezclar bien la solución bien la solución
con el sedimento. Centrifugar durante 1 minutos por
1500 rpm.
7) Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la
superficie del liquido. Puede ser con un asa.
8) Colocarlos en un portaobjeto y mezclar con 1 gota de
Lugol, colocar cubre-objeto para verlo entonces al
microscopio.
Cuidados con Faust!
▪ Los parásitos vuelven a descender en 1 hra. Llevarlos al
portaobjetos antes de ese tiempo
▪ El éxito depende de la exactitud en la densidad del
sulfato de Zinc (1.180 o al 33%).
▪ Cuando las heces están fijadas en formalina, usar una
densidad de 1.200 ó 33.6%
▪ El contacto prolongado con el sulfato de zinc, puede
deformar los quiste y dificultar su identificación, por lo
tanto estas preparaciones debe ser examinan lo antes
posible
▪ Heces con muchos ácidos grasos no dan buen resultado
por interferencia
 Sheather (Azúcar)
▪ Para separar, concentrar y recobrar ooquistes
de Isospora, Cryptosporidium y Cyclospora
Sheather Willis Sensibili Especific
Protozoario o helminto p
N°(%) N°(%) dad % idad %
Blastocystis hominis 92(93.9) 90(91.8) 97.8* 00.0* 0.715
Entamoeba coli 50(51.0) 40(40.8) 80.0* 83.3 0.000*
Iodamoeba butchslii 46(46.9) 20(20.4) 43.5 84.6 0.002*
Endolimax nana 12(12.2) 04(04.1) 33.3 97.7 0.000*
Giardia lamblia 10(10.2) 02(02.0) 20.0 100.0 0.000*

Ascaris lumbricoides 70(71.4) 64(65.3) 91.4* 71.4 0.000*

Trichuris trichiura 06(06.1) 00(00.0) 0.0- 100.0 1.000
Necator/Ancylostoma 04(04.1) 00(00.0) 0.0- 97.9 0.768
Fasciola hepatica 04(04.1) 00(00.0) 0.0- 100.0 1.000
Enterobius vermicularis 02(02.0) 00(00.0) 0.0- 95.8 0.768
n=98
Jara, Minchon-Medina, Zárate-Asmat
TÉRMINOS UTILIZADOS EN
DIAGNÓSTICOS
Términos utilizados en
diagnósticos
▪ Prevalencia
 La ocurrencia o frecuencia del parasitismo en una
población y un área determinada, en un tiempo
concreto.
 Dada en porcentajes
 Prevalencia= N° de sujetos parasitados X100
N° de sujetos en el grupo estudiado
 Incidencia
 Indica los nuevos casos que se dan en una población,
área y tiempo determinados
 Se expresa en porcentaje
 Incidencia= N° de primoinfecciones X100
N° de sujetos en el grupo estudiado
Problemas…

a) Si se han estudiado 1300 niños en varios

jardines de infancia, y se detectaron 430 niños
con giardia, cuál sería la prevalencia?
a) En los 1,300 niños, 40 reportan haberse contagiado
con gisrdia por primera vez… ¿Podríamos hacer
cálculos de incidencia y/o prevalencia?

b) En un grupo escolar de 1400 niños, se han

detectado primoinfecciones por piojos en 250 de
ellos. Cuál sería la incidencia de la pediculosis en
este grupo?
Observaciones:

▪ Ambos térmminos tienen aplicaciones

distintas, si se quiere conocer la frecuencia o
la evolución del parásito
 Fase crónica, la prevalencia
 Permite un estudio comparativo con análisis
anteriores
 Fase aguda, la incidencia
 Proporciona el conocimiento del ritmo con que la
infección va apareciendo
Términos utilizados en diagnósticos
▪ Sensibilidad
 La sensibilidad es la capacidad del test para detectar
la enfermedad.

FN= Fracción de verdaderos positivos

▪ Especificidad
 Es la probabilidad de clasificar correctamente a un
individuo sano, es decir, la probabilidad de que para
un sujeto sano se obtenga un resultado negativo.

FN= Fracción de verdaderos negativos

Tamaños comparativos de parásitos
Cómo medir?
▪ Alinear regla objetivo con regla ocular en
paralelo
▪ Las divisiones en el portaobjeto corresponde a
10 um cada raya
▪ Encontrar línea perfectamente emparejada de
regla ocular y objetivo: 13 oc y 15 obj
 130 um/150 X 10 = 8.7 (cada raya X 8.7= tamaño del
objeto en um
▪ Alinear el parásito con la regla ocular y medir
Portaobjeto

Regla del ocular1

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
E. coli 15-30 um
E. hartmanni?
Trofozoito de ameba…cuál?
Iodamoeba y Blastocystis
Coccidio
Hymenolepis nana?
Hymenolepis diminuta?
Trematodo
Trichuris
Balantidium? Hasta 870 um
Ascaris
Ascaris infértil
Strongyloides dentro del huevo
Nematodirus sp.
Moniezia sp.